缺血性视网膜静脉阻塞继发黄斑水肿患者基线血清己糖激酶1抗体滴度与抗VEGF治疗后视力改善的相关性分析

目的分析缺血性视网膜静脉阻塞继发黄斑水肿(RVO-ME)患者基线血清己糖激酶1抗体滴度与抗血管内皮生长因子(VEGF)治疗后视力改善的相关性。方法招募2017年6月至2020年2月在首都医科大学宣武医院确诊为缺血性RVO-ME并接受初始抗VEGF治疗的53例患者,其中缺血性视网膜中央静脉阻塞(CRVO)23例(CRVO组),缺血性视网膜分支静脉阻塞(BRVO)30例(BRVO组)。另选取该院同期30例行超声乳化的白内障患者作为对照组。研究对象行基线血清己糖激酶1抗体滴度检测、眼科常规检查和光学相干断层成像(OCT)检查。所有RVO-ME患者按照“3+按需治疗方案(pro re nata,PRN)”向玻璃体内注射抗VEGF药物治疗。随访12个月,采用多元线性回归分析缺血性RVO-ME患者抗VEGF治疗后视力改善的影响因素。结果CRVO组基线logMAR BCVA高于对照组和BRVO组,CRVO组和BRVO组基线CRT、基线血清己糖激酶1抗体滴度高于对照组,且CRVO组基线CRT、基线血清己糖激酶1抗体滴度高于BRVO组,差异有统计学意义(P<0.05)。RVO-ME患者基线血清己糖激酶1抗体滴度与随访6个月(r=0.377,P=0.005)、9个月(r=0.362,P=0.008)和12个月(r=0.465,P<0.001)时BCVA改善呈正相关,与随访12个月时中断EZ横向长度减少值(r=0.401,P=0.001)呈正相关。多元线性回归分析结果显示,基线logMAR BCVA、基线血清己糖激酶1抗体滴度是缺血性RVO-ME患者抗VEGF治疗随访12个月时BCVA改善的影响因素(P<0.05)。结论己糖激酶1抗体作为一种新的血清生物标志物,与缺血性RVO-ME患者抗VEGF治疗后的视力改善相关。

己糖激酶结构域成分1基因敲除对人结直肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的 探讨己糖激酶结构域成分1(HKDC1)对人结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法 HT-29、SW480细胞进行瞬时转染,设置HKDC1-si RNA组、阴性对照组及空白组。同时收集2020年3月至2022年5月河北北方学院附属第一医院接受手术的50例患者的结直肠癌组织和癌旁正常组织。RT-q PCR实验检测HKDC1 m RNA表达;Western blot实验检测HKDC1蛋白表达;CCK-8实验、划痕实验和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果 HT-29细胞HKDC1 m RNA的表达量高于SW480细胞(P<0.05),故选取HT-29细胞株用于后续实验。结直肠癌组织中HKDC1 m RNA、光密度值高于癌旁正常组织(P<0.05)。空白组与阴性对照组HKDC1 m RNA、蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);HKDC1-si RNA组HKDC1 m RNA、蛋白表达水平低于阴性对照组(P<0.05)。空白组与阴性对照组光密度值比较,差异无统计学意义(P>0.05);HKDC1-si RNA组光密度值低于阴性对照组(P<0.05)。空白组与阴性对照组细胞迁移率比较,差异无统计学意义(P>0.05);HKDC1-si RNA组细胞迁移率低于阴性对照组(P<0.05)。空白组与阴性对照组细胞迁移数目比较,差异无统计学意义(P>0.05);HKDC1-si RNA组细胞迁移数目低于阴性对照组(P<0.05)。结论 HKDC1在结直肠癌组织及细胞中高表达,可促进结直肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,有望成为结直肠癌基因治疗的新靶点。

