巨噬细胞胞外诱捕网对心血管疾病的调控作用研究进展

巨噬细胞胞外诱捕网(METs)是由巨噬细胞产生的细胞外纤维网状结构。METs在动脉粥样硬化、心肌梗死和其他心血管疾病(CVDs)的发生和发展中起到重要作用。本文对METs在CVDs中的作用机制、未来的研究方向及将其作为临床疾病潜在治疗靶点的可能性进行阐述。

中性粒细胞胞外诱捕网通过诱导巨噬细胞M2型极化促进非小细胞肺癌增殖和侵袭

目的:探究中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)诱导巨噬细胞极化在非小细胞肺癌(NSCLC)增殖和侵袭中的作用及其相关机制。方法:采集28例NSCLC患者肿瘤组织及其癌旁组织,通过免疫组化检测PAD4和Arg-1表达水平。采用PMA/LPS和PMA/IL-4极化THP-1细胞为M1和M2型巨噬细胞的过程中加入NETs共孵育,qRT-PCR检测巨噬细胞iNOS、IL-6、TNF-α、Arg-1、IL-10和TGF-β表达水平。将各组M2型巨噬细胞与A549细胞共孵育,CCK8检测A549细胞增殖变化,Transwell检测细胞侵袭能力变化,qRT-PCR和Western blot检测细胞VEGF表达水平变化。结果:与癌旁组织比较,NSCLC患者肿瘤组织PAD4和Arg-1表达水平升高。在向M1型巨噬细胞极化过程中,加入NETs后巨噬细胞iNOS、IL-6、TNF-α表达水平降低,Arg-1、IL-10、TGF-β表达水平升高。在向M2型巨噬细胞极化过程中,加入NETs后巨噬细胞Arg-1、IL-10、TGF-β表达水平升高。与Control组比较,M2组A549细胞增殖、侵袭能力和VEGF表达水平升高。与M2组比较,M2+NETs组A549细胞增殖、侵袭能力和VEGF表达水平升高。结论:NETs通过诱导巨噬细胞向M2型极化,促进NSCLC增殖和侵袭。

巨噬细胞胞外诱捕网诱导成纤维样滑膜细胞活化作用在类风湿关节炎发病中的机制

目的研究巨噬细胞胞外诱捕网(METs)对成纤维样滑膜细胞(FLSs)的作用和相关机制。方法采用人源单核细胞白血病细胞(THP-1)系体外诱导成巨噬细胞,分别使用脂多糖(LPS)和干扰素γ(IFN-γ)诱导METs形成。采用Sytox标记外泄的DNA水平;采用Western blot和免疫荧光法检测METs主要蛋白成分NE和MPO。纯化METs蛋白组分,将人FLSs细胞系分为对照组、METs组、C29组、IAXO-102组和C29+IAXO-102联合干预组,除对照组外,其余组均将纯化的METs蛋白组分加入FLSs培养液中,C29组同时加入Toll样受体(TLR)2抑制剂C29,IAXO-102组加入TLR4抑制剂IAXO-102,C29+IAXO-102联合干预组同时加入C29和IAXO-102。24 h后,检测FLSs细胞活力、迁移和侵袭能力。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清中白细胞介素6(IL-6)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)和基质金属蛋白酶13(MMP-13)水平。结果LPS诱导METs能力强于IFN-γ,差异有统计学意义(P<0.05);METs蛋白可以显著增强FLSs细胞活力、滑膜细胞迁移和侵袭能力(P<0.05);与对照组相比,METs蛋白处理组上清中IL-6、MMP-1、MMP-3和MMP-13升高,差异有统计学意义(P<0.05)。C29和IAXO-102单用或联用干预能显著降低滑膜细胞的活力、迁移和侵袭能力(P<0.05);与METs组相比,C29+IAXO-102联合干预组上清中IL-6、MMP-1、MMP-3和MMP-13水平下降,差异具有统计学意义(P<0.05),且IAXO-102抑制能力强于C29(P<0.05)。结论METs蛋白作为损伤相关模式分子主要通过活化TLR4来进一步激活FLSs,从而参与RA发病。

