工业大麻内生真菌HDM07挥发性成分分析

旨在开发利用工业大麻内生真菌HDM07挥发性成分,探索工业大麻内生真菌HDM07次生代谢产物生物合成途径。以工业大麻内生真菌HDM07为研究对象,采用GC-MS法和检索质谱数据库分析鉴定内生真菌HDM07发酵液和菌丝体中的挥发性成分,采用形态学观察法和18S rDNA序列分析法鉴定菌种。结果表明,经GC-MS法和质谱数据库检索分析,从内生真菌HDM07发酵液中鉴定出11种挥发性成分,在内生真菌HDM07菌丝体中鉴定出14种挥发性成分,工业大麻叶中鉴定了12种成分,空白对照品溶液(PDB培养基)中鉴定了7种成分;经鉴定内生真菌HDM07为链格孢菌(Alternaria alternate)。上述结果表明,HDM07发酵液挥发性成分与菌丝体中挥发性成分两者的合成途径既有联系又有区别。内生真菌HDM07的发酵液及菌丝体中均含有与工业大麻相同或相似的挥发性成分,也含有其特有的挥发性成分,说明该菌株与宿主植物工业大麻在合成挥发性成分方面具有一定的相关性。

工业大麻内生真菌菌群结构及其在植株内的空间分布特征

本研究旨在探讨不同样地和不同部位大麻组织中内生真菌的多样性及其分布特征,对4个不同样地大麻(‘云麻1号’)的植株不同部位组织进行内生真菌分离,采用形态学观察和ITS序列分子鉴定。共分离得到内生真菌531株,其中茎分离出138株,叶分离出393株;分属于29个属,其中茎22个属,叶24个属。有18个属普遍存在于大麻茎和叶中,其中炭疽菌属是大麻的优势菌属,优势度为40.11%。大麻茎部的内生真菌分离率显著低于叶部,接近地面部分的大麻茎叶组织内生真菌分离率最高。4个样地大麻内生真菌多样性指数在1.84到2.46之间,不同样地中大麻内生真菌组成的相似系数普遍较高,同一样地中大麻茎与叶的相似性系数较小。结果表明,工业大麻内生真菌多样性偏低、宿主专一性较小。

盐胁迫条件下‘巴麻火麻’内生真菌的分离鉴定与多样性分析

旨在研究‘巴麻火麻’不同浓度盐处理下植物内生真菌动态变化规律,并筛选到与缓解盐胁迫密切相关的内生真菌。以前期筛选的耐盐工业大麻品种‘巴麻火麻’为研究材料,通过不同浓度(0、100、200和300 mmol/L)NaCl盐处理,利用传统方法对大麻内生真菌进行分离纯化,结合形态学和rDNA-ITS序列分析对菌种进行鉴定。1400个大麻组织片中共分离到543株真菌,隶属于14个科18个属44个种。研究发现,盐胁迫处理影响大麻内生真菌群落组成,不同浓度NaCl处理下分离到的内生真菌不同,各处理间相似性系数均小于0.5。随着NaCl处理浓度的增加,内生真菌的丰富度、多样性指数、分离率均呈先降后升的趋势。其中,在200 mmol/L NaCl处理下,丰富度和多样性指数最低,而100 mmol/L NaCl处理下,分离率达到最低。在所有的处理中,均分离得到与抗逆性密切相关的毛壳菌(Chaetomium globosum)、哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、炭垫菌(Nemania diffusa)、枝孢霉(Cladosporium)、炭团菌(Annulohypoxylon stygium)等。

不同品种工业大麻的内生真菌多样性及其分布特征

从4个工业大麻品种不同部位叶的600块组织中共分离得到内生真菌376株（云麻3号71株、云麻4号107株、云麻5号95株、云晚6号103株），经形态学和ITS序列分子鉴定发现这些内生真菌分属于20个属，其中6个属普遍存在于4个品种中，炭疽菌Colletotrichum是大麻的优势菌属，在4个品种中的优势度均大于50％．大麻4个品种的内生真菌分离率在0．47-0．71之间，平均为0．63．内生真菌群落组成的多样性及相似性分析结果表明，工业大麻的内生真菌多样性偏低、宿主专一性较小．