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MSPD-HPLC法分析云南红豆杉中的10-DAB Ⅲ和紫杉醇
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作者 赵倩倩 朱靖博 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1042-1051,共10页
为建立云南红豆杉(Taxus yunnanensis)中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-DABⅢ)和紫杉醇(Taxol)的分析方法,该研究采用基质固相萃取-高效液相色谱分析(MSPD-HPLC)对云南红豆杉中的10-DABⅢ及Taxol进行定量分析,探究硅胶、佛罗里硅土、酸性氧化... 为建立云南红豆杉(Taxus yunnanensis)中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-DABⅢ)和紫杉醇(Taxol)的分析方法,该研究采用基质固相萃取-高效液相色谱分析(MSPD-HPLC)对云南红豆杉中的10-DABⅢ及Taxol进行定量分析,探究硅胶、佛罗里硅土、酸性氧化铝、中性氧化铝、碱性氧化铝、C_(18)、C_(18)-ME、C_(18)-G1、C_(18)-HC、Diol、Xamide、Xion共12种样品预处理分散剂及各种分散剂的质量、洗脱剂的种类、洗脱剂的浓度、洗脱剂体积对两种成分分析的影响,并对优化后的条件进行方法学验证,同时与超声提取、热回流提取预处理方法进行比较分析证明其有效性。结果表明:(1)12种固相分散剂中,碱性氧化铝具有良好的目标化合物萃取物检出量,并且当碱性氧化铝与样品的质量比为3∶1、6 mL甲醇为洗脱剂洗脱时,10-DABⅢ和Taxol的萃取检出量较高。(2)建立的云南红豆杉枝叶中10-DABⅢ和Taxol的分析方法具有良好的线性关系(r≥0.9999),10-DABⅢ和Taxol的检出限和定量限分别介于0.0239~0.0301μg·mL^(-1)和0.142~0.178μg·mL^(-1)之间;各目标分析物平均加样回收率在93.6%~109.0%之间。(3)比较分析显示,3种方法对2种紫杉烷类化合物的萃取检出量基本无差别,但MSPD法溶剂消耗少、操作简单,分析时间短,净化效率高,可应用于云南红豆杉原料的快速分析。该研究以碱性氧化铝为分散剂应用于云南红豆杉紫杉烷类化合物的萃取,建立了快速、高效的云南红豆杉中10-DABⅢ和紫杉醇的分析方法,为云南红豆杉中的紫杉烷类化合物的定量分析提供了依据。 展开更多
关键词 云南红豆杉 10-去乙酰基巴卡亭 紫杉醇 基质固相萃取 高效液相色谱分析
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南方红豆杉10-去乙酰巴卡亭Ⅲ-10-乙酰转移酶基因的克隆与生物信息学分析 被引量:3
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作者 程抒劼 黄仕杰 +2 位作者 郭丽琼 韩飞 林俊芳 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期107-112,共6页
对中国重要药用植物南方红豆杉中的10-去乙酰巴卡亭Ⅲ-10-乙酰转移酶(DBAT)基因进行分离、测序以及生物信息学分析。根据GenBank中已登录的10-去乙酰巴卡亭Ⅲ-10-乙酰转移酶(DBAT)基因cDNA序列设计引物,采用RT-PCR技术从南方红豆杉叶片... 对中国重要药用植物南方红豆杉中的10-去乙酰巴卡亭Ⅲ-10-乙酰转移酶(DBAT)基因进行分离、测序以及生物信息学分析。根据GenBank中已登录的10-去乙酰巴卡亭Ⅲ-10-乙酰转移酶(DBAT)基因cDNA序列设计引物,采用RT-PCR技术从南方红豆杉叶片中克隆了1个DBAT基因Tc-DBAT的全长cDNA。结果显示,Tc-DBAT cDNA含有1个1 323 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),编码440个氨基酸,对应基因组序列含有1个内含子。Tc-DBAT蛋白N端含有5个N-酰基化作用位点和2个保守的N-糖基化作用位点,具有1个保守的B ig-1结构域,多个重要的磷酸化位点以及1个类似钙结合蛋白重复结构。序列同源性比较、系统发生分析以及蛋白质高级结构预测均表明,Tc-DBAT属于转移酶超家族(transferase superfamily),是一个具有乙酰转移酶活性的功能蛋白,能够催化10-去乙酰巴卡亭Ⅲ(10-DAB)10位的乙酰化,从而生成抗癌新药紫杉醇生物合成途径中的最后一个双萜中间体——巴卡亭Ⅲ。有望通过成功克隆和鉴定紫杉醇生物合成途径中的关键酶基因达到提高其半合成前体巴卡亭Ⅲ产量的目的,并且为进一步利用组合表达系统商业化生产紫杉醇奠定基础。 展开更多
关键词 南方红豆杉 紫杉醇 10-去乙酰巴卡亭-10-乙酰转移酶 基因克隆 生物信息学分析
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南方红豆杉枝叶中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ的分离与纯化 被引量:11
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作者 马淑桢 吴绵斌 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第13期1084-1086,共3页
