巨噬细胞移动抑制因子与趋化因子受体7对结肠癌细胞侵袭及奥沙利铂耐药的影响

目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)与趋化因子受体7(CXCR7)对结肠癌细胞侵袭能力及奥沙利铂(L-OPH)耐药的影响。方法体外培养L-OPH结肠癌耐药细胞株HCT116/L-OPH和结肠癌敏感细胞株HCT116,设置对照组(A组,HCT116细胞株)和实验组[B组(HCT116/L-OPH细胞株),C组(shRNA转染技术沉默HCT116/L-OPH细胞株中CXCR7的表达,CXCR7-shRNA),D组(HCT116/L-OPH细胞株阴性对照,CXCR7-shCtrl),E组(HCT116/L-OPH加入MIF特异性小分子拮抗剂ISO-1),F组(CXCR7-shRNA加入ISO-1),G组(CXCR7-shCtrl加入ISO-1)],采用噻唑蓝(MTT)法检测各细胞组的耐药性及在不同L-OPH浓度下的细胞增殖活性,采用Transwell法检测细胞的侵袭能力,采用免疫印迹(Western blot)法检测CXCRT mRNA的表达水平和磷酸化丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)的表达水平,采用逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测CXCR7蛋白的表达水平。结果A组、B组、C组、D组细胞对L-OHP的半数抑制浓度分别为6.36,74.72,7.01,7.49μmol/L,B组细胞的耐药指数为11.74。10,20,50,100μmol/L L-OHP浓度下,B组细胞的增殖抑制率显著低于A组(P<0.05),C组细胞的增殖抑制率显著高于B组和D组(P<0.05),E组细胞的增殖抑制率显著高于B组(P<0.05)。C组细胞CXCR7的mRNA和蛋白表达水平均显著低于B组(P<0.05)。C组和E组细胞的侵袭能力显著弱于B组(P<0.05)。C组和E组细胞的p-Akt表达水平显著弱于B组(P<0.05)。结论MIF与CXCR7均可调控结肠癌细胞侵袭及L-OPH耐药,其作用机制可能与MIF通过CXCR7激活Akt信号通路相关。

高迁移率族蛋白B1巨噬细胞转移抑制因子联合CXC亚家族趋化因子16对高危型HPV感染患者诊断价值

目的:探究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、巨噬细胞转移抑制因子(MIF)联合CXC亚家族趋化因子16(CXCL16)在高危型人乳头状瘤病毒(HPV)感染患者中的表达意义及诊断价值。方法:纳入本院2020年10月至2023年10月期间接诊的150例HPV感染患者作为研究组,根据患者核酸检测结果分为高危型HPV感染组(n=40)和低危型HPV感染(n=110)。另选取同期于本院接受经阴道镜活检检查的健康女性作为对照组(n=100)。对研究组患者均采用HPV-DNA分型试剂盒检测;对研究组和对照组人员采用酶联免疫吸附法检测HMGB1和CXCL16水平,免疫组化检测MIF染色强度。对比对照组和研究组HMGB1、MIF和CXCL16差异;对比低危型和高危型HPV感染组HMGB1、MIF和CXCL16差异;采用受试者特征曲线(ROC)分析HMGB1、MIF和CXCL16联合检测对高危型HPV感染诊断价值;Spearman相关性分析HMGB1、MIF和CXCL16与不同HPV感染分型相关性。结果:与对照组相比,研究组血清HMGB1、CXCL16水平和MIF阳性细胞占比得分显著更高(均P<0.05);与低危型HPV感染组相比,高危型HPV感染组血清HMGB1、CXCL16水平和MIF阳性细胞占比得分显著更高(均P<0.05);ROC工作曲线分析结果显示HMGB1、MIF和CXCL16单独及联合诊断高危型HPV感染的AUC分别为0.748、0.684、0.791和0.934,联合检测诊断价值显著高于单独检测(Z=2.577、3.152、2.096,均P<0.05);Spearman相关性结果显示HMGB1、MIF和CXCL16与不同HPV感染分型存在显著正相关(r=0.615、0.633、0.649均P<0.05)。结论:高危型HPV感染患者血清HMGB1、CXCL16水平和MIF阳性细胞占比得分显著高于低危型和对照组,临床检查中应用HMGB1、MIF和CXCL16联合检测可提升高危型HPV感染临床诊断率,为临床提供一种新型检测方法和治疗依据。

