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半巢式RT-PCR检测进口大豆中菜豆荚斑驳病毒的研究 被引量:19
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作者 闻伟刚 崔俊霞 +2 位作者 赵秀玲 徐瑛 陈先锋 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期296-300,共5页
菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus,BPMV)在美国东部和南部的大豆产区广泛分布。该病毒能够造成3%~52%的产量损失并使大豆品质降低,目前我国未见其分布。针对进口大豆种子的植物病毒检测,本文建立了半巢式RTPCR技术检测BPM... 菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus,BPMV)在美国东部和南部的大豆产区广泛分布。该病毒能够造成3%~52%的产量损失并使大豆品质降低,目前我国未见其分布。针对进口大豆种子的植物病毒检测,本文建立了半巢式RTPCR技术检测BPMV的方法。该方法采用Trizol快速提取大豆种子病毒总RNA,并根据BPMV的外壳蛋白编码基因设计特异性引物,经第一轮RT—PCR和第二轮半巢式PCR扩增.分别得到275bp和196bp大小的特异性基因片段。半巢式RT—PCR扩增产物的测序表明,该产物序列与BPMV的外壳蛋白编码基因存在91%~95%的高度同源性。检测灵敏度比较研究显示,DAS—ELISA与RT—PCR的检测灵敏度相近,半巢式RT—PCR的检测灵敏度比这2种方法高出10^3倍以上。 展开更多
关键词 菜豆荚斑驳病毒 检测 巢式rt—pcr 灵敏度
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Ph^+/bcr-abl^+急性淋巴细胞白血病微小残留病变的细胞遗传学分析、巢式RT-PCR及流式细胞术检测 被引量:4
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作者 薛芳 董作仁 +1 位作者 张冰 高丽霞 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第4期372-375,共4页
为了探索检测Ph+ /bcr abl+ 急性淋巴细胞白血病 (ALL)患者的微小残留病变 (MRD)的简便而灵敏的方法 ,对 84例初治ALL患者和其中的缓解期患者的骨髓分别用细胞遗传学、流式细胞术和巢式RT PCR检测。结果表明 ,缓解期患者骨髓中不存在Ph... 为了探索检测Ph+ /bcr abl+ 急性淋巴细胞白血病 (ALL)患者的微小残留病变 (MRD)的简便而灵敏的方法 ,对 84例初治ALL患者和其中的缓解期患者的骨髓分别用细胞遗传学、流式细胞术和巢式RT PCR检测。结果表明 ,缓解期患者骨髓中不存在Ph′染色体 ,巢式RT PCR方法检测到 11/ 14例缓解期患者存在MRD(bcr abl融合基因 ) (阳性率 78 5 7% ) ,而流式细胞术检测到 5 / 14的缓解期患者阳性 (阳性率 35 71% )。巢式PCR的灵敏度达到 10 -6- 10 -7水平 ,流式细胞检测的灵敏度达到 10 -4- 10 -5水平。结论 :Ph染色体核型分析技术检测MRD不够灵敏 ,而巢式RT PCR检测MRD较流式细胞技术检测灵敏度更高 ,且更易于开展应用。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 Ph^+/bcr-abl^+急性淋巴细胞白血病 细胞遗传学分析 巢式rt—pcr 流式细胞术 微小残留病变
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尼帕病毒巢式RT-PCR方法的建立和初步应用 被引量:2
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作者 张体银 张志灯 +3 位作者 郑腾 白泉阳 王武军 林素洁 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期599-602,共4页
