左旋盐酸去甲基苯环壬酯对大鼠和小鼠震颤与行为的影响

目的评价抗胆碱药左旋盐酸去甲基苯环壬酯(R-DM8021)的帕金森病(PD)治疗作用。方法 ①使用脑单侧立体定向注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)损毁大鼠中脑黑质-多巴胺神经元的方法建立PD动物模型。观察大鼠单次ig给予R-DM80210.2,0.5,1.0和2.0mg.kg-1旋转行为;观察大鼠连续ig给予R-DM80210.2,0.5和2.0mg.kg-121d对大鼠旋转行为;观察大鼠连续ig给予R-DM80210.2,0.5和2.0mg.kg-17d后自发活动情况。②昆明小鼠ig给予R-DM80210.25～40mg.kg-1,30min后ip给予氢溴酸槟榔碱35mg.kg-1,观察肌肉震颤持续时间。③C57BL/6小鼠ip给予MPTP30mg.kg-17d建立MPTP帕金森病模型,ig给予R-DM80215,10和20mg.kg-1后观察小鼠自发活动情况。结果①与6-OHDA损毁模型对照组相比,单次ig给予R-DM80210.2,0.5,1.0和2.0mg.kg-1分别使APO诱导的旋转次数增加(17.3±4.5)%、(29.8±9.3)%、(30.2±13.9)%和(31.7±5.5)%;苯海索3.0,5.0和10.0mg.kg-1组分别增加(18.8±4.8)%、(22.2±17.3)%和(36.9±10.0)%。连续给药21d,大鼠APO诱导的旋转次数显著增加(P<0.01),并维持在稳定的水平。与等剂量的苯海索相比,R-DM8021对APO诱导旋转的作用更强。建模成功后,大鼠10min内自发活动路程较正常组显著降低(P<0.01),连续给予R-DM8021和苯海索7d可明显提高大鼠自发活动路程,R-DM8021对大鼠自发活动的改善效果显著优于等剂量的苯海索(P<0.01)。②ip给予槟榔碱35mg.kg-1,小鼠出现明显肌肉震颤,持续时间为(8.9±1.0)min,R-DM8021和苯海索均可剂量依赖性地降低小鼠肌肉震颤持续时间,两药对槟榔碱致小鼠肌肉震颤持续时间抑制作用的ED50分别为(6.87±1.33)mg.kg-1和(41.14±9.31)mg.kg-1,两者相比具有显著性差异(P<0.01)。③ip连续给予MPTP7d,小鼠3min内自发活动路程较正常组显著降低,连续ig给予R-DM8021和苯海索3d可明显提高小鼠自发活动路程,R-DM8021对小鼠自发活动的改善效果显著优于等剂量的苯海索(P<0.01)。结论 R-DM8021对3种模型PD均有治疗作用且效果均优于苯海索。

左旋盐酸去甲基苯环壬酯对MPTP诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用(英文)

目的探究M4受体选择性拮抗剂左旋盐酸去甲基苯环壬酯(R-DM8021)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导人多巴胺能神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞损伤的保护作用。方法预先给予不同浓度R-DM8021(1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7),1×10^(-6)mol·L^(-1))孵育SH-SY5Y细胞1 h后,加入MPTP1 mmol·L^(-1)共孵育24 h,MTT比色法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量,TUNEL法观察细胞凋亡形态,Western蛋白印迹法检测细胞凋亡相关蛋白Bax和胱天蛋白酶3前体蛋白表达水平。结果 MTT结果显示,与细胞对照组相比,MPTP 1 mmol·L^(-1)作用SH-SY5Y细胞24 h,细胞存活率显著降低至(44.5±2.7)%(P<0.01);与MPTP组相比,预先给予R-DM8021(1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7),1×10^(-6)mol·L^(-1))均可逆转MPTP对SH-SY5Y细胞的损伤作用,细胞存活率分别提高至(80.5±4.7)%,(71.5±8.1)%,(74.4±6.5)%和(61.3±3.2)%(P<0.01)。流式细胞检测结果显示,与细胞对照组相比,MPTP 1 mmol·L^(-1)作用SH-SY5Y细胞24 h,细胞内ROS含量显著升高至129±22(P<0.01);与MPTP组相比,预先给予R-DM8021(1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7),1×10^(-6)mol·L^(-1))显著降低MPTP诱导的胞内ROS释放,细胞内ROS含量降低至84±12,86±15,86±6和88±8(P<0.05)。TUNEL检测显示,与细胞对照组相比,MPTP 1 mmol·L^(-1)作用SH-SY5Y细胞24 h,贴壁细胞染色质皱缩,核膜裂解,并产生大量凋亡小体;与MPTP组相比,预先给予R-DM8021 1 nmol·L^(-1)可显著改善MPTP诱导的细胞凋亡,凋亡小体显著减少。Western蛋白印迹结果显示,与MPTP组相比,R-DM8021 1 nmol·L^(-1)可显著抑制MPTP诱导SH-SY5Y细胞凋亡,降低Bax和胱天蛋白酶3前体蛋白的表达(P<0.01)。结论 R-DM8021能有效对抗MPTP诱导的SH-SY5Y细胞损伤,其机制与提高细胞存活率,降低胞内ROS含量,抑制细胞凋亡有关。