磁振磁电疗法治疗慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(气虚血瘀证)的疗效及对活化T细胞趋化因子、巨噬细胞集落刺激因子水平的影响

目的观察磁振磁电疗法干预下慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(气虚血瘀证)的疗效及活化T细胞趋化因子(regulated upon activation,normal T cell expressed and secreted,RANTES)、巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)的表达。方法将2021年6月至2022年6月于广东省中医院珠海医院男科门诊确诊为慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(气虚血瘀证)的100例患者按照随机数字表法分为试验组和对照组,每组50例,试验组予磁振磁电疗法;对照组予盐酸坦索罗辛缓释胶囊口服,均以4周为1个疗程。比较两组治疗的总有效率、治疗前后慢性前列腺炎评分、中医证候疗效、治疗前后中医证候评分及前列腺液中RANTES、M-CSF的水平变化。结果两组总有效率、中医证候疗效总有效率比较,差异有显著性(P<0.05);两组治疗后疼痛症状评分、排尿症状评分、生活质量评分、NIH-CPSI总评分差异有显著性(P<0.05);两组治疗前后比较,RANTES、M-CSF均有显著性(P<0.05),治疗后组间比较,差异有显著性(P<0.05)。结论磁振磁电疗法能显著改善慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征的临床症状,疗效确切且安全性高,其作用机制主要与通过抑制RANTES、M-CSF等细胞因子表达,降低相关炎症细胞的增殖分化有关。

外周血巨噬细胞趋化因子-1、脂联素水平在老年糖尿病肾病患者中变化及与肾血管内皮功能障碍的关系

目的探讨外周血巨噬细胞趋化因子(MCP)-1、脂联素(APN)水平在老年2型糖尿病肾病(T2DN)患者中的变化及与肾血管内皮功能障碍的关系。方法选取老年T2DN患者95例及2型糖尿病(T2DM)患者45例,另取同期体检中心健康志愿者45例为对照组。比较3组外周血MCP-1、APN及肾血管内皮功能相关指标血清可溶性细胞间黏附分子(sICAM)-1、内皮素(ET)-1水平,Pearson相关性分析MCP、APN与sICAM、ET-1水平的相关性。结果与对照组比较,T2DM组和T2DN组MCP-1水平显著升高,且T2DN组显著高于T2DM组(P<0.05);与对照组比较,T2DM组和T2DN组APN水平显著降低,且T2DN组显著低于T2DM组(P<0.05)。与对照组比较,T2DM组和T2DN组sICAM、ET-1水平显著升高,且T2DN组显著高于T2DM组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,MCP-1与sICAM、ET-1呈正相关(r=0.542、0.681,均P<0.05);APN与sICAM、ET-1呈负相关(r=-0.461、-0.586,均P<0.05)。Logistic回归分析显示,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高水平、尿清蛋白与肌酐比值(UACR)高水平、MCP-1高水平、APN低水平是T2DN发生的独立危险因素(P<0.05)。结论老年T2DN患者外周血MCP-1异常高表达,APN异常低表达,二者与T2DN的发生及肾血管内皮功能障碍关系密切,可作为T2DN患者早期血管内皮功能障碍早期预警指标。