目的:以南方红豆杉的枝叶为原料,研究其中活性成分10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ(10-DABⅢ)的分离和纯化条件,并进行优化筛选。方法:综合运用浸提、萃取(包括液液萃取和反萃取)、色谱分离和重结晶技术得到10- DABⅢ晶体,并采用UV,HPLC法进行分析鉴... 目的:以南方红豆杉的枝叶为原料,研究其中活性成分10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ(10-DABⅢ)的分离和纯化条件,并进行优化筛选。方法:综合运用浸提、萃取(包括液液萃取和反萃取)、色谱分离和重结晶技术得到10- DABⅢ晶体,并采用UV,HPLC法进行分析鉴定。结果:得到了用以合成高效抗癌药紫杉醇的前体——10-DABⅢ晶体,纯度可达91%,整个工艺收率达7.9%。结论:本实验为首次采用该工艺路线得到10-DABⅢ和紫杉醇,总收率达60%以上,可用于进一步的工业化研究。 展开更多
关键词 南方红豆杉 紫杉醇 10-脱乙酰巴卡亭(10-DAB) 提取
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反相高效液相色谱法测定曼地亚红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量的研究 被引量:8
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作者 甄铧 蒲尚绕 张学毅 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期358-361,共4页
目的:建立测定曼地亚红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ(10-DABⅢ)的反相高效液相色潜法。方法:采用硅胶层析柱(BUCHI,Φ12mm×75 mm,40~63μm),以甲醇-水(1:1)为洗脱剂对曼地亚红豆杉提取液进行初步分离制备供试品溶液;HPLC 检测条件:SHI... 目的:建立测定曼地亚红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ(10-DABⅢ)的反相高效液相色潜法。方法:采用硅胶层析柱(BUCHI,Φ12mm×75 mm,40~63μm),以甲醇-水(1:1)为洗脱剂对曼地亚红豆杉提取液进行初步分离制备供试品溶液;HPLC 检测条件:SHIM—PACK VP—ODS 色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-水(45:55)为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),柱温为40℃,检测波长为232 nm。结果:10-DABⅢ浓度在0.04~4.00μg·mL^(-1)范围(r=0.9974),与峰面积呈良好线性关系(n=6);回收率(n=9)为99.5%~104.9%,RSD 为1.0%~1.8%。结论:曼地亚红豆杉提取液用硅胶柱层析后,多数高含量非目标物被分离,消除了高含量非目标物对10—DABⅢ测定的影响,HPLC 检测条件简单,获得满意的效果。 展开更多
关键词 曼地亚红豆杉 10-脱乙酰巴卡亭(10-DAB) 反相高效液相色谱 硅胶柱层析
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云南红豆杉中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量的固相萃取-高效液相色谱法测定 被引量:4
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作者 孔繁晟 严春艳 +1 位作者 庞小雄 贲永光 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1426-1427,共2页
目的建立以固相萃取-高效液相色谱(HPLC)法测定云南红豆杉枝叶中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量。方法固相萃取柱:Agilent ODS C18500 mg/3 ml;色谱柱:Agilent zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-水-乙腈(35∶55∶1... 目的建立以固相萃取-高效液相色谱(HPLC)法测定云南红豆杉枝叶中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量。方法固相萃取柱:Agilent ODS C18500 mg/3 ml;色谱柱:Agilent zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-水-乙腈(35∶55∶10),流速1.0 ml.min^-1,检测波长227 nm,柱温30℃。结果 10-去乙酰巴卡亭Ⅲ在1.6-8.0μg.ml^-1范围内,进样量与色谱峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为96.8%,RSD为4.8%(n=6)。结论该方法可用于云南红豆杉枝叶中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量测定,方法稳定,结果准确、可靠。 展开更多
关键词 固相萃取-高效液相色谱法 红豆杉 10-去乙酰巴卡亭
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高效液相色谱法测定云南红豆杉细胞培养物中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ的含量 被引量:9
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作者 李海峰 赵志莲 +2 位作者 杨永寿 王胤 刘光明 《大理学院学报(综合版)》 CAS 2008年第2期3-4,共2页