左旋盐酸去甲基苯环壬酯的合成新方法

目的合成新型M4受体选择性拮抗剂左旋盐酸去甲基苯环壬酯。方法以苄胺为原料制备N,N-二乙氧基甲基苄胺,该苄胺与环己酮反应、选择性还原,再与(R)-α-苯基-α-环戊基-α-羟基乙酸甲酯反应,经氢化、成盐得到目标产物左旋盐酸去甲基苯环壬酯,总收率为8.0%。结果与结论目标化合物的结构经元素分析、核磁共振氢谱、质谱确证。新方法操作简便,以新旧合成路线中共有贵重原料(R)-α-苯基-α-环戊基-α-羟基乙酸甲酯计算,产品收率较原方法提高了10.6%,降低了成本,且利于环保。

左旋盐酸苯环壬酯片的含量及溶出度测定方法

目的:测定左旋盐酸苯环壬酯片的含量及溶出度。方法:采用溶剂萃取酸性色素比色法(BCG法)测定含量,λmax=414nm。溶出度以桨法测定,转速50r·min-1,溶出介质为250mL0.1mol·L-1盐酸溶液。结果:当左旋盐酸苯环壬酯浓度为2.0～10.0μg·mL-1时,浓度与吸光度呈良好线性,回归方程:Y=0.0935X+0.0021,R2=1(n=3),回收率为(98.76±1.55)%,RSD=1.57%(n=5)。片剂30min取样,主药溶出80%以上。结论:该方法简便、快捷、准确,与HPLC法含量测定结果基本一致,为该制剂的溶出度测定及片剂半成品快速测定提供了方法学依据。

左旋盐酸苯环壬酯及其光学异构体的安全性药理学比较

目的盐酸苯环壬酯(phencynonate hydrochloride,PCH)是我所合成的中枢性抗胆碱能药物,用于晕动病的治疗,具有疗效强,中枢不良反应少的特点。由于其分子结构中存在一个手性碳原子,苯环壬酯具有R(-)和S(+)2种不同构象。不同旋光异构体的药理毒理效应是否存在差异,目前尚不清楚。本研究比较盐酸苯环壬酯左旋体(R(-)-PCH)与右旋体(S(+)-PCH)以及消旋体(PCH)对动物中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统的影响。方法中枢神经系统实验采用自发活动视频分析系统,每个活动室内一次放1只动物,记录给药后2h内动物自发活动情况。以10min内指标的平均值进行组间比较。心血管系统、呼吸系统的检测使用BIOPACMP150数据采集系统。动物麻醉后分离左侧股总动脉作动脉插管,记录血压(收缩压、舒张压和平均动脉压);并以针状电极,记录Ⅱ导联心电图;气管插管连接呼吸流量传感器,描记呼吸波形、记录呼吸频率及潮气量。以每个时间点60s内平均值作为评价指标。结果R(-)-PCH和PCH能够减少小鼠活动次数,但R(-)-PCH作用程度稍弱于PCH。S(+)-PCH对小鼠自发活动无影响。R(-)-PCH、PCH、S(+)-PCH各剂量组对大鼠呼吸频率和潮气量均无明显影响,但三者在一定剂量范围内对血压有降低的趋势。结论在本实验条件下R(-)PCH、S(+)PCH和PCH消旋体对小鼠自发活动、大鼠呼吸频率、潮气量和心率无明显影响,不同旋光异构体对血压均有降低趋势,但剂量效应关系不明显。