白细胞分化抗原74和CXC趋化因子配体9阳性巨噬细胞亚群在大鼠肝移植排斥反应中的作用

目的探讨在肝移植排斥反应中巨噬细胞亚群分类及变化。方法建立大鼠肝移植模型分为:免疫耐受组(B-B),将BN大鼠供体的肝脏移植至BN大鼠受体;免疫排斥组(L-B),将Lewis大鼠供体的肝脏移植至BN大鼠受体,使用单细胞RNA测序和高通量RNA测序区分大鼠移植肝巨噬细胞亚群,发现排斥反应高度差异的基因,免疫组化确定蛋白表达和细胞亚群的变化和分布。结果CD68阳性巨噬细胞在排斥组多于耐受组(P<0.05),巨噬细胞可分为9个亚群,排斥反应中巨噬细胞第8群的CXC趋化因子配体9(CXCL9)明显升高,第5群的白细胞分化抗原74(CD74)基因明显升高(P<0.05)。排斥反应中巨噬细胞差异基因综合第1位的是CD74,第2位是CXCL9。与耐受组比较,排斥组肝脏汇管区可见大量CD74阳性巨噬细胞浸润,并且在肝血窦CD74阳性巨噬细胞浸润也明显增加(P<0.05),在排斥肝脏汇管区和肝血窦可见大量CXCL9阳性巨噬细胞浸润以汇管区为著(P<0.05),在排斥肝脏汇管区CD14阳性细胞明显增加(P<0.05)。结论在肝移植排斥反应中CD74阳性巨噬细胞亚群和CXCL9阳性巨噬细胞亚群是促进肝移植排斥反应中的关键亚群,完善了巨噬细胞在肝移植排斥反应中作用机制。

狼疮肾炎患者血中巨噬细胞衍生趋化因子和IL-18水平的变化及意义

目的:探讨不同病理类型的狼疮肾炎(LN)患者血中巨噬细胞衍生趋化因子(MDC)和白介素18(IL-18)的变化及意义。方法:应用ELISA法对不同病理类型LN患者血中MDC和IL-18进行测定。结果:(1)Ⅱ、Ⅲ型LN患者血中MDC的水平明显增高。MDC的水平与LN患者血中补体的变化呈负相关,与抗ds-DNA抗体的变化呈正相关,与系统性红斑狼疮的疾病活动评分(SLEDAI)呈正相关。(2)IL-18的水平在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型LN患者血中均明显增高,且与补体下降呈负相关,与抗ds-DNA抗体水平、SLEDAI评分及LN患者的肾功异常呈正相关。③MDC的水平在Ⅱ、Ⅲ型LN组与IL-18水平的变化呈正相关,在Ⅳ型LN组无明显相关变化。结论:MDC和IL-18在LN的发生发展中均有重要作用,MDC对病变过程中的病理损伤的程度及Th1/Th2细胞失衡的变化的探讨具有重要意义。IL-18在LN的发生发展、治疗及预后的监控上具有重要作用。

芪苈强心胶囊对慢性心力衰竭大鼠心肌巨噬细胞衍生趋化因子表达的影响

【目的】探讨芪苈强心胶囊对慢性心力衰竭(CHF)大鼠的治疗作用及其可能机制。【方法】将60只Wistar大鼠随机抽取15只作为空白组,其余45只采用阿霉素腹腔注射法复制CHF模型。造模成功后,将造模成功大鼠随机分为芪苈强心治疗组、地高辛对照组、模型组各15只,分别对应给予芪苈强心胶囊溶液、地高辛溶液和生理盐水灌胃,给药4周后,经超声心动图观察左心室舒张末期内径(LVIDd)、左心室收缩末期内径(LVIDs)、左心室短轴缩短率(FS)、射血分数(EF);检测心脏血流动力学指标[左心室收缩/舒张末期压力(LVSP/LVEDP)、左室内压最大变化速率(±dp/dtmax)];应用苏木素—伊红(HE)染色和透射电镜观察心肌组织形态学变化;应用免疫组织化学法和酶联免疫吸附分析(ELISA)分别检测心肌组织巨噬细胞衍生趋化因子蛋白(MDC)表达和含量。【结果】与空白组比较,模型组大鼠LVIDd、LVIDs、LVEDP明显升高,EF、FS、LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax及MDC表达和含量明显降低(P<0.05),心肌组织出现明显病理损害;与模型组比较,芪苈强心治疗组、地高辛对照组大鼠LVIDd、LVIDs、LVEDP明显降低,EF、FS、LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax及MDC的表达和含量明显升高(均P<0.05),心肌组织病理形态均有不同程度改善,且2个治疗组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】芪苈强心胶囊可能通过调节心肌MDC表达和含量进而改善心肌舒缩功能,对CHF大鼠心脏起保护作用。

