中国主要油茶产区山茶炭疽菌群体遗传结构分析

以中国主要油茶产区的油茶(Camellia oleifera Abel.)炭疽病优势种山茶炭疽菌(Colletotrichum camelliae)的16个地理种群168个菌株为供试材料,应用ISSR分子标记技术进行遗传多样性和种群遗传结构分析。16个地理种群的多态位点百分比(PPB)为98.99%,Nei’s基因多样性指数(He)为0.28,Shannon信息多样性指数(Is)为0.43,遗传相似度(I)平均为0.834,遗传距离(D)平均为0.183,表明山茶炭疽菌遗传多样性水平较高且异质性较强,种群间存在一定程度的遗传变异,遗传距离与地理距离之间无相关性。湖北省、浙江省、江西省、湖南省和广西5个省级种群总基因多样度(Ht)为0.274 8,遗传分化系数(Gst)为0.517 4,基因流(Nm)为0.466 4,表明山茶炭疽菌5个省级种群虽然被分化,但是不存在基因流动现象(Nm<1)。

巴西橡胶树48份野生种质对胶孢炭疽菌抗性评价

选取来自巴西3个州的48份橡胶树(Hevea brasiliensis)野生种质,将胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)活化后进行大田接种鉴定及自然条件评价,以筛选抗性种质。橡胶树种质人工接种大田鉴定结果表明,抗病种质3份,中感种质14份,感病种质25份,高感种质6份;自然评价的结果与大田接种鉴定结果显著相关。3份抗性种质均来自于巴西Rondonia州。

贵州百香果果实炭疽病病原菌分离及鉴定

炭疽病是贵州百香果果实重要病害之一。采用组织分离法,从贵州百香果炭疽病病果中分离到疑似炭疽菌株B10、ZB3,根据分离纯化菌株的形态特征、柯赫氏法则验证,以及基于ITS-TUB2-ACT-CHS-1多基因序列系统发育树分析,明确引起贵州产区百香果果实炭疽病病原主要为巴西炭疽菌Colletotrichum brasiliense和喀斯特炭疽菌C.karstii。

海南岛橡胶炭疽菌基础生物学特性研究

对来源于海南省的11个橡胶炭疽菌株进行了生物学特性研究。结果表明:参试菌株之间菌落、分生孢子形态及大小总体变化幅度不大;测试菌株的最适生长温度为24～26℃,pH值为5.0～7.0,但是参试菌株间的生长速率差异较大,以RC169生长最慢;橡胶树幼苗活体叶片刺伤处理后的病情指数明显高于不刺伤处理,且菌株RC14的致病力比较弱,而RC29、RC30的致病力较强。

根癌农杆菌介导的香蕉炭疽菌转化

利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的转化方法,以香蕉炭疽菌(Colletotrichum musae)的分生孢子为受体,pTHPR1为双元载体,成功实现了植物病原真菌香蕉炭疽菌的遗传转化.在诱导培养基pH 5.6、乙酰丁香酮200μg/mL、共培养时间24 h等适宜条件下,最高转化率可达260个转化子/106个孢子.对转化子的PCR检测表明,T-DNA已整合到香蕉炭疽菌的基因组中,转化子的遗传表现稳定.

希金斯炭疽菌14-3-3蛋白质生物信息学分析

希金斯炭疽菌(Colletotrichum higginsanum Sacc.)可以侵染菜心、萝卜等十字花科蔬菜引起炭疽病,不仅降低蔬菜的产量,还影响蔬菜的品质。基于酿酒酵母中2个典型14-3-3蛋白质序列,利用Blastp以及关键词对炭疽菌属蛋白质数据库进行搜索,明确该菌存在2个典型的14-3-3蛋白质,分别命名为ChFTT1、ChFTT2;对这两个蛋白质进行理化性质、二级结构、疏水性、信号肽、跨膜结构域以及亚细胞定位等生物信息学分析,可为深入研究希金斯炭疽菌14-3-3蛋白质功能提供参考。

