E-选择素和巨噬细胞炎症蛋白2在慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症中的作用

目的探讨E-选择素和巨噬细胞炎症蛋白2(MIP-2)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道炎症中的作用。方法24只健康雄性SD大鼠随机分为COPD组和正常对照组,每组12只。COPD组大鼠采用单纯烟熏法制备COPD模型。采用免疫组织化学方法检测COPD组和对照组大鼠支气管肺组织中E-选择素的表达,ELISA方法检测血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)、肺组织匀浆中MIP-2的含量。结果所建大鼠模型的病理及肺功能测定基本符合人类COPD的特点。COPD组大鼠模型中E-选择素在支气管肺组织血管内皮细胞的表达明显高于对照组(P<0.05),与BALF中的中性粒细胞数呈正相关(r=0.809,P<0.01);MIP-2在BALF及肺组织匀浆含量显著高于对照组(P均<0.05),且均与BALF中的中性粒细胞数呈正相关(r值分别为0.893和0.716,P值分别<0.01和<0.05)。结论E-选择素和MIP-2可能参与了COPD气道炎症过程。

巨噬细胞炎症蛋白2在脂多糖致大鼠脑水肿中的表达

目的探讨巨噬细胞炎症蛋白2(MIP2)在脂多糖(LPS)致大鼠脑水肿发病过程中的表达及纳洛酮对其干预作用。方法SD大鼠84只分3组,各28只,对照组(NS组)予0.2mL生理盐水颈内动脉注射;内毒素组(LPS组)颈内动脉注射LPS200μg;纳洛酮治疗组(NAL组)颈内动脉注射LPS后10min,1、2、6、12h及处死前2h腹腔注射纳洛酮1mg/kg。于不同时间点测定脑组织匀浆MIP2含量。干湿法测定脑组织含水量,甲酰胺法测定伊文思兰(EB)含量。结果LPS组脑组织含水量、EB含量显著高于NS组(P<0.01)。NAL组脑组织含水量和EB含量显著低于LPS组(P<0.01),但仍较NS组明显升高(P<0.01)。LPS组脑组织含水量与EB含量呈正相关(r=0.743P<0.01)。LPS组MIP2显著高于NS组(P<0.01)。NAL组MIP2显著低于LPS组(P<0.01)。结论MIP2参与脑水肿的发生发展,纳洛酮可抑制MIP2的生成,减轻脑水肿。

大鼠脑水肿模型中脑组织巨噬细胞炎症蛋白-2、IL-10含量测定

目的:探讨巨噬细胞炎症蛋白2(MIP-2)、白介素10(IL-10)在脂多糖(LPS)致大鼠脑水肿发病过程中的表达及意义。方法:SD大鼠56只,随机分为2组。对照组(NS组)28只,0.2ml生理盐水颈内动脉注射;脂多糖组(LPS组)28只,颈内动脉注射LPS200μg。于注射后4h、6h、12h、24h分别测定2组大鼠脑组织含水量、MIP-2、IL-10、伊文思蓝(EB)的含量。结果:LPS组不同时间点脑组织含水量、EB含量、MIP-2和IL-10的含量显著高于NS组(P<0.05)。LPS组脑组织含水量和EB含量、IL-10含量呈正相关(r=0.743,0.467,P<0.05),IL-10含量与MIP-2含量呈正相关(r=0.619,P<0.05)。结论:在内毒素致中枢神经系统炎症中,MIP-2、IL-10表达量增高,2者参与脑水肿的发生发展。

巨噬细胞炎症蛋白-2和细胞凋亡在内毒素诱导急性肺损伤发病中的作用探讨

目的探讨巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)和细胞凋亡在小鼠内毒素诱导急性肺损伤发病机制中的作用。方法以脂多糖气管内注射建立小鼠急性肺损伤模型,进行肺组织病理、肺水含量、支气管肺泡灌洗液白细胞总数和中性粒细胞分类计数、TNF-α和MIP-2浓度检测,并作肺组织凋亡细胞计数。结果气管内注射LPS后,肺水含量、肺泡灌洗液白细胞总数和中性粒细胞分类计数、TNF-α和MIP-2浓度及肺组织凋亡细胞计数均明显升高,且随时间推移呈逐渐变化的趋势。结论MIP-2是炎症早期的促炎性细胞因子,其在早期短期急剧释放可趋化和激活中性粒细胞并诱导肺组织细胞凋亡,从而启动与维持炎症反应。