猪源CXCL17的原核表达及其对猪巨噬细胞的趋化作用

[目的]本研究旨在探究CXC趋化因子配体17(CXC motif chemokine ligand 17,CXCL17)对巨噬细胞的趋化作用并解析其分子机制。[方法]构建表达猪CXCL17蛋白的重组菌,该菌经IPTG诱导后高效表达CXCL17蛋白,并主要以包涵体形式存在;包涵体经过变性、纯化和复性获得重组蛋白,利用SDS-PAGE和Western blot对纯化的CXCL17蛋白进行验证。通过CCK-8法筛选CXCL17蛋白对猪巨噬细胞的最佳作用浓度范围,并以此设置浓度梯度处理猪巨噬细胞,用Transwell试验检测CXCL17对巨噬细胞的趋化活性。通过免疫荧光和Western blot检测细胞微丝骨架的变化及相关通路的激活情况,以揭示CXCL17趋化巨噬细胞迁移的作用机制。[结果]重组菌在IPTG终浓度为1.0 mmol·L^(-1)及37℃诱导条件下表达7 h,获得高表达量的重组猪CXCL17蛋白。该蛋白纯化后的纯度可高达95%。重组猪CXCL17蛋白可以剂量依赖诱导猪巨噬细胞迁移,其机制为通过激活微丝骨架下游的LIMK/Cofilin信号通路引起细胞微丝骨架重排,促进细胞微丝骨架解聚、聚合,从而有利于巨噬细胞迁移。[结论]本研究重组表达了猪CXCL17蛋白,并发现CXCL17蛋白调控细胞微丝骨架诱导猪巨噬细胞迁移的分子机制,为CXCL17作为黏膜免疫增强剂提供了试验依据。

巨噬细胞衍生趋化因子在MRL/lpr小鼠肾组织中的异常表达

目的:研究巨噬细胞衍生趋化因子(MDC)在红斑狼疮小鼠狼疮肾炎中的作用。方法:比较MRL/lpr狼疮小鼠和BALB/c小鼠24h尿蛋白,并用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)和免疫组织化学方法检测两组小鼠肾组织MDCmRNA及蛋白表达情况。结果:MRL/lpr小鼠24h尿蛋白高于BALB/c小鼠(P<0.05);MRL/lpr小鼠肾组织MDCmRNA表达较BALB/c小鼠明显升高(P<0.05);MRL/lpr小鼠肾小球、肾小管及间质均有明显MDC蛋白表达,而BALB/c小鼠肾脏未见MDC表达。结论:MDC在红斑狼疮小鼠肾脏组织中的表达增高,说明MDC可能参与介导了小鼠狼疮性肾炎的病变过程。

高同型半胱氨酸血症大鼠主动脉平滑肌细胞中巨噬细胞炎性蛋白1α和C-C型趋化因子受体1的表达

目的通过检测高同型半胱氨酸血症大鼠胸主动脉平滑肌细胞中巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)和C-C型趋化因子受体1(CCR1)蛋白的表达,探讨高同型半胱氨酸血症引起动脉粥样硬化(AS)的机制。方法8周龄SD雄性大鼠16只随机分为对照组和高蛋氨酸组,每组8只。对照组给予普通饲料喂养,高蛋氨酸组在普通饲料喂养的基础上加质量分数2%的蛋氨酸。喂养8周后处死大鼠,心脏采血,取胸主动脉。肉眼及光镜下观察血管形态学改变,采用高效液相色谱法测定血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度,S-P免疫组织化学染色法检测MIP-1α和CCR1的表达。结果(1)血浆Hcy浓度:高蛋氨酸组大鼠血浆Hcy浓度(45.74±9.65)mmol.L-1显著高于对照组(7.38±2.28)mmol.L-1(P<0.01)。(2)形态学改变:肉眼观可见对照组大鼠胸主动脉内膜光滑,高蛋氨酸组胸主动脉内膜粗糙、隆起;光镜下可见对照组大鼠主动脉内膜内皮细胞排列整齐,高蛋氨酸组内膜细胞排列紊乱,脂质沉积。(3)免疫组织化学染色结果:MIP-1α和CCR1蛋白的阳性表达表现为细胞质呈棕褐色。MIP-1α和CCR1蛋白在高蛋氨酸组的阳性表达强于对照组,二者在高蛋氨酸组的阳性表达平均灰度值明显低于对照组(P<0.01)。结论高同型半胱氨酸血症可诱导大鼠胸主动脉平滑肌细胞MIP-1α及其受体CCR1的表达,引起血管壁的炎症,导致AS形成。