朱砂叶螨己糖激酶HXK466基因克隆及特征分析

【目的】为了深入探索并寻找一套高效、环保的生物学防治策略来抵御朱砂叶螨的侵害。【方法】克隆朱砂叶螨己糖激酶HXK466基因,探明该基因序列的生物信息学特征,分析其序列组成、结构域分布以及潜在的调控位点,运用实时荧光定量PCR方法,对朱砂叶螨的卵、幼螨、若螨和成螨4个关键发育阶段的样本进行测定。【结果】成功克隆己糖激酶HXK466基因(GenBank登陆号:PP536561.1),基因全长1518 bp,阅读开放框为1422 bp,编码473个氨基酸;己糖激酶HXK466基因在朱砂叶螨的卵、幼螨、若螨和成螨四个阶段中都有一定的表达。其中成螨阶段表达量最高,其次为若螨和幼螨,卵阶段的表达量最低。预测到朱砂叶螨HXK466为非跨膜蛋白和疏水性蛋白,己糖激酶HXK466基因目的蛋白共有4种二级结构,其中a-螺旋占比最高为43.13%,延伸链占比14.16%,β-转角占比4.23%,无规则卷曲占比为38.48%。【结论】克隆得到朱砂叶螨己糖激酶HXK466基因,明确其不同时期的表达特征,构建以己糖激酶为靶标的新型生物杀螨剂,为生物农药领域的创新奠定基础。

己糖激酶2在胶质瘤中的表达及与预后的关系

目的 探讨己糖激酶2(HK2)在胶质瘤中的表达及与预后的关系。方法 分别从癌症基因组图谱(TCGA)数据库和中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库下载胶质瘤HK2 mRNA表达数据集及相对应患者的临床资料进行分析,比较不同世界卫生组织(WHO)分级、性别、巢蛋白(NES)mRNA表达量、异柠檬酸脱氢酶(IDH)突变状态、染色体1p/19q共缺失情况、ATRX突变状态胶质瘤患者的HK2 mRNA表达情况。利用UCSC Xena等在线工具网站,采用Kaplan-Meier法绘制HK2 mRNA高表达组和低表达组患者的生存曲线。将HK2mRNA表达水平与已知的生物标志物表达水平或突变情况联合分析,根据其表达水平/突变情况分别分为4个亚组,比较患者的生存情况。结果 相较于正常组织,HK2 mRNA在胶质瘤组织中高表达;相较于低级别脑胶质瘤(LGG),胶质母细胞瘤(GBM)中HK2 m RNA表达量更高。在TCGA和CGGA数据库中,WHO分级为Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级的胶质瘤患者HK2 mRNA的表达水平不同,随着胶质瘤WHO分级升高,HK2 mRNA表达增加(P﹤0.05)。IDH野生型和IDH突变型、染色体1p/19q共缺失和非共缺失胶质瘤患者HK2 mRNA表达水平比较,差异均有统计学意(P﹤0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,在CGGA数据库中,HK2 mRNA高表达组胶质瘤、LGG、GBM患者的生存率均低于HK2 mRNA低表达组患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。HK2 mRNA高表达与NES mRNA高表达、IDH1未突变、ATRX未突变提示更差预后。结论 HK2 mRNA的表达与胶质瘤的恶性程度有关,HK2 mRNA高表达患者生存率较低,HK2 mRNA可作为胶质瘤患者预后的预测指标。

猕猴桃果实后熟软化过程中己糖激酶基因的表达分析

为解决猕猴桃果实采后快速软化问题,本研究以‘红阳’猕猴桃果实为材料,探究10 mmol/L N-乙酰-D-葡萄糖胺(N-acetyl-D-glucosamine,NAG)对猕猴桃后熟软化过程中基本生理变化、己糖激酶(hexokinase,HXK)活性和AcHXKs基因表达的影响。结果表明,与对照组(CK组)相比,外源NAG处理可有效降低猕猴桃的呼吸速率和乙烯释放量,延缓其硬度和总酸含量的下降以及果胶和淀粉的水解,维持较低的可溶性固形物含量。与CK组相比,NAG能够同时抑制HXK活性和AcHXK3表达水平,进而影响糖代谢和呼吸代谢过程。此外,AcHXK7~AcHXK9基因被NAG诱导上调表达,且表达量与硬度显著正相关,其可能作为糖信号分子介导猕猴桃后熟软化进程。综上,AcHXK3、AcHXK7~AcHXK9受NAG诱导差异表达,进而发挥催化和调节功能,延缓猕猴桃后熟软化。本实验结果可为猕猴桃后熟软化机制提供理论依据,也为猕猴桃保鲜技术的研发提供新思路。