中性粒细胞胞外诱捕网放大脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应

目的观察中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)对脂多糖(LPS)诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应的放大作用。方法采用小鼠外周血中性粒细胞分离试剂盒分离提取C57BL/6小鼠外周血中性粒细胞。采用佛波酯(PMA)(100nmol/L)诱导中性粒细胞形成NETs,采用荧光显微镜及扫描电子显微镜观察NETs。体外培养大鼠肺泡巨噬细胞NR8383,分为⑴对照组:加入等体积PBS;⑵NETs组:加入制备好的(1.7×10~6个/ml)NETs;⑶LPS组:加入1mg/L LPS;⑷LPS+NETs组:LPS联合NETs共刺激,各组均刺激12h。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果荧光显微镜下观察示对照组中性粒细胞核形态完整,无DNA与NETs的胞外共定位网状结构,PMA刺激组可见DNA网状结构,且与NETs共定位;扫描电子显微镜下也观察到中性粒细胞染色质呈网状结构释放至胞外,提示PMA诱导NETs形成成功。采用LPS、NETs分别刺激肺泡巨噬细胞12h,细胞上清液中的IL-1β、TNF-α含量均较对照组显著升高,LPS+NETs组上清液中的IL-1β含量较LPS组显著升高(P<0.05),上清液中的TNF-α较LPS组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NETs增加LPS诱导的肺泡巨噬细胞炎症因子释放,提示NETs可以放大LPS诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应。

巨噬细胞胞外诱捕网在类风湿关节炎患者滑膜中的表达及其临床意义

目的通过检测类风湿关节炎(RA)患者滑膜巨噬细胞胞外诱捕网(METs)形成情况,探讨METs在RA发病中的作用。方法收集RA及创伤手术患者的滑膜组织,采用苏木精-伊红(HE)染色检测炎症浸润情况,激光共聚焦显微镜观察巨噬细胞(F4/80^(+))的表达、巨噬细胞极化(F4/80^(+)CD86^(+),F4/80^(+)CD206^(+))情况、METs(F4/80^(+)H2A^(+))形成水平。分离滑膜细胞,用蛋白免疫印迹法检测滑膜细胞中METs瓜氨酸化组蛋白H3(CH3)及肽酰基精氨酸脱亚胺酶4(PAD4)的水平。结果与创伤手术患者比较,RA患者滑膜组织炎性浸润程度较重,炎性细胞增多,巨噬细胞总数和Ⅰ型巨噬细胞(M1)比例均显著增多(98±7.09 vs 10±1.15,0.78±0.022 vs 0.13±0.011,P<0.001),两组间M2型巨噬细胞比例差异无统计学意义(0.23±0.019 vs 0.18±0.012,P>0.05)。RA组METs形成显著高于对照组(0.65±0.023 vs 0.18±0.012,P<0.001)。蛋白免疫印迹法显示RA患者滑膜PAD4和CH3水平较创伤手术患者明显增多(0.82±0.018 vs 0.20±0.015,0.83±0.013 vs 0.40±0.012,P<0.001)。结论RA患者滑膜中巨噬细胞明显增多,且以M1型巨噬细胞为主,METs形成明显增多。