目的:建立云南红豆杉细胞培养物中10-脱乙酰巴卡亭III含量的测定方法。方法:样品经干燥研细后采用甲醇浸提、乙酸乙酯萃取,测定同一批细胞培养物中10-脱乙酰巴卡亭III含量,采用Spherisorb C185μm柱,流动相甲醇-乙腈-水(42∶13∶45),流... 目的:建立云南红豆杉细胞培养物中10-脱乙酰巴卡亭III含量的测定方法。方法:样品经干燥研细后采用甲醇浸提、乙酸乙酯萃取,测定同一批细胞培养物中10-脱乙酰巴卡亭III含量,采用Spherisorb C185μm柱,流动相甲醇-乙腈-水(42∶13∶45),流速1.0ml/min,检测波长为234nm。结果:云南红豆杉细胞培养物中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量为0.023 47%,平均回收率为100.6%,变异系数(RSD)为2.2%。结论:该方法能准确、快速测定云南红豆杉细胞培养物中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量,为探讨10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ在细胞培养物中的代谢研究提供测定方法。 展开更多
关键词 云南红豆杉 细胞培养 高效液相色谱法 10-脱乙酰巴卡亭
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云南红豆杉生长过程中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量变化 被引量:5
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作者 李海峰 赵志莲 刘光明 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期2443-2444,共2页
目的研究云南红豆杉生长过程中不同部位10-去乙酰巴卡亭Ⅲ(10-deacetyl baccatinⅢ)的含量变化。方法采用色谱柱Agilent C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-水(42∶13∶45),流速1.0 m l.min^-1,柱温32℃,检... 目的研究云南红豆杉生长过程中不同部位10-去乙酰巴卡亭Ⅲ(10-deacetyl baccatinⅢ)的含量变化。方法采用色谱柱Agilent C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-水(42∶13∶45),流速1.0 m l.min^-1,柱温32℃,检测波长234 nm,测定云南红豆杉生长过程中不同部位10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量。结果回归方程Y=15.290 29X-4.059 76(r=0.999 0),线性范围5.50~550μg.ml^-1;加样回收率(n=6)98.6%,RSD为2.4%。在云南红豆杉生长期树皮中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量高于枝叶,是枝叶中最高含量的1.498倍;休眠芽分化期和休眠期是10-去乙酰巴卡亭Ⅲ积累的关键时期,在枝叶中的含量显著高于树皮,最高含量达0.115 0%是树皮中最高含量的1.769倍,二年生枝叶中含量略高于一年生枝叶。结论该方法简便、准确度高,可用于云南红豆杉枝叶的质量控制。 展开更多
关键词 云南红豆杉 生长过程 10-去乙酰巴卡亭 高效液相色谱法
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南方红豆杉菌根菌液体纯发酵培养产紫杉醇及10-去乙酰巴卡亭Ⅲ 被引量:3
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作者 龚雪元 杜亚填 +1 位作者 刘姣 张翔宇 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第3期114-120,共7页
从南方红豆杉菌根菌中筛选出产紫杉醇和紫杉烷类化合物10-去乙酰巴卡亭Ⅲ(10-DAB)的高产菌株,对分离获得的21株菌株进行了液体发酵培养实验,通过TLC、HPLC及LC-MS检测发现,有10株菌株具有产紫杉醇及紫杉烷类化合物的能力,其中4株菌株中... 从南方红豆杉菌根菌中筛选出产紫杉醇和紫杉烷类化合物10-去乙酰巴卡亭Ⅲ(10-DAB)的高产菌株,对分离获得的21株菌株进行了液体发酵培养实验,通过TLC、HPLC及LC-MS检测发现,有10株菌株具有产紫杉醇及紫杉烷类化合物的能力,其中4株菌株中产10-DAB分别为260.05、92.88、393.27、70.52μg/L,但未检出产紫杉醇;6株中产紫杉醇分别为434.94、1 242.19、200.65、360.77、317.90、29.82μg/L,但未检出产10-DAB,说明南方红豆杉的各种菌根真菌虽具有合成紫杉醇或紫杉烷类化合物的能力,但各自所合成化合物有差异,不同种类的菌根菌可能分别参与了紫杉醇生物合成的不同环节,即南方红豆杉菌根高含量紫杉醇的生物合成可能是多种菌根菌协同参与作用的结果,且其中的高产菌株具有发酵生产紫杉醇的潜力。 展开更多
关键词 南方红豆杉 菌根菌 紫杉醇 10-去乙酰巴卡亭(10-DAB) 液体发酵
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HPLC法测定云南红豆杉枝叶中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量 被引量:7
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作者 安春志 罗佳波 +1 位作者 刘莉 邢学锋 《广州医药》 2006年第5期47-49,共3页