己糖激酶2在犬乳腺肿瘤中的表达及预后研究

本研究旨在探究己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)在犬乳腺肿瘤(canine mammary tumor,CMT)中的表达情况及与患犬预后的相关性。将临床收集的121例犬乳腺肿块样本制作石蜡切片,经组织病理学分析判读后随机抽取恶性乳腺肿瘤与正常乳腺组织样本各3份进行高通量转录组测序,筛选差异表达基因。使用实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR,qPCR)和免疫组织化学法检测HK2在犬全身组织及乳腺肿瘤组织中的表达情况,对术犬长期随访调查并分析HK2与乳腺肿瘤患犬临床特征及预后的相关性。结果表明:1)本研究中收集到的121例犬乳腺肿块临床样本中良性乳腺肿瘤33例,恶性乳腺肿瘤78例;2)经高通量转录组测序筛选出HK2、MEST、GDF5等36个显著差异表达基因,其中,HK2经qPCR验证以及基于其在细胞代谢中的关键作用且在人类某些肿瘤中异常表达,故将HK2作为研究对象;3)HK2 mRNA与蛋白表达水平在犬正常乳腺组织中均表现为低表达,而CMT中HK2 mRNA与蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);4)同时HK2的表达水平与肿瘤组织类型、肿瘤大小、脉管浸润、Ki-67指数以及预后显著相关(P<0.01)。HK2在CMT组织中呈高表达,并与肿瘤的临床特征及预后显著相关。HK2具有作为CMT的诊断与预后评估因子的潜力。

健脾养正消癥汤干预己糖激酶2介导的糖代谢调控胃癌细胞增殖和凋亡

目的基于网络药理学和细胞实验探讨健脾养正消癥汤调控胃癌糖代谢和增殖的作用机制。方法通过TCMSP和SwissTargetPrediction检索健脾养正消癥汤组方药物的有效活性成分并预测其相应靶点,GeneCards数据库预测胃癌的靶基因,筛选出药物靶点和疾病靶点的交集作为关键靶点;对关键靶点构建蛋白相互作用(PPI)网络,并寻找核心基因;应用RStudio进行GO、KEGG、DO富集分析;构建交集网络、中药-活性成分-靶点网络和PPI网络;采用PyMOL软件进行小分子和蛋白对接。利用健脾养正消癥汤大鼠含药血清体外干预胃癌细胞株HGC-27和AGS,流式细胞术检测细胞凋亡,通过检测细胞葡萄糖摄取和乳酸生成分析细胞糖代谢变化,Western blot检测细胞己糖激酶2(HK2)表达。结果健脾养正消癥汤作用于胃癌糖代谢途径的关键化学成分共181种,包括槲皮素、柚皮素、光甘草定、山柰酚、刺芒柄花素等;关键靶点包括HK2、EGFR、HIF1A、HSP90AA1、ALB等;GO富集结果包括前体代谢物和能量的产生、NADP代谢过程、ATP水解活性等,KEGG富集分析得到碳代谢、HIF-1信号通路、糖酵解/糖异生、癌症中的中心碳代谢等通路,DO富集分析得到包括胃癌在内多种癌症;分子对接显示,HK2与活性成分具有较强的结合活性。细胞实验表明,与对照组比较,健脾养正消癥汤能显著促进HGC-27、AGS细胞凋亡(P<0.01),下调HK2蛋白表达(P<0.01),减少葡萄糖摄取量和乳酸生成量。结论健脾养正消癥汤可通过多成分、多靶点、多信号通路干预胃癌糖代谢,其中下调HK2表达是其关键。

高志华和段树民团队合作成果揭示Ⅱ型己糖激酶调控小胶质细胞功能的新机制

2022年12月20日,浙江大学医学院脑科学与脑医学学院高志华教授和段树民院士团队在《自然·代谢》(Nature Metabolism)发表题为“Dual roles of hexokinase 2 in shaping microglial function by gating glycolytic flux and mitochondrial activity”的研究论文(DOI:10.1038/s42255-022-00707-5)。该研究揭示了小胶质细胞高表达的Ⅱ型己糖激酶(HK2)在调控小胶质细胞生理和病理功能中的双重作用及机制。