趋化因子受体介导巨噬细胞炎症蛋白-1α对多发性骨髓瘤细胞增殖与迁移的影响

目的:探讨两种趋化因子受体(cell chemokine receptor,CCR)在人多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞株KM3、SKO007、XG-6中的表达及介导巨噬细胞炎症蛋白-1α(macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)对瘤细胞增殖与迁移的影响。方法:半定量RT-PCR检测KM3、SKO007、XG-6细胞中的CCR1、CCR5mRNA水平;MTT法进行细胞增殖实验;体外微孔隔离室迁移板进行细胞迁移实验。结果:MM细胞株KM3、XG-6同时表达CCR1和CCR5,SKO007细胞仅表达CCR5;在介导MIP-1α对KM3和XG-6细胞的增殖与迁移时,实验组较对照组差异有统计学意义(P<0.05),但实验组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:KM3、XG-6细胞株均表达CCR1、CCR5两种受体,SKO007细胞株仅表达CCR5受体;MIP-1α可能是通过CCR1、CCR5两种受体来介导瘤细胞的增殖与迁移。

趋化因子CX3CL1和CCL2对人单核细胞来源巨噬细胞的作用及意义

背景 研究发现巨噬细胞及其分泌的趋化因子与角膜新生血管（CNV）的发生相关.巨噬细胞具有异质性,在不同的微环境以及不同的刺激条件下发挥不同的作用. 目的 检测C-X3-C趋化因子配体1（CX3CL1）和C-C趋化因子配体2（CCL2）对巨噬细胞增生的作用,并探讨其意义. 方法 7～8周龄雄性BALB/c小鼠20只,用角膜碱烧伤的方法构建左眼CNV模型,术后4d在裂隙灯显微镜下检查小鼠CNV情况,颈椎脱臼法处死小鼠并制备角膜切片.用荧光免疫组织化学法检测小鼠角膜组织中巨噬细胞表面两种趋化因子受体C-C趋化因子受体2（CCR2）和CX3CR1的表达.用密度梯度离心法分离人外周血单核细胞,在含质量分数10％胎牛血清（FBS）的RPMI-1640培养液中加入30 μg/L粒细胞巨噬细胞刺激因子（GM-CSF）,诱导和培养人外周血单核细胞来源的巨噬细胞.将培养的细胞分为CD68＋CCR2组和CD68＋CX3CR1组,分别加入CD68＋CCR2抗体和CD68＋CX3CR1抗体,每组2管,其中一管作为IgG同型对照.采用流式细胞仪分别检测小鼠碱烧伤角膜组织中巨噬细胞和人外周血巨噬细胞中CX3CR1以及CCR2的表达.分别用人重组CX3CL1和CCL2蛋白刺激巨噬细胞,实时定量PCR（real-time PCR）法检测干预后巨噬细胞中血管内皮生长因子（VEGF）、血小板凝血酶敏感蛋白样模体的解整链蛋白金属蛋白酶1（ADAMTS-1）、凝血酶敏感蛋白1（TSP-1）等血管生成相关因子的表达.结果 角膜碱烧伤后4d,裂隙灯显微镜下可见角膜局部有新生血管发生,CNV沿角膜缘向角膜中心区域延伸.荧光免疫组织化学法检测发现,角膜组织内有F4/80阳性的巨噬细胞浸润,其表面可见CCR2和CX3CR1分子的表达,呈绿色荧光.未受GM-CSF诱导培养的巨噬细胞能维持生长约2周,但死亡细胞较多,而经GM-CSF诱导培养的细胞生长稳定,细胞数量增加,无明显悬浮死亡现象.培养的巨噬细胞中CX3CR1表达率平均约为75％,CCR2表达率为45％.Real-time PCR法检测发现,CCL2干预后巨噬细胞中VEGF mRNA的相对表达量明显增加,其中150 mg/L CCL2组VEGF mRNA的相对表达量明显高于对照组,差异有统计学意义（t=-5.09,P=0.03）,而ADAMTS-1 mRNA、TSP-1 mRNA表达下降,其中150 mg/L CCL2组ADAMTS-1 mRNA、TSP-1 mRNA表达明显低于对照组,差异有统计学意义（t=3.01,P=0.04;t=4.27,P=0.02）.CX3CL1干预后巨噬细胞中VEGF mRNA表达量明显下降,而ADAMTS-1mRNA、TSP-1 mRNA的表达水平升高,与对照组相比,150 mg/L CX3CL1组VEGF mRNA表达量下降,ADAMTS-1 mRNA、TSP-1mRNA表达量下降,差异均有统计学意义（t=6.35,P=0.02；t=-2.92,P=0.04；t=-3.81,P=0.03）. 结论 CCL2、CX3CL1能通过其对应受体影响巨噬细胞VEGF、ADAMTS-1、TSP-1等血管新生相关因子的表达,提示通过CCL2、CX3CL1等干预靶点治疗新生血管性眼病的可能.