血清巨噬细胞炎症蛋白-2在脓毒症患者病情严重程度及预后中的评估价值

目的探讨脓毒症患者早期血清巨噬细胞炎症蛋白-2(macrophage inflammatory protein-2,MIP-2)的浓度、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、降钙素原(procalcitonin,PCT)动态变化及与预后的关系。方法采用前瞻性研究方法,选择2011年3月至2012年9月重症监护病房(ICU)62例脓毒症患者,按照目标导向治疗(EGDT)方案进行复苏,将完成6 h EGDT复苏目标者归为Ⅰ组,未完成6 h EGDT复苏目标者归为Ⅱ组。分别记录患者复苏前(T0),复苏后6 h(T6 h)及复苏后1 d(T1 d)、2 d(T2 d)、3 d(T3 d)、4 d(T4 d)、5 d(T5 d)的APACHEⅡ评分,检测患者血中MIP-2、PCT、尿素氮(BUN)及肌酐(Cr)等指标动态变化。根据患者28 d转归分为存活组和死亡组。结果Ⅰ组APACHEⅡ评分、血MIP-2、PCT及BUN、Cr于复苏成功后呈逐渐下降趋势,于T5 d最低;Ⅱ组APACHEⅡ评分、血MIP-2、PCT及BUN、Cr于复苏失败后呈逐渐上升趋势;Ⅱ组APACHEⅡ评分于T2 d时,血MIP-2于T1 d时较Ⅰ组明显升高(均P<0.05)。Ⅰ组死亡率明显低于Ⅱ组[12.5%(5/40)vs 68.2%(15/22),P<0.05]。存活组APCHEⅡ评分、血MIP-2、PCT及血BUN、Cr随病情好转逐渐下降,于T5 d最低,而死亡组则显著上升;死亡组APACHEⅡ评分于T1 d时、血MIP-2于T6 h时即较存活组明显升高(均P<0.05)。结论 MIP-2是评估脓毒症的良好指标,动态监测其变化可了解脓毒症的发展过程,结合APACHEⅡ评分及PCT变化,对疾病的严重程度及预后有重要的评估意义。

丙酮酸乙酯对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织巨噬细胞炎症蛋白-2表达的影响

目的观察丙酮酸乙酯（EP）预先给药对内毒素性急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织巨噬细胞炎症蛋白-2表达的影响，探讨丙酮酸乙酯可能的保护机制。方法静脉注射脂多糖（LPS）5mg／kg，复制大鼠ALI模型。雄性SD大鼠30只随机分为三组：A组为对照组，B组为LPS组，C组为EP＋LPS组，于静脉注射LPS前1h腹腔内注射EP（40mg／kg）。所有动物于注射LPS或生理盐水后6h颈动脉放血处死，RT-PCR法测定肺组织巨噬细胞炎症蛋白-2mRNA的表达；酶联免疫吸附法测定肺组织TNF-α和IL-1β的含量。结果与A组相比，B组、C组肺组织巨噬细胞炎症蛋白-2mRNA表达增加，肺组织TNF-α和IL-1β含量上升（P〈0．05）；与B组相比，C组肺组织巨噬细胞炎症蛋白-2mRNA表达降低，肺组织TNF-α和IL-1β含量降低（P〈0．05）。结论丙酮酸乙酯通过下调大鼠LPS诱导的肺组织巨噬细胞炎症蛋白-2表达，降低了TNF-α和IL-1β的释放，减轻ALI大鼠肺部的炎症反应。

巨噬细胞炎症蛋白-2在急性胰腺炎大鼠肺损伤中的作用

目的:研究巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)与急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)大鼠肺损伤的关系。方法:雄性SD大鼠,随机分为5组,即正常对照组,AP3 h,AP6 h,AP12 h,AP24 h组,胰胆管逆行注射脱氧胆酸钠,制备大鼠急性胰腺炎模型。测定血清淀粉酶,测定肺组织MIP-2含量和髓过氧化物酶(MPO)活性,胰腺组织和肺组织病理学检查及评分。结果:AP 3 h组肺组织中MIP-2的含量即明显升高,6 h达到高峰,和正常对照组比较差异有统计学意义;肺组织中MPO活力3 h开始升高,并随时间推移而逐渐升高;AP 3 h组肺组织及胰腺组织病理学评分明显高于正常对照组,在6 h及以后时段损伤表现更为严重。本研究结果中肺镜下病理评分与胰腺镜下病理评分(r=0.35,P<0.05)、肺组织MPO活性(r=0.42,P<0.05)呈正相关。结论:急性胰腺炎病理过程中,MIP-2作为早期的促炎性细胞因子,趋化和激活了以中性粒细胞为主的炎性细胞,介导了肺损伤。