中性粒细胞外诱捕网激活巨噬细胞促凝级联放大效应与心肌梗死介入术后肺栓塞的关系

目的探讨中性粒细胞外诱捕网(NETs)激活巨噬细胞促凝级联放大效应与心肌梗死介入术后肺栓塞的关系。方法采用回顾性研究的方式选取2018年12月—2020年12月在安阳市第三人民医院进行心肌梗死介入术的病人120例,根据病人术后是否出现肺栓塞分为栓塞组、对照组。观察两组病人术前、术后1 d、术后3 d、术后5 d血清NETs、炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)]水平变化,分析NETs与炎性因子之间的相关性,采用Logistic回归分析术后肺栓塞的危险因素,并以受试者工作特征曲线(ROC)分析NETs预测术后肺栓塞的临床价值。结果120例心肌梗死介入术病人术后发生肺栓塞20例。栓塞组术后1 d、3 d、5 d血清NETs、TNF-α、IL-1β、巨噬细胞计数明显高于对照组(P<0.05);两组中性粒细胞计数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后1 d、3 d、5 d血清NETs与TNF-α、IL-1β、巨噬细胞计数均呈正相关(P<0.05),与中性粒细胞计数无统计学相关(P>0.05)。ROC曲线分析显示,术后1 d、3 d、5 d血清NETs的曲线下面积(AUC)分别为0.920[95%CI(0.836,0.975)]、0.730[95%CI(0.634,0.789)]、0.630[95%CI(0.532,0.686)];血清NETs术后1 d的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均明显高于术后3 d、5 d。术后1 d血清NETs、IL-1β、TNF-α、巨噬细胞计数为心肌梗死介入术后肺栓塞发生的独立影响因素。结论血清NETs激活巨噬细胞促凝级联放大效应与心肌梗死介入术后肺栓塞关系密切,可以通过术后检测NETs、IL-1β、TNF-α、巨噬细胞计数,有效预测术后肺栓塞的发生。

曲美他嗪激活自噬增加巨噬细胞胞外诱捕网抑制炎性体减少泡沫细胞胆固醇含量

目的探讨曲美他嗪(TMZ)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导泡沫细胞形成的影响及可能的作用机制。方法应用ox-LDL刺激RAW264. 7细胞建立泡沫细胞模型,分为对照组(培养基)、模型组(60μg/m L ox-LDL刺激)、氯喹(CQ)组(60μg/m L ox-LDL联合10 mmol/L CQ处理)、TMZ联合CQ组(60μg/m L ox-LDL联合80μmol/L TMZ和10 mmol/L CQ处理)。油红O染色评估泡沫细胞形成情况,ELISA试剂盒检测细胞内总胆固醇(TC)及游离胆固醇(FC)含量;单丹磺酰尸胺(MDC)染色观察自噬; Picogreen荧光染色及荧光定量PCR检测巨噬细胞胞外诱捕网(MET)形成及其含量;实时定量PCR检测自噬相关指标微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)、泛素结合蛋白P62、含pyrin结构域NOD样受体家族3 (NLRP3)、含胱天蛋白酶结构域凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶1(caspase-1)及胆固醇流出相关基因ATP结合盒亚家族A成员1(ABCA1)、ATP结合盒亚家族G成员1(ABCG1)的mRNA水平。结果与模型组相比,TMZ联合CQ组LC3B表达增加、P62表达减少,同时TC、FC、胆固醇酯(CE)/TC含量降低,此外NLRP3、ASC及caspase-1的mRNA表达水平均显著下调,MET形成增加。CQ组结果相反。结论曲美他嗪可以通过激活自噬、增强巨噬细胞胞外诱捕网(MET)形成并抑制炎性体形成,从而促进泡沫细胞的胆固醇流出。

