己烯雌酚在UV-Vis/Fe(Ⅲ)/H_2O_2体系中的光降解

以250W高压汞灯为光源研究了水中己烯雌酚(DES)在UV-Vis/Fe(Ⅲ)/H2O2体系中的光降解和矿化情况,考查了初始pH值、H2O2初始浓度、DES初始浓度对DES光降解的影响。结果表明,UV-Vis/Fe(Ⅲ)/H2O2体系能有效光降解和矿化DES。在pH3.0～7.0范围内,pH初始值越小,DES降解率越大;在1000～4000"mol·L-1范围内,H2O2初始浓度越大,DES降解率越大;DES初始浓度越低,其降解率越高。当Fe(Ⅲ)浓度为10.0"mol·L-1,H2O2浓度为1000"mol·L-1,pH3.0条件下,光照80min时,10.0mg·L-1的DES的降解率可达100%,光照120min时,10.0mg·L-1的DES的矿化率可达95.0%。

SPE-HPLC同时测定水产品中己烯雌酚、甲基睾酮的研究

目的:固相萃取高效液相色谱法同时测定水产品中己烯雌酚(DES)、甲基睾酮(MET)的残留量。方法:固相萃取小柱为AlltechExtract cleancolumnsC18,2 0 0mg/ 4.0ml,洗脱液为甲醇;色谱柱为SUPELCODiscoveryC185 μm2 5 0×4.6mm ,流动相为:甲醇∶水=75∶2 5 (V/V) ,流速为1 0ml/min ,二极管阵列检测器,检测波长为2 4 5nm。结果:该方法的线性范围为:0.5～10.0 μg/ml;标准曲线线性良好,其回归方程及相关系数r分别为己烯雌酚:y =6 1 3 10 4 2x+ 2 3 86 15 ,r =0 99994 ;甲基睾酮:y =6 6.5 5 4 2 7x + 2.3 2 4 91 ,r =0.99994。最低检出限分别为:己烯雌酚9 5 μg/kg ;甲基睾酮5 4μg/kg ;回收率在95 %～10 2 %之间,相对标准偏差小于1.3 %。结论:该方法操作简便、快捷。

己烯雌酚对雌性BALB/c小鼠脾细胞凋亡影响的动态观察

目的了解新生期注射己烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)对雌性BALB/c小鼠生后不同时期脾细胞凋亡及Bcl-2、Bax的影响。方法新生雌性BALB/c小鼠,在生后24h内颈背部皮下注射DES40μg,每隔24h注射一次,共连续5次,对照组平行注射等量无菌豆油。分别在生后7、14、21、35和49d将小鼠处死,取其脾进行常规石蜡包埋和切片,进行TUNEL(TdT-mediated dUTP nick endlabeling,)检测以及Bcl-2、Bax的免疫组织化学检测。结果与对照组相比,DES组雌性BALB/c小鼠脾细胞的TUNEL阳性细胞数目在生后各点均有显著性增加。Bcl-2在各时间点DES组的表达均弱于相应的对照组。Bax在生后7d的对照组和DES组中的表达差异无统计学意义,而在生后14、21、35和49d DES组的阳性表达明显多于对照组。结论新生期注射DES可以导致雌性BALB/c小鼠脾细胞凋亡明显增加。细胞凋亡在对照组和DES组不同时间点的动态变化以及在两组间相同时间点的差异可能与Bcl-2表达的减少以及Bax表达的增加有关。

己烯雌酚对小鼠H_(22)肝癌细胞肺转移的作用

目的 :探讨己烯雌酚 (diethylstilbestrol,DES)对小鼠H2 2 肝癌细胞在小鼠体内造成肺转移的影响及其机制 .方法 :将 1 0 0只小鼠随机分为注射生理盐水对照组 (A组 ) ,注射芝麻油对照组 (B组 ) ,注射不同剂量DES用药组 (C、D、E组 ) .采用尾ivH2 2 肿瘤细胞的方法制作肿瘤转移模型 .观察动物肺转移灶及组织切片 .采用硝酸还原酶法测定昆明小鼠血清中一氧化氮 (NO)含量 .采用TYXN 91智能血液凝集仪测定用ADP诱导的血小板聚集率 .并进行出血时间测定 .结果 :C、D、E组小鼠肺表面转移灶数目分别为 6 .1± 2 .5 ,6 .1± 5 .2 ,4 .9± 2 .2较A、B组 (7.3± 3.5 ,8.5± 3.7)有不同程度的明显减少(P <0 .0 5 ) .与A、B组相比 ,用药组 (C、D和E组 )血清NO含量有明显升高 (P <0 .0 5 ) ,血小板聚集率明显降低 (A ,B ,C ,D ,E组分别为 (31± 1 9) % ,(37± 1 7) % ,(1 2± 6 ) % ,(1 4±1 3) % ,(1 3± 1 2 ) % (P <0 .0 5 ) ,出血时间明显延长 (P <0 .0 5 ) .结论 :DES可能通过促进NO释放 ,降低血小板聚集功能来抑制肿瘤转移 .

