巴西海木提取物抗生殖系统氧化损伤活性研究

目的考察巴西海木提取物对生殖系统氧化损伤的影响,初步探究其作用机制。方法采用水和不同比例(50%、70%及95%)乙醇溶液浸提巴西海木树皮,得到4种粗提物;依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取不同比例醇提物,得到9种有机相组分,共得到13种巴西海木提取物TCE-1~TCE-13。以小鼠睾丸支持细胞(TM4)增殖率变化为指标考察各提取物的细胞毒作用;采用H_(2)O_(2)处理TM4细胞建立氧化损伤模型,以细胞存活率及氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力变化为指标,邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)处理雄性小鼠建立生殖系统氧化损伤模型,造模后灌胃给予300、600、900 mg·kg^(-1)50%粗提乙酸乙酯组分(TCE-6)28 d后,以睾丸组织氧化指标变化验证TCE-6药效。最后通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测相关基因的表达情况,初步探究其作用机制。结果细胞毒性实验结果表明95%粗提物(TCE-4),50%粗提石油醚组分(TCE-5)、正丁醇组分(TCE-7),70%粗提石油醚组分(TCE-8)、正丁醇组分(TCE-10)以及95%粗提石油醚(TCE-11)、正丁醇组分(TCE-13)对TM4细胞具有杀伤作用。50%粗提物(TCE-2)、TCE-6以及70%粗提乙酸乙酯组分(TCE-9)给药组显著提高氧化损伤后TM4细胞存活率,TCE-6组SOD、GSH-Px活力显著提高、MDA含量显著下降(P<0.01)。900 mg·kg^(-1)TCE-6处理后能显著提高氧化损伤模型小鼠睾丸组织内SOD、GSH-Px活力,降低MDA含量(P<0.05)。qRT-PCR结果表明,900 mg·kg^(-1)TCE-6处理后提高了核因子E2相关因子2(Nrf2)、超氧化物歧化酶2(SOD2)及超氧化物歧化酶3(SOD3)mRNA的表达(P<0.05)。结论TCE-6可能通过上调SOD酶家族表达和调节Nrf2信号通路发挥抗生殖系统氧化损伤作用,具有开发为生殖系统损伤治疗药物的潜力。