左旋黄皮酰胺在大鼠体内的排泄

Aim To study the excretion of(-)-clausenamide in rats.Methods The urine,feces and bile were collected at predetermined time points after(-)-clausenamide was orally administrated to 6 rats(30 mg·kg^-1).The concentrations of(-)-clausenamide and its metabolite 6-OH-(-)-clausnamide were determined by HPLC-MS/MS method using glipzide as the internal reference,and the accumulative excretion amount of(-)-clausenamide and 6-OH-(-)-clausenamide was calculated in the urine,feces and bile,separately.Results(-)-Clausenamide was recovered mostly(44%) from feces in 112 hours,7.1% was found from urine in 120 hours and 0.013% was detected from bile in 24 hours.The accumulative excretions of 6-OH-(-)-clausenamide were 0.92%,0.46% and 0.0003% of the administered dose from feces,urine and bile,respectively.Conclusion The major amount of(-)-clausenamide was recovered from feces after(-)-clausenamide was orally administrated to rats(30 mg·kg^-1).

左旋黄皮酰胺对冈田酸和β淀粉样肽_(25-35)神经毒性的保护作用

探讨左旋黄皮酰胺对冈田酸(okadaic acid,OA)诱导的人神经瘤细胞(SH-SY5Y)和去卵巢(ovariectomy,OVX)及单侧侧脑室注射Aβ25-35所致神经元损伤的保护作用。通过MTT试验、LDH释放测定试验、Hoechst 33258荧光染色试验以及SH-SY5Y细胞检测,考察左旋黄皮酰胺拮抗冈田酸诱导的细胞毒作用。通过避暗试验、电镜检测、Nissl体染色及HE染色,考察左旋黄皮酰胺对去卵巢及侧脑室注射Aβ25-35大鼠神经元的保护作用。左旋黄皮酰胺可明显拮抗冈田酸诱导的细胞毒作用,提高去卵巢及侧脑室注射Aβ25-35大鼠的学习记忆能力,保护海马及皮层神经元。左旋黄皮酰胺可拮抗冈田酸及Aβ25-35诱导的神经毒性,具有神经保护作用。

左旋黄皮酰胺在大鼠肝微粒体中的代谢转化研究

用大鼠肝微粒体体外温孵法进行了左旋黄皮酰胺［（－）ｃｌａｕｓｅｎａｍｉｄｅ］代谢转化研究，优化了温孵体系，建立了反相ＨＰＬＣＤＡＤ同时分离检测左旋黄皮酰胺及其体外代谢产物的分析方法。用硅胶低压柱色谱、制备ＴＬＣ及制备ＨＰＬＣ分离纯化了两个代谢产物并进行了光谱鉴定。结果表明，两个代谢物分别确定为６和５位羟基取代的黄皮酰胺。

左旋黄皮酰胺抑制去血清所致神经细胞凋亡及其相关机制的研究

目的观察中药成分左旋黄皮酰胺对去血清所致PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法采用形态学观察及MTT法检测左旋黄皮酰胺对去血清所致PC12细胞存活的影响;采用流式细胞术检测左旋黄皮酰胺对PC12细胞凋亡的影响;采用Western blotting及共聚焦显微镜检测左旋黄皮酰胺对GSK-3β、Bcl-2、Bax表达的影响。结果左旋黄皮酰胺1,10μmol/L剂量组可以通过抑制去血清所致PC12细胞的凋亡而增加细胞的存活率,其机制是抑制GSK-3β的表达并增加Bcl-2/Bax的比值。结论左旋黄皮酰胺可能是通过抑制神经细胞损伤而改善学习记忆障碍。

反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中左旋黄皮酰胺及其主要代谢产物和药代动力学

目的 探讨左旋黄皮酰胺 [(- )clau]及其主要代谢产物 6 OH clau在大鼠体内的药代动力学。方法 建立了RP HPLC UV法。固定相为Kromasil 10 0C18(5 μm)色谱柱 ,流动相为乙腈—甲醇—水 (2 1∶16 5∶6 2 5 ) ,DM 9384作内标 ,氯仿作提取溶剂。结果 测得 (- )clau的回收率为 96 91%～ 10 5 74% ,日内、日间RSD低于 7% ,最低检测浓度为 2 4ng·mL-1,(- )clau和 6 OH clau分别在 0 0 47～ 96 8μg·mL-1和 0 0 49～ 2 0 0 μg·mL-1,线性关系良好 (γ =0 999) ;(- )clau和 6 OH clau血浆浓度 时间曲线符合二室开放模型 ,同时求得两者的药代动力学参数。结论 数据表明 (- )clau在大鼠血浆中的分布。