目的建立灵敏、特异的检测尼帕病毒的巢式RT-PCR方法。方法根据GenBank公布的尼帕病毒N基因序列,设计2对特异性引物(外引物和内引物),建立巢式RT-PCR方法,优化反应体系,测定特异性和灵敏度,并进行临床样品的检测。结果该方法扩增的片段... 目的建立灵敏、特异的检测尼帕病毒的巢式RT-PCR方法。方法根据GenBank公布的尼帕病毒N基因序列,设计2对特异性引物(外引物和内引物),建立巢式RT-PCR方法,优化反应体系,测定特异性和灵敏度,并进行临床样品的检测。结果该方法扩增的片段序列与源序列同源性均为100%。特异性试验结果表明本试验设计的内外侧引物不能从新城疫病毒、牛瘟病毒和日本乙型脑炎病毒中扩增出条带。敏感性试验结果表明,该方法最低能检测出的标准模板RNA浓度为39fg/μL。100份临床样品检测结果全部为阴性。结论初步建立了快速、灵敏、特异的检测尼帕病毒N基因的巢式RT-PCR方法,可用于动物疫病监测和检验检疫等领域。 展开更多
关键词 巢式rt—pcr 尼帕病毒 N基因
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巢式RT-PCR检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞的临床价值 被引量:1
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作者 傅卫 王水 +3 位作者 杜青 肇毅 查小明 刘晓安 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期818-821,858,共5页
目的:联合采用细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)及乳腺上皮黏蛋白(small breast epithelial mucin,SBEM)指标,探讨通过巢式RT-PCR(nested RT-PCR)方法检测乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)的临床价值。方法... 目的:联合采用细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)及乳腺上皮黏蛋白(small breast epithelial mucin,SBEM)指标,探讨通过巢式RT-PCR(nested RT-PCR)方法检测乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)的临床价值。方法:采用MCF-7RNA与健康志愿者外周血单核细胞(peripheral mononuclear cell,PMNC)RNA进行梯度混合后的反转录产物,检测优化后巢式RT-PCR体系的敏感性,再选择10例健康志愿者以及20例乳腺良性疾病患者外周血检测其特异性后,对56例乳腺癌患者外周血中CK19 mRNA及SBEM mRNA表达情况进行检测。结果:优化后的检测体系能够在3ml外周血PMNCs中检测到1个MCF-7细胞,10例健康志愿者以及20例乳腺良性疾病患者外周血中未检测到CK19 mRNA与SBEM mRNA的表达;两者的表达与原发肿瘤大小,腋窝淋巴结状况及TNM分期相关(P<0.05),而与原发肿瘤病理类型,激素受体以及C-erbB-2的表达无明显相关性(P>0.05)。结论:经过优化的巢式RT-PCR体系联合检测乳腺癌患者外周血CK19 mRNA及SBEM mRNA的表达敏感性和特异性较高,能用于检测外周血CTC,对进一步精确评估预后及指导治疗可能有较高的临床价值。 展开更多
关键词 乳腺癌 循环肿瘤细胞 巢式rt—pcr 细胞角蛋白19 乳腺上皮黏蛋白
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应用巢式RT-PCR联合检测原发性肝癌病人外周血AFPmRNA和MAGE-1mRNA的表达
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作者 宋天强 张毓清 +2 位作者 李强 王殿昌 郝希山 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 2004年第9期602-605,共4页
目的 寻找一种敏感的方法以早期发现原发性肝癌的复发与转移。方法 应用逆转录聚合酶链反应分别在术前、术后 1周和术后 2个月检测 37例行根治性切除的原发性肝癌病人外周血中MAGE 1mRNA和AFPmRNA的表达 ,并随访所有病人 1年。结果 ... 目的 寻找一种敏感的方法以早期发现原发性肝癌的复发与转移。方法 应用逆转录聚合酶链反应分别在术前、术后 1周和术后 2个月检测 37例行根治性切除的原发性肝癌病人外周血中MAGE 1mRNA和AFPmRNA的表达 ,并随访所有病人 1年。结果 外周血中MAGE 1mRNA和AF PmRNA的阳性率和肿瘤的病理分期相关 ;肿瘤病期越晚 ,外周血中微转移灶的检出率越高。 1年的随访中 ,有 9例病人出现复发 ,MAGE 1和 (或 )AFPmRNA的阳性率为 77 8% (7/9) ,其中 6例外周血中MAGE 1mRNA和 (或 )AFPmRNA持续阳性 ,2例由阴性转为阳性。另有 10例病人MAGE 1mRNA和(或 )AFPmRNA由术前阳性术后转为阴性 ,随访 1年中无复发。结论 联合检测外周血MAGE 1和AFPmRNA的表达是早期发现肝癌术后复发、评估预后一项敏感可信的指标。 展开更多