希金斯炭疽菌PITP生物信息学分析

以酿酒酵母中已经报道的5个典型PITP序列为基础,对炭疽菌属蛋白质数据库进行Blastp比对以及关键词搜索,并通过SMART保守结构域分析,明确该菌含有4个典型的PITP;同时,通过对上述氨基酸序列进行疏水性、细胞信号肽、跨膜区结构域、亚细胞定位以及二级结构等生物信息学分析,并与其他物种中15个同源序列进行遗传关系比较分析,以期为深入开展希金斯炭疽菌(Colletotrichum higginsanum Sacc.)PITP的功能研究打下理论基础,同时,也为进一步开展其他炭疽菌的研究提供重要的理论指导。

希金斯炭疽菌腺苷酸环化酶生物信息学分析

希金斯炭疽菌(Colletotrichum higginsanum Sacc.)可以侵染菜心、萝卜等众多十字花科蔬菜引起炭疽病,给生产造成巨大的经济损失。通过对该菌中可能的腺苷酸环化酶(AC)氨基酸序列进行理化性质、细胞信号肽、跨膜区结构以及二级结构等生物信息学分析。结果表明,该菌种Ch Cap1,Ch Cap2与Srv2在理化性质、二级结构、亚细胞定位方面差异较大,以期为深入开展AC基因的定位、表达以及功能域等方面研究及为进一步实现以控制病原菌G蛋白信号途径功能新药物靶标的开发提供有力的理论支撑。

胶孢炭疽菌对核桃叶生理生化特性的影响

以离体的泡核桃(Juglans sigillata Dode)叶为材料,研究了胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)对核桃(Juglans regia L.)叶生理生化指标的影响。结果表明,接种胶孢炭疽菌感病后核桃叶片内超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性均随着感病时间的延长呈先升高后降低的趋势,过氧化物酶(POD)活性则随着感病时间的延长呈先下降后升高的趋势,核桃叶发病第三天和第五天的SOD、POD和CAT活性均显著高于对照;丙二醛(MDA)、可溶性蛋白质和可溶性糖含量均随着核桃叶感病时间的延长呈现出升高的趋势,其中,MDA含量在感病的第三天和第五天均显著高于对照,而可溶性蛋白质和可溶性糖含量与对照差异不显著;叶绿素含量随着核桃叶感病时间的延长而下降,在感病第五天叶绿素含量显著低于对照;感病核桃叶的净光合速率显著低于对照,气孔导度、胞间CO2浓度和蒸腾速率则与对照差异不显著。可见,胶孢炭疽菌感染对泡核桃叶片的生理生化特性有显著影响。

湖北省草莓炭疽病菌对咪鲜胺的敏感性

由炭疽属真菌（ Colletotrichum spp.）引起的炭疽病是草莓育苗期的主要病害，在世界各地普遍发生。采用菌丝生长速率法，测定了湖北省内17个不同地区采集分离的103株草莓炭疽病菌株对咪鲜胺的敏感性。结果显示：咪鲜胺对湖北省草莓炭疽病菌的EC50值分布范围为0.0142~0.2156μg/mL，平均值为（0.0938±0.0299）μg/mL，其敏感性频率符合正态分布，因此可将该EC50平均值作为湖北省草莓炭疽病原菌群体对咪鲜胺敏感基线的参考值。

金钗石斛炭疽病病原鉴定及杀菌剂毒力测定

近年贵州赤水市种植的金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl)炭疽病(烟煤病)发生较多,该病害分布广、危害严重。对金钗石斛炭疽病菌的生物学特性、培养性状及形态等研究,初步确定病原菌为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides),结合ITS序列分析,确定该致病菌为胶孢炭疽菌。杀菌剂室内抑菌试验结果表明多菌灵对其有较好的抑制作用。

