巴西苏木素通过抑制SarA以PIA依赖性方式减少MRSA生物膜形成的研究

目的 探究巴西苏木素(brazilin,BN)抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)生物膜形成的机制,为开展中医药防治MRSA感染提供新思路。方法 建立MRSA ATCC43300菌株生物膜模型,试验分为BN 8、16和32μg/mL组及对照组;通过结晶紫法测定BN对MRSA生物膜的抑制作用;刚果红平板法、硫酸-苯酚法检测BN对细胞间多糖黏附素(polysaccharide intercellular adhesion,PIA)合成的影响;使用real-time PCR(qRT-PCR)方法验证胞间黏附素操纵子icaA和icaD转录水平;分析高通量转录组测序可能存在的生物膜抑制基因;通过qRT-PCR、Western blot方法对相关基因及蛋白加以验证;通过皮下埋植静脉导管建立MRSA生物膜感染小鼠模型进一步验证BN疗效。结果 与对照组相比,不同浓度的BN组均能显著减少MRSA生物膜及PIA生成,其中在最低剂量8μg/mL BN作用下,MRSA生物膜形成量下降40.17%(P<0.01)、PIA减少55.56%(P<0.01);通过qRT-PCR验证不同浓度的BN组均能显著抑制icaA和icaD基因的表达,其中在8μg/mL浓度下,icaA和icaD基因的表达量分别比对照组降低了59.03%(P<0.01)、48.33%(P<0.05);高通量测序显示sarA下调-1.458 log2;qRTPCR、Western blot结果显示,BN能显著抑制sarA转录及其蛋白表达;通过体内实验显示,BN能有效抑制小鼠体内MRSA生物膜的形成。结论 BN通过抑制SarA的表达,减少PIA的合成,进而干预生物膜的形成。

巴西苏木素对MRSA丙氨酸消旋酶抑制作用的初步研究

目的 探讨巴西苏木素(BN)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)丙氨酸消旋酶(Alr)的抑制作用。方法 PCR扩增MRSA丙氨酸消旋酶基因Alr,通过使用酶切和连接技术构建重组表达质粒pET-28a-Alr,然后将其转化至E.coil BL21(DE3)中,利用IPTG诱导表达Alr,并通过镍离子亲和层析法进行纯化;试验分为对照组MOCK(不作任何处理)、不同浓度BN组(8、16、32、64μg/mL),分别测定不同浓度BN对Alr活性的影响;通过细胞热位移分析(CETSA)实验测定BN对Alr蛋白热稳定性的影响;利用软件AutoDock Vina将BN与Alr进行分子对接,预测两者之间的结合模式。结果 成功诱导表达纯化Alr蛋白,且其具备将L-丙氨酸外消旋为D-丙氨酸的活性。与对照组相比,不同浓度的BN均能够抑制Alr的活性,其中在64μg/mL BN作用下,抑制率达到50%(P<0.0001)。CETSA实验结果显示,在55.9~59.5℃下BN处理后的Alr蛋白热稳定性明显高于Mock组(P<0.0001)。分子对接结果显示BN与Alr之间的结合能为-8.0 kcal/mol,与Alr活性位点内的Gly221、Phe169、Arg219、Ser204、Ile222和Tyr43形成氢键,与其活性位点通道的Ile352、Tyr354形成π-π键及疏水作用,与Asn203形成疏水作用。结论 BN对Alr的活性具有抑制作用,可能是因为BN与Alr蛋白活性位点处的结合能力相关。