HPLC/MS法研究左旋黄皮酰胺及其代谢物在Beagle犬血浆中的药代动力学

目的用HPLC/MS法研究左旋黄皮酰胺[(-)-clau]及其代谢物6-羟基-黄皮酰胺(6-OH-clau)在Beagle犬血浆中的药代动力学过程.方法Beagle犬灌胃左旋黄皮酰胺30 mg·kg-1,采集静脉血样,血浆经乙酸乙酯萃取分离后,用HPLC/MS选择性正离子检测内标(格列吡嗪,[M+H]+,m/z 446)法测定左旋黄皮酰胺([M+H]+,m/z298)及6-羟基-黄皮酰胺([M+H-H2O]+,m/z 296)的浓度,以甲醇-水-冰醋酸(60:40:0.8)为流动相,流速1.0mL·min-1.用3P97软件计算药代动力学参数.结果左旋黄皮酰胺和6-羟基-黄皮酰胺分别在1.0～200ng·mL-1和0.2～40.0 ng·mL-1线性关系良好(r＞0.999),萃取回收率均大于85%.原药及其代谢物的体内过程均符合二室模型;左旋黄皮酰胺及6-羟基-黄皮酰胺的Cmax分别为(21±10)ng·mL-1和(3.9±2.2)ng·mL-1;Tmax分别为(0.8±0.5)h和(1.3±0.5)h;T1/2α分别为(0.9±0.6)h和(1.4±0.6)h;T1/2β分别为(19±23)h和(13±12)h;AUC0.24h分别为(69±14)h·ng·mL-1和(12±7)h·ng·mL-1.结论Beagle犬灌胃左旋黄皮酰胺后迅速吸收,血药浓度一相消除很快,但末端消除较慢;其代谢物6-羟基-黄皮酰胺血药浓度经时过程与左旋黄皮酰胺相似,但血药浓度相对较小.

HPLC-MS法测定血浆中左旋黄皮酰胺的浓度

目的:建立测定血浆中左旋黄皮酰胺浓度的 LC-MS 方法。方法:血浆样品经醋酸乙酯提取处理后,以2%冰醋酸-甲醇(45∶55)为流动相,在1.0 mL·min^(-1)的流速下,用 Shimadzu ODS 色谱柱(150mm×4.6mm,5μm)分离,样品经电喷雾离子化后,通过 HP 1100 HPLC-MS 质谱仪液相色谱串联质谱法,以格列吡嗪为内标测定左旋黄皮酰胺的浓度。结果:血浆中左旋黄皮酰胺的线性范围为0.01-10μg·mL^(-1),最低定量浓度为10ng·mL^(-1),准确度在80%-90%之间,日内、日间精密度(RSD)在±10%之内。结论:该方法高效、准确,可用于左旋黄皮酰胺在体内的药代动力学研究及血浆中左旋黄皮酰胺的含量测定以控制质量。

一种新型的抗老年痴呆剂:左旋黄皮酰胺的化学、生物学活性和作用机制研究

从芸香科植物黄皮叶中分离出具有五种不同骨架的七个新酰胺类化合物,其中之一的黄皮酰胺的γ-内酰胺与具有促智作用的脑复康(piracetam)呈现相同的骨架,其分子中有4个不对称中心,应有16个对映体。在鉴定出16个对映体的绝对构型之后,用黄量教授设计的仿生路线先后完成了16个对映体和光活黄皮酰胺的不对称合成,在这一研究中解决了立体化学和合成中的一些难点,大大缩短了合成步骤,提高了总得率,生产工艺日趋成熟,其合成规模可满足临床试用和日后治疗疾病的需要。使用多项模型和指标也已证明(-)黄皮酰胺是有效对映体,(+)黄皮酰胺为劣对映体。黄皮酰胺对映体的代谢(血药浓度、吸收、分布、排泄、血浆蛋白结合、肝脏首过效应)和酶促动力学也都存在立体选择性差异。(-)黄皮酰胺的主要药理作用是改善认知功能和抑制Aβ毒性。药理作用的显著特点是提高突触效能和结构的可塑性,为国际上近年提出的"突触丢失是老年痴呆的主要原因"的新学说提供了有力的支持,也为当前AD治疗的新策略提供了有良好前景的新药。