蓖麻毒素修饰物对巨噬物细胞结构和功能的影响

蓖麻毒素修饰物对巨噬物细胞结构和功能的影响李霖，邹伯英，王文学第四军医大学毒理学教研室（西安７１００３３）蓖麻毒素（ＲＴ）是一种强细胞毒性的糖蛋白。近年来较广泛地用于抗癌方面的研究，尤其作为抗癌免疫毒素受到重视，但是由于毒素对免疫功能有强抑制作用，限...

结直肠癌组织中错配修复蛋白及肿瘤相关巨噬细胞与临床病理特征相关性

目的探讨结直肠癌(CRC)组织中错配修复(MMR)蛋白及肿瘤相关巨噬细胞与临床病理特征的相关性。方法选取淮北矿工总医院自2020年1月至2023年8月收治的81例CRC患者的癌组织及癌旁组织为研究对象。采用免疫组化法检测错配修复系统同源物1(MLH1)、错配修复系统同源蛋白2(MSH2)、错配修复系统同源蛋白6(MSH6)、错配修复系统蛋白2(PMS2)、巨噬细胞标志蛋白163(CD163)和巨噬细胞标志蛋白68(CD68)的表达情况。分析MMR蛋白、肿瘤相关巨噬细胞标志物表达与临床病理特征的相关性。采用多因素Logistic回归分析筛选CRC组织中MMR蛋白缺失、肿瘤相关巨噬细胞标志物高表达的危险因素。结果81例CRC患者中:MMR表达正常69例(85.19%),MMR蛋白表达缺失12例(14.81%);CD68低表达42例(51.85%),高表达39例(48.15%);CD163低表达46例(56.79%),高表达35例(43.21%)。CRC患者MMR蛋白表达与肿瘤直径、肿瘤部位、TNM分期、组织分化相关(P<0.05),与性别、肿瘤形态、病理类型无关(P>0.05)。肿瘤相关巨噬细胞标志物CD68、CD163与肿瘤直径、TNM分期、组织分化相关(P<0.05),与性别、肿瘤形态、肿瘤部位、病理类型无关(P>0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示:肿瘤直径≥5 cm、肿瘤位于右半结肠、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期和中至中-低分化均为MMR蛋白缺陷高表达的独立危险因素(P<0.05);肿瘤直径≥5 cm、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期和中至中-低分化均为肿瘤相关巨噬细胞标志物高表达的独立危险因素(P<0.05)。结论CRC组织中MMR蛋白表达与肿瘤直径、肿瘤部位、TNM分期和组织分化相关,肿瘤相关巨噬细胞标志物表达与肿瘤直径、TNM分期和组织分化相关。

非酒精性脂肪肝及肝纤维化的免疫浸润分析与中药靶点预测

目的本研究通过探讨巨噬细胞标志物与NAFLD及肝纤维化的相关性,以期为进一步探求NAFLD肝纤维化的发病机制,探索有效中药成分,为中医药防治肝纤维化提供帮助和借鉴。方法基于生物信息学方法分析NAFLD基因芯片,筛选差异表达基因;通过WGCNA共表达网络分析和构建LASSO模型,筛选核心表达基因;利用CIBERSORT进行免疫细胞浸润分析,探索巨噬细胞表型与差异表达基因、纤维化程度的相关性,并通过外部数据集鉴定NAFLD及肝纤维化中巨噬细胞的相关生物标记物,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)验证核心基因在不同巨噬细胞亚型中的表达差异。通过医学本体信息检索平台Coremine medical数据库,筛选NAFLD的中药治疗靶点并进行归纳分析。结果本研究共筛选出15个与NAFLD及肝纤维化相关的核心基因。CIBERSORT算法分析结果表明,NAFLD的发生与多种免疫细胞相关,其中M1型巨噬细胞在NAFLD组中显著升高,差异显著(P<0.01),M1型巨噬细胞与肝纤维化程度呈正相关,M2型巨噬细胞与肝纤维化程度呈负相关。核心基因与巨噬细胞的相关性分析结果显示,KDM4A、MED30、IKBKG、ENO1、HSPA8与总巨噬细胞数呈负相关,IL-6、FOS、EDN2、NR4A2表达与M1型巨噬细胞数呈负相关,而与M2型巨噬细胞数呈正相关。通过外部数据集验证及体外RT-PCR验证结果显示,在M2型巨噬细胞中FOS、NR4A2 mRNA的表达量高于M1型巨噬细胞(P<0.001),与M1型巨噬细胞呈负相关,而与M2型巨噬细胞呈正相关。其中基于核心靶点通过Coremine medical数据库,根据药物功效与归经筛选出丹参、牡丹皮、地黄、当归、泽泻、枳椇子、人参、山茱萸、山楂等相关中药,功效分析其主要集中在清热解毒、祛湿化痰以及活血化瘀等方面,其中筛选频数最高的药物为牡丹皮。结论肝脏巨噬细胞是治疗肝病的靶细胞,调控巨噬细胞M2极化有助于治疗NAFLD及相关肝纤维化,c-Fos、NR4A2可能是关键作用靶点,其中牡丹皮等中药具有肝保护作用,为进一步研究NAFLD及肝纤维化的发病机制和治疗方法提供了新的参考。

