巨噬细胞亚群在母胎免疫耐受中的作用

母胎界面主由胎盘、子宫内膜（或蜕膜）和肌层3部分组成,其中胎盘起源于胚胎,子宫蜕膜和肌层属于母体。子宫蜕膜组织免疫细胞与同种半异体胚胎来源的抗原和滋养层细胞直接接触,却不对其产生免疫排斥,这种特殊的免疫耐受是胚胎正常发育的前提[1]。研究表明,正常情况下,巨噬细胞普遍存在于母胎界面,在妊娠的各个阶段,

免疫组织荧光与流式细胞术检测脊髓损伤局部巨噬细胞亚群的比较

目的比较免疫组织荧光(IHF)与流式细胞术(FCM)检测脊髓损伤(SCI)局部M1和M2型巨噬细胞亚群的优缺点。方法采用纽约大学脊髓损伤仪制做大鼠重物坠落SCI模型。术后7天,分别采用IHF和FCM检测损伤脊髓中M1和M2型巨噬细胞,并进行比较。结果两种方法均可有效地检测脊髓损伤局部浸润的巨噬细胞及其M1、M2亚群。IHF检测到的M1(CD68^+CCR7^+)和M2(CD68^+Arg1^+)细胞亚群的比率为2.79±0.21,FCM检测到的M1(CD68^+CD86^+)和M2(CD68^+CD163^+)细胞亚群的比率为2.46±0.20,两种方法检测到的结果没有统计学差异(P>0.05)。IHF可对待测的细胞进行定位,但在细胞计数和比例分析方面需要人工完成;而FCM则可以直接自动分析细胞数量和比例,但无法对其进行定位。结论 IHF和FCM在分析脊髓浸润的细胞表型方面各有优缺点,两者结合可有效地分析SCI局部M1和M2巨噬细胞亚群的数量和比例。

巨噬细胞亚群在移植后重症肺部感染引发过度炎症中的作用

免疫抑制状态下过度炎症发病机制较复杂,病死率高,是临床常见的移植术后急危重症。巨噬细胞亚群是主要的炎性反应调节细胞,释放大量炎性因子然后间接或直接地参与过度炎症反应过程,导致机体失控的炎性反应,形成恶性循环加重机体损伤。笔者就目前国内外关于巨噬细胞亚群在免疫抑制状态下导致的过度炎症研究情况进行综述。

大鼠创伤后腹腔巨噬细胞亚群的变化及与IL-6、TNFα的关系

目的 探讨创伤后免疫功能紊乱状态与巨噬细胞亚群的关系。方法 采用创伤失血模型 ,运用流式细胞仪分析单克隆抗体ED1、ED2单克隆抗体双标记表达情况 ,测定腹腔巨噬细胞 (pM)培养上清白细胞介素 6 (IL 6 )、肿瘤坏死因子 (TNFα)含量 (ELISA法 )。结果 正常大鼠pM分为ED1+ ED2 -亚群、ED1+ED2 + 亚群 ,无单纯的ED2 + 巨噬细胞亚群 ,创伤后ED1+ ED2 -亚群比例增加 ,ED1+ ED2 + 亚群比例降低 ,同时TNFα、IL 6分泌增加 ,内毒素 (LPS)刺激可增加TNFα、IL 6分泌水平。结论 创伤后细胞因子分泌紊乱可能与ED1+ ED2

肝纤维化发生发展及逆转过程中肝巨噬细胞亚群分类

肝纤维化是由持续性损伤修复反应引起的,导致肝组织内细胞外基质异常沉积,进一步引发肝脏结构和肝功能异常改变的一种病理过程.已有大量研究表明,肝纤维化在去除损伤因素后是可以逆转的.肝星状细胞作为主要的效应细胞,合成和分泌各种胶原和细胞外基质,一直被认为是肝纤维化发生发展的中心环节.最近的研究发现,巨噬细胞作为主要的调节细胞,能同时调节肝星状细胞的功能和基质胶原的降解,促进肝纤维化的形成.而在肝纤维化逆转过程中,促使活化的肝星状细胞凋亡和纤维胶原的降解,促进肝纤维化的逆转.目前已有研究表明,巨噬细胞亚群在肝纤维化发生发展及逆转中具有双向调控作用,但是对于动物模型体内还没有系统的研究巨噬细胞亚群的分类.本文对巨噬细胞亚群的分类研究做一个全面的综述,对肝脏巨噬细胞在肝纤维化中分子机制的进一步研究具有一定的参考价值和借鉴意义.

