差相富集-免疫荧光原位杂交技术检测膀胱癌患者循环肿瘤细胞的初步研究

目的利用差相富集-免疫荧光原位杂交技术(subtraction enrichment and immunostainingfluorescence in situ hybridization,SE-iFISH)检测膀胱癌患者外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs),并探究该检测结果与肿瘤临床特征的关系。方法收集2016年4~6月收治入院的16例膀胱癌患者(实验组)临床病理资料,其中男14例,女2例,年龄(66.88±8.97)岁。另取10例非肿瘤患者为对照(对照组),其中男7例,女3例,年龄(61.90±9.13)岁。取外周静脉血各6mL,差相富集法收集外周血CTCs,肿瘤细胞标志物-iFISH检测6mL血中所有CTCs的数量及相关生物学特性,比较CTCs的数量与膀胱癌临床特征(有无血尿、肿瘤大小、数目、是否侵及肌层、原发肿瘤分期、淋巴结转移、肿瘤级别、肿瘤病理学类型等)的关系。结果实验组CTCs阳性检出率为43.75%(7/16),对照组CTCs阳性检出率为0%(0/10),两组阳性检出率差异有统计学意义(P=0.022 7)。实验组CTCs含量为0~29个,中位数为0个,对照组CTCs含量为0个,两组CTCs含量差异有统计学意义(P=0.028 3)。实验组中,有无血尿、肿瘤大小、数目、是否侵及肌层、原发肿瘤分期、淋巴结转移、肿瘤级别、肿瘤病理学类型等亚组之间,CTCs阳性检出率的差异无统计学意义。结论 SE-iFISH检测膀胱癌外周血CTCs可行性好。关于CTCs含量与膀胱癌患者临床特征的关系尚不肯定,需更大样本量予以说明。

皮肤肿瘤患者外周血循环肿瘤细胞与循环肿瘤血管内皮细胞检测的临床价值

目的探究循环肿瘤细胞(CTC)与循环肿瘤血管内皮细胞(CTEC)检测在皮肤恶性肿瘤中的临床运用价值。方法采用差相富集-免疫荧光染色结合染色体荧光原位杂交(SE-iFISH)方法检测5例皮肤恶性肿瘤患者(肿瘤组)以及14例健康人(健康组)外周血中CTC及CTEC数量,计算检出率,分析肿瘤组CTC/CTEC的亚类分型特征以及CTC/CTEC数量与患者临床特征的相关性。结果肿瘤组CTC及CTEC阳性检出率均为100%,外周血中CTC平均值为(6.93±8.18)个/mL,CTEC平均值为(1.60±1.03)个/mL;健康组CTC及CTEC阳性检出率均为64%,外周血中CTC平均(0.19±0.21)个/mL,CTEC平均(0.30±0.33)个/mL。肿瘤直径较大、伴淋巴结转移、临床分期为Ⅲ、Ⅳ期患者CTC及CTEC水平较高。肿瘤患者大细胞CTC占总数的88.46%(184/208),大细胞CTEC占总数的81.25%(39/48),且主要为≥五倍体CTC和CTEC。结论皮肤肿瘤患者CTC/CTEC检出率较高;CTC及CTEC数量与患者临床特征具有密切关系;皮肤肿瘤外周血中大细胞多倍体CTC和CTEC比例高于其他亚型。

小细胞肺癌患者骨髓肿瘤细胞的检测及其临床价值

目的探讨小细胞肺癌(SCLC)患者骨髓肿瘤细胞的检测与临床特征及疗效和预后的关系。方法前瞻性纳入2018年1月至2022年10月首都医科大学附属北京胸科医院诊断的初治SCLC患者113例,治疗前抽取骨髓液分别采用液基细胞学检测肿瘤细胞、采用差相富集-免疫荧光原位杂交(SE-iFISH)平台检测播散肿瘤细胞(DTCs)。采用χ^(2)检验分析两种方法检测结果与患者临床特征及疗效的相关性,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,采用Cox比例风险回归模型进行生存分析。结果骨髓液基细胞学阳性率为15.93%(18/113),液基细胞学阳性患者中肝及骨转移率均高于阴性患者(肝转移率分别为55.56%和11.58%;P<0.001;骨转移率分别为77.78%和16.84%,P<0.001),血小板减低更多见(16.67%和2.11%,P=0.033)。SE-iFISH检测DTCs阳性率为92.92%(105/113),DTCs≥111个/3 ml的患者中肝及骨转移率均明显高于DTCs<111个/3 ml的患者(肝转移率分别为37.93%和11.90%,P=0.002;骨转移率分别为44.83%和20.23%,P=0.010),血小板减低发生率明显升高(13.79%和1.19%,P=0.020)。疾病控制组和疾病进展组的骨髓液基细胞学阳性率分别为12.00%(12/100)和46.15%(6/13),差异有统计学意义(P=0.002),骨髓SE-iFISH检测DTCs分别为29(8,110)个/3 ml和64(15,257)个/3 ml,差异无统计学意义(P=0.329)。骨髓液基细胞学阳性患者中位无进展生存时间(PFS)为6.33个月,低于阴性患者(中位PFS为9.27个月,P=0.019),中位总生存时间(OS)为8.03个月,亦低于阴性患者(中位OS为19.50个月,P=0.033)。骨髓SE-iFISH检测DTCs≥111个/3 ml患者的中位PFS为6.83个月,低于DTCs<111个/3 ml患者(中位PFS为9.50个月,P=0.004),中位OS为11.20个月,也低于DTCs<111个/3 ml患者(中位OS为20.60个月,P=0.019)。多因素Cox回归分析显示,疾病分期(HR=2.806,95%CI:1.499~5.251,P=0.001)和骨髓SE-iFISH检测DTCs数量(HR=1.841,95%CI:1.095~3.095,P=0.021)是SCLC患者PFS的独立影响因素,疾病分期是SCLC患者OS的独立影响因素(HR=2.538,95%CI:1.169~5.512,P=0.019)。结论骨髓液基细胞学检测肿瘤细胞和SE-iFISH检测DTCs两种方法临床可行,液基细胞学阳性或DTCs≥111个/3ml均与患者远处脏器转移相关,DTCs≥111个/3 ml是SCLC患者较差PFS的独立影响因素。