关键词 巢式rt—pcr 联合检测 原发性肝癌 外周血 AFPMRNA MAGE—1mRNA 表达
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齿兰环斑病毒与建兰花叶病毒分子检测研究 被引量:5
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作者 闻伟刚 谭钟 +1 位作者 崔俊霞 陈先锋 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期65-69,共5页
齿兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,ORSV)与建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,Cy MV)是严重危害兰科植物的两种主要病毒。本研究根据病毒外壳蛋白基因设计特异性引物,应用ELISA、普通RT-PCR、巢式RT-PCR和免疫捕获RT-PCR4... 齿兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,ORSV)与建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,Cy MV)是严重危害兰科植物的两种主要病毒。本研究根据病毒外壳蛋白基因设计特异性引物,应用ELISA、普通RT-PCR、巢式RT-PCR和免疫捕获RT-PCR4种方法进行了检测研究与比较。结果表明:普通RT-PCR与ELISA方法检测灵敏度相当;巢式RT-PCR检测灵敏度要比普通RT-PCR与ELISA方法高出104倍以上;免疫捕获RT-PCR检测灵敏度介于普通RT-PCR和巢式RT-PCR之间。采用巢式RT-PCR方法对我国台湾进境的蝴蝶兰植株样本检测,1号样本出现与阳性对照一致的特异条带。双向测序分析,扩增产物序列与ORSV外壳蛋白基因具有100%的同源性,表明1号蝴蝶兰样本携带ORSV。 展开更多
关键词 齿兰环斑病毒 建兰花叶病毒 巢式rt—pcr 免疫捕获rt-pcr 检测灵敏度
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混合系白血病基因重排的检测方法及其临床意义 被引量:3
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作者 陈伟红 陈成坚 +5 位作者 汪明春 李长钢 游伟文 黄瑞宏 李明 陶小梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第1期20-24,共5页
为了研究混合系白血病(MLL)基因重排在急性白血病(AL)中的发生率、融合基因类型及其临床意义,用荧光原位杂交技术检测60例急性白血病(AL)患者MLL基因重排,对于MLL基因重排阳性的患者,用巢式RT-PCR方法检测MLL基因重排形成的6种常见融合... 为了研究混合系白血病(MLL)基因重排在急性白血病(AL)中的发生率、融合基因类型及其临床意义,用荧光原位杂交技术检测60例急性白血病(AL)患者MLL基因重排,对于MLL基因重排阳性的患者,用巢式RT-PCR方法检测MLL基因重排形成的6种常见融合基因类型。结果表明:7例AL患者有MLL基因重排,发生率为11.67%,其中2例为急性髓细胞白血病M5(AML-M5),融合基因均为MLL/AF9;另5例为B细胞系急性淋巴细胞白血病(B-ALL),其中2例融合基因为MLL/ENL,1例MLL/AF4,2例未扩增出融合基因产物。结论:荧光原位杂交技术是检测ALMLL基因易位重排的快速、特异、灵敏的方法,巢式RT-PCR是检测MLL基因重排产生的融合基因类型的简便可行的方法;MLL基因重排的检测对急性白血病预后判断和治疗方案的选择具有重要意义。 展开更多
关键词 急性白血病 混合系白血病基因 基因重排 荧光原位杂交 巢式rt—pcr
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河北省丙型肝炎病毒基因分型研究 被引量:5
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作者 牛建章 许若丹 +3 位作者 白瑞婷 田茶 张立平 孟宗达 《中国病毒学》 CSCD 2003年第6期611-613,共3页
丙型肝炎病毒 (Hepatitis C virus, HCV)感染是输血后肝炎的主要原因[1],主要通过输血或使用污染的血制品传播[2],且与肝硬化和肝细胞癌的发生有密切关系.