流式细胞术检测脊髓损伤大鼠局部浸润的巨噬细胞亚群

目的:建立检测脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠局部浸润巨噬细胞亚群的流式细胞术方法。方法:取5只健康雌性SD大鼠,采用纽约大学SCI撞击仪系统制作重物坠落SCI模型为SCI组;另设5只假手术大鼠为假手术组。SCI术后7 d收集损伤的脊髓,制备单细胞悬液,采用Percoll原液密度梯度离心法浓缩浸润的巨噬细胞。分别以CD68与CD86或CD163的不同荧光标记抗体组合作为鉴定M1和M2型巨噬细胞的标志,用流式细胞术检测损伤局部巨噬细胞亚群的变化。结果:假手术组大鼠脊髓单细胞悬液中,CD68+细胞占细胞总数的(0.07±0.02)%,CD86+细胞和CD163+细胞分别占CD68+细胞的(9.90±3.28)%和(4.95±0.17)%;而SCI组大鼠脊髓单细胞悬液中,CD68+细胞的百分比为(0.21±0.09)%,CD86+细胞和CD163+细胞分别占CD68+细胞的(18.71±0.49)%和(27.07±3.74)%,差异均有统计学意义(P<0.05～P<0.01)。结论:以小鼠抗大鼠CD68、小鼠抗大鼠CD86、小鼠抗大鼠CD163为标志,采用流式细胞术可以成功检测SCI局部浸润的M1和M2型巨噬细胞亚群。

小鼠腹腔巨噬细胞亚群对病毒拟似物Poly I∶C的免疫应答效应比较

目的探讨小鼠腹腔巨噬细胞亚群在病毒侵染早期免疫应答功能的差异与相关机制。方法流式细胞术分选获得小鼠腹腔F4/80hi亚群和F4/80^lo亚群巨噬细胞,Poly I∶C免疫刺激8 h后采用实时定量PCR方法比较两群细胞促炎因子与相关转录因子基因表达的变化,进一步采用Western blot方法检测信号通路的变化,最后使用通路抑制剂实施阻断实验。结果小鼠腹腔F4/80hi亚群巨噬细胞数量显著性高于F4/80^lo亚群(P<0.05);Poly I∶C作用后,F4/80hi亚群促炎因子IL6、iNOS、IFNα、IFNγ基因的表达变化倍数显著性高于F4/80^lo亚群(P<0.05),转录因子IRF3、IRF7基因表达均显著性升高(P<0.05);同时F4/80hi亚群JNK通路磷酸化水平显著上升(P<0.05);采用JNK信号通路磷酸化抑制剂SP600125阻断后,促炎因子IL6与IFNα基因表达显著下调(P<0.05)。结论F4/80hi巨噬细胞亚群在病毒感染早期活化程度显著性高于F4/80^lo亚群,可能通过上调IRF7分子表达和JNK通路的活化水平参与巨噬细胞活化的调控。

创伤性脑损伤诱导大鼠脑内巨噬细胞亚群分化与脑外伤后神经元过度自噬和凋亡的关系研究

目的探讨创伤性脑损伤后大鼠脑内巨噬细胞分化的亚群种类和创伤后神经元过度自噬和凋亡的关系。方法选择45只雄性SD大鼠建立创伤性脑损伤(TBI)模型,然后根据随机数字表法分为Sham组(假手术大鼠,右心室注射5μL氯化钠溶液)、TBI组(TBI模型大鼠,右心室注射5μL氯化钠溶液)和3-MA组(TBI模型大鼠,右心室注射5μL 600 nmol的3-MA),每组各15只。造模后1~14 d测定Sham组和TBI组大鼠脑水肿程度;流式细胞术检测Sham组、TBI组和3-MA组大鼠脑损伤处巨噬细胞分化的亚群种类,采用蛋白质印迹(Western blotting)法测定了3组大鼠脑损伤处自噬相关通路蛋白、凋亡相关通路蛋白的表达水平以及自噬效应性信号通路PI3K/AKT通路的磷酸化水平。结果TBI造模手术后第1~14天时,TBI组大鼠脑水肿程度显著高于Sham组(P<0.05);与Sham组相比,TBI组和3-MA组M1亚群比例和M1/M2比值均显著升高,3-MA组M1亚群比例则较TBI组显著降低(P<0.05);与Sham组相比,TBI组和3-MA组大鼠脑损伤组织中凋亡相关蛋白cleaved-Caspase-3和Bax的相对表达水平显著升高,Bcl-2的相对表达水平显著降低,3-MA组cleaved-Caspase-3和Bax的相对表达水平则较TBI组显著升高,Bcl-2水平显著降低(P<0.05);与Sham组相比,TBI组和3-MA组的p-PI3K和p-AKT的磷酸化水平显著升高,而3-MA处理后,p-PI3K和p-AKT的磷酸化水平较TBI组显著降低(P<0.05)。结论TBI能够诱导大鼠脑内M1巨噬细胞亚群激增并导致脑损伤处神经元发生过度自噬和凋亡,同时,当自噬被抑制后,脑损伤处的凋亡被进一步激活;TBI大鼠神经元的过度自噬引发PI3K/AKT信号通路被激活,抑制自噬能够明显下调被激活的PI3K/AKT磷酸化水平。