柿炭疽病研究进展

概述了柿炭疽病病原的命名发展过程、病原种类的多样性、侵染过程和分子生物学研究等方面的重要成果,特别是病原侵染过程的细胞学研究与其他炭疽菌侵染过程的异同、致病相关基因的克隆与功能分析方面,并对今后柿炭疽病的研究方向进行了展望。

番木瓜炭疽病生防木霉菌株的初步筛选

为利用生物防治的方法抑制番木瓜炭疽病,通过测定并综合分析比较各木霉菌株的抗生作用、产孢量、不同培养基下的抑菌率、生长速度以及耐药性,从90株木霉菌株中初步筛选出拮抗番木瓜炭疽菌的优良木霉菌(Trichodermaspp.)T05-049、T8-R、T05-035和T05-044等4株菌株,其产孢量分别为1.42×109、5.45×108、4.16×108、1.38×109;在1.01 mg/L特可多的条件下,均生长良好;该4个菌株在25、20、15和10℃下生长正常,耐温性较好,对炭疽菌(Colletotrichumspp.)的抗生作用分别为3、1、1、5;分别在PDA和番木瓜培养基上于25、20和15℃下培养,木霉对胶孢炭疽菌(C.gleosporioides)的抑制率在57.05%以上,对辣椒炭疽菌(C.capcisi)的抵制率在47.87%以上.

辣椒炭疽病菌种类及主栽品种抗病性鉴定

辣椒炭疽病是辣椒生产上的重要病害,推广和使用抗病品种、采用合适的种植模式是辣椒生产上防治该病害最经济有效的方法。为明确河北省鸡泽县和望都县主栽品种辣椒炭疽病的病原菌种类和抗病性高低,采用稀释分离法分离鉴定了辣椒炭疽病的病原菌种类,采用田间自然发病方式测定了生产上10个主栽品种的抗病性程度,并调查两地不同种植模式辣椒炭疽病发病率。结果表明:鸡泽县和望都县辣椒炭疽病的主要病原菌是黑点炭疽菌(Colletotrichum capsici)和红色炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)。10个辣椒品种对辣椒炭疽病没有高抗品种,望都椒和冀泽羊角红1号为抗病品种,病情指数分别为12.39和16.67。4种种植模式中以玉米与辣椒间作后辣椒炭疽病病果率最低,为8.89%。由此建议在选择抗病品种的基础上,通过辣椒与玉米间作预防辣椒炭疽病发生。

芒果胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)CgFAE基因对孢子产量及菌丝生长的影响

炭疽病是芒果的重要病害之一,由胶孢炭疽菌引起。阿魏酸酯酶为细胞壁降解酶,在致病机理中起着越来越重要的作用。本研究克隆了芒果胶孢炭疽菌的一个阿魏酸酯酶基因FAE,命名为CgFAE,该基因编码一个含有539个氨基酸的蛋白,分子质量约为58.3 k D。为了进一步研究该基因的功能,根据同源重组原理,构建了CgFAE基因的敲除载体pCB1532-CgFAE,通过PEG介导的原生质体转化法将其转入到胶孢炭疽菌原生质体细胞中进行同源交换,经过对转化子进行抗性筛选和分子鉴定,获得CgFAE基因的敲除突变体ΔCgfae,并对其孢子产量和菌落生长情况进行分析,发现胶孢炭疽菌CgFAE基因的敲除突变体ΔCgfae的孢子产量低于野生型菌株,菌落生长慢于野生型菌株。以上结果表明,该基因与胶孢炭疽菌的产孢能力与菌丝生长有关。

炭疽菌属真菌分类的研究进展

炭疽菌(Colletotrichum)是一类重要真菌,其分类研究一直是菌物学家关注的热点问题.文章对近年来炭疽菌分类研究的新进展,主要包括形态分类学、分子系统学以及其他分类方法的研究进展进行了综述,对生理生化特征、性亲和性以及次生代谢产物种类在炭疽菌鉴定上的应用情况进行了简述,并对炭疽菌分类研究的未来发展趋势进行了展望.