目的 本实验采用RP-HPLC法测定云南红豆杉枝叶中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ(10-deaxetylbaccatin Ⅲ)的含量。方法 利用C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)甲醇-乙腈-水(5:35:60)作为流动相,检测波长为227nm。结果 10-去乙酰巴卡亭Ⅲ... 目的 本实验采用RP-HPLC法测定云南红豆杉枝叶中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ(10-deaxetylbaccatin Ⅲ)的含量。方法 利用C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)甲醇-乙腈-水(5:35:60)作为流动相,检测波长为227nm。结果 10-去乙酰巴卡亭Ⅲ在0.096~1.947μg与峰面积线性关系良好,Y=1351.973X+1.903(R^2=0.999),平均回收率为95.90%,RSD为1.94%。结论 此方法可靠简便、重现性好、灵敏度高,具有很高的实用价值,而且未见报导,可用于红豆杉植物中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ的定性、定量分析。 展开更多
关键词 云南红豆杉 10-去乙酰巴卡亭 高效液相色谱
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南方红豆杉与引种德国曼地亚红豆杉茎、叶中紫杉醇和10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量的比较 被引量:9
10
作者 宋秋烨 《西北药学杂志》 CAS 2014年第2期129-132,共4页
目的:建立HPLC法同时测定并比较南方红豆杉与德国引种曼地亚红豆杉茎、叶中紫杉醇和10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量。方法采用CosmasilTMC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);以乙腈-水(50∶50)为流动相;流速为1.0mL·min-1;检测... 目的:建立HPLC法同时测定并比较南方红豆杉与德国引种曼地亚红豆杉茎、叶中紫杉醇和10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量。方法采用CosmasilTMC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);以乙腈-水(50∶50)为流动相;流速为1.0mL·min-1;检测波长为227nm;柱温:30℃。结果紫杉醇、10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ的线性范围分别为2.675~42.8μg·mL-1(r=0.9993)和3.875~62μg·mL-1(r=0.9996),平均加样回收率(n=9)分别为98.1%和101.6%,RSD分别为2.7%和2.3%。南方红豆杉与德国引种曼地亚红豆杉的茎、叶中紫杉醇含量分别为0.12和0.10mg·g^-1,10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量分别为0.12和0.14mg·g^-1。结论引种红豆杉与南方红豆杉在同一地区的生态环境下生长,茎、叶中所含紫杉醇和10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量有显著性差异(P<0.05)。所建立方法准确,简便,适用于红豆杉的质量评价,为不同栽培品种的选择提供参考。 展开更多
关键词 紫杉醇 10-脱乙酰巴卡亭 南方红豆杉 曼地亚红豆杉 含量
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不同扶正方对红豆杉中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ煎出量的影响 被引量:1
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作者 王斐 张露蓉 +2 位作者 许恒 江国荣 李湧键 《长春中医药大学学报》 2013年第3期391-393,共3页
目的:建立红豆杉水煎液中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ(10.DABⅢ)HPLC分析方法,观察不同扶正方(养阴代表方、益气代表方、温阳代表方)对红豆杉中10.DABⅢ煎出量的影响。方法:采用反相高效液相色谱法,c18色谱柱(4.61mm×250mm,5... 目的:建立红豆杉水煎液中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ(10.DABⅢ)HPLC分析方法,观察不同扶正方(养阴代表方、益气代表方、温阳代表方)对红豆杉中10.DABⅢ煎出量的影响。方法:采用反相高效液相色谱法,c18色谱柱(4.61mm×250mm,5μgm),流动相为甲醇:水(40:60),流速为1mL/min,检测波长为:227Bin,柱温为25℃。结果:10-DABⅢ在20~400μg/mL范围内峰面积与含量成线性关系(Y=6.5015X4-20.792,r=0.99997),平均回收率为103.86%(RSD=1.83%)。红豆杉组、红豆杉配伍养阴代表方组、红豆杉配伍益气代表方组、红豆杉配伍温阳代表方组中10-DABⅢ的含量依次为(2.004±0.091)、(2.286±0.0734)、(2.096±0.097)、(1.640±0.138)mg(n=3)。结论:不同扶正方对红豆杉中10.DABⅢ煎出量存在明显差异,可为红豆杉临床合理使用提供参考实验依据。 展开更多
关键词 红豆杉 10-去乙酰巴卡亭(10 DAB) 扶正方 中药配伍 高效液相色谱法
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从云南红豆杉细胞培养物中分离鉴定10-去乙酰巴卡亭Ⅲ 被引量:3
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作者 李海峰 赵志莲 刘光明 《大理学院学报(综合版)》 CAS 2008年第12期1-2,5,共3页