盐酸苯环壬酯预防晕动病临床试验研究

盐酸苯环壬酯是中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所研制的抗胆碱I类新药。本项多中心临床试验研究由中国药物依赖性研究所负责组织,对盐酸苯环壬酯预防晕动病进行乘车、乘船试验和试验室内运动试验。对照药为眩晕停和安慰剂。乘车、乘船试验301例,包括双盲对照试验104例与开放试验197例。总有效率81.40%,显效率60.80%,有效率20.60%,部分有效率11.96%,无效率6.64%。总有效率与安慰剂比较,差异极为显著(p<0.01),与眩晕停比较也有显著性差异(p<0.05)。试验室内运动试验60例,包括双盲对照和开放试验各30例。旋转性眼球震颤记录显示,服药后旋转中眼震和旋转后眼震速度均明显低于服药前,具有显著性差异(p<0.01);科里奥力加速度刺激胃电记录显示,服药后胃体和胃窦胃电振幅均明显低于服药前,差异非常显著(p<0.01)。组间对照表明:本药与安慰剂组比较有显著性差异,与眩晕停组比较无显著性差异。苯环壬酯副作用主要是口干,发生率9.7%,无其他严重不良反应。以上结果表明,盐酸苯环壬酯是预防晕动病的安全有效药物之一。

盐酸苯环壬酯对最大电休克发作及戊四氮惊厥模型的抗惊作用

目的 评价盐酸苯环壬酯抗癫痫疗效,探讨其抗癫痫作用机制。方法 建立不同癫痫发作模型,评价盐酸苯环壬酯等药物抗癫痫疗效;观察盐酸苯环壬酯等药物对致死剂量NMDA中毒小鼠、NMDA诱导的原代培养大鼠海马神经细胞损伤及NMDA诱发电流的影响。结果 盐酸苯环壬酯在不同癫痫发作模型上均具明显抗惊作用;并可显著对抗致死剂量NMDA中毒,浓度依赖性抑制NMDA诱导原代培养大鼠海马神经细胞损伤及NMDA诱发电流。结论 盐酸苯环壬酯在经典癫痫模型上均具显著抗惊作用,其作用机制可能与其对NMDA受体的拮抗作用有关。

盐酸苯环壬酯人体药代动力学及生物利用度研究

１２名男性健康志愿者随机分为两组，交叉口服抗胆碱Ⅰ类新药盐酸苯环壬酯片剂２ｍｇ、４ｍｇ和水剂４ｍｇ。采用ＧＣ－ＭＳ方法测定血浆中药物浓度，进行药代动力学及片剂相对生物利用度的研究。结果表明口服两种剂量及两种剂型后均能很快吸收，血药浓度一时间曲线符合二室模型，口服片剂２ｍｇ与４ｍｇ组的Ｔ１／２ｋａ分别为０．４２±０．１３和０．３３±０．１９ｈ；Ｔ１／２ａ分别为０．４６±０．４３和０．５１±０．２９ｈ；Ｔ１／２β分别为３．３３±３．２１和３．９８±３．４４ｈ；Ｔｍａｘ分别为１．６８±０．７８和１．１６±０．３７ｈ，两种剂量上述参数经ｔ检验无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。两种浓度的回收率为５４．３±１９．１％（ＣＶ＝１０．３％）和４０．９±６．２％（ＣＶ＝１５．２％）。表明盐酸苯环壬酯在人体内运转过程不受剂量（临床用量范围）的影响。口服相同剂量（４ｍｇ）片剂和水剂的Ｔ１／２β分别为３．９８±３．４４和４．７５±３．０９ｈ；Ｔｍａｘ分别为１．１６±０．３７和０．９５±０．３２ｈ；Ｃｍａｘ分别为１５．４３±１３．８６和１４．７０±９．１０μｇ／ｌ；ＡＵＣ分别为４５．９±４０．４７和５７．３４±２３．７５μｇ·ｈ－１·Ｌ?

