一株甲胺磷高效降解菌——巴氏葡萄球菌(Staphylococcus pasteuri)的筛选及其分子鉴定

从湘潭南天化工厂的甲胺磷废水和污泥中分离细菌样品,以甲胺磷为唯一碳源和能源,经过定向筛选,得到1株可高效降解甲胺磷的菌株HN003,气相色谱测定其对甲胺磷的平均降解效率在24h、48h和72h分别达到45.8%、88.5%和100%。对其进行常规生理生化测试,结果表明,菌株HN003革兰氏染色为阳性,在10-42℃、pH3.0-pH14.0范围内均能生长,并与巴氏葡萄球菌的表型特征非常相似。为了进一步确定HN003的分类学地位,测定了其16S rRNA基因序列(1541bp),分析了相关细菌相应序列的同源性,构建了分子系统发育树,结果表明,菌株HN003与巴氏葡萄球菌的亲缘关系最近。综合上述结果,菌株HN003可鉴定为巴氏葡萄球菌(Staphylococcus pasteuri)。

巴氏葡萄球菌TS-82联合酿酒酵母发酵改善沙棘果酒风味

利用巴氏葡萄球菌TS-82联合酿酒酵母发酵沙棘果酒,分别采用皂化法、高效液相色谱(HPLC)、气相色谱-质谱联用(GC-MS)比较该酿造方法与传统酿造方法中类胡萝卜素、十种主要多酚和降异戊二烯类化合物的含量差异。结果表明:巴氏葡萄球菌TS-82联合酿酒酵母发酵沙棘果酒可催化类胡萝卜素降解产生风味物质,β-环柠檬醛、β-紫罗兰酮、β-紫罗兰酮-5,6-环氧化物和二氢猕猴桃内酯等典型香气物质的含量明显增加(p<0.05),同时也可保留一定量的类胡萝卜素(2.4 mg/L),确保沙棘果酒的营养和风味兼得。此外,还发现酿酒酵母和巴氏葡萄球菌TS-82的共同添加可提高沙棘果酒中没食子酸、儿茶酸、阿魏酸、金丝桃苷和鞣花酸等游离酚的含量(p<0.05)。综上所述,巴氏葡萄球菌TS-82联合酿酒酵母发酵可有效改善沙棘果酒的风味。

巴氏葡萄球菌TS-82类胡萝卜素裂解酶的分离纯化及其酶学特性

巴氏葡萄球菌TS-82类胡萝卜素裂解酶经强阴离子柱、高效制备液相色谱和多肽分子筛纯化得到液相级纯酶(95.6%)。该酶比活力为125 U/g,纯化倍数为446,回收率为2.39%。纯化后的类胡萝卜素裂解酶经液相色谱-质谱联用测定,得其分子质量为655.093 D。关于酶学特性,研究发现该酶对C_(40)类胡萝卜素底物的最适温度为60℃,而作用于β-阿朴-8’-胡萝卜醛的最适温度是50℃,该酶的稳定温度为50℃以下;该酶对所测定底物的最适p H值为3.0;该酶与5种底物亲和力排列为:玉米黄质>虾青素>β-胡萝卜素>角黄质>β-阿朴-8’-胡萝卜醛;Al^(3+)和Fe^(3+)是该酶的强效催化剂,Fe^(2+)是该酶的强效抑制剂;H_2O_2在低浓度范围内(0~16 mmol/L)可促进酶活性;低体积分数乙醇(4%~16%)的添加对酶活性无明显抑制作用。结果表明该酶具有很好的耐酸性和热稳定性,能够适应果酒环境,为其工业化应用提供依据。

巴氏葡萄球菌类胡萝卜素降解酶的酶学性质研究

目的:从巴氏葡萄球菌发酵液中分离出可降解类胡萝卜素的酶,初步纯化,研究其生化性质,为后续研究纯酶性质打基础。方法:以β-胡萝卜素标准品为底物,通过检测最适温度、耐热性、最适p H、耐酸性,活化能等研究该类胡萝卜素降解酶的生化性质。结果:该类胡萝卜素降解酶的最适反应温度60℃,具有较稳定的耐热性。根据阿伦尼乌斯方程得到酶与底物反应的活化能Ea为81.086 k J/mol。该酶的耐酸性较强,在p H 3.0时活性最高。Fe2+抑制酶的活性,Al3+、Fe3+促进酶活性,而其它金属离子对该酶的影响较小。在40℃和p H 5.0条件下,其反应动力学常数Km为14.205μmol/L,最大反应速率Vmax为1.0101μmol/(L·min)。结论:该类胡萝卜素降解酶的动力学性质与其它来源的胡萝卜素酶相比明显不同,可能是降解β-胡萝卜素的一个新的家族。