血源性单核巨噬细胞对小鼠脊髓损伤局部巨噬细胞分化的影响

目的:探讨血源性单核巨噬细胞对小鼠脊髓损伤(SCI)局部巨噬细胞分化的影响。方法:将6~8周龄C57BL/6J雌鼠随机分为两组:SCI+PBS脂质体组(SCIP组)、SCI^(+)氯磷酸二钠脂质体(Chlodrolip)组(SCIL组)。两组小鼠分别注射相同剂量两种脂质体。采用流式细胞术(FCM)检测手术前外周血中单核细胞比例,确定单核细胞清除效率。在小鼠T_(10)椎骨处制备SCI重物坠落模型。实验过程中每天对小鼠称重,SCI术后7 d称取两组小鼠脾脏重量;提取损伤脊髓附近浸润的巨噬细胞和小胶质细胞。分别以CD11b、CD68、CCR7的不同荧光抗体组合作为巨噬细胞和小胶质细胞不同状态和亚型的标志。CD68^(+)CD11b^(+)为活化的巨噬细胞和小胶质细胞,CD11b^(+)CD68^(+)CCR7^(+)细胞为M1型巨噬细胞。用FCM检测两组小鼠脊髓损伤部位不同细胞所占比例。结果:SCIP组CD68^(+)细胞占CD11b^(+)细胞百分比例为(48.12±2.70)%,显著低于SCIL组(61.03±3.00)%(P<0.05);CCR7^(+)CD68^(+)细胞占CD11b^(+)细胞百分比例为(43.15±1.79)%,显著低于SCIL组(59.13±1.31)%(P<0.01);SCIL组小鼠体重量和脾脏重量较SCIP组明显下降差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:清除血源性单核巨噬细胞可导致SCI后小鼠体重量及脾脏重量减低,并使脊髓损伤局部巨噬细胞和小胶质细胞向促炎性M1方向极化。

中药复方及有效成分调节巨噬细胞亚群参与冠心病炎症和修复的作用机制

动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)引起的冠心病(coronary artery disease, CAD)是全球疾病负担的主要贡献者。冠心病的发病机制复杂,而心脏巨噬细胞的亚群数量和功能是影响AS发生、发展及CAD预后的重要因素。近些年研究表明,某些中药复方及有效成分能调控巨噬细胞亚群参与冠心病的炎症、损伤和修复过程。该文阐述了巨噬细胞在动脉粥样硬化和心肌梗死后的重要作用。并基于巨噬细胞的可塑性基础,论述了中药调节巨噬细胞亚群,降低炎症因子水平,促进巨噬细胞自噬,参与动脉粥样硬化的防治;中药加速M2型巨噬细胞的招募、抑制糖酵解介导的M1型巨噬细胞极化、抑制M1型巨噬细胞介导的心脏神经重构、促进M2型巨噬细胞介导的血管生成,参与心肌梗死后的心脏修复过程。另外,文章还概述了中药有效成分调节巨噬细胞亚群的体外研究,指出NF-κB、AMPK、PI3K/Akt、CCL2/CCR2等途径是中药调控巨噬细胞的关键靶点和通路。

白细胞功能多极化及其意义

免疫与造血是实验血液学的基本课题之一。免疫功能是白细胞的主要功能,免疫反应的多样性和复杂性令人困惑。30年前发现的免疫细胞的功能性极化促进了对淋巴细胞分化的研究,近年来对淋巴细胞、单核/巨噬细胞功能多极化的研究为阐明免疫细胞的调控网络奠定了基础,为阐明免疫反应的多样性和复杂性提供了线索,也为深入研究造血细胞的分化拓展了思路。本文对淋巴细胞、单核/巨噬细胞和树突细胞的多极化及其作用和意义,尤其是在细胞因子风暴和白血病、肿瘤的前炎症状态发生中的可能作用进行评述。

基于巨噬细胞可塑性的分类研究

当体内环境受到外来刺激发生变化时,为了适应机体的需要,巨噬细胞需要通过其显著的可塑性来改变它的生理特性。在变化的过程中,巨噬细胞能够产生不同的功能,同时也被划分为不同的巨噬细胞群。因此,本文介绍一种新的分类方法,即按照其功能的不同:宿主防御、伤口愈合和免疫调节,将其分为三类。并且,本文通过对一些疾病中各种巨噬细胞功能的研究发现,这三种功能在巨噬细胞活化的过程中并不是相互独立,而是相铺相成,不可分割的。所以,本文用不同的颜色来标注其相应的功能,以便于理解。

睾丸巨噬细胞的研究进展

睾丸作为重要的男性生殖器官,具有复杂的生殖-内分泌-免疫调控网路。睾丸巨噬细胞在血管形成、精子发生、类固醇激素生成、免疫抑制和细菌病毒感染等方面有着非常重要的作用。本文通过综述睾丸巨噬细胞的定位、分类、发育来源以及功能等来说明其在睾丸中的地位及意义,以期为研究睾丸巨噬细胞的功能和治疗男性不育症、睾丸炎症等提供理论依据。

世界药物新闻(五)

一、国外研制的新药及新适应症: 1.美国研制的新药及其阶段(1988年10月)产品公司适应症研制的阶段巨噬细胞群激发因子遗传学研究所癌症血癌骨髓Ⅰ期临床(Macrophage-CSF)(Genetics Inst)