巨噬细胞诱导性C型凝集素样受体在真菌性足菌肿患者外周血巨噬细胞中的表达

目的:检测巨噬细胞诱导性C型凝集素样受体(MINCLE)在真菌性足菌肿患者外周血巨噬细胞中的表达,探讨其在真菌性足菌肿发病中的作用。方法:收集我院2011年8月到2014年2月确诊的真菌性足菌肿患者12例作为观察组,并选择同期在我院进行健康体检者18例作为健康对照。采用流式细胞仪检测真菌性足菌肿患者外周血CD163+巨噬细胞中MINCLE的表达。结果:MINCLE在真菌性足菌肿患者外周血CD163+巨噬细胞中呈高表达[(0.68±0.41)%],而健康对照组外周血中则呈低水平表达[(0.11±0.03)%],两组差异具有统计学意义(t=19.12,P<0.05)。结论:C型凝集素样受体MINCLE在真菌性足菌肿患者CD163+巨噬细胞中表达增高,可能参与真菌性足菌肿的发病过程。

凝集素样受体巨噬细胞诱导性C型凝集素样受体在类风湿关节炎患者巨噬／树突状细胞中表达及其临床意义’

目的研究巨噬细胞诱导性C型凝集素样受体（MINCLE）在健康者、类风湿关节炎（RA）和骨关节炎患者外周血及关节滑液中的表达特征，探讨其与RA发病的相关性。方法①采用实时定量聚合酶链反应（PCR）方法在mRNA水平检测RA患者（253例）及健康人（71名）外周血单个核细胞（PBMC）中MINCLE的表达；②采用流式细胞术在蛋白水平检测RA患者（18例）、骨关节炎患者（5例）及健康人（12名）外周血及关节滑液巨噬细胞、髓样树突状细胞（mDC）和浆细胞样树突状细胞（pDC）中MINCLE的表达；采用Mann—WhitnevU检验或配对t检验统计分析MINCLE在健康者、骨关节炎患者和RA患者外周血及关节滑液之间的表达差异。结果①在mRNA水平，外周血PBMC中RA患者的MINCLE表达量高于健康对照组[（1．65±0．36）和（0．37±0．06），U=6057，P=2．75×10^-5]；②在蛋白水平，健康人及骨关节炎患者外周血巨噬细胞、mDC及pDC中未见MINCLE的表达；在骨关节炎关节滑液中，MINCLE仅低水平表达于mDC[（7．5±2．9）％]中，而MINCLE在RA患者关节滑液mDC中呈高表达[（34．8±4．4）％，U=0，P=2．6×10^—3]；MINCLE在RA患者的滑液巨噬细胞及mDC的表达均明显高于其在相对应的外周血中的水平[巨噬细胞（2．01±0．53）％和（0．27±0．51）％，t=4．879，P=2．23×10^-6；mDC为（34．8±4．4）％和（21．7±5．5）％，t=2．535，P=0．017]。结论MINCLE的表达特征具有RA组织特异性，MINCLE很可能为RA发病的一个重要标记物。

血凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1在氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞氧化应激中的作用

目的:探讨血凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞氧化应激中的作用。方法:将生长至对数增殖期的巨噬细胞随机分成对照组、空质粒对照组(pCon组)、ox-LDL组、LOX-1-小干扰RNA(siRNA)+ox-LDL组,分别测定各组丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,荧光显微镜及流式细胞仪检测各组巨噬细胞活性氧(ROS)水平,实时定量聚合酶链反应(PCR)及Western blot法检测各组还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOX)核心酶NOX2及亚组分p22phox的mRNA及蛋白表达水平。结果:(1)与对照组、pCon组比较,oxLDL组MDA含量明显升高,SOD活性明显下降;与ox-LDL组比较,LOX-1-siRNA+oxLDL组MDA含量明显下降,SOD活性明显升高。(2)荧光显微镜、流式细胞仪检测示oxLDL组巨噬细胞ROS平均荧光强度较正常对照组、pCon组显著增加,而LOX-1-siRNA+ox-LDL组较ox-LDL组显著降低,pCon组与对照组相比差异无统计学意义。(3)实时定量PCR及Western blot检测示ox-LDL组NOX2、p22phox的mRNA和蛋白表达水平较对照组、pCon组显著升高,LOX-1-siRNA+ox-LDL组NOX2、p22phox的m RNA和蛋白表达水平较ox-LDL组则明显下降。结论:LOX-1与ox-LDL作用可使巨噬细胞NOX2、p22phox表达增加,进而促进ROS生成,LOX-1在ox-LDL诱导的巨噬细胞氧化应激中起促进作用。