人血中盐酸苯环壬酯的GC－MS／SIM定量测定

建立了血中盐酸苯环壬酯的ＧＣ－ＭＳ／ＳＩＭ的定量分析方法。采用同位素标记物［２Ｈ３］盐酸苯环壬酯为内标，以ｍ／ｚ１３８和ｍ／ｚ１４１为盐酸苯环壬酯和［２Ｈ３］盐酸苯环壬酯的检测离子；方法线性度、回收率、相对标准偏差以及仪器的稳定性均达到定量测定的要求。其最低检测限为２５ｐｇ·ｍｌ－１血浆。该法应用于盐酸苯环壬酯Ⅰ期临床实验中的血药浓度测定，得到了准确、可靠的药代动力学和相对生物利用度数据，为盐酸苯环壬酯的新药报批提供了依据。

高效液相色谱法测定盐酸苯环壬酯片的含量

目的 :建立反相高效液相色谱法测定盐酸苯环壬酯片的含量。方法 :采用Zorbax -C18柱 ,以丙酸睾酮为内标物 ,甲醇 -0 1mol·L- 1醋酸钠缓冲液 ( pH 5) ( 8∶2 )为流动相 ,检测波长 2 2 0nm。结果 :盐酸苯环壬酯进样量在 1～ 6μg ,内标物为 0 6μg时 ,与峰面积比值呈良好线性 ,r =0 9999(n =5)。方法平均回收率为 99 79% ,RSD为 0 4 5% (n =1 5)。结论 :方法简便、准确、专属。

盐酸苯环壬酯及其光学异构体的细胞毒性

目的:研究新型抗胆碱能药物盐酸苯环壬酯(CPG)及其光学异构体S(+)-CPG和R(-)-CPG的细胞毒性。方法:人肝肿瘤细胞HepG2、人近曲肾小管上皮细胞HK-2及人胚肺成纤维细胞HLF染毒不同浓度的CPG,S(+)-CPG和R(-)-CPG,采用中性红吸收法测定半数抑制浓度(IC50)。结果:CPG,S(+)-CPG和R(-)-CPG均以浓度依赖的方式降低细胞存活率,它们对HepG2细胞的IC50分别为192.5,193.6和217.0μmol.L-1,对HK-2细胞的IC50分别为181.8,196.0和208.8μmol.L-1,对HLF细胞的IC50分别为223.7,233.9和244.6μmol.L-1。结论:CPG与其光学异构体S(+)-CPG和R(-)-CPG的细胞毒性没有明显差异。

HPLC法测定盐酸苯环壬酯渗透泵片的含量

目的:建立高效液相色谱法测定盐酸苯环壬酯渗透泵片含量的方法。方法:采用Diamonsil C_(18)(2)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈-水-磷酸-三乙胺(270:400:1.3:2);检测波长:220 nm;流速:1.0 ml·min^(-1);柱温:30℃。结果:盐酸苯环壬酯在2~6μg·ml^(-1)范围内线性关系良好,r=0.999 9;平均回收率为100.5%,RSD为1.44%(n=9)。结论:该方法专属性强,结果准确可靠,可用于盐酸苯环壬酯渗透泵片的质量控制。

盐酸苯环壬酯控释片释放度研究方法的建立

目的：建立盐酸苯环壬酯控释片释放度的测定条件和释放量测定方法。方法：采用HPLC法测定盐酸苯环壬酯控释片的释放度,色谱条件：Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm,5μm）为色谱柱,乙腈-水-磷酸-三乙胺（270∶400∶1.3∶2）为流动相,检测波长为220 nm,流速为1.0 ml.min-1,柱温为30℃,进样量为20μl；考察释放装置、释放介质和转速对盐酸苯环壬酯控释片释放度的影响。结果：建立的释放量测定方法在0.3~5.0μg.ml-1线性关系良好,r=0.9998,释放度的平均回收率为100.6%,RSD为1.16%（n=15）；在以900 ml pH 3.0磷酸盐缓冲溶液为释放介质、转速为50 r.min-1、加沉降篮的释放条件下,本品的体外释药行为符合零级模型,释药方程为：Q=6.1412t-9.3287,r=0.996。结论：建立的释放度测定条件和释放量测定方法简便、准确、可靠,可用于盐酸苯环壬酯控释片释放度的质量控制。

高效液相色谱法内标法测定盐酸苯环壬酯控释片的含量

目的建立测定盐酸苯环壬酯控释片含量的高效液相色谱法内标法。方法选择盐酸地芬尼多为内标物,采用Diamonsil C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）为色谱柱,乙腈-水-磷酸-三乙胺（270∶400∶1.3∶2）为流动相,检测波长为220 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃。结果盐酸苯环壬酯质量浓度线性范围是2.0-6.0μg/m L,r=0.999 2,平均回收率为101.3%,RSD为1.63%（n=9）。结论该法结果准确可靠、专属性强,可用于盐酸苯环壬酯控释片的含量测定和质量控制。

