梭形住肉孢子虫和巨型住肉孢子虫包囊各部分的免疫特性研究

运用对流免疫电泳(CIE)和酶联免疫吸附试验(ELISA)对梭形住肉孢子虫和巨型住肉孢子虫的包囊壁、包囊液、缓殖子及全色囊抗原的免疫特性进行了比较研究。结果表明:缓殖子抗原对抗血清的免疫反应最强.

梭形住肉孢子虫和巨型住肉孢子虫抗原的免疫特性研究

运用 ＣＩＥ和 ＥＬＩＳＡ对两种住肉孢子虫全包裹抗原及包裹各部分抗原的免疫特性进行了分析研究；结果表明；两种住肉孢子虫与同种或异种住肉孢子虫阳性血清具有强烈的交叉反应，包囊各部分抗原以缓殖子抗原免疫反应最强．

青海巨型住肉孢子虫线粒体cox1基因的克隆及进化分析

为了研究青海省巨型住肉孢子虫线粒体细胞色素C氧化酶第一亚基(cox1)基因部分序列(pcox1)的遗传变异情况,并用pcox1序列构建巨型住肉孢子虫与其他住肉孢子虫的种群遗传关系。利用PCR技术扩增巨型住肉孢子虫的pcox1,将测序所获序列进行比对,并进行同源性分析和系统发育树的构建。结果显示,所获得的pcox1序列长度均为968 bp,与GenBank已公布的巨型住肉孢子虫相似度为99.1%~99.8%。系统发育树表明,所有分离株与已知巨型住肉孢子虫位于同一分支。巨型住肉孢子虫pcox1序列种内相对保守(0.2%~0.7%),种间差异较大(6.8%~20.8%),可用作种间遗传变异研究的标记。

藏羊巨型住肉孢子虫体外培养方法的建立

为了建立青海藏羊巨型住肉孢子虫体外培养方法,以贴壁生长和形态完整的非洲绿猴肾细胞(Vero)作为宿主细胞,将青海藏羊巨型住肉孢子虫缓殖子(1.25×104个/mL)接种于宿主细胞,连续培养21d,期间观察记录其生长发育状况。结果表明,藏羊巨型住肉孢子虫在Vero细胞中生长良好,并在培养液中观察到游离的虫体卵囊,21d后均可分离、纯化出新一代的缓殖子。说明在实验室条件下,成功建立了藏羊巨型住肉孢子虫稳定的体外培养方法。

基于巨型住肉孢子虫SPFH-SG蛋白ELISA方法的建立

本试验以藏绵羊食道肌巨型住肉孢子虫(Sarcocystis gigantea)SPFH-SG蛋白为研究对象,通过基因克隆及蛋白表达,建立了一种特异性、重复性均良好的间接ELISA检测方法,为藏羊住肉孢子虫病的批量临床检测提供技术方案。