巨噬细胞炎症蛋白-2与造血

巨噬细胞炎症蛋白－２（ＭＩＰ－２）目前主要包括ＭＩＰ－２α和ＭＩＰ－２β，即生长相关癌基因Ｇｒｏ（Ｇｒｏβ和Ｇｒｏγ），其受体为ＣＸＣＲ２／ＩＬ－８ＲＢ，除广泛参与免疫调节、血管形成外，还是一种具有正负双向调控造血功能的ＣＸＣ类趋化因子。

表没食子儿茶素-3-没食子酸酯抑制烫伤诱导的小鼠皮肤巨噬细胞炎症蛋白-2的表达

目的探讨表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(EGCG)对局部烫伤诱导的小鼠皮肤组织巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)表达的影响。方法将52只昆明种小鼠随机分为空白对照组、烫伤组和烫伤EGCG处理组,其中48只小鼠进行局部皮肤烫伤。利用实时定量PCR和ELISA法检测皮肤组织MIP-2 mRNA和MIP-2蛋白水平。结果局部烫伤可引起受损部位皮肤组织的MIP-2 mRNA和MIP-2水平升高,而涂敷0.2g/kg EGCG膏剂可使MIP-2表达水平下降。结论 0.2g/kg EGCG膏剂抑制局部烫伤诱导的皮肤组织MIP-2表达,减弱由MIP-2引起的炎症反应,促进受损皮肤修复。

大鼠急性胰腺炎肺损伤组织巨噬细胞炎症蛋白-2和TNF-α基因表达

目的探讨大鼠急性胰腺炎(AP)肺损伤时,肺组织损伤程度与组织巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达的关系。方法胰胆管逆行注射5%脱氧胆酸钠(DCA)复制大鼠AP模型,观察胰腺和肺组织病理学改变,使用RT-PCR法检测肺组织中MIP-2 mRNA、TNF-αmRNA的表达。结果AP 3 h、AP 6 h组胰腺和肺组织镜下病理评分明显高于相应对照组。AP 6 h组肺组织MIP-2 mRNA表达明显上调。胰腺病理评分与肺组织病理学评分、肺组织MIP-2基因表达呈正相关;肺组织MIP-2与TNF-α的基因表达之间也呈明显正相关。结论肺组织MIP-2基因表达上调,以及与TNF-α的相互诱生,可能是导致急性胰腺炎中性粒细胞在肺组织浸润和活化,进而导致肺损伤的重要机制之一。

大鼠急性胰腺炎肺损伤中巨噬细胞炎症蛋白-2的改变

目的：研究大鼠急性胰腺炎(AP)肺损伤与巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)的关系.方法：成年♂SD大鼠随机分为AP3h组、AP 6h组,每组6只；对照3h组、对照6h组,每组3只.胰胆管逆行注射50g/L脱氧胆酸钠(DCA)诱导大鼠AP模型.肺组织镜下病理评分及髓过氧化物酶(MPO)活性评估肺损伤.ELISA法检测血清、胰腺及肺组织MIP-2含量.结果：肺镜下病理评分在AP3h组明显高于对照3h组(t=2.14,P=0.035),AP6h组进一步升高,与对照6h组比较差异具有非常显著性的意义(t=3.12,P=0.009).肺组织MPO活性升高,与对照6h组相比差异具有显著性的意义(t=2.72,P=0.015).血清MIP-2在对照3h组中不能检出,在对照6h组含量很低；在AP3h组明显升高,与对照3h组相比差异具有非常显著性的意义(t=3.76,P=0.007)；在AP6h组进一步升高,与对照6h组及AP3h组比较差异具有显著性的意义(t=2.42,P=0.023；t=3.17,P=0.024).血清MIP-2浓度与胰腺镜下病理评分和肺镜下病理评分呈正相关(r=0.42,P= 0.014；r=0.35,P=0.036)；肺组织MIP-2含量与胰腺镜下病理评分和血清淀粉酶(AMY)呈正相关(r=0.38,P=0.023；r=0.42,P=0.016).结论：大鼠MIP-2与DCA诱导的大鼠AP肺损伤关系密切,在大鼠AP肺损伤的病理过程中可能发挥了重要作用.