关键词 丙型肝炎病毒 基因分型 巢式rt—pcr 基因序列
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印迹基因Snrpn在人类卵母细胞及植入前胚胎mRNA表达 被引量:3
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作者 马玲 李蓉 +3 位作者 卢丽华 贺蓉 郝桂琴 林秋华 《临床和实验医学杂志》 2007年第5期1-4,共4页
目的了解印迹基因Snrpn在人类卵母细胞和植入前胚胎的表达,以分析Snrpn基因表达对人类卵母细胞和早期胚胎发育的影响。方法采用单细胞巢式逆转录多聚酶链式反应(Single Cell Nested RT-PCR)方法,检测人类卵子和植入前各个阶段胚胎的印... 目的了解印迹基因Snrpn在人类卵母细胞和植入前胚胎的表达,以分析Snrpn基因表达对人类卵母细胞和早期胚胎发育的影响。方法采用单细胞巢式逆转录多聚酶链式反应(Single Cell Nested RT-PCR)方法,检测人类卵子和植入前各个阶段胚胎的印迹基因Snrpn mRNA表达情况。结果Snrpn在人类卵母细胞GV、MI、MII和植入前胚胎2、4、6、8细胞期都有表达,单卵母细胞扩增成功率为87.5%,单个胚胎为75.8%,平均扩增成功率为79.1%。单个卵母细胞和单个卵裂球扩增成功率无显著性差异(P>0.05),但单卵母细胞较单个卵裂球高。结论建立了比较稳定、可靠的单细胞巢式RT-PCR技术检测基因表达。印迹基因Snrpn在人类卵细胞和植入前胚胎的表达对卵子生长和胚胎发育有着重要意义。 展开更多
关键词 印迹基因 Snrpn人类卵母细胞植入前胚胎 单细胞巢式rt—pcr
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检测MUC-1 mRNA对诊断非小细胞肺癌患者外周血微转移的意义 被引量:1
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作者 刘小青 任宏轩 伍治平 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1267-1270,共4页
背景与目的:粘蛋白家族,包括MUC-1,通常被认为是上皮组织及其来源的肿瘤的产物,理论上如果在间叶组织来源的血液中找到MUC-1 mRNA即意味着癌转移。本研究探讨MUC-1 mRNA作为分子指标检测非小细胞肺癌患者外周血微转移的可行性。方法:应... 背景与目的:粘蛋白家族,包括MUC-1,通常被认为是上皮组织及其来源的肿瘤的产物,理论上如果在间叶组织来源的血液中找到MUC-1 mRNA即意味着癌转移。本研究探讨MUC-1 mRNA作为分子指标检测非小细胞肺癌患者外周血微转移的可行性。方法:应用巢式RT-PCR技术检测60例非小细胞肺癌患者外周血中MUC-1基因的表达,并以15例肺良性疾病患者及20名健康人外周血作为对照,同时使用相同的方法,扩增非上皮细胞来源的细胞株K562,HL-60及上皮细胞来源的细胞株A549、MCF-7,以观察靶基因的表达情况。结果:病患组MUC-1 mRNA表达阳性率达80.0%(48/60),15例肺良性疾病患者及20例健康人外周血中MUC-1 mRNA表达阳性率分别为60.0%(9/15),65.0%(13/20),K562、HL-60及A549、MCF-7细胞株经巢式RT-PCR也可以扩增出靶基因的条带。结论:MUC-1 mRNA不是检测非小细胞肺癌外周血微转移的可靠指标。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 微转移 外周血 粘蛋白-1 巢式rt—pcr 诊断
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非小细胞肺癌患者外周血中CK19 mRNA、MUC-1 mRNA及LUNX mRNA的表达及意义 被引量:4
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作者 刘小青 任宏轩 +1 位作者 伍治平 蒋奇益 《肿瘤基础与临床》 2008年第4期277-279,共3页