循环肿瘤细胞和循环肿瘤内皮细胞对鼻咽癌治疗的应答变化及其意义

目的 探究鼻咽癌患者各治疗阶段循环肿瘤细胞(circulating tumor cell, CTC)及循环肿瘤内皮细胞(circulating tumor endothelial cell, CTEC)与治疗方式的关系。方法 回顾性收集2016年3月-2019年11月在四川大学华西医院就诊的不同治疗阶段鼻咽癌患者,通过差相富集-瘤标免疫荧光染色-染色体原位杂交进行CTC检测,部分患者进行CTEC检测,分析CTC及CTEC与鼻咽癌患者放疗及化疗之间的关系,并探究鼻咽癌CTC与CTEC之间的相关性。结果 共纳入191例鼻咽癌患者,其中初治治疗前66例,诱导化疗后38例,同步放化疗后87例;127例患者行CTEC检查,其中初治治疗前41例,诱导化疗后29例,同步放化疗后57例。各治疗阶段组患者CTC阳性率分别为89.4%、81.6%以及69.0%,其中仅初治治疗前组与同步放化疗后组差异有统计学意义(P=0.003);同步放化疗后组CTC数目分别较初治治疗前组、诱导化疗后组减少(P<0.001,P=0.002);同步放化疗后组三倍体CTC数目与初治治疗前组、诱导化疗后组差异有统计学意义(P=0.009,P=0.013);同步放化疗后组四倍体CTC数目与诱导化疗后组差异有统计学意义(P=0.007);同步放化疗后组多倍体(五倍体或8号染色体拷贝数>5)CTC数目与初治治疗前组差异有统计学意义(P<0.001)。各治疗阶段组患者CTEC阳性率分别为70.7%、82.8%以及64.9%,差异无统计学意义(P>0.05);同步放化疗后组CTEC数目仅较诱导化疗后组减少(P=0.009);各组间三倍体、四倍体CTEC数目差异无统计学意义(P=0.265,P=0.088);多倍体CTEC数目仅同步放化疗后组与诱导化疗后组之间差异有统计学意义(P=0.007)。Spearman相关性分析结果显示,CTC和CTEC之间呈正相关关系(rs=0.437,P<0.001)。结论 同步放化疗对鼻咽癌患者血液CTC数目的减少起着重要作用,而诱导化疗似乎并不会直接引起CTC数目的改变。鼻咽癌患者中,不同倍型CTC对不同治疗方式所产生的应答不同。鼻咽癌CTEC水平与CTC水平呈正相关关系。

老年食管胃交界腺癌患者循环肿瘤细胞检测的临床意义

目的通过检测老年食管胃交界腺癌(AEG)患者外周血中的循环肿瘤细胞(CTCs),探讨CTCs与老年AEG患者临床特征及预后的关系。方法回顾性分析聊城市人民医院2016年8月至2020年5月95例老年AEG患者的临床资料,治疗前的1周均采用阴性富集-免疫荧光原位杂交技术(NE-FISH)检测CTCs,分析CTCs计数阳性与患者临床特征的关系,通过随访获取老年AEG患者无进展生存期(PFS)及总生存期(OS),采用Kaplan-Meier法进行生存分析,Cox回归分析CTCs计数与老年AEG患者预后指标(PFS、OS)的关系。结果95例老年AEG患者CTCs阳性(CTCs≥2)率为72.6%(69/95)。老年AEG患者CTCs阳性与患者脉管内瘤栓、TNM病理分期、T分期、淋巴结转移、是否手术均密切相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析示,与CTCs<2组比较,CTCs≥2组老年AEG患者中位PFS(12个月vs 50个月)及中位OS更短(20个月vs 50个月),差异有统计学意义(P<0.01)。结论运用NE-FISH技术对老年AEG患者行外周血CTCs检测是可行的,CTCs阳性与老年AEG患者肿瘤转移、病情进展密切相关,CTCs≥2可能是老年AEG患者预后不良的预测指标。