血清胱抑素C、凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对不稳定型心绞痛的诊断价值

目的探讨血清胱抑素C(CysC)、凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(Lox-1)及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对不稳定型心绞痛(unstable angina pectoris,UAP)的诊断价值。方法选取50例UAP患者为UAP组,30例稳定型心绞痛(stable angina pectoris,SAP)患者为SAP组以及30例健康体检者为对照组。分别检测三组受试患者血清CysC、Lox-1及GM-CSF水平,并绘制受试者工作曲线(ROC)分析各指标对UAP的诊断价值。结果 UAP组患者血清CysC、Lox-1及GM-CSF水平显著高于SAP组和对照组,差异均具有显著性(P<0.05)。UAP组中,随着病情的加重,患者血清CysC、Lox-1及GM-CSF表达水平及阳性率也显著升高,差异具有显著性(P<0.05)。ROC分析显示,CysC、Lox-1、GM-CSF诊断UAP的最佳临界值分别为CysC>0.90mg/L、Lox-1>221.52ng/L、GM-CSF>0.36μg/L,各因子诊断UAP的灵敏度分别为86.0%、64.0%、90.0%,特异度为60.0%、86.7%、76.7%。结论 UAP患者血清CysC、Lox-1、GM-CSF水平异常升高,其浓度随UAP危险程度的增加而增加,测定血清CysC、Lox-1、GM-CSF水平对UAP的诊断具有重要参考价值。

葡萄糖和厄贝沙坦对单核巨噬细胞系凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体表达的影响

目的研究不同浓度葡萄糖和厄贝沙坦对人单核巨噬细胞系(THP-1)凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体mRNA及蛋白表达的影响,并探讨其可能的机制。方法 THP-1细胞经0.16μmol/L佛波酯诱导分化72 h后,将细胞分为对照组、不同浓度葡萄糖组(5、8、12和15 mmol/L)和厄贝沙坦干预组,葡萄糖组将不同浓度葡萄糖与诱导分化的巨噬细胞孵育24 h,厄贝沙坦干预组用厄贝沙坦预先孵育2 h后,再加入15 mmol/L葡萄糖共同孵育24 h。用荧光定量PCR和细胞酶联免疫法检测凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体mRNA和蛋白的表达。结果与对照组相比,5 mmol/L葡萄糖组凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体mRNA及蛋白表达差异无显著性(P>0.05),其余高糖组该受体mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05),并且其表达呈浓度依赖性;厄贝沙坦可显著抑制此作用,使该受体表达明显降低。结论高糖以浓度依赖方式上调凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体mRNA和蛋白的表达,这可能是导致动脉粥样硬化发生的机制之一;厄贝沙坦可显著抑制这一作用,可能在抗动脉粥样硬化中起作用。

糖基化终产物对凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达的影响

目的研究长期高血糖所致糖基化终产物对巨噬细胞凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达的影响。方法 U937细胞经佛波酯诱导分化,并将不同浓度或同一浓度糖基化终产物与诱导分化48 h后的U937细胞共同孵育,用Western Blotting法检测凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白的表达。同时应用ELISA法测定24例2型糖尿病患者及22例正常对照者血清可溶性氧化型低密度脂蛋白受体1的含量。结果 100、200和400 mg/L糖基化终产物刺激后细胞表面凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白表达量分别是对照组的1.85、3.22和4.65倍(P<0.05);400 mg/L的糖基化终产物作用12、24、48 h后,U937巨噬细胞该受体蛋白表达量分别为0 h的2.85、3.89和4.3倍(P<0.05)。糖尿病患者血清氧化型低密度脂蛋白受体1及糖基化终产物含量较正常对照者显著升高(P<0.01),两者呈正相关(P<0.001)。结论糖基化终产物可增加U937巨噬细胞凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白表达且呈浓度和时间依赖性。这可能与糖尿病患者加速泡沫细胞形成而易致动脉粥样硬化有关。