目的应用巢式逆转录聚合酶链反应(Nested RT-PCR)技术检测非小细胞肺癌患者外周血中CK19mRNA、MUC-1mRNA及LUNXmRNA的表达,探讨其作为肺癌微转移检测分子标记物的可能性。方法应用巢式RT-PCR技术检测60例非小细胞肺癌患者外周血中靶基... 目的应用巢式逆转录聚合酶链反应(Nested RT-PCR)技术检测非小细胞肺癌患者外周血中CK19mRNA、MUC-1mRNA及LUNXmRNA的表达,探讨其作为肺癌微转移检测分子标记物的可能性。方法应用巢式RT-PCR技术检测60例非小细胞肺癌患者外周血中靶基因的表达,并以15例肺良性疾病及20例健康人外周血作为对照。结果CK19mRNA、MUC-1mRNA及LUNXmR-NA表达的阳性率为:51.7%(31/60)、80.0%(48/60)和55.0%(33/60)。对照组中15例肺良性疾病及20例健康人外周血中无LUNXmRNA表达,20例健康人外周血中有1例CK19mRNA表达,而MUC-1mRNA表达的阳性率在肺良性疾病中为60.0%(9/15),在健康人外周血中为65.0%(13/20)。结论CK19mRNA、LUNXmRNA作为检测非小细胞肺癌患者外周血微转移的分子标记物,具有良好的敏感性和特异性,而MUC-1mRNA作为诊断非小细胞肺癌微转移的指标还需进一步探讨。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 微转移 细胞角蛋白19 粘蛋白-1 肺特异性蛋白X 巢式rt—pcr
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沙培林抑制胃癌细胞腹腔内微转移的研究 被引量:1
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作者 黄允宁 杨勇 +3 位作者 徐远义 杨世杰 杜鹏 姚保国 《宁夏医学杂志》 CAS 2008年第12期1072-1074,I0001,共4页
目的研究沙培林对胃癌细胞腹腔内微转移的预防和治疗作用。方法手术前48小时向随机选择的24例进展期胃癌患者腹腔内注射沙培林5KE,37例进展期胃癌患者腹腔内注射生理盐水20ml,手术中收集腹腔冲洗液,用巢式RT-PCR法测定腹腔冲洗液中CEAm... 目的研究沙培林对胃癌细胞腹腔内微转移的预防和治疗作用。方法手术前48小时向随机选择的24例进展期胃癌患者腹腔内注射沙培林5KE,37例进展期胃癌患者腹腔内注射生理盐水20ml,手术中收集腹腔冲洗液,用巢式RT-PCR法测定腹腔冲洗液中CEAmRNA的表达。结果实验组24例中有4例(20.8%)CEAmRNA表达阳性,对照组37例中,有16例(43.2%)CEAmRNA表达阳性。两组间有差异有统计学意义(P<0.01)。结论胃癌患者腹腔内注射沙培林CEAmRNA阳性表达率降低。 展开更多
关键词 沙培林 胃肿瘤 微转移 巢式rt—pcr
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CEAmRNA在胃癌腹腔冲洗液中的表达 被引量:1
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作者 杨勇 黄允宁 +3 位作者 杨世杰 苏刚 杜鹏 王炜 《宁夏医学杂志》 CAS 2009年第6期481-482,共2页
目的采用巢式逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测胃癌腹腔冲洗液中癌胚抗原信使核糖核酸(CEAmRNA)的表达情况,寻求一种筛选腹腔种植转移高危患者的方法。方法采用巢式RT-PCR的方法检测69例胃癌患者和10例良性疾病患者腹腔冲洗液中CEAm... 目的采用巢式逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测胃癌腹腔冲洗液中癌胚抗原信使核糖核酸(CEAmRNA)的表达情况,寻求一种筛选腹腔种植转移高危患者的方法。方法采用巢式RT-PCR的方法检测69例胃癌患者和10例良性疾病患者腹腔冲洗液中CEAmRNA的表达情况,并和腹腔冲洗液细胞学(PLC)的检测结果进行比较。结果69例胃癌患者腹腔冲洗液中CEAmRNA的阳性表达率49.28%(34/69),高于PLC检测27.54%(19/69)的阳性表达率(P<0.01);10例良性病人腹腔冲洗液标本巢式RT-PCR检测CEAmRNA表达均为阴性,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。胃癌细胞株MNK1中巢式RT-PCR检测CEAmRNA的敏感性达到1/105。结论巢式RT-PCR是一种高敏感性、高特异性胃癌腹腔种植转移的筛选方法,优于传统的PLC方法。 展开更多
关键词 胃癌 CEAMRNA 巢式rt—pcr
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圈养大熊猫戊型肝炎病毒感染调查 被引量:1
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作者 张成林 丁叶 +5 位作者 闫鹤 普天春 佘锐萍 尹君 杨明海 张金国 《野生动物》 2013年第6期323-326,共4页