温度突变对凡纳滨对虾己糖激酶和丙酮酸激酶活力以及热休克蛋白表达的影响

研究了水温从17℃突变为27℃对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)稚虾己糖激酶(HK)和丙酮酸激酶(PK)活力及热休克蛋白(HSP70)表达的影响。主要结果如下:(1)温度突变后,凡纳滨对虾肝胰脏中己糖激酶活力逐渐增大,温度突变后3h达到最高,是温度突变前的2.54倍(P<0.05)。随后,对虾己糖激酶的活力逐渐下降,72h酶活力基本恢复到温度突变前的水平。(2)温度突变后1h,凡纳滨对虾丙酮酸激酶的活力降到最低,随后逐渐增大;6h达到最高,随后对虾丙酮酸激酶的活力逐渐下降并在72h恢复到温度突变前的水平。(3)温度突变0.5h后,凡纳滨对虾肌肉中HSP70的表达量迅速升高,1h达到最高,与温度突变前差异显著(P<0.05),随后下降到比温度突变前稍高的水平并趋于稳定。实验结果表明,温度突然升高后,己糖激酶活力升高,随后恢复到起始水平;糖酵解过程先受到抑制,之后得以恢复;温度突变可导致凡纳滨对虾对环境的抗逆性提高。

高等植物己糖激酶基因研究进展

己糖激酶(HXK)具有催化己糖磷酸化的作用,是植物体呼吸代谢过程中的关键酶之一。近十几年的研究发现,HXK在植物的糖感知和糖信号转导过程中扮演重要的角色。目前GenBank已登录28种高等植物的HXK同源基因,其在不同物种中均以多基因家族形式存在。HXK基因家族多数成员包括9个外显子,编码492-522个氨基酸。HXK亚细胞定位研究发现,植物HXK家族成员主要分布于线粒体,少数成员存在于细胞质、叶绿体和质体基质中。植物HXK基因家族大部分成员在不同器官或组织中均有表达,但是拟南芥(Arabidopsis thaliana)AtHKL3和水稻(Oryza sativa)OsHXK10仅在花中表达。高等植物部分HXK不仅影响植物生长发育,还调控植物激素信号转导以及调节植物花青素合成途径中相关基因表达。应用MEGA 4.0软件对18个物种HXK基因氨基酸序列构建系统进化树,HXK基因序列聚为7小支,聚类关系能反映不同基因结构和功能的差异。

转化酶和己糖激酶调控草莓聚合果内糖积累

以设施栽培的草莓品种‘枥乙女’为试材,用高效液相色谱法分析了果实发育进程中草莓聚合果内不同部位糖含量及相关酶活性的变化。果实成熟过程中草莓聚合果果顶部分含糖量高,中间部位次之,果柄端最低。转化酶活性呈现与糖含量相似的梯度变化。己糖激酶和果糖激酶则表现出与糖梯度相反的变化。上述结果表明,聚合果顶端转化酶活性高,有利于形成蔗糖梯度,从而促进光合产物向果顶端转移;聚合果近果柄端的己糖代谢酶活性高,促进果柄端的己糖消耗,导致果柄端相对低的糖含量。

茶树己糖激酶基因CsHXK2的启动子克隆及表达特性分析

植物己糖激酶是双功能蛋白,具有磷酸化己糖和介导糖信号的关键性作用。前期研究中,我们从茶树中克隆获得4个己糖激酶基因,其中CsHXK2基因编码492个氨基酸残基,与拟南芥AtHXK3、番茄LeHXK4归为Type A类HXKs。利用RT-PCR技术,克隆获得长度为2029 bp的CsHXK2基因启动子。CsHXK2基因可能受到光照、低温、病原菌、糖和多种激素等信号的调控,且可能特异性表达于叶、花、种子、根系、腋芽等组织。CsHXK2蛋白定位于叶绿体内。酵母突变体功能互补试验表明,去除叶绿体转运信号肽的CsHXK2成熟蛋白具有葡萄糖和果糖磷酸化活性。茶树组织特异性表达分析显示,CsHXK2基因在根和茎中表达量最高,而在老叶中表达量最低。CsHXK2基因的表达受低温胁迫而显著下调,经炭疽菌侵染的茶树叶片内CsHXK2基因的表达也受到显著抑制,而外源赤霉素(GA3)处理的茶树叶片内CsHXK2基因表达显著上调。本研究结果表明,CsHXK2基因在茶树的生长发育过程和逆境胁迫响应中发挥重要的调控作用。