新型C型凝集素受体mincle的研究进展

巨噬细胞诱导型C型凝集素受体mincle是一种新发现的非经典型C型凝集素受体，主要表达于抗原递呈细胞表面，可以在某些真菌、结核分枝杆菌、坏死细胞的刺激下与相关配体结合，激活核因子-κB（NF—κB）途径，引起炎性因子的表达，从而在宿主的固有免疫应答过程中发挥一定的作用。目前，mincle受体在一些免疫相关疾病中作用机制的研究成为热点，但关于其在眼科炎性感染性疾病中作用的研究甚少，深入研究mincle受体与眼科感染性疾病的关系可以为相关疾病的免疫治疗提供新的思路。就mincle受体的基本概念、作用机制、与炎性疾病的关系以及其在眼科疾病研究中的展望进行综述。

巨噬细胞甘露糖受体的结构与功能

巨噬细胞甘露糖受体属于哺乳动物类C型凝集素超家族成员,主要表达于巨噬细胞和未成熟树突状细胞表 面,不仅在抵抗病原体感染的天然免疫防御中起重要作用,还参与抗原提呈和获得性免疫应答。

PaCLR介导PaLECT2激活脂多糖刺激的香鱼(Plecoglossus altivelis)单核巨噬细胞功能

香鱼(Plecoglossus altivelis)白细胞衍生趋化因子2(leukocyte cell-derived chemotaxin 2,PaLECT2)可以激活香鱼头肾来源的单核巨噬细胞(monocytes/macrophages,MO/MΦ),提高细菌感染后香鱼存活率。进一步研究显示,PaLECT2与香鱼C型凝集素受体(C-type lectin receptor,PaCLR)相互作用可激活静息状态下香鱼MO/MΦ,增强其免疫活性。在前期基础上,本研究通过抗体封闭实验检测PaCLR是否介导PaLECT2激活LPS刺激的MO/MΦ功能。结果显示,重组PaLECT2成熟肽(rPaLECT2m)显著提高了LPS刺激的香鱼MO/MΦ细胞因子的表达,并增强了其吞噬能力和杀菌活性。封闭PaCLR显著抑制了rPaLECT2m激活LPS刺激的香鱼MO/MΦ细胞因子表达、吞噬和杀菌功能。因此,PaCLR介导PaLECT2可以激活病理状态香鱼MO/MΦ。这一认识进一步揭示了LECT2在病理状态的鱼类巨噬细胞调控和炎症反应中的作用及机制。

巨噬细胞诱导型C型凝集素受体在脑梗死中的研究进展

脑卒中是全球死亡和致残的主要原因,其中脑梗死发病率占所有脑卒中的近80%[1].目前应用最广泛的脑梗死治疗手段是溶栓,但需在4.5 h的时间窗内完成,并且仍伴随着神经元缺血损伤和再灌注引起的脑组织损伤,因此需要一种可以靶向调节神经保护且不只是溶解凝块的有效治疗方法[2]。