采用ELISA、巢式RT-PCR、免疫组织化学等多种方法对北京动物园保存的大熊猫组织材料和部分现存活个体的粪便、血清等样品进行戊型肝炎病毒抗原调查。调查发现在死亡大熊猫肝脏组织中戊肝病毒抗原阳性检出率为88.9%(8/9),肾脏的阳性检出... 采用ELISA、巢式RT-PCR、免疫组织化学等多种方法对北京动物园保存的大熊猫组织材料和部分现存活个体的粪便、血清等样品进行戊型肝炎病毒抗原调查。调查发现在死亡大熊猫肝脏组织中戊肝病毒抗原阳性检出率为88.9%(8/9),肾脏的阳性检出率为85.7%(6/7)。现活体动物的粪便、血清抗原检查没有出现阳性结果。结果说明死亡大熊猫曾感染过戊型肝炎病毒,现有个体中没有戊肝病毒感染。 展开更多
关键词 大熊猫 戊型肝炎病毒(HEV) 免疫组化 巢式rt—pcr ELISA
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上皮钙黏着蛋白mRNA表达与肺癌的相关性研究
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作者 段勇 袁育林 +3 位作者 张林 刘华 李娅 王玉明 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期339-341,共3页
目的探讨E-cadherin(上皮钙黏着蛋白,E-cad)mRNA与肺癌及其病理类型之间的相关性。方法用巢式RT-PCR检测50例肺癌患者的癌、癌旁和远癌肺组织及5例肺良性对照标本中的E-cad mRNA的相对表达量。结果癌组织1.33±0.53、癌旁组织1.65&#... 目的探讨E-cadherin(上皮钙黏着蛋白,E-cad)mRNA与肺癌及其病理类型之间的相关性。方法用巢式RT-PCR检测50例肺癌患者的癌、癌旁和远癌肺组织及5例肺良性对照标本中的E-cad mRNA的相对表达量。结果癌组织1.33±0.53、癌旁组织1.65±0.60、远癌组织2.01±0.46、非肺癌对照肺组织2.09±0.09,经方差分析癌、癌旁和远癌组织差异有统计学意义(F=18.810,P<0.01),但远癌组织与非肺癌对照肺组织之间的差异无统计学意义(P>0.05)。肺鳞癌、腺癌及腺鳞癌的癌组织、癌旁组织和远癌组织中E-cad mRNA水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论E-cad mRNA表达减少或缺失与肺癌的发生和发展有相关性,与肺癌的组织类型无关。 展开更多
关键词 肺癌 上皮钙黏着蛋白mRNA 巢式rt—pcr
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广西肝癌高发区人群外周血AFP-mRNA检测的初步研究
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作者 黄景宁 金群馨 +3 位作者 姜海行 唐国都 唐星火 覃锦耀 《广西医科大学学报》 CAS 2012年第4期530-532,共3页
目的:探讨广西肝癌高发区人群中进行外周血AFP-mRNA检测的价值。方法:应用巢式RT-PCR检测117例当地人员外周血AFP-mRNA。HBsAg阴性者30例,HBsAg阳性及ALT正常者35例,HBsAg阳性及ALT异常者29例,HBsAg阳性及AFP异常者23例。结果:117例的... 目的:探讨广西肝癌高发区人群中进行外周血AFP-mRNA检测的价值。方法:应用巢式RT-PCR检测117例当地人员外周血AFP-mRNA。HBsAg阴性者30例,HBsAg阳性及ALT正常者35例,HBsAg阳性及ALT异常者29例,HBsAg阳性及AFP异常者23例。结果:117例的外周血AFP-mRNA检测结果均为阴性。结论:利用巢式RT-PCR方法检测广西肝癌高发区人群外周血AFP-mRNA未能发现早期肝癌患者。 展开更多
关键词 AFP-MRNA 巢式rt—pcr 原发性肝癌
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原发性小肝癌微波消融治疗前后外周血播散癌细胞及免疫功能变化 被引量:2
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作者 温朝阳 董宝玮 +4 位作者 梁萍 于晓玲 苏莉 于德江 夏红天 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 2005年第8期537-540,共4页
目的研究微波消融治疗原发性小肝癌(≤5 cm)对外周血播散癌细胞及细胞免疫功能影响.方法微波消融治疗19例小肝癌病人,手术切除治疗21例.于术前、术后30 min、1 d及7 d采外周静脉血,巢式RT-PCR检测AFP mRNA,监测CD3、CD4、CD8及CD4/CD8.... 目的研究微波消融治疗原发性小肝癌(≤5 cm)对外周血播散癌细胞及细胞免疫功能影响.方法微波消融治疗19例小肝癌病人,手术切除治疗21例.于术前、术后30 min、1 d及7 d采外周静脉血,巢式RT-PCR检测AFP mRNA,监测CD3、CD4、CD8及CD4/CD8.结果巢式RT-PCR检测外周血AFP mRNA,两组40例病人术前阳性率为40%(16/40);微波组和手术组均有3例病人治疗前AFP mRNA阴性,术后30 min转为阳性,两组之间比较无差异;微波组术后7 d内外周血细胞免疫功能无明显变化,手术组降低.随访1~16个月,4例肝内复发或远处转移病人治疗前后AFP mRNA 均阳性.结论与手术切除相比,微波消融治疗原发性小肝癌也可同样程度地造成癌细胞脱落入血,对外周血细胞免疫功能(7 d内)无明显影响,有其自身特点;治疗前后外周血AFP mRNA均呈阳性表达(7 d内)者,复发/转移的可能性增大. 展开更多