己糖激酶与植物生长发育

介绍了植物己糖激酶亚细胞定位、酶特性、基因克隆和表达及其在糖信号转导中的作用的最新研究进展。

植物己糖激酶的信号转导作用

己糖激酶在植物细胞的信号转导中起着重要的作用。近年来,有关植物己糖激酶的研究工作已经较多,受到足够的重视。现对植物己糖激酶的特性、亚细胞定位、编码基因分子特征、感受己糖与信号转导功能、依赖己糖激酶的糖信号转导途径及其调控作用进行介绍。

大肠杆菌脂多糖对腹膜间皮细胞己糖激酶活性的影响

目的:观察大肠杆菌脂多糖对原代培养的大鼠腹膜间皮细胞己糖激酶活性的影响;探讨其活性与葡萄糖净利用的关系,初步阐释腹膜透析相关性腹膜炎引起腹膜透析失超滤的机制。方法:利用胰蛋白酶消化法行大鼠腹膜间皮细胞的原代培养及传代,第2代细胞经鉴定及同步化后进入实验;用含不同浓度的大肠杆菌脂多糖(0、0.1、1.0、10、50、100 mg/L)刺激细胞3 h,另用10 mg/L脂多糖分别刺激1、3、6、12、24 h,利用6-磷酸葡萄糖脱氢酶偶联比色法观察腹膜间皮细胞己糖激酶活性的变化;利用比色法观察细胞葡萄糖净利用量。结果:大肠杆菌脂多糖对大鼠腹膜间皮细胞己糖激酶活性的影响呈剂量和时间依赖性并伴有细胞葡萄糖净利用的增加。结论:大肠杆菌感染性腹膜炎时,其脂多糖通过影响腹膜间皮细胞己糖激酶的活性参与腹膜透析失超滤的过程。

烫伤大鼠肝葡萄糖激酶、肌己糖激酶活性及红细胞三磷酸腺苷含量的变化

为进一步探讨损伤后糖代谢状况，我们测定了３０％体表烫伤后大鼠不同时间的血糖和血乳酸，并比较休克期（伤后６ｈ）和高代谢期（伤后７２ｈ）的肝葡萄糖激酶及比目鱼肌已糖激酶（Ⅱ型）活性。结果显示血乳酸水平在伤后６ｈ和４８ｈ各有一个高峰，可能分别是应激和代谢紊乱的表现。血糖水平在伤后６ｈ明显升高，但６ｈ内波动很大。伤后７２ｈ肝葡萄糖激酶活性显著降低（Ｐ＜０．０５），可能与创伤后血糖升高，糖异生增强及胰岛素抵抗等现象有关。伤后比目鱼肌已糖激酶活性及红细胞三磷酸腺苷（ＡＴＰ）含量未发现明显变化。

miR-181c靶向己糖激酶2抑制癌相关成纤维细胞的糖酵解

目的探讨mi R-181c在癌相关成纤维细胞(CAFs)糖酵解中的作用和机制。方法用组织贴壁法分离原代肺腺癌病人肺组织CAF及肺正常成纤维细胞(NFs)。用LipofectamineTM2000转染mi R-181c mimics,mi R-181c inhibitor,si RNA-HK2和HK2-vecto等;Q-PCR检测mi R-181家族表达水平;Western blotting检测己糖激酶2(HK2)蛋白表达;2-NBDG法检测细胞葡萄糖摄取率;DRY-CHEM FCD3500仪器检测细胞上清中乳酸生成;双荧光素酶报告基因系统检测HK2 m RNA表达。结果在细胞形态上CAFs与NFs无明显区别。与NFs组相比,CAFs组葡萄糖摄取、乳酸生成和HK2蛋白表达明显增加,而mi R-181家族表达明显减少(P<0.05)。在NFs转染inhibitor-181c后,其HK2蛋白表达、葡萄糖摄取和乳酸生成明显增加(P<0.05);相反,CAFs转染了mimics-181c后,其HK2蛋白表达、葡萄糖摄取和乳酸生成明显减少(P<0.05)。并且在敲低HK2细胞的CAFs中,mimics-181c不能减少葡萄糖摄取和乳酸生成;而mimics-181c可以减少过表达HK2对NFs葡萄糖摄取和乳酸生成的增强作用。结论 mir-181c可以通过抑制HK2的蛋白表达来抑制CAFs的糖酵解。