蛇床子素调节Mincle/Syk/NF-κB信号通路对肾病综合征大鼠的治疗作用

目的:探讨蛇床子素(OST)调节巨噬细胞诱导性C型凝集素样受体(Mincle)/脾脏酪氨酸激酶(Syk)/核因子κB(NF-κB)信号通路对肾病综合征(NS)大鼠的治疗作用。方法:随机选择10只大鼠记为N组,其它大鼠构建NS模型,将建模成功的50只大鼠随机平分为NS组(模型组)、L-OST组(10mg/kg OST)、M-OST组(20mg/kg OST)、H-OST组(40mg/kg OST)、H-OST+TDB组(40mg/kg OST+50μg TDB/周),OST每天注射1次,连续治疗4周。ELISA法检测血清中炎性因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)、氧化应激指标(SOD、MDA、LDH)、24h尿液中UP水平;通过全自动化学分析仪检测BUN、Scr水平;HE染色以及Masson染色检测肾脏病理变化;TUNEL染色检测肾脏细胞凋亡;Western blot检测collagen I、Ly6g、Ki-67、Mincle/Syk/NF-κB通路蛋白表达。结果:N组肾组织结构正常,染色清晰,NS组出现大量间质炎性细胞浸润、肾小管萎缩、大量空泡的现象,NS组较N组24h UP、Scr、BUN含量、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、LDH水平、胶原容积分数、凋亡率、collagen I、Ly6g、Ki-67、Mincle、Syk、p-NF-κB/NF-κB蛋白水平均显著升高(P<0.05),SOD水平显著下降(P<0.05);与NS组相比,L-OST组、M-OST组、H-OST组均改善炎性细胞浸润、肾小管萎缩现象,24h UP、Scr、BUN含量、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、LDH水平、胶原容积分数、凋亡率、collagen I、Ly6g、Ki-67、Mincle、Syk、p-NF-κB/NF-κB蛋白水平均显著下降(P<0.05),SOD水平显著升高(P<0.05),且H-OST组治疗效果最佳;TDB消除了OST对NS大鼠肾损伤的改善作用。结论:OST可能通过抑制Mincle/Syk/NF-κB信号通路减轻OST大鼠的肾损伤。

辛伐他汀对氧化型低密度脂蛋白及葡萄糖诱导的LOX-1表达的不同作用

目的研究辛伐他汀干预对于氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)及葡萄糖诱导的巨噬细胞表面血清凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体(LOX)-1表达的影响,以及核因子(NF)-κB的作用。方法 U937细胞经佛波酯诱导分化后,将含有50 mg/L ox-LDL和(或)25 mmol/L葡萄糖的培养液与上述细胞共同孵育,应用吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)及不同浓度辛伐他汀(1、10μmol/L)干预上述细胞,干预前后用ELISA检测LOX-1蛋白的表达及NF-κB的活性,RT-PCR检测LOX-1 mRNA含量。结果 ox-LDL、高糖及联合组均上调LOX-1表达,NF-κB的抑制剂PDTC可以抑制其作用,辛伐他汀可以下调ox-LDL诱导的LOX-1表达增加,且高浓度下调明显;但辛伐他汀对于高糖诱导LOX-1表达无明显影响。各组间NF-κB活性改变与LOX-1表达基本一致。结论辛伐他汀可以下调ox-LDL诱导的巨噬细胞LOX-1表达,但对葡萄糖诱导的LOX-1表达无明显影响,LOX-1表达调控与NF-κB信号途径有关。