Cu_2O光催化降解水中环境内分泌干扰物己烯雌酚性能的研究

采用水解法制备Cu2O,以Cu2O为催化剂,对光催化降解环境内分泌干扰物己烯雌酚(DES)的性能和影响因素进行了研究,利用高效液相色谱法(HPLC)测定降解后水中DES的含量。探讨了溶液的初始浓度、催化剂投加量、pH值以及光照时间对降解效率的影响。当DES初始浓度为5μg/mL,催化剂投加量为0.8g/L,pH值=4.0,光照120min的条件下降解效果达95.02%。

己烯雌酚促验进实动物卵泡发育同步化及其机制的初步研究

目的观察人工合成的非甾体化合物己烯雌酚（DEs）对性成熟前小鼠和大鼠卵巢中卵泡发育的影响，以及出现有卵泡同步化机理。方法取性成熟前雌性小鼠和大鼠，腹腔注射一定剂量的DES，然后取卵巢经连续切片和HE染色后，统计整个卵巢内三级卵泡数量。同时，取卵巢利用免疫组织化学和免疫印迹方法，分别检测泛素末端水解酶LI（UCH-L1），c-Jun结合蛋白l（Jabl）和细胞周期素依赖激酶抑制因子p27KipI在小鼠卵巢中的定位和含量。结果UCH-LI定位在卵巢中各级卵泡的卵母细胞中，Jab1分布于次级和三级卵泡的卵母细胞核中，而p27KipI广泛分布于卵巢各类细胞中。免疫组化结果显示，仅就卵母细胞而言，由于DES的处理，UCH—L1和Jab1的表达信号增强，而p27KipZ的信号变弱，与肿瘤细胞中的情况类似。然而，免疫印迹分析结果表明，以上3种蛋白在卵巢中相对b-actin的含量因DES处理而均呈现一定程度的上升变化趋势。青春前期的小鼠，在1-4周龄期间，卵巢中UCH．L1和p27KiPI的蛋白量随着周龄增加的趋势，而Jab1的变化趋势不明显。结论腹腔注射DES或导致卵巢内卵泡发育同步化，其中涉及的机理可能是，UCH-L1及其关联蛋白Jab1导致p27KiPI在卵母细胞核中的含量下降，进而导致了多个卵泡的卵母细胞同时发育启动。

CTMAB催化增敏分光光度法测定食品中的己烯雌酚

利用CTMAB（三甲基十六烷基溴化铵）具有相转移催化和增敏络合体系等特性，建立了用可见分光光度法测定己烯雌酚（DES）的方法。研究表明，DES能将Fe（Ⅲ）还原成Fe（Ⅱ），Fe（Ⅱ）与k[Fe（CN）61在CTMAB存在的环境下形成稳定的多元胶束络合体系，其最大吸收波长在736nm处。DES的质量浓度在0．03256～0．6521ug／mL范围内与吸光度呈良好线性关系，线性回归方程A=0．0027＋0．3990P（μg／mL），相关系数R2=0．9991，摩尔吸光系数s=5．43×105（L·mol-1·cm-1），检出限1．35μg／mL，相对标准偏差为0．89％，方法用于测定奶粉中DES含量，回收率为89-3％～101．6％。

含己烯雌酚血清对体外培养正常人黑素细胞的作用

目的:观察不同浓度含己烯雌酚(DES)血清对体外培养人黑素细胞的增殖和酪氨酸酶活性的影响。方法:采用MTT法测定黑素细胞增殖情况;参考Nakajima M方法测定酪氨酸酶活性;NaOH溶解法测定黑素含量。结果:己烯雌酚血清不同剂量对人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性均有促进作用。结论:己烯雌酚能促进体外培养人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性,对相关皮肤色素性疾病可能有一定的治疗作用。