盐酸苯环壬酯片的酸性色素比色法及其溶出度测定

目的 :测定盐酸苯环壬酯片的含量及溶出度。方法 :采用溶剂萃取、酸性色素比色法测定含量 ,检测波长 413nm。溶出度以转篮法测定 ,转速 10 0r·min-1,溶出介质 5 0 0mlpH 3磷酸盐缓冲液。 结果 :3.0～ 15 .0 μg·ml-1范围内线性良好 ,r =0 .9999(n =5 ) ,平均回收率 99.95 % (n =9) ,RSD为± 0 .6 5 %。片剂 30min定时取样测定 ,主药溶出 90 %以上。结论 :方法简便、准确、专属 ,可作为该制剂的含量测定和质量控制。

盐酸苯环壬酯片预防晕动病的疗效研究

目的 :观察盐酸苯环壬酯片预防装甲车辆乘载员晕动病的疗效与不良反应。方法 :采用随机双盲交叉对照的方法 ,试验分盐酸苯环壬酯片 (n =31)、茶苯海明片 (n =33)和安慰剂 (n =31) 3组 ,口服剂量分别为 2 ,5 0和 10 0mg。 结果 :盐酸苯环壬酯片组总有效率 77.42 % ,显效率 48.38% ,与安慰剂相比有极显著性差异 (P <0 .0 1) ,与茶苯海明片组相比无统计学差异。盐酸苯环壬酯片组嗜睡发生率低 ,与其他 2组相比差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :盐酸苯环壬酯片是预防晕动病的安全有效药物。

氘标记盐酸苯环壬酯的合成

为了开展盐酸苯环壬酯及其光学异构体药代动力学研究,确定代谢途径,进行代谢差异比较,对盐酸苯环壬酯进行了稳定同位素氘标记合成研究。以五氘溴苯为原料,先由格氏反应生成D代中间体α-环戊基-α-D5-苯基羟乙酸乙酯,再经三步反应得到定位标记的盐酸氘代苯环壬酯。该合成路线简捷,同位素原料易得,引入标记原子的步骤短,反应条件较易控制,氘丰度达99%,经质谱、核磁确证结构与盐酸苯环壬脂一致。

左旋苯环壬酯在小鼠体内的组织分布研究

目的研究左旋苯环壬酯在小鼠体内主要脏器组织分布特征,分析是否存在药物浓度高、蓄积时间长的组织和器官,并着重考察其在药效靶器官中的分布。方法采用液相色谱串联质谱法测定组织中左旋苯环壬酯的药物浓度,分析药物在组织中的分布特征。结果小鼠口服盐酸左旋苯环壬酯后,肝、脾、肺、心在给药后5 m in浓度即达到峰值,其中肝浓度最高,为531.50 ng/g,其他组织在给药后30 m in浓度达峰,2 h后各组织的药物均降至较低水平。结论盐酸左旋苯环壬酯在小鼠体内的吸收、分布均较快,药物入血后很快分布到体内各个组织中,药物在组织中的消除也较快,没有组织蓄积现象。

酸性色素比色法测定盐酸苯环壬酯片的质量分数及溶出度

采用溶剂萃取、酸性色素比色法测定盐酸苯环壬酯片的质量分数及溶出度 ,检测波长 41 3nm,溶出度以转篮法测定 ,转速 1 0 0 r·min-1,溶出介质 50 0 m L,p H3的磷酸盐缓冲液。结果表明 :在 3.0～ 1 5.0 mg·L-1范围内线性良好 ,r=0 .9999(n=5) ,平均回收率 99.95% (n=9) ,RSD为±0 .65%。片剂 30 min定时取样测定 ,主药溶出 90 %以上。此方法简便、准确、专属 ,可作为该制剂的质量分数测定和质量控制。

盐酸苯环壬酯对小鼠的围产期毒性试验研究

盐酸苯环壬酯分成２．５、１２．５和６２．５ｐｐｍ３个浓度组，溶于自来水中，供孕鼠从妊娠ｄ１５开始至断乳时饮用。结果显示，在相当于人临床用量１５～７５倍剂量范围内，该药对小鼠胚胎后期生长发育、母鼠分娩、哺乳及新生小鼠神经行为发育无明显影响。６２．５ｐｐｍ组孕鼠给药期间体重增长抑制，死产仔鼠数增多，雄性仔鼠肝脏重量增加，表现出一定的母体毒性和发育毒性。