miR-125b通过下调己糖激酶2的表达抑制HOS骨肉瘤细胞有氧糖酵解

目的探讨miR-125b对HOS骨肉瘤细胞有氧糖酵解的影响和机制。方法采用实时定量PCR检测HOSB正常成骨细胞和HOS骨肉瘤细胞中miR-125b的表达水平;采用3H标记的2-脱氧葡萄糖(3H-2DG)法检测细胞葡萄糖摄取率、乳酸定量试剂盒检测细胞上清中乳酸含量,以评价miR-125b模拟物(miR-125b-mimics)对HOS骨肉瘤细胞有氧糖酵解的影响。采用双荧光素酶报告基因实验明确己糖激酶2(HK2)是否为mimics-125b的直接靶分子;采用Western blot法检测mimics-125b对HK2蛋白水平的影响。结果 mimics-125b在HOS骨肉瘤细胞中表达水平显著低于HOSB正常成骨细胞;HOS细胞过表达miR-125b后,糖摄取率和乳酸生成明显减少,有氧糖酵解受到显著抑制;HK2蛋白为miR-125b的直接靶分子;HOS细胞过表达miR-125b后,HK2蛋白表达受到抑制。结论 miR-125b在HOS骨肉瘤细胞中低表达,并通过靶向抑制HK2的表达抑制HOS细胞有氧糖酵解。

siRNA沉默己糖激酶-2基因对MDA-MB231细胞放疗敏感性的影响

目的观察小干扰RNA(siRNA)沉默己糖激酶-2(HK2)对乳腺癌细胞MDA-MB231放疗敏感性的影响。方法实验分为3组:空白(Control)组、阴性对照(Negative)组和转染HK2 siRNA的实验(siRNA-HK2)组。将HK2 siRNA瞬时转染于MDA-MB231细胞,用Western blot和qRT-PCR分别检测转染前后HK2蛋白和mRNA表达;CCK-8实验观察不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)X线照射下三组细胞增殖情况;流式细胞仪检测三组细胞在4 Gy照射下细胞凋亡率,观察siRNA干扰HK2对乳腺癌细胞MDA-MB231放疗敏感性的影响。结果 siRNA-HK2组HK2的蛋白和mRNA表达量均降低。三组细胞分别给予不同剂量的X线照射后,细胞存活率呈剂量依赖性递减的趋势,且siRNA-HK2组的存活率较Control组和Negative组明显下降(P<0.05)。照射后,siRNA-HK2组细胞凋亡率明显高于Control组和Negative组(P<0.01)。结论沉默乳腺癌细胞HK2基因可增加其对放疗的敏感性。

缺氧对食管鳞状细胞癌中缺氧诱导因子-1α和己糖激酶-Ⅱ表达的影响

目的观察缺氧对食管鳞状细胞癌中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和己糖激酶-Ⅱ(HK-Ⅱ)表达的影响及对糖酵解的作用。方法培养人食管鳞状细胞癌TEl3、Ecal09细胞株,采取分组方式培养,观察组在1%氧浓度下培养,对照组在20%氧浓度下培养。利用实时定量PCR方法检测两组细胞中HIF-1α和HK-ⅡRNA表达,同时利用分光光度法检测常氧和缺氧条件下细胞培养液中细胞的乳酸浓度变化。结果实时定量PCR法检测显示,常氧条件下被干扰的TEl3/shRNA和Ecal09/shRNA细胞中HIF-1αRNA表达量较未干扰的TEl3、Ecal09细胞明显减弱(P<0.01),HK-ⅡRNA表达结果与HIF-1αRNA一致。另外,TEl3和Ecal09细胞在缺氧条件下分泌乳酸明显较对照组增多。结论食管鳞癌中HIF-1α及HK-Ⅱ在缺氧条件下表达明显增强,HK-Ⅱ表达及乳酸浓度与HIF-1α表达密切相关,HIF-1α可能通过HK-Ⅱ影响细胞的糖酵解水平。