己烯雌酚对未成熟大鼠卵巢卵泡颗粒细胞分化的形态学观察

取出生后21~26天Sprague-Dawley未成熟雌性大鼠,分为实验与对照两组。实验组只/天注射己烯雌酚(DES)0.5mg(溶于芝麻油中),并按注射天数分为2、3、4、5天组;对照组注射等量的芝麻油。注射2天后,逐日取材固定,用光镜和电镜观察两组动物的卵巢和卵泡颗粒细胞。同时从各组卵巢中分离出卵泡颗粒细胞,用无血清McCoy 5a培养基培养,加入不同的激素,分为对照组、FSH组、DES+FSH组、FSH+hCG组。培养3天后,取材固定,用光镜、透射电镜、扫描电镜观察各组的细胞形态,结果为:1.实验组卵巢比对照组的大,卵泡也大。卵泡细胞增多,细胞体积大,分裂象多见。2.注射3天以上DES的卵巢中,闭锁卵泡和退化的卵泡细胞增多。3.电镜下,实验组卵泡细胞中与蛋白质合成有关的细胞器比对照组发达。4.体外培养的卵泡颗粒细胞,对照组细胞排列分散;FSH组细胞集聚成团,细胞表面微绒毛增多;细胞质内与合成蛋白质有关的细胞器比对照组的发达。DES+FSH组的细胞排列和结构与FSH组的相似。FSH+hCG组细胞体积增大,细胞表面微绒毛减少或消失。细胞质内出现滑面内质网,细胞开始黄体化。5.注射2~5天DES的各组细胞形态和结构均相似。从形态学来看,经DES处理的未成熟雌鼠的卵泡颗粒细胞的形态、排列和对不同激素作用下的变化,与文献报道的去垂体雌鼠的同类细胞相似。因此我们认为,未成熟雌鼠的卵泡颗粒细胞也能作为研究细胞分化的一种模型。

饲料中己烯雌酚ELISA检测方法的建立

为了建立一种饲料中己烯雌酚（DES）残留的检测方法，试验采用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行检测，并对该方法的检测限、准确度、精密度和特异性等参数进行考察。结果表明：本试剂盒的线性工作范围为0.1～8．1μg／kg，IC50浓度为0．417μg/kg，对饲料中DES的检测限为5μg/kg；对饲料样品中DES的添加回收率范围为83％～107％，批内变异系数≤5．7％，批间变异系数≤6．3％：与DES类似物无交叉反应。本研究所建立的ELISA检测方法具有简单、灵敏、准确等特点，适用于饲料中DES残留的快速检测。

饲料中合成雌激素的测定方法研究

研究并建立GC-MS测定动物饲料中己烷雌酚（HEX）、己烯雌酚（DES）、双烯雌酚（DE）的方法。样品经乙醚和碱液提取经MAX固相萃取柱净化后衍生，进行GC-MS分析。己烷雌酚、己烯雌酚、双烯雌酚较好分离，得到浓度与峰面积成正比的工作曲线，相关系数r=0．999，RSD〈11．20％（n=6）。定量检出限分别为1、3和3×10^-7％，回收率66．3％～100．3％。本法具有灵敏、准确、样品前处理简单、抗干扰等优点，符合欧盟的限量要求。

已烯雌酚与人乳腺癌细胞WISP-2基因表达

目的探讨已烯雌酚(DES)对人乳腺癌细胞(MCF-7细胞株)WISP-2基因(wnt-1inducible signalingpathway protein-2)表达的影响及DES在乳癌发生中的作用机制。方法用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测DES对人乳癌MCF-7细胞生长活性的影响;以免疫细胞化学法及逆转录-聚合酶链反应法检测DES对人乳癌MCF-7细胞WISP-2mRNA和WISP-2蛋白表达影响。结果DES使MCF-7细胞增殖率增加,其吸光度A570值明显上升,与对照组比较,P<0.05。以10nmol/L的DES分别作用细胞不同时间,A570值随着作用时间的延长而增加。DES可使MCF-7细胞WISP-2mRNA和WISP-2蛋白表达上升,WISP-2蛋白和mRNA的表达强度随药物浓度增加而升高,WISP-2mRNA和蛋白表达随DES作用时间的延长而增加,其效应类似于雌二醇。结论IDES能促进MCF-7细胞增殖,2DES能诱导MCF-7细胞的WISP-2基因表达增加,作用强度随剂量的增加而增加;随着作用时间的延长而上升。