目的:从云南红豆杉(Taxus yunnanensis)细胞培养物中提取、分离和纯化10-去乙酰巴卡亭Ⅲ(10-deacetyl baccatinⅢ,10-DABⅢ)。方法:采用固液分离、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、重结晶等方法从细胞培养物中提取分离得到10-DABⅢ,并用波谱... 目的:从云南红豆杉(Taxus yunnanensis)细胞培养物中提取、分离和纯化10-去乙酰巴卡亭Ⅲ(10-deacetyl baccatinⅢ,10-DABⅢ)。方法:采用固液分离、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、重结晶等方法从细胞培养物中提取分离得到10-DABⅢ,并用波谱解析(1HNMR,13CNMR)对其结构进行了鉴定。结果:建立了从红豆杉细胞培养物中提取、分离和纯化10-DABⅢ的方法,证明与从天然红豆杉植物中得到的10-DABⅢ为同一化合物。结论:本方法简便、成本低,可用于红豆杉细胞培养物中10-DABⅢ的提取、分离。 展开更多
关键词 云南红豆杉 细胞培养物 10-去乙酰巴卡亭 提取分离 结构鉴定
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红豆杉中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ成分的研究进展 被引量:1
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作者 卫强 张国升 +2 位作者 刘金旗 戴一 尹伟 《赤峰学院学报(自然科学版)》 2014年第4期25-27,共3页
作为抗肿瘤药紫杉醇和多西紫杉醇主要的合成原料,10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ具有十分重要的药用价值.本文就红豆杉中10-去乙酰基巴马亭Ⅲ成分中涉及的细胞培养、提取分离、废料转化、中药复方影响、含量测定等内容进行概括和总结,以期为进一... 作为抗肿瘤药紫杉醇和多西紫杉醇主要的合成原料,10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ具有十分重要的药用价值.本文就红豆杉中10-去乙酰基巴马亭Ⅲ成分中涉及的细胞培养、提取分离、废料转化、中药复方影响、含量测定等内容进行概括和总结,以期为进一步开展研究提供新的思路. 展开更多
关键词 红豆杉 10-去乙酰基巴卡亭 研究进展
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HPLC法测定云南红豆杉细胞悬浮培养中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ 被引量:2
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作者 郭玉婷 张臻 +1 位作者 张经硕 王剑文 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期118-120,共3页
目的测定经寡聚半乳糖醛酸(oligogalacturonic acid,OGA)诱导的云南红豆杉Taxus yunnanensis细胞悬浮培养物中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10—deacetyl baccatinⅢ,10-DABⅢ)的量。方法采用不同质量浓度的0GA处理云南红豆杉悬浮培养细... 目的测定经寡聚半乳糖醛酸(oligogalacturonic acid,OGA)诱导的云南红豆杉Taxus yunnanensis细胞悬浮培养物中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10—deacetyl baccatinⅢ,10-DABⅢ)的量。方法采用不同质量浓度的0GA处理云南红豆杉悬浮培养细胞,通过RP—HPLC法测定细胞和培养液中的10—DABⅢ的量,甲醇-乙腈-水(2:3:8)为流动相,检测波长为232nm。结果10—DABⅢ在0.05~2.06μg与峰面积线性关系良好,回归方程为Y=89.146X+27.067(R^2=0.9996),细胞内、外样品平均回收率分别为94.96%、100.72%,RSD分别为0.44%、0.81%。0GA(40μg/mL)可显著提高云南红豆杉细胞中10—DABⅢ的量。结论10—DABⅢ的RP—HPLC方法可靠简便、重现性好、灵敏度高,具有较高的实用价值,可用于对红豆杉细胞诱导培养研究中的分析,OGA是10—DABⅢ细胞生产的有效诱导子。 展开更多
关键词 云南红豆杉 细胞培养 寡聚半乳糖醛酸 10-去乙酰基巴卡亭 HPLC
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HPLC、UPLC测定南方红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ的含量 被引量:3
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作者 胡杰 蒋剑平 +1 位作者 熊耀康 张春椿 《中国中医药科技》 CAS 2016年第2期168-169,171,共3页