柑橘炭疽菌的生物学特性及硼对其抑制作用

我国是世界柑橘生产第一大国，由胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides引起的柑橘炭疽病严重威胁柑橘生产。目前，该病仍以化学药剂防治为主，但化学防治常导致病原菌抗性增强、环境污染和食品安全等问题。硼是植物生长发育所必需的微量元素，已有研究表明，硼对某些植物病害有很强的抑制作用，但硼对柑橘炭疽菌的抑制作用尚未见报道。为此，本研究探讨了柑橘炭疽菌的生物学特性和硼对炭疽菌的抑制作用，以期为柑橘炭疽病的防治及杀菌剂的开发提供理论依据。

侵染油茶的两种病原菌的鉴定及其生物学特性研究

为了掌握湖北孝感本地油茶(Camellia oleifera)主要病害发生规律,采用常规组织分离法分离病原菌,依据病原菌的形态特征,结合其r DNA-ITS序列分析,对油茶病原菌进行分离和分子鉴定,并对其生物学特性进行了研究。结果表明,鉴定两种病原菌分别为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)和链格孢(Alternaria alternata);炭疽病菌菌株在PDA培养基中生长最快,最适碳源和氮源分别为淀粉、硫酸铵,p H 6.0为宜,最适生长温度为25℃,致死温度为52℃;链格孢菌株最适培养基为PDA培养基,以淀粉为碳源、硝酸铵为氮源为宜,p H 8.0时菌丝生长最快,最适温度为25℃,致死温度为54℃。

菠萝蜜蒂腐病病原菌分离与鉴定

对海南省菠萝蜜病害调查过程中,发现菠萝蜜发病严重,症状表现为果柄表皮呈水浸状腐烂但不脱落,有时能看到明显白色霉层,后逐渐向果实部位蔓延,果蒂逐渐变褐色,在田间,常可发现感染该病的病果果蒂脱水干枯而悬挂于树枝上,这与已经报道的可可球色单隔孢Botryodiplodia theobromae Pat.引起木菠萝球二孢叶斑病及果腐病明显不同,故命名为蒂腐病。采用常规组织分离法从该病样中分离出菌株,经柯赫法则验证后,通过形态学鉴定、ITS、GAPDH、ACT、CHS-1和TuB-2序列分析。结果表明,引起菠萝蜜蒂腐病的病原菌为胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides类群中的Colletotrichum siamense。

胶孢炭疽菌特有效应蛋白基因CgE23对产孢能力的影响

天然橡胶作为中国重要的工业原料和战略资源,其产量一直受到病害的影响,其中包括橡胶树炭疽病。胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)和尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum)作为橡胶树炭疽病的致病因子,均可以引起橡胶树炭疽病,但胶孢炭疽菌的致病性远强于尖孢炭疽菌的致病性。本研究通过比较胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌的基因组测序结果,利用RT-PCR技术扩增了一个胶孢炭疽菌特有效应蛋白基因,命名为CgE23。生物信息学分析表明,CgE23编码一条212个氨基酸的多肽,分子质量为22.7 kD,其中第1~第16位氨基酸是典型的信号肽序列,第106~第208位的氨基酸编码一个HNH保守结构域。依据同源重组和基因回补原理,构建了CgE23基因的敲除载体pCB1532-CgE23-Sur和互补载体Cgniad-CgE23-Flag-HPH,并通过PEG介导转化法将其转入到胶孢炭疽菌原生质体细胞,分别经过氯嘧磺隆(Sur)和潮霉素(HPH)抗性筛选和分子鉴定后,成功获得CgE23基因的敲除突变体ΔCgE23和基因互补突变株Res-ΔCgE23。进一步研究发现,ΔCgE23的孢子产量显著低于野生型和互补株Res-ΔCgE23,基因互补株Res-ΔCgE23的孢子产量与野生型并无明显差异。以上结果表明CgE23与胶孢炭疽菌的产孢能力有关。本研究结果可为进一步研究胶孢炭疽菌特有效应蛋白基因CgE23的功能和致病机制提供帮助。