振荡模式下TGF-β_1基因转染成肌诱导化ADSCs构筑工程化平滑肌的研究

目的:分析工程化平滑肌的体外生物学行为,评估构筑工程化平滑肌的理想方法,为修复女性尿道损伤提供新的方法。方法:转化生长因子β1腺病毒载体(Ad-TGF-β1)转染兔脂肪基质细胞(ADSCs),观察细胞形态、转染效率及细胞周期变化。接种到壳聚糖/胶原(Cs/Col)支架,构建工程化平滑肌:A组:凝胶+生长因子+振荡种植静态培养,B组:凝胶+生长因子+静态种植静态培养,C组:凝胶+基因转染+振荡种植静态培养,D组:静态种植静态培养。第1天、4天、8天、12天、16天、20天、24天、28天,电镜、共聚焦观察,检测细胞存活率、细胞增殖、Ⅲ型胶原及DNA含量。结果:C组细胞骨架发育完善,生长旺盛、细胞外基质丰富,细胞存活率高于其他组(P<0.05),增殖活力、Ⅲ型胶原及DNA含量均高于其他组(P<0.05)。结论:凝胶包埋基因与振荡模式能加速种子细胞扩增及优化工程化平滑肌构建质量。为细胞移植治疗尿道损伤开创了新的模式。