1,6-二磷酸果糖对LPS急性肺损伤大鼠肺组织巨噬细胞炎症蛋白-2表达的影响

目的:观察1,6-二磷酸果糖(FDP)预先给药对内毒素性急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)表达的影响,探讨FDP可能的保护机制。方法:静脉注射脂多糖(LPS)5mg/kg,复制大鼠ALL模型。雄性SD大鼠30只随机分为3组,对照组、LPS组和LPS+FDP组,其中LPS+FDP组于静脉注射LPS前1h腹腔内注射FDP(250mg/kg)。3组于注射LPS或生理盐水后6h颈动脉取血测血气分析,并测定肺组织湿、干重量,计算湿/干重量比(W/D),RT-PCR法测定肺组织MIP-2mRNA的表达;ELISA法测定肺组织TNF-a和IL-lβ的含量。结果:与对照组相比,LPS组和LPS+FDP组MIP-2mRNA表达增加,肺组织W/D、TNF-a和IL-lβ含量上升(P<0.05);与LPS组相比,LPS+FDP组MIP-2mRNA表达降低,肺组织W/D、TNF-a和IL-lβ含量降低(P<0.05)。结论:FDP通过下调大鼠LPS诱导的MIP-2表达,降低TNF-a和IL-lβ的释放,减轻ALI大鼠肺部的炎症反应,保护肺组织。

内毒素体外诱导巨噬细胞炎症蛋白-2γ的表达

目的:体外研究内毒素对巨噬细胞炎症蛋白-2γ(MIP-2γ)表达的作用。方法:选用小鼠单核-巨噬细胞株RAW264.7及原代培养的BALB/c小鼠肾脏细胞用LPS刺激,以实时荧光定量RT-PCR检测不同时间点MIP-2γmRNA表达水平的变化。结果:RAW264.7细胞在LPS刺激后2 h,MIP-2γ.mRNA表达水平快速到达峰值(较正常水平增加约7倍),以后缓慢下降,至刺激后16 h基本恢复正常水平。原代培养肾脏细胞经LPS刺激后12 h,MIP-2γmRNA表达水平增长约50倍。结论:LPS在体外可明显诱导单核-巨噬细胞和肾脏细胞MIP-2γ mRNA的表达,提示MIP-2γ参与了炎症过程。

反转录聚合酶链式反应定量分析巨噬细胞炎症蛋白-2 mRNA

目的:建立反转录聚合酶链式反应定量分析巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)mRNA的方法。方法:以β-肌动蛋白(β-actin)为内参照,通过优化RT-PCR条件定量MIP-2 mRNA的表达。结果:获取了PCR线性扩增范围,确定了RT-PCR的最佳循环次数和模板量。结论:优化的RT-PCR方法可以用于MIP-2 mRNA的分析。

血清巨噬细胞炎症蛋白-2、MicroRNA-25水平变化与脓毒症患者病情程度的相关性及临床意义

目的分析血清巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)、microRNA-25水平变化与脓毒症患者病情程度的相关性。方法选取平顶山市第二人民医院2019年8至2021年4月收治的89例脓毒症患者进行回顾性研究,均采用目标导向治疗方案复苏,根据治疗结果分为两组,其中完成复苏的47例患者纳入A组,未完成复苏的42例患者纳入B组。分别记录患者复苏前、复苏后6h、1d、3d、5d病情程度,病情程度采用急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)进行评估,同时检测血清MIP-2、microRNA-25水平,比较两组复苏前后APACHEⅡ评分、血清MIP-2、microRNA-25水平动态变化情况。结果复苏后6h、1d、3d、5dA组APACHEⅡ评分较B组低(P<0.05);复苏后6h、1d、3d、5dA组血清MIP-2水平较B组低(P<0.05);复苏后6h、1d、3d、5dA组microRNA-25水平较B组高(P<0.05);血清MIP-2与脓毒症患者APACHEⅡ评分呈正相关关系,microRNA-25与脓毒症患者APACHEⅡ评分呈负相关关系(P<0.05)。结论脓毒症患者血清MIP-2、microRNA-25水平与患者疾病转归关系密切,血清MIP水平降低、microRNA-25水平提高提示患者病情程度缓解。通过临床血清水平检测有助于评估患者病情变化,为临床干预、预后评估提供依据,具有重要临床价值。