胰腺癌组织化学趋化因子表达与肿瘤相关巨噬细胞计数的相关性

目的:研究胰腺癌组织中IL-8,MCP-1和MIP-1α表达特征及与TAM计数的相互关系及临床病理意义.方法:胰腺癌(n=51)手术切除标本经40g/L中性甲醛固定后常规制作石蜡包埋切片,IL-8,MC-1l和MIP-1α表达及TAM染色均采用常规ABC免疫组化法.结果:胰腺癌组织IL-8,MCP-1和MIP-1α表达阳性率分别为62.7%,66.7%和66.7%,其评分值分别为2.9±1.9,2.6±1.8和2.4±1.7,TAM计数均值为18.0±6.0个/HP;高分化腺癌IL-8评分及TAM计数明显低于低分化腺癌(P<0.05);转移病例IL-8,MCP-1,MIP-1α表达阳性率及其评分及TAM计数均明显高于未转移病例(P<0.05或P<0.01):化学趋化因子阳性表达病例TAM计数均明显高于阴性病例(P<0.01),且其评分值与TAM计数均呈密切正相关(rIL-8=0.52,P<0.01;rMCP-1=0.50,P<0.01;rMIP-1α=0.46,P<0.01),同样IL-8与MCP-1(r=0.54,P<0.01)和MIP-1α(r=0.52,P<0.01)及MCP-1与MIP-1α(r=0.54,P<0.01)之间也均呈密切正相关;化学趋化因子表达和TAM计数与胰腺癌其他临床病理特征均无明显关系.结论:化学趋化因子及TAM计数与胰腺癌进展、血管生成、转移发生及预后有密切关系,阳性表达者或TAM计数高者可能进展快和预后差.

血清内巨噬细胞衍生趋化因子、胸腺和活化调节趋化因子水平与支气管哮喘临床参数的关系

目的:探讨巨噬细胞衍生趋化因子(macrophage-derived chemokine,MDC)、胸腺和活化调节趋化因子(thymus-and activation-regulated chemokine,TARC)与支气管哮喘密切相关的IgE、白细胞介素-5(IL-5)及外周血嗜酸粒细胞计数(eosinophils,EOS)等临床参数的关系。方法:收集支气管哮喘患者112例(特应性皮炎患者除外)、健康人58例(性别、年龄与支气管哮喘患者相匹配,无特应性皮炎)作对照。应用酶联免疫吸附法检测每例患者非急性发作时血清内MDC、TARC、总IgE、IL-5的浓度及健康人血清中MDC、TARC浓度,测定外周血EOS计数。分别评价支气管哮喘患者血清内MDC、TARC水平与总IgE、IL-5及EOS的关系,评价血清内MDC、TARC水平在支气管哮喘患者与健康人之间的差异性。结果:支气管哮喘患者血清内MDC浓度与总IgE、IL-5水平呈正相关(IgE,r=0.243,P=0.013 0;IL-5,r=0.309,P=0.004 0),MDC、TARC血清内浓度与EOS呈正相关(MDC,r=0.388,P=0.000 1;TARC,r=0.275,P=0.042 2)。支气管哮喘患者非发作时血清内MDC、TARC浓度与健康人之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MDC、TARC可能是支气管哮喘有价值的临床生物学标志物,在支气管哮喘的发病机制中起着重要作用。

