毕赤酵母己糖运载体HXT1基因缺失菌株的构建

葡萄糖在酵母胞内的转运是依靠己糖运载体家族成员完成的。目前在酿酒酵母中已鉴定了18个己糖运载体基因,各自功能也已得到深入的研究。然而在作为优良蛋白表达系统的毕赤酵母中,目前国内外尚未有此类基因的相关报道。本文基于酵母同源重组率高的特性,以G418作为抗性筛选标记,分别在其5′和3′端连接待缺失毕赤酵母基因HXT1开放阅读框ORF的上下游各200bp作为同源重组区,电转毕赤酵母GS115感受态,通过不同浓度G418抗性平板筛选,最终得到了HXT1基因缺失的毕赤酵母菌株GS115ΔHXT1。通过与野生株比较发现,HXT1基因缺失株的生长状况及葡萄糖利用都有所下降。