猪霍乱沙门菌胞外产物的核酸酶活性及其对巨噬细胞胞外诱捕网形成的影响

旨在探究猪霍乱沙门菌胞外产物的核酸酶活性及其对巨噬细胞胞外诱捕网形成的影响。采用平板培养法、琼脂糖凝胶电泳法和琼脂扩散法观察猪霍乱沙门菌胞外产物降解λDNA的活性,同时,分析不同温度、pH和金属离子对胞外产物核酸酶活性的影响以及胞外产物对巨噬细胞胞外诱捕网形成的影响。猪霍乱沙门菌胞外产物具有降解λDNA的DNA酶活性,高温和酸性条件抑制DNA酶的活性,活性最适温度和pH分别为42℃和9.0,且胞外产物的核酸酶可被60℃以上的温度灭活。添加Na^(+)、K^(+)、Ca^(2+)和Ni^(2+)对胞外产物切割λDNA的活性没有影响;5.00和10.00 mmol·L^(-1)的Ba^(2+)、Mg^(2+)和Mn^(2+)可提高胞外产物的DNA酶活性;0.01~1.00 mmol·L^(-1)的Zn^(2+)、Cu^(2+)和Fe^(3+)对胞外产物的DNA酶活性具有促进作用,但Co^(2+)则表现出抑制作用。荧光显微镜和定量分析均显示,猪霍乱沙门菌不能刺激巨噬细胞释放胞外诱捕网,而猪霍乱沙门菌胞外产物可显著降解白色念珠菌刺激巨噬细胞形成的胞外诱捕网。本研究证实了猪霍乱沙门菌胞外产物的DNA酶活性,为进一步探究胞外产物在猪霍乱沙门菌感染与宿主免疫互作中的作用提供参考。

牙周炎症对牙龈组织巨噬细胞胞外诱捕网形成的影响

目的:探讨牙周炎症对牙龈组织中巨噬细胞胞外诱捕网(METs)形成的影响。方法:纳入基础治疗后,需进行牙周翻瓣手术的牙周炎患者29例,以牙周健康的牙冠延长术患者20例作为对照。术前记录菌斑指数(PLI)、牙龈指数(GI)、探诊深度(PD)、临床附着丧失(CAL)等牙周临床指标,收集龈沟液(GCF)样本,术中收集牙周炎患者牙周破坏最严重部位的牙龈组织及牙冠延长术患者的健康牙龈组织。采用激光共聚焦显微镜观察牙龈组织中METs的形成情况,采用ELISA技术检测GCF中TNF-α和IL-9表达水平,分析两组样本METs形成水平与各牙周临床指标、GCF中TNF-α、IL-9水平的相关性。结果:牙周炎组METs形成分数,PLI、GI、PD、CAL等牙周临床指标,以及TNF-α、IL-9水平均显著高于正常对照组(P<0.05)。METs形成分数与PD、CAL正相关(P<0.05)。结论:牙周炎症破坏可以促进牙龈组织中METs的形成。

不同诱导剂体外诱导巨噬细胞胞外诱捕网形成效率的比较

目的比较体外诱导巨噬细胞胞外诱捕网(MET)形成的不同方法。方法采用(0.5、1、5、10)μg/m L脂多糖(LPS)、(10、25、50、80)μmol/L佛波酯(PMA)和(50、100、150)μg/m L二氧化硅(Si O2)处理RAW264.7细胞,在处理后3 h和6 h,采用免疫荧光染色法检测MET的产生,并对其进行半定量分析。结果免疫荧光染色表明MET主要由DNA和组蛋白构成,1μg/m L LPS处理RAW264.7细胞6 h,MET形成百分比为(37.04±10.02)%,明显高于对照组(7.90±2.71)%;80μmol/L的PMA处理细胞后MET形成百分比为(22.40±1.83)%,高于对照组(10.11±1.13)%;各剂量的Si O2诱导MET的量与对照组无明显差异。结论用LPS和PMA均能在体外诱导RAW264.7细胞MET的形成,Si O2诱导不是可行的方法。