等离子体活化水对加州鲈巴氏葡萄球菌的抑制作用

以加州鲈鱼肉为原料,研究等离子体活化水(Plasma-activated water,PAW)对其优势腐败菌(巴氏葡萄球菌)的抑制效果和对染菌鱼块的腐败抑制能力。利用比浊法和涂布法研究制备时间(0~60 min)对PAW抑菌作用的影响。以感官评价、质构、挥发性盐基氮(Total volatile base nitrogen,TVBN)、菌落总数(cfu/g)为指标,测定PAW对鲈鱼腐败的抑制能力。实验结果表明,PAW制备时间越长,抑菌效果越好;其中,PAW60对巴氏葡萄球菌的抑制率达(95.25±0.05)%,显著高于其他各组(P<0.05),抑菌能力最强。染菌鱼块经PAW60处理30 min,室温下贮藏48 h后,腐败菌数和TVBN值分别为(8.13±0.02)log cfu/g和(61.73±0.57)mg/100 g,显著低于对照组样品的腐败菌数和TVBN值;鱼肉色泽和外观与对照组相比显著提高(P<0.05),气味、质地和总体接受度与对照组无显著性差异(P>0.05)。综上,PAW60对巴氏葡萄球菌抑制效果良好,用其处理染菌加州鲈鱼鱼块30 min能明显抑制鱼肉腐败,并改善其贮藏品质。

新型发酵剂对沙棘果酒品质及抗氧化性的影响

以沙棘果酒的理化性质、总酚含量、总黄酮含量及抗氧化性为指标,探究酵母菌传统发酵(方法Ⅰ)、巴氏葡萄球菌TS-82联合酵母菌发酵(方法Ⅱ)和酵母菌发酵并添加类胡萝卜素降解酶(方法Ⅲ)三种不同酿造方法对沙棘果酒发酵品质及抗氧化性的影响。结果表明:与方法Ⅰ相比,方法Ⅱ和Ⅲ对pH、可溶性固形物、酒精度、还原糖、滴定酸及微生物指标影响不大,且无致病菌检出。应用方法Ⅱ,可显著提高总酚含量(p<0.05),达到9.3 g/L(gallic acid计),且DPPH·的清除能力(86.5%)和铁离子还原能力(88%)也有所提高(p<0.05)。应用方法Ⅲ,沙棘果酒总酚含量为8.7 g/L(gallic acid计),DPPH·的清除能力为84.7%,铁离子还原能力为87.6%,与方法Ⅱ相比,总酚含量和DPPH·清除能力显著降低(p<0.05)。因此巴氏葡萄球菌TS-82联合酵母菌发酵的方式(方法Ⅱ)应用在沙棘果酒酿造中,在改善风味的同时,有利于开发高抗氧化性的保健食品。

TMPD降解菌Staphylococcus pasteuri的鉴定

通过形态学观察、生理生化特征测定和16S rDNA序列同源性分析,对1株TMPD降解菌(LF-2)进行了鉴定。结果表明:LF-2的形态及主要生理生化特征与葡萄球菌属一致,而且与巴氏葡萄球菌(AJ717376)的16S rDNA序列具有99.80%的同源性;在系统发育树上构成一个分支。由此确定TMPD降解菌LF-2属于巴氏葡萄球菌(Staphylococcus pasteuri)。

猪肌肉多发性脓肿病原菌的分离鉴定及药敏试验

广东某大型养殖场在生猪屠宰过程中,发现一体征无异常,但全身肌肉出现多发性脓肿的病例。本试验对病灶的脓汁进行了细菌分离、培养、鉴定及药敏试验,并对感染部位进行了病理学分析。菌落形态学观察、革兰染色镜检、生化试验和16S rDNA基因序列分析结果显示,该猪肌肉多发性脓肿病原菌为巴氏葡萄球菌;药敏试验结果显示,分离菌株对青霉素、万古霉素、林可霉素等多种常见抗菌药耐药;病理切片结果显示,脓肿病灶中有大量的炎症细胞浸润。本试验为诊断此类猪肌肉多发性脓肿病提供了科学依据,为辨别同类病例提供了临床经验。