过氧化氢刺激RAW264.7巨噬细胞促炎细胞因子和趋化因子基因表达

免疫反应细胞经呼吸瀑布作用产生的活性氧是巨噬细胞促炎细胞因子和趋化因子表达的信号分子,但目前缺乏过氧化氢(H2O2)刺激巨噬细胞表达促炎细胞因子和趋化因子的直接证据.本研究以离体培养的小鼠RAW264.7巨噬细胞为研究体系,探讨外源H2O2对RAW264.7巨噬细胞促炎因子和趋化因子基因表达和生成的影响.MTT法结合实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示,RAW264.7细胞在H2O2浓度低于40μmol/L时不影响RAW264.7细胞的增殖活力.20μmol/L和40μmol/L H2O2显著增强RAW264.7细胞TNF-α、IL-1β、MCP-1和MIP-2基因转录和蛋白质生成,并存在剂量依赖效应;而200 U/m L过氧化氢酶预处理则可减弱由H2O2刺激的TNF-α、IL-1β、MCP-1和MIP-2基因表达和蛋白生成.这些结果提示,H2O2是刺激巨噬细胞促炎因子和趋化因子表达或生成的重要因子,对机体炎症反应的发生具有重要作用.

高糖对体外培养巨噬细胞MIP-2和MCP-1表达的影响

目的观察高糖环境对体外培养巨噬细胞中趋化因子巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响。方法自小鼠腹腔灌洗液中提取巨噬细胞,分别用高糖型(含葡萄糖25.5 mmoL/L,高糖组)和正常糖型(含4.5 mmol/L葡萄糖,正常组)DMEM培养基进行体外培养,于不同时间点(0、2、4、8、12、24、48 h)收集上清及细胞,分别采用ELISA法和RT-PCR技术检测MCP-1、MIP-2蛋白和mRNA的表达,并进行统计学分析。结果正常组巨噬细胞MIP-2、MCP-1蛋白和mRNA表达在各时间点无统计学差异(P>0.05)。培养后4 h时,高糖组MIP-2蛋白和mRNA表达明显增高,以后逐渐下降;培养后8 h时,高糖组MCP-1蛋白和mRNA表达开始显著增高,12 h时达高峰,24、48 h时略有下降。结论高糖环境可使体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞中MIP-2、MCP-1表达明显增加。提示在糖尿病创面愈合过程中,高糖可能通过刺激创面局部巨噬细胞表达趋化因子并导致炎症细胞持续存在而影响其愈合进程。

表没食子儿茶素没食子酸酯抑制脂多糖诱导巨噬细胞趋化因子的表达

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞趋化因子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和巨噬细胞炎症蛋白2(MIP-2)表达的影响。方法小鼠RAW264.7巨噬细胞用1 mg/L LPS进行刺激,采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测MCP-1与MIP-2 mRNA水平、ELISA检测培养液中MCP-1与MIP-2的蛋白含量。结果 1 mg/L LPS可显著刺激RAW264.7细胞MCP-1和MIP-2 mRNA表达,单独EGCG对MCP-1和MIP-2基因表达无明显影响,但EGCG可以抑制LPS诱导的MCP-1和MIP-2的表达,并存在剂量依赖效应。结论 EGCG能以剂量依赖方式抑制LPS诱导的巨噬细胞MCP-1和MIP-2的表达。

JNK信号通路介导机械牵张引发的肺泡巨噬细胞炎性因子表达

目的观察不同机械牵张应力对大鼠肺泡巨噬细胞白介素-6(IL-6)和巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)的影响,并探讨C-JUN氨基末端激酶(JNK)对机械牵张诱导的大鼠肺泡巨噬细胞IL-6和MIP-2表达的调控作用。方法采用支气管肺泡灌洗的方法取得大鼠肺泡巨噬细胞,并建立体外大鼠肺泡巨噬细胞梯度应力的机械牵张模型,应用RT-PCR和Western印迹方法观察IL-6和MIP-2的表达。进一步应用JNK特异性抑制剂SP600125,p38特异性抑制剂SB203580,及ERK特异性抑制剂PD98059给予同期干预,检测干预效果。结果随着机械牵张应力的增大,肺泡巨噬细胞MIP-2 mRNA和其蛋白的表达递增(均P<0.05)。给予SP600125干预组大鼠肺泡巨噬细胞MIP-2 mRNA和蛋白表达较机械牵张处理组明显降低。SB203580干预组及PD98059干预组的肺泡巨噬细胞MIP-2 mRNA和蛋白水平较对照组明显升高,而与机械牵张处理组相比无明显变化。而IL-6 mRNA及其蛋白水平在上述各组中均无明显变化。结论大鼠巨噬细胞MIP-2的表达与机械牵张应力呈强度依赖性,JNK信号通路在周期性牵张诱导肺泡巨噬细胞表达释放MIP-2过程中起重要作用。