目的:对高效液相色谱法(HPLC)和超高效液相色谱法(UPLC)测定的南方红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ(10-DABⅢ)含量进行比较。方法:分别建立HPLC和UPLC测定南方红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量的方法。HPLC法为Inertsil ODS-SP(4.6×250 m... 目的:对高效液相色谱法(HPLC)和超高效液相色谱法(UPLC)测定的南方红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ(10-DABⅢ)含量进行比较。方法:分别建立HPLC和UPLC测定南方红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量的方法。HPLC法为Inertsil ODS-SP(4.6×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇:水(53∶47)为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长227 nm,柱温30℃;UPLC法为ACQUITY UPLC BEH C_(18)(2.1×100 mm,1.7μm)色谱柱,以甲醇∶水(53∶47)为流动相,流速分别为0.3 mL·min^(-1),检测波长227 nm,柱温15℃。结果:超高效液相色谱仅6.8 min即可完成测试,测定时间远低于高效液相色谱法,2种方法所得结果一致结论:UPLC法较HPLC法具有速度更快、灵敏度更高,且节省溶剂的优势。UPLC法可以成功代替HPLC法,应用于南方红豆杉药材的质量控制。 展开更多
关键词 南方红豆杉 @10-脱乙酰巴卡亭 超高效液相色谱法 高效液相色谱法
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高压破碎提取-工业色谱分离制备10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ 被引量:1
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作者 李海池 李志良 +1 位作者 史庆龙 葛发欢 《中药材》 CAS 北大核心 2019年第6期1364-1369,共6页
目的:优选红豆杉中10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-DABⅢ)的最佳制备工艺。方法:在单因素试验的基础上,以10-DABⅢ转移率为指标,采用响应面试验设计优化最佳的高压破碎提取条件,通过大孔树脂进一步纯化10-DABⅢ,采用工业色谱分离技术确定10-DA... 目的:优选红豆杉中10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-DABⅢ)的最佳制备工艺。方法:在单因素试验的基础上,以10-DABⅢ转移率为指标,采用响应面试验设计优化最佳的高压破碎提取条件,通过大孔树脂进一步纯化10-DABⅢ,采用工业色谱分离技术确定10-DABⅢ的分离条件,最终得到分离制备10-DABⅢ的工艺路线。结果:最佳高压破碎提取工艺为:乙醇浓度76.70%、破碎压力125 MPa、料液比1∶30(g/mL)、提取2次;工业色谱分离工艺为:分离填料UniPS40-300、流动相为50%乙醇、流速为30 mL/min、进样10 mL。获得的10-DABⅢ产品纯度为99.14%,总转移率为75.26%。结论:该研究建立提取制备10-DABⅢ的工艺,为产业化制备10-DABⅢ开辟一条新途径。 展开更多
关键词 10-脱乙酰基巴卡亭 高压破碎提取 响应面分析 工业色谱
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培养基和培养条件对云南红豆杉细胞生长量及产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响 被引量:2
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作者 赵志莲 李海峰 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第11期4876-4877,4879,共3页
[目的]探讨云南红豆杉细胞生产10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响条件。[方法]研究不同培养基、培养温度和光照强度对云南红豆杉细胞生长量和产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响。[结果]结果表明,BTM培养基中细胞生长量和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量分别是B... [目的]探讨云南红豆杉细胞生产10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响条件。[方法]研究不同培养基、培养温度和光照强度对云南红豆杉细胞生长量和产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响。[结果]结果表明,BTM培养基中细胞生长量和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量分别是B5培养基中的1.7倍和2.6倍;20℃培养时细胞生长量和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量分别是30℃时的1.5倍和5.7倍;暗培养细胞生长量和10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量分别是强光照(3 000 lx)培养时的2.5倍和4.4倍。[结论]该研究结果为云南红豆杉细胞培养生产10-去乙酰巴卡亭Ⅲ提供依据。 展开更多
关键词 云南红豆杉 细胞生长量 10-去乙酰巴卡亭 培养基 培养条件
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稀土诱导子对红豆杉细胞生长及产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响 被引量:1
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作者 赵志莲 顾培安 李海峰 《大理学院学报(综合版)》 CAS 2009年第12期4-6,共3页