中性粒细胞胞外诱捕网与口腔鳞状细胞癌关系的 研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)是中性粒细胞释放的一种由解聚的染色质和颗粒蛋白组成的纤维网状结构,可以捕获和杀死细菌。NETs的形成由各种细菌、病毒等病原体激活,其过程被称为网捕死亡(NETosis)。NETosis是一种不同于细胞凋亡和细胞坏死的细胞程序性死亡过程,目前已经报道了两种NETosis形式:裂解性NETosis和非裂解性NETosis。研究发现NETs能够在肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中与免疫细胞相互作用,激活巨噬细胞;促进髓系抑制细胞的免疫抑制作用;并能包裹在肿瘤表面,防止CD8+T细胞和自然杀伤细胞发挥细胞毒性作用。近年研究发现,NETs在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中大量存在,与OSCC发生发展关系复杂,根据不同的中性粒细胞表型,NETs可发挥促肿瘤或抗肿瘤作用,对N1型中性粒细胞,NETs可能是其发挥抗肿瘤作用的手段,而转换生长因子⁃β(transforming growth factor⁃β,TGF⁃β)诱导的NETs的形成可能与N2型中性粒细胞呈现促癌活性从而诱导口腔扁平苔藓恶变的机制有关。NETs还可能参与OSCC的转移过程,其通过捕获循环肿瘤细胞(circu⁃lating tumor cells,CTC)并诱导高凝状态促进肿瘤相关血栓的形成和血源性转移。NETs参与了OSCC发生和转移的过程,为抗肿瘤治疗和预测OSCC的预后提供了新的研究方向。抑制NETs的形成可以显著抑制化疗后产生的耐药性,并有利于降低OSCC患者的血栓形成风险从而抑制肿瘤转移。目前基于NETs相关基因已构建了多个关于头颈部鳞状细胞癌的预后模型。但目前NETs与OSCC的治疗尚处于讨论阶段,其作用机制与实行的可能性尚需大规模的基础与临床试验验证。本文通过综述NETs与OSCC之间的关系,为治疗OSCC提供新思路。

中性粒细胞胞外诱捕网、ANGPTL4及MIP-1α与急性呼吸窘迫综合征严重程度相关性及对临床转归的预测价值

目的分析中性粒细胞胞外诱捕网(NET)、血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)及巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)严重程度相关性及对临床转归的预测价值。方法回顾性将2021年1月至2023年1月延安市人民医院治疗的102例ARDS患者纳入观察组,其中重度ARDS患者42例,非重度ARDS患者60例;另选102名健康体检者纳入对照组。检测所有入选者血清NET的标志物游离DNA(cf-DNA/NET)、ANGPTL4、MIP-1α水平;分析cf-DNA/NET、ANGPTL4、MIP-1α与急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、氧合指数的关系;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析cf-DNA/NET、ANGPTL4、MIP-1α对ARDS患者病死的预测效能。结果观察组血清cf-DNA/NET、ANGPTL4、MIP-1α水平分别为(480.25±114.73)ng/mL、(1065.93±225.85)ng/mL、(125.98±36.81)pg/mL,均高于对照组[(136.82±24.57)ng/mL、(205.82±44.71)ng/mL、(52.43±12.74)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。重度ARDS患者血清cf-DNA/NET、ANGPTL4、MIP-1α水平分别为(541.64±130.05)ng/mL、(1358.19±289.80)ng/mL、(156.34±51.79)pg/mL,均高于非重度ARDS患者[(405.82±62.37)ng/mL、(863.92±187.43)ng/mL、(89.72±25.04)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关性分析,ARDS患者血清cf-DNA/NET、ANGPTL4、MIP-1α水平均与APACHEⅡ评分呈正相关(P<0.05),与氧合指数呈负相关(P<0.05)。经多因素Logistic回归分析,ARDS患者血清cf-DNA/NET、ANGPTL4、MIP-1α均是其病死的独立预测因素(P<0.05)。经ROC曲线分析,血清cf-DNA/NET、ANGPTL4联合MIP-1α预测ARDS患者病死的AUC为0.928。结论血清cf-DNA/NET、ANGPTL4及MIP-1α均在ARDS患者外周血中呈高表达,均与其病情严重程度有关,联合应用可提高对患者病死的预测效能。