关键词 肝细胞 AFP mRNA 转移/复发 微波消融 巢式rt—pcr 免疫应答 微波消融治疗 原发性小肝癌 治疗前后
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膀胱移行上皮癌患者尿及癌组织中Survivin表达的临床意义 被引量:2
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作者 袁龙 王剑松 +3 位作者 徐本玲 袁鹏 韩广森 吴惠泽 《临床泌尿外科杂志》 北大核心 2009年第11期839-842,共4页
目的:探讨Survivin对膀胱癌早期发现、常规筛选且无损伤的方法,研究其与肿瘤病理分级(期)的相关性。方法:留取53例膀胱移行上皮癌、20例泌尿系其他疾病、10例健康志愿者新鲜中段晨尿,同上53例术后癌组织。利用巢式RT-PCR、实时定量PCR... 目的:探讨Survivin对膀胱癌早期发现、常规筛选且无损伤的方法,研究其与肿瘤病理分级(期)的相关性。方法:留取53例膀胱移行上皮癌、20例泌尿系其他疾病、10例健康志愿者新鲜中段晨尿,同上53例术后癌组织。利用巢式RT-PCR、实时定量PCR技术检测Survivin的表达,同时行尿脱落细胞学及膀胱镜病检。结果:53例膀胱癌患者尿及癌组织中Su rvivin均有表达,敏感性为100%,特异性为90%。与尿脱落细胞学敏感性比较两者差异有统计学意义(P<0.05),与膀胱镜检比较差异无统计学意义。三种方法特异性比较差异无统计学意义(P>0.05)。癌组织中Survivin的量与肿瘤病理分级(期)正相关(P<0.01)。结论:检测尿脱落细胞中Survivin的表达有望成为临床诊断、筛检膀胱癌的较可靠方法。Survivin在膀胱的演进过程中可能起重要作用,可望作为检测膀胱癌恶化进展的指标。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 移行上皮癌 巢式rt—pcr 实时定量pcr 基因表达
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急性白血病患者混合谱系白血病基因重排的检测 被引量:1
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作者 赵瑾 苏丽萍 +4 位作者 关涛 闫晓俊 丰恺超 王军 马莉 《白血病.淋巴瘤》 CAS 2012年第10期611-613,共3页
目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术和多重巢式RT-PCR技术对急性白血病(AL)患者混合谱系白血病(MLL)基因重排检测的价值。方法采用MLL双色FISH基因探针,应用间期FISH和多重巢式RT-PCR技术对189例AL患者进行检测,同时进行染色体R或... 目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术和多重巢式RT-PCR技术对急性白血病(AL)患者混合谱系白血病(MLL)基因重排检测的价值。方法采用MLL双色FISH基因探针,应用间期FISH和多重巢式RT-PCR技术对189例AL患者进行检测,同时进行染色体R或G显带。结果179例AL患者行FISH检测,其中9例(5.03%)MLL基因重排阳性[无MLL.部分串联重复(PTD)],而经多重巢式RT-PCR检测的189例中16例(8.47%)MLL基因重排阳性,包括MLL/AF9、MLL/AF10、MLL/AF6、MLL/AF17、MLL/ELL、MLL—PTD,189例患者同时进行染色体R或G显带,其中仅5例(2.65%)涉及11q23的相互易位。急性淋巴细胞白血病(ALL)(73例)与急性髓系白血病(AML)(116例)中6种常见MLL基因重排的发生率差异均无统计学意义(均P〉0.05)。结论多重巢式RT-PCR技术是对初诊AL患者进行MLL基因重排筛检的有效方法,不仅能证实常规细胞遗传学易位,还能检测出染色体核型分析和FISH技术均不能检出的MLL-PTD,为预后判断和治疗方案的选择提供依据。 展开更多
关键词 急性白血病 MLL基因重排 荧光原位杂交 多重巢式rt—pcr
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