护场理论指导下的如意金黄散加减酊剂箍围法对皮肤脓肿大鼠组织CD68、MPO表达的影响

目的观察护场理论指导下的箍围药如意金黄散加减酊剂外用对皮肤脓肿大鼠周围局部组织巨噬细胞标记物(CD68)、髓过氧化物酶(MPO)表达的影响。方法将50只大鼠随机分为空白组、预治疗组、治疗组、对照组、模型组,除空白组外,其余4组皮下注射金黄色葡萄球菌造成皮下脓肿模型,采用如意金黄散加减酊剂、莫匹罗星软膏及生理盐水等不同药物外敷治疗。分别于治疗8、13、18、22、25 d提取大鼠脓肿周围1、2、3 cm皮下组织制成切片,免疫组化染色,采用显微镜结合光密度检测法检测不同时期、不同位置大鼠组织CD68及MPO阳性表达,并分析其变化及影响。结果各组大鼠脓肿周围组织CD68及MPO累积光密度值在治疗期间均呈先升后降的趋势,且随着距离脓肿中心距离减小阳性表达亦减弱。如意金黄散加减治疗组在脓肿尚未形成期及脓肿形成后期对局部CD68及MPO的影响呈双面性,在不同阶段的不同范围内,脓肿未形成期应用如意金黄散加减酊剂的预治疗组CD68及MPO表达值不同程度地低于其他治疗组,差异具有统计学意义(P <0. 05或P <0. 01),而脓肿形成后采用如意金黄散加减酊剂的治疗组CD68及MPO表达值则不同程度高于其他治疗组,差异具有统计学意义(P <0. 05或P <0. 01)。结论早期应用如意金黄散加减酊剂治疗大鼠皮肤脓肿,能够在脓肿形成不同时期调节局部促炎性因子标记物CD68及MPO的释放,从而为护场形成提供有利条件。

甲状腺癌组织中环氧合酶-2、CD163和血管内皮生长因子的表达及临床意义

目的探讨甲状腺癌患者切除组织中环氧合酶-2(COX-2)、M2型巨噬细胞标志物CD163、血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其临床意义。方法回顾性分析我院2016年6月至2017年6月首诊并治疗的113例甲状腺癌患者资料,纳入甲状腺癌组,另选取同期手术切除的甲状腺瘤组织74例为甲状腺瘤组,正常甲状腺组织61例为对照组。所有研究对象甲状腺组织均经免疫组化法检测COX-2、CD163、VEGF表达水平。分析COX-2、CD163、VEGF表达与甲状腺癌临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线分析COX-2、CD163、VEGF表达对3年总生存率的影响。结果甲状腺癌组组织中COX-2、CD163、VEGF阳性表达率明显高于甲状腺瘤组、对照组(P<0.05),甲状腺瘤组组织中COX-2、CD163、VEGF阳性表达率明显高于对照组(P<0.05);不同病理类型、临床分期、淋巴结转移情况、肿瘤胞膜情况甲状腺癌COX-2、CD163、VEGF阳性表达率均具有显著差异(P<0.05);COX-2阳性表达甲状腺癌总生存率显著低于阴性表达(P<0.05),CD163阳性表达甲状腺癌总生存率显著低于阴性表达(P<0.05),VEGF阳性表达甲状腺癌总生存率显著低于阴性表达(P<0.05)。结论甲状腺癌患者切除组织中COX-2、CD163、VEGF阳性表达率高,其阳性表达与病理类型、临床分期、淋巴结转移、胞膜情况及预后密切相关。

半乳糖凝集素-受体相互作用对感染伯氏疟原虫小鼠小肠病理的调节

目的探讨半乳糖凝集素与其受体相互作用对伯氏疟原虫ANKA株感染小鼠小肠组织病理的调节。方法对昆明小鼠采用腹腔注射105个感染伯氏疟原虫的红细胞建立动物模型。对部分对照小鼠和感染伯氏疟原虫的小鼠经腹腔注射300 mmol/Lα-乳糖溶液,每日2次,达到竟争性封闭半乳糖凝集素的目的。采用H&E染色观察小鼠小肠组织病理变化,实时荧光定量PCR检测小肠M1型巨噬细胞极化标记物[诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和趋化因子受体2(CCR2)]以及M2型巨噬细胞极化标记物[几丁质酶3样蛋白1(YM1)和抵抗素样分子α(Fizz1)]的mRNA表达水平。采用SPSS 19.0对数据进行Student t检验分析。结果在感染后第8天,伯氏疟原虫单感染组小鼠和伯氏疟原虫感染+α-乳糖组小鼠小肠组织均出现明显病理损伤,小肠组织中M1型巨噬细胞极化标记物iNOS的mRNA表达水平与正常对照组相比显著增加,差异有统计学意义(分别为P<0.05和P<0.01);单感染组和感染+α-乳糖组小鼠小肠组织中CCR2的mRNA表达水平与正常对照组相比也显著增加,差异有统计学意义(P<0.01)。与伯氏疟原虫单感染组小鼠感染后第8天相比,伯氏疟原虫感染+α-乳糖组小鼠小肠组织的病理损伤更加严重,小肠组织中iNOS和CCR2的mRNA表达水平均显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论阻断半乳糖凝集素-受体相互作用可能通过促进小肠组织巨噬细胞M1极化,加重伯氏疟原虫红细胞内期感染小鼠的小肠组织病理,提示半乳糖凝集素与其受体之间的相互作用对控制伯氏疟原虫感染引起的肠道病理损伤具有重要作用。