系统性红斑狼疮患者外周血中性粒细胞自噬和胞外诱捕网形成增加

目的 探究中性粒细胞自噬、凋亡和胞外诱捕网(NET)形成在系统性红斑狼疮(SLE)中的作用。方法 收集36例女性SLE患者(SLE组)和同期32例健康体检者为对照,Western blot法检测SLE患者和健康体检者中性粒细胞微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、自噬相关基因5(ATG5)、 P62、 B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、 Bcl2相关X蛋白(BAX)的蛋白表达;流式细胞术检测中性粒细胞LC3B的蛋白表达;ELISA检测血浆髓过氧化物酶(MPO)水平。体外分离培养中性粒细胞,分别用100 nmol/L雷帕霉素和10μg/mL脂多糖(LPS)处理6 h, Western blot法检测中性粒细胞LC3B、 ATG5、 P62、 Bcl2和BAX的蛋白表达,ELISA检测培养上清中MPO水平,SytoxTMGreen染色结合荧光光度法检测培养上清中NET形成的荧光强度变化。结果 与健康对照组比较,SLE组中性粒细胞自噬、凋亡水平和NET形成均显著增加,中性粒细胞自噬与凋亡、 NET分别正相关;雷帕霉素诱导中性粒细胞自噬活化,但对凋亡和NET形成无明显影响;LPS能诱导中性粒细胞自噬激活并促进NET形成,但对凋亡无明显影响。结论 SLE患者中性粒细胞自噬、凋亡和NET形成均增加,SLE患者中性粒细胞自噬过度激活和NET形成增多可能是炎性内环境长期作用的结果。

细胞自噬参与中性粒细胞胞外诱捕网形成的机制研究进展

自噬是将病原体或受损的细胞器转移至溶酶体进行降解的生物学过程,对机体处理饥饿、氧化应激和防御病原体入侵至关重要。中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是由DNA和组蛋白等组成的网状结构,通过捕获、杀死、清除病原微生物来发挥其抗炎作用,但过度的NETs也可能使机体免疫系统异常活化,导致组织损伤。NETs的病理作用机制尚不清楚,但大量研究表明自噬参与其中,可能通过mTOR信号轴、PI3K、部分自噬基因及REDD1等调控参与NETs形成。本文就自噬参与NETs形成机制的研究进展做一综述,以期为揭示相关疾病的发病机制以及探索药物作用靶点提供参考依据。

白蛋白对脂多糖诱导中性粒细胞胞外诱捕网生成的抑制作用

目的探讨白蛋白对脂多糖(LPS)诱导人外周血中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)生成的抑制作用及机制。方法分离人外周血中性粒细胞,分别培养于无白蛋白和含生理浓度白蛋白的培养体系中,加入LPS刺激,同时使用钙离子(Ca2+)以及自噬调节剂干预,采用sytox green染色法检测NETs,采用Fluo-4 AM染色法检测胞内Ca2+水平,免疫荧光法检测NETs相关蛋白髓过氧化物酶(MPO)、弹性蛋白酶(NE)和瓜氨酸化组蛋白H3(cit-H3)以及自噬体相关蛋白LC3B的表达。结果 LPS可诱导中性粒细胞释放NETs,白蛋白可抑制NETs生成;白蛋白可降低LPS刺激下中性粒细胞胞内Ca2+浓度和自噬水平。Ca2+载体可增强中性粒细胞自噬水平并促进LPS诱导的NETs生成,Ca2+螯合剂可降低自噬水平并抑制NETs生成。自噬激动剂可显著增强NETs,自噬抑制剂则显著抑制NETs。结论白蛋白对LPS诱导中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)生成具有抑制作用,其作用机制可能与减少中性粒细胞Ca2+内流进而抑制自噬有关。

microRNA调控脓毒症中性粒细胞胞外诱捕网的研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)主要由网状脱氧核糖核酸(DNA)骨架构成,是中性粒细胞内除吞噬和脱颗粒外的新型抗菌机制。脓毒症时感染引起全身炎症反应,导致大量NETs释放,抗菌的同时进一步放大炎症级联反应,引起组织损伤且加重脓毒症病情进展。目前研究发现,miR-146a、miR-155、miR-378a-3p和miR-15b-5p通过不同机制调控脓毒症中NETs形成,影响脓毒症患者存活率及器官损害。本文总结了NETs的形成,阐述microRNA(miRNA)对脓毒症NETs的调控机制,为脓毒症的靶向治疗提供新的理念与思路。