小鼠巨噬细胞源性趋化因子作为佐剂增强不可分型流感嗜血杆菌P6蛋白疫苗的免疫保护作用

目的用原核细胞表达不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)P6蛋白并观察巨噬细胞源性趋化因子(MDC)对NTHi-P6蛋白疫苗免疫效果的影响。方法构建原核表达质粒PGEX-6P2/P6,转化E.coli XL1-Blue,诱导P6蛋白的表达。将BALB/c小鼠随机分为P6蛋白联合Freund佐剂与MDC组、P6蛋白联合Freund佐剂组、PBS对照组。分别于0、14、28 d经腹腔免疫,末次免疫后14 d,每组取12只小鼠取血,ELISA检测血清中IgG抗体水平。每组取3只小鼠,制备脾淋巴细胞,ELISA检测IL-4和IFN-γ水平。用10×LD50NTHi攻击每组剩余15只小鼠,观察免疫保护作用。结果 P6蛋白联合Freund佐剂与MDC组、P6蛋白联合Freund佐剂组均能诱导小鼠产生IgG抗体,其滴度分别为1∶1 140.25、1∶3 044.38,P6蛋白联合Freund佐剂与MDC组小鼠抗体滴度和IFN-γ水平明显高于P6蛋白联合Freund佐剂组(P<0.05),但IL-4水平2组间差异无统计学意义(P>0.05)。经NTHi攻击后,P6蛋白联合Freund佐剂与MDC组小鼠的生存率达80%,与PBS组相比差异有统计学意义(P<0.05),但与P6蛋白联合Freund佐剂组相比无显著性差异。结论 MDC作为蛋白佐剂,在一定程度上增强了NTHi-P6蛋白疫苗的免疫保护作用。

病毒巨噬细胞炎性蛋白与趋化因子受体结合的效应分析

目的:探讨人疱疹病毒8 K6基因编码的产物病毒巨噬细胞炎性蛋白(viral m acrophage inflamm atory prote in,vM IP)是否具有结合趋化因子受体以及趋化作用。方法:受体配体交联试验检测vM IP与受体结合能力。趋化实验及细胞内钙流检测判断vM IP的生物学活性。结果:vM IP可与外周血单个核细胞(PBMCs)膜上的趋化因子受体结合,抑制hM IP-1α对PBMC的趋化能力,EC50为3.39 ng/m l。其本身只有较弱的趋化能力。钙流实验证实vM IP轻度升高胞内钙离子浓度,但可明显抑制hM IP-1α所引起的胞内钙离子高峰。结论:重组vM IP与hM IP-1α受体(CCR5)结合后,可有效的阻断人源性趋化因子的结合与信号传导,但其本身对细胞未有明显的激活作用,因此可作为趋化因子受体的天然阻断剂,可用于免疫移植中的排斥反应或H IV-1病毒感染等。

单核/巨噬细胞及其趋化因子与脑缺血再灌注损伤

缺血再灌注能诱导脑组织表达单核细胞趋化因子 1(MCP 1)和巨噬细胞炎性蛋白 1(MIP 1) ,并伴有单核 /巨噬细胞的浸润和激活。一方面 ,这些趋化因子的表达和单核 /巨噬细胞的激活有助于增强机体抵抗力 ,参与组织修复 ,是机体防御反应的重要组成部分 ;另一方面 ,又可加重组织损伤。文章论述了单核 /巨噬细胞及其趋化因子MCP 1和MIP

