巴戟天含药血清对高糖诱导的血管内皮细胞FOXP2/AGGF1信号通路及增殖、迁移的影响

目的探索巴戟天含药血清对高糖诱导的血管内皮细胞增殖、迁移及侵袭的影响,并初步研究其作用机制。方法体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),并建立高糖损伤模型,随机分为空白对照组、对照组、巴戟天低、中、高剂量组;噻唑蓝(MTT)法检测各组HUVEC增殖变化情况;膜联蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(AnnexinⅤ-FITC/PI)法检测各组HUVEC凋亡情况;划痕实验和侵袭实验(Transwell)分别评估各组HUVEC的迁移、侵袭能力;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组HUVEC叉头框蛋白(FOX)P2及G补缀FHA域血管生成因子(AGGF)1 mRNA表达情况;Western印迹分析检测各组HUVEC FOXP2及AGGF1蛋白表达情况。结果30 mmol/L D-葡萄糖浓度为诱导HUVEC损伤的最佳高糖浓度值;与空白对照组和对照组相比,巴戟天低、中、高剂量组HUVEC存活率、划痕愈合率、侵袭数量、FOXP2、AGGF1 mRNA及蛋白表达水平依次明显升高,细胞凋亡率依次明显降低(P<0.05),呈剂量依赖性。结论巴戟天含药血清能够促进人脐静脉血管内皮细胞的增殖、迁移并抑制凋亡,可能与激活FOXP2/AGGF1信号通路相关。

巴戟天多糖含药血清对骨髓间充质干细胞成骨分化过程中Cbfa-1 mRNA表达的影响

目的探讨巴戟天多糖含药血清对SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)骨向分化过程中核心结合因子ɑ-1(Cbfɑ-1)m RNA表达的影响。方法全骨髓贴壁法分离培养SD大鼠BMSCs,采用p NPP法检测不同浓度r巴戟天多糖含药血清(高、中、低)对BMSCs碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,并以其最佳作用浓度进行后续实验,后续实验分成空白组、成骨诱导组、巴戟天多糖含药血清组、联合组(巴戟天多糖含药血清组+成骨诱导组),各组用药14d,采用RT-PCR技术检测各组BMSCs Cbfa-1m RNA表达的情况。结果与对照组比较,不同剂量的巴戟天多糖含药血清均可提高BMSCs分泌ALP(F=126.278,P<0.05),其中高剂量组的作用强度高于其它剂量组;与空白组相比,成骨诱导组、巴戟天多糖含药血清组、联合组均能上调BMSCs中Cbfa-1 m RNA的表达(F=261.412,P<0.05);但与成骨诱导组相比,巴戟天多糖含药血清组不及成骨诱导组,两者差异有统计学意义(t=26.721,P<0.05)。结论巴戟天多糖含药血清能够促进BMSCs向成骨细胞分化,并能上调Cbfa-1 m RNA的表达,但其作用不及成骨诱导强。