Ox-LDL诱导肝硬化患者巨噬细胞产生ET

目的探讨氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导肝硬化患者巨噬细胞形成胞外诱捕网(ET)对肝硬化发展的作用。方法运用肝脏超声及肝脏弹性成像检测筛选肝硬化患者;通过ox-LDL等不同物质刺激巨噬细胞,观察ET的形成;检测ox-LDL、ET水平;诱导巨噬细胞表型转换。结果Ox-LDL刺激健康人巨噬细胞无ET产生;Ox-LDL可诱导肝硬化患者巨噬细胞形成ET,且在刺激后5 h达到峰值;ET诱导巨噬细胞表型M1向表型M2转化。结论ox-LDL可诱导肝硬化患者巨噬细胞产生ET,可能与肝硬化发展机制有关。

聚集NETs与巨噬细胞自噬在痛风炎症缓解中的机制

痛风是一种由饱和的针状单钠尿酸盐(MSU)结晶堆积在关节内或关节四周引发的急性、自限性炎症,与中医学“历节”“痹证”“脚气”相类。在痛风急性期主要表现为剧烈疼痛,甚则出现全身炎症反应,尽管可以在滑液和受影响的组织中检测到MSU晶体,但炎症多于2 w内自行缓解[1],提示这可能与中性粒细胞、巨噬细胞及一系列序贯事件相关。

中性粒细胞胞外诱捕网在肺炎克雷伯菌肺部感染小鼠模型巨噬细胞激活过程中的调控作用

目的建立肺炎克雷伯菌肺部感染小鼠模型,探讨中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)在肺炎克雷伯菌肺部感染小鼠巨噬细胞激活过程中的调控作用。方法提取小鼠外周血中性粒细胞,采用佛波酯(PMA)诱导中性粒细胞形成NETs;采用鼻腔滴注肺炎克雷伯菌法构建小鼠肺部感染模型,提取和培养模型小鼠肺泡巨噬细胞,将巨噬细胞分成空白组(加入等体积PBS),NETs组[加入(1.7×10^(6)个/ml)NETs];两组均刺激12 h。采用酶联免疫吸附试验检测培养液及细胞中白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平;实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测NETs对巨噬细胞炎症因子mRNA转录的影响。结果模型组小鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均显著升高(P<0.05),提示模型组小鼠出现严重感染;与空白组比较,NETs组小鼠肺泡巨噬细胞和上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α含量表达水平均升高(P<0.05),同时能增加巨噬细胞中TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA转录。结论NETs能够增加肺泡巨噬细胞炎症因子释放,放大肺炎克雷伯菌肺部感染小鼠炎症反应,提示NETs可以作为肺部感染病情生物学标志物并为预后评估和治疗提供指导。

中性粒细胞胞外诱捕网在代谢相关性脂肪肝病中的作用研究进展

代谢相关性脂肪肝病(metabolic associated fatty liver disease, MAFLD)是一类主要由多系统代谢紊乱引起的肝脏疾病,目前尚无药物上市,而其发病率却在逐年增加,通过抑制其炎症进展有利于缓解病情。而中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)作为先天免疫系统中的一类网状物质,其在炎症发展过程中发挥重要作用。本文综述了NETs在MAFLD中的作用,旨在揭示其作为药物靶点的潜力,同时为MAFLD的治疗带来新思路。