SE-hBCG对重组巨细胞病毒糖蛋白B及冻干人用狂犬病疫苗免疫原性的影响

目的探讨含角鲨烯的水包油纳米乳剂-热灭活卡介苗(SE-hBCG)对重组巨细胞病毒糖蛋白B(CgB)及冻干人用狂犬病疫苗(Rab)免疫原性的影响。方法选取145只SPF级6~8周龄雌性BALB/c小鼠进行以下实验。实验1:取25只小鼠,分成SE组、SE-hBCG组、CgB组、SE+CgB组、SE-hBCG+CgB组等5组,每组5只;于实验开始第0、2、4周分别给每只小鼠肌内注射SE、SE-hBCG、CgB、SE+CgB、SE-hBCG+CgB各0.2 ml,末次免疫后2周解剖小鼠。实验2:取120只小鼠,分成PBS组、Rab组、SE+Rab组、SE-hBCG+Rab组等4组,每组30只;于实验开始第0周及第1周每只小鼠分别腹腔注射PBS、Rab、SE+Rab、SE-hBCG+Rab各0.2 ml,于初免后第4、8、10、12、14、35天各解剖5只小鼠。无菌摘取小鼠脾脏,制备脾淋巴细胞悬液,采用酶联免疫斑点实验(ELISPOT)检测抗原特异的IFN-γ或IL-4的斑点形成细胞数(IFN-γ-SFC或IL-4-SFC);取小鼠眼球血,离心后收集血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗原特异的IgG水平。结果SE-hBCG组诱导小鼠产生CgB特异的IFN-γ-SFC(266.0±87.9)高于SE组(104.5±28.8,P<0.05);SE-hBCG+CgB组诱导小鼠产生抗-CgB IgG抗体滴度(18800.0±2396.0)及CgB特异的IFN-γ-SFC(440.5±38.4)高于CgB组(抗体滴度为3333.0±737.9,IFN-γ-SFC为189.2±21.4,P<0.05)。SE+Rab或SE-hBCG+Rab初免后第4天可诱导低水平抗-Rab IgG抗体(OD450≤0.2);Rab、SE+Rab及SE-hBCG+Rab组抗-Rab IgG抗体均于初免后第12天达到峰值;SE-hBCG+Rab组于初免后第8、10、14及35天检测的抗-Rab IgG抗体(分别为1700.0±200.0、19400.0±1661.3、23000±358.9、23600.0±6038.2)均高于Rab组(分别为310.0±97.9、6730.0±1655.4、6000.0±1655.6、4400.0±1655.5,P<0.05)。SE-hBCG+Rab组初免后第4、8、14及35天检测的Rab特异IFN-γ-SFC(分别为110.8±52.5、213.0±29.7、105.2±33.7、80.4±36.8)均高于对照组(分别为6.4±3.5、32.2±12.9、11.4±5.1、4.4±2.5,P<0.05)。结论SE-hBCG可增强CgB及Rab的免疫原性,是一种较好的免疫增强剂。

人巨细胞病毒糖蛋白B基因分型与婴幼儿感染致病的相关性研究

目的探讨不同人巨细胞病毒糖蛋白B基因分型与婴幼儿感染致病间的关系。方法临床采集200例婴幼儿感染HCMV血液标本,采用巢式PCR检测130例婴儿肝病综合征患者、33例血小板减少症患者和37例神经性耳聋患者标本中HCMV的gB基因,并通过限制性片段长度多态性分析(RFLP)对gB基因进一步分型。分析HCMV及其不同gB基因型与上述婴幼儿感染致病的关系。结果婴儿肝病综合征患者中gB基因型主要以gB1型为主,占56.9%;血小板减少症患者中gB基因型分布较均衡,各gB分型无特异性;而在神经性耳聋患者中,gB基因型主要为gB4型,占40.5%,其次为gB1型占24.3%。不同gB基因型HCMV感染患者在婴儿肝病综合征和神经性耳聋中的分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论婴儿肝病综合征和神经性耳聋与HCMV的gB分型密切相关,而血小板减少症无直接关系。