巴西苏木素对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌抑制作用机制研究

目的探讨巴西苏木素对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)的体外抑制作用及其机制。方法收集临床分离的金黄色葡萄球菌,经VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪鉴定为MSSA,采用二倍稀释法和平板法测定巴西苏木素对其的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);采用绘制生长曲线方法观察巴西苏木素对其生长的影响作用;采用油镜法观察巴西苏木素对MSSA形态的影响;采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定巴西苏木素对MSSA可溶性蛋白的影响;采用紫外分光光度计测定其DNA及RNA等大分子物质的外渗水平;通过测量MSSA产溶血环的大小来反映巴西苏木素对α-溶血素分泌的影响;通过建立MSSA生物膜模型、计算生物膜内存活菌的数量反映巴西苏木素对MSSA生物膜的作用效果。结果巴西苏木素对MSSA的MIC为65μg/mL,MBC为130μg/mL;生长曲线显示巴西苏木素浓度增加,对MSSA的抑制作用增强;镜下形态学的改变表明,药物浓度增加,抑制作用增强,表现为菌体数量减少、干扰菌体繁殖时的聚集;SDS-PAGE蛋白电泳结果表明药物浓度增加,对MSSA可溶性蛋白形成的抑制作用增强;巴西苏木素对MSSA的DNA、RNA的外渗有显著影响(P<0.05),药物浓度增加,外渗量增大;药物浓度增加,溶血环直径减小;药物浓度增加,MSSA生物膜内的存活菌量减少。结论巴西苏木素对MSSA具有极好的抑制作用且具有浓度依赖性,可能通过减少其可溶性蛋白的形成、改变细胞膜的通透性、影响MSSAα-溶血素的活性,从而起到对MSSA的杀灭作用;药物也可能通过破坏生物膜,减少生物膜内MSSA的存活数量来发挥抑制作用。

巴西苏木素通过ROS-JNK通路对皮肤鳞状细胞癌杀伤作用的机制

目的探讨巴西苏木素(Brazilin)对皮肤鳞状细胞癌的杀伤作用及其机制。方法使用Brazilin处理皮肤鳞癌细胞(SCC12),运用MTT法检测细胞活性,Mito-Sox荧光法检测活性氧(ROS)含量。JC-1荧光标记法检测细胞线粒体膜电位。使用Western blot法检测c-Jun氨基末端激酶(JNK)及磷酸化-JNK(p-JNK)蛋白表达。再取32只裸鼠,构建移植瘤模型,分为:用Brazilin药物处理(Bra组),用Brazilin+N-乙酰半胱氨酸(NAC)共处理(Bra+NAC组),用Brazilin+JNK抑制剂(SP600125)处理(Bra+SP组)及Control组,药物处理后,观察病理组织学变化并进行免疫组化检测。结果Bra 32μg/(ml·6 h)时,SCC12细胞活性约为50%;Bra组细胞凋亡高于Control组,Bra组ROS水平、JNK以及p-JNK蛋白表达高于Control组、Bra+NC组,Bra+NAC组ROS水平、JNK以及p-JNK蛋白表达高于Bra组,差异有统计学意义(P<0.05)。Bra组细胞线粒体膜电位低于Control组,Bra+NAC组细胞线粒体膜电位高于Bra组,差异有统计学意义(P<0.05);Bra组肿瘤体积及重量低于Control组,Parp阳性表达细胞高于Control组,差异有统计学意义(P<0.05);Bra+NAC及Bra+SP600125处理后,肿瘤体积和重量无显著变化,Parp阳性表达细胞数低于Bra组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Brazilin可诱导SCC12细胞凋亡,其机制可能是通过诱导ROS升高,进而激活JNK通路来实现的。

巴西苏木素的研究进展

目的:对巴西苏木素的研究进展进行综述。方法:参考相关文献,对巴西苏木素在提取分离、结构鉴定、含量测定、药理活性以及合成等方面进行概述。结果和结论:巴西苏木素结构骨架特殊,具有多种药理活性,有一定的开发利用价值,但在提取分离和化学合成方面需优化步骤、提高收率,药理活性及其作用机制、药代动力学和毒理学等方面值得进一步深入研究。

氧化巴西苏木素对小鼠坐骨神经损伤后脊髓运动神经元中NF-κB表达的影响

目的：探讨氧化巴西苏木素对BALB/c小鼠坐骨神经损伤后相应脊髓节段中NF-κB表达的影响。方法健康成年雄性BALB/c小鼠160只，行单侧坐骨神经离断缝合术后，随机分为空白对照组，高剂量组，中剂量组和低剂量组四组，同期给药。于给药后存活不同时间点获取术侧L4—L6脊髓节段，应用Westen-Blot法检测其中NF-κB的表达变化。于术后第1，2，4，8周行电生理检测。结果 Westen-Blot结果显示高剂量和中剂量组12 h，24 h，3 d，5 d，1周NF-κB 表达量明显低于低剂量组和空白对照组。2周，4周，8周各组比较无明显差异。电生理检测各剂量组与对照组间均存在显著的差异。结论氧化巴西苏木素对坐骨神经损伤后脊髓相应节段细胞中NF-κB活化起到抑制作用，可促进神经再生。

UPLC法测定苏木中巴西苏木素和原苏木素B的含量

目的建立同时测定苏木中巴西苏木素和原苏木素B的质量分数的超高效液相（UPLC）法。方法采用UPLC-PDA方法,色谱柱为ACQUICTY UPLC HSS T3（2.1 mm×100 mm,1.8μm）,流动相为甲醇-质量分数0.2%的冰醋酸水溶液,梯度洗脱,洗脱时间7.5 min,柱温40℃,流量为0.3 m L/min,检测波长为280nm。进样量为10μL。结果巴西苏木素和原苏木素B均达到基线分离,质量浓度在0.195~200μg/m L范围内与峰面积有良好的线性关系,R2均为0.999 8;平均回收率分别为103.89%、99.83%,RSD为1.26%、1.87%。结论相比HPLC法,UPLC法明显提高了同时检测苏木中巴西苏木素和原苏木素B质量分数的分析速度,并且灵敏度更高,可为以后建立苏木质量检测方法新标准提供参考。

HPLC测定苏木配伍马钱子前后对巴西苏木素和原苏木素B含量的影响

目的:测定巴西苏木素和原苏木素B在马钱子配伍苏木(马苏)不同比例水煎剂中的含量变化。方法:制备马苏煎液1∶6组、1∶8组、1∶12组以及1∶24组,采用高效液相色谱法(HPLC)检测巴西苏木素和原苏木素B含量的变化。色谱柱为Agilent SBC18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%醋酸,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为285 nm。结果 :经检测马苏煎液中两种化学成分的线性范围保持在0.025~1.50 mg/mL,两者的相对保留值是0.9997。结论:证明了不同比例的马苏水煎液中巴西苏木素与原苏木素B的含量均保持在梯度式升高的趋势上。

巴西苏木素对舌癌Tca8113细胞凋亡和自噬的影响及分子机制

目的探讨巴西苏木素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其分子机制,为临床用药提供理论依据。方法用MTT法检测巴西苏木素对Tca8113细胞的增殖作用;Hoechst33342染色法观察细胞形态变化;Annexin V/PI双染色检测巴西苏木素对Tca8113细胞凋亡程度的影响;Western blot法检测凋亡相关蛋白bax、bcl-2、cleaved caspase3及自噬相关蛋白p-AMPK、p-mTOR、LC3B、p62的表达;使用AMPK通路抑制剂与巴西苏木素共同作用于Tca8113细胞,并检测通路相关蛋白p-AMPK、p-mTOR、LC3B的表达。结果 MTT结果表明,巴西苏木素能明显抑制Tca8113细胞的增殖,24 h时IC50为31.17μmol/L;Hoechst33342染色结果显示,巴西苏木素能使Tca8113细胞发生凋亡形态学改变,且与浓度正相关;Annexin V/PI染色结果显示,不同浓度巴西苏木素作用24 h后,细胞凋亡数和凋亡率均高于空白对照组;Western blot检测相关蛋白表达结果表明,巴西苏木素可抑制抗凋亡蛋白bcl-2,促进凋亡关键蛋白bax和cleaved-caspase3的表达,同时增加LC3B和p-AMPK的表达,降低p62和p-mTOR表达。在与抑制剂合用后,p-AMPK与LC3B表达量虽仍略高于空白对照组,但与单纯使用巴西苏木素相比均明显降低,而p-mTOR的表达较巴西苏木素组则明显升高(P<0.05)