结核分枝杆菌H37Ra热休克蛋白16.3敲除菌株对小鼠骨髓来源巨噬细胞炎性细胞因子表达及趋化功能的影响

目的初步探讨结核分枝杆菌H37Ra热休克蛋白16.3敲除菌株对小鼠骨髓来源巨噬细胞炎性细胞因子表达及趋化功能的影响。方法从BALB/c小鼠胫腓骨中提取骨髓细胞,与GM-CSF共培养获得骨髓来源的巨噬细胞,流式细胞术检测巨噬细胞表面F4/80和CD11b的表达;分别用H37Ra野生型菌株(WT)、H37Ra热休克蛋白16.3回补菌株(COMP)、H37Ra热休克蛋白16.3敲除菌株(MUT)感染小鼠骨髓来源巨噬细胞,Real-time PCR检测巨噬细胞炎性细胞因子TNF-α、IL-6和iNOS以及趋化因子CCL2、CCL3、CCL4、CCL5和CCL12 mRNA的相对表达水平;ELISA以及Western blot检测TNF-α、IL-6和iNOS的表达水平;Transwell实验检测巨噬细胞的趋化功能;流式细胞术检测F4/80^(+)CCR1^(+)、F4/80^(+)CCR2^(+)和F4/80^(+)CCR5^(+)的细胞数量。结果F4/80^(+)CD11b^(+)的细胞数量占比为97.8%,提示小鼠骨髓来源巨噬细胞诱导成功;相较于WT和COMP菌株感染组,在感染巨噬细胞3 h后MUT感染组CCL2、CCL3、CCL4、CCL5和CCL12 mRNA的相对表达水平上调,继续感染24 h,相较于WT和COMP菌株感染组,MUT菌株感染组TNF-α和IL-6mRNA的相对表达水平更高,各感染组间iNOS mRNA的相对表达水平没有差异,而在感染48 h后,各感染组间TNF-α和IL-6mRNA的相对表达水平没有差异,MUT菌株感染组相较于WT和COMP菌株感染组iNOSmRNA的相对表达水平更低;ELISA结果显示TNF-α和IL-6的分泌水平在各感染组间没有差异;Western blot结果显示iNOS的表达在各感染组间也没有明显差异;Transwell实验结果显示,MUT感染组能够趋化更多数量的巨噬细胞至下室;流式结果显示,各感染组间F4/80^(+)CCR1^(+)的细胞数量没有差异,MUT菌株感染组F4/80^(+)CCR2^(+)和F4/80^(+)CCR5^(+)的细胞数量相较于WT和COMP菌株感染组明显上调。结论MTB Hsp16.3能在基因表达水平调控小鼠骨髓来源巨噬细胞炎性细胞因子TNF-α、IL-6和iNOS的表达且可能通过CCL3、CCL4、CCL5/CCR5和CCL2、CCL12/CCR2抑制小鼠骨髓来源巨噬细胞的趋化功能。

巨噬细胞类症蛋白-1α趋化因子及其在肿瘤治疗研究中的进展

巨噬细胞炎症蛋白 1α(MIP- 1α)是 CC趋化因子中的一种。本文从 MIP- 1α的发现、分子生物学特点、分泌、生物活性及在肿瘤治疗方面的研究进展等几方面作一综述。

异氟醚对人肺泡巨噬细胞趋化因子和细胞因子mRNA表达的影响

目的 研究异氟醚麻醉中人肺泡巨噬细胞IL 8、IL 1β、TNF α、IFN γ、IL 4和IL 10mRNA的表达 ,探讨异氟醚对肺炎性反应的影响。方法 2 4例肝脏部分切除手术病人随机分为异氟醚组 (n =12 )和对照组 (n =12 ) ,在麻醉诱导后即刻和 4h分别用纤维支气管镜行支气管肺泡灌洗 ,从灌洗液中收获肺泡巨噬细胞提取RNA ,逆转录合成cDNA以 β actin为内对照作PCR后电泳扫描求积 ,检测肺泡巨噬细胞上述细胞因子、趋化因子mRNA的表达。结果 异氟醚组麻醉诱导后 4h比麻醉诱导后即刻IL 8、IL 1βmRNA的表达显著增加 (P <0 .0 5 ) ,对照组麻醉诱导后 4h比麻醉诱导后即刻IL 8、IL 1βmRNA的表达轻度增加 (P <0 .0 5 ) ;在麻醉诱导后4h ,异氟醚组和对照组之间IL 8、IL 1βmRNA的表达水平差异有显著意义 (P <0 .0 5 )。TNF α、IFN γ、IL 4和IL 10mRNA的表达在麻醉前后无明显变化。结论 异氟醚能增强病人肺泡巨噬细胞促炎性细胞因子、趋化因子mRNA的表达 。