枸杞多糖通过MGL/TLR信号通路调控巨噬细胞RAW264.7的活化

目的:探讨枸杞多糖(LBP)促进巨噬细胞RAW264.7活化的机制。方法:采用不同浓度(50、100、200 mg·L^(-1))的LBP刺激巨噬细胞RAW264.7,以100μg·L^(-1)的脂多糖(LPS)和100 mg·L^(-1)半乳糖(Gal)作为阳性药。LBP刺激24 h后,采用细胞增殖与活性检测试剂盒(CCK-8)检测不同给药浓度的LBP(0、50、100、200、400、800 mg·L^(-1))对巨噬细胞RAW264.7的毒性影响;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞培养上清中白细胞介素(IL)-6、IL-12的水平;分别通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测巨噬细胞RAW264.7 Toll样受体4(TLR4)/Toll样受体2(TLR2)/巨噬细胞半乳糖型凝集素(MGL)通路中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和核转录因子-κB(NF-κB) mRNA及蛋白表达水平;结果:CCK-8结果显示,与空白组比较,400、800 mg·L^(-1)LBP组干预巨噬细胞RAW264.7时,细胞存活率下降(P<0.05)。ELISA结果显示,与空白组比较,50 mg·L^(-1)LBP能够促进巨噬细胞RAW264.7分泌IL-12水平(P<0.01);与空白组比较,100、200 mg·L^(-1)LBP能够促进巨噬细胞RAW264.7分泌IL-6水平(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示,与空白组比较,不同质量浓度的LBP组(50、100、200 mg·L^(-1))作用于巨噬细胞RAW264.7能够增强TLR4、TLR2和MGL通路中MAPK关键分子(p-p38 MAPK、p-ERK、p-NF-κB、p-JNK)的蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,200 mg·L^(-1)LBP组能够促进巨噬细胞RAW264.7p-NF-κB蛋白表达水平(P<0.01)。Real-time PCR结果显示,与空白组比较,不同质量浓度的LBP组(50、100、200 mg·L^(-1))作用于巨噬细胞RAW264.7能够增强TLR4、TLR2信号通路中MAPK关键分子p38 MAPK、ERK、NF-κB、JNK的mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,50、200 mg·L^(-1)LBP组能够促进巨噬细胞RAW264.7 JNK、ERK2 mRNA的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:LBP能够通过TLR2/TLR4//MGL通路调控巨噬细胞RAW264.7的活化,参与免疫应答。

骨质疏松分子生物学研究专家共识

骨质疏松分子生物学研究在骨代谢分子信号通路、骨质疏松易感基因、骨质疏松相关蛋白、骨质疏松靶向治疗等方向取得了很大进展。核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)信号通路、核因子κB受体活化因子(NF-κB)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/ERK)信号通路、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)信号通路、钙离子(Ca^(2+))信号通路、酪氨酸激酶、蛋白激酶B(Src、Akt)信号通路、蛋白激酶C(PKC)信号通路等骨代谢重要通路,维生素D受体(VDR)基因、低密度脂蛋白相关蛋白5(LRP5)基因、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因、雌激素受体(ER)基因等易感基因,载脂蛋白E(Apo E)、Klotho蛋白(Klotho)、骨形态发生蛋白(BMP)、骨涎蛋白(BSP)等相关蛋白,以直接或间接的方式参与调控骨代谢,作用重叠相互联系,互为结果,已在本专业领域达成共识。

血清CysC、Lox-1、GM-CSF水平变化与不稳定型心绞痛患者病情程度的相关性

目的分析血清粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(Lox-1)、胱抑素C(Cys C)水平变化与不稳定型心绞痛患者病情程度的相关性。方法选取本院2015年4月至2017年12月收治的不稳定型心绞痛患者73例设为研究组,其中重度28例、中度23例、轻度22例。另选同期稳定型心绞痛患者71例设为对照1组,同期健康体检者69例设为对照2组。比较3组及研究组不同病情程度不稳定型心绞痛患者血清GM-CSF、Lox-1、Cys C水平,分析血清GM-CSF、Lox-1、Cys C水平变化与不稳定型心绞痛患者病情程度的相关性。结果 3组血清GM-CSF、Lox-1、Cys C水平对比,差异均有统计学意义(均P<0.05);研究组血清GMCSF、Lox-1、Cys C水平分别为(0.44±0.07)μg/L、(228.92±32.83) ng/L、(1.14±0.33) mg/L,较对照1组、对照2组高,差异均有统计学意义(均P<0.05);不同病情程度不稳定型心绞痛患者血清GM-CSF、Lox-1、Cys C水平对比,差异均有统计学意义(均P<0.05),且重度不稳定型心绞痛患者血清GM-CSF、Lox-1、Cys C水平较轻、中度患者高,差异有统计学意义(P<0.05);血清GM-CSF、Lox-1、Cys C水平变化与不稳定型心绞痛患者病情程度呈正相关(P<0.05)。结论不稳定型心绞痛患者血清GM-CSF、Lox-1、Cys C水平呈异常高表达且与病情严重程度正相关。