目的:研究稀土诱导子对云南红豆杉细胞生长及产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响。方法:在培养12d后分别向培养基中添加不同浓度的硝酸铈、硝酸铈铵和硝酸镧诱导子,经过培养对云南红豆杉细胞生长量进行统计,用HPLC法测定细胞中10-去乙酰巴卡... 目的:研究稀土诱导子对云南红豆杉细胞生长及产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响。方法:在培养12d后分别向培养基中添加不同浓度的硝酸铈、硝酸铈铵和硝酸镧诱导子,经过培养对云南红豆杉细胞生长量进行统计,用HPLC法测定细胞中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量。结果:培养基中添加0.1mmol/L硝酸铈、0.01mmol/L硝酸铈铵和0.01mmol/L的硝酸镧时,10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量是不添加时的2.3倍、4.1倍和2.6倍,含量分别为0.05446%、0.09767%和0.06187%。结论:该研究为云南红豆杉细胞培养生产10-去乙酰巴卡亭Ⅲ提供理论依据。 展开更多
关键词 云南红豆杉 细胞生长 10-去乙酰巴卡亭 稀土 诱导子
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HPLC法测定南方红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ和金松双黄酮含量
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作者 凌子懿 吴泽君 +3 位作者 包敏 唐小鹏 肖人钟 丁野 《广州化工》 CAS 2022年第22期130-132,共3页
建立HPLC法同时测定南方红豆杉药材中主成分10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ和金松双黄酮的含量。采用Inertsil ODS-3 C 18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-0.1%冰醋酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长232 nm。研究... 建立HPLC法同时测定南方红豆杉药材中主成分10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ和金松双黄酮的含量。采用Inertsil ODS-3 C 18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-0.1%冰醋酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长232 nm。研究表明10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ在0.8640~216.0μg·mL^(-1)(r=0.9999)范围内、金松双黄酮在0.8036~200.9μg·mL^(-1)(r=0.9997)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为99.85%(RSD=0.72%)、99.35%(RSD=0.90%)。本方法简便、准确可靠,可用于南方红豆杉药材及中药饮片的质量控制。 展开更多
关键词 南方红豆杉 10-脱乙酰巴卡亭 金松双黄酮 含量测定 高效液相色谱法
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Cu^(2+)、前体对红豆杉细胞生长及产生10-Deacetyl Baccatin的影响 被引量:4
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作者 张海珠 赵志莲 +1 位作者 刘光明 李海峰 《大理学院学报(综合版)》 CAS 2009年第6期5-8,共4页
目的:研究前体和Cu2+诱导子对云南红豆杉细胞生长和产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响。方法:在培养12d后分别向培养基中添加不同浓度的乙酸钠、苯甲酸钠两种前体和CuSO4诱导子,经过培养对云南红豆杉细胞生长情况进行统计,用HPLC测定细胞中10... 目的:研究前体和Cu2+诱导子对云南红豆杉细胞生长和产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响。方法:在培养12d后分别向培养基中添加不同浓度的乙酸钠、苯甲酸钠两种前体和CuSO4诱导子,经过培养对云南红豆杉细胞生长情况进行统计,用HPLC测定细胞中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量。结果:培养基中添加0.1mmol/L乙酸钠和0.1mmol/L苯钾酸钠,10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量是不添加时的1.8倍和2.8倍,含量分别为0.079 88%、0.082 91%;B5培养基中添加0.1mg/L硫酸铜时,10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量是B5培养基标准含量的2.2倍。结论:确定了云南红豆杉细胞悬浮培养过程中B5培养基添加乙酸钠、苯甲酸钠和硫酸铜的最佳浓度,表明适宜浓度前体和Cu2+诱导子对10-去乙酰巴卡亭Ⅲ合成与释放有显著影响。 展开更多
关键词 云南红豆杉 细胞生长 10-去乙酰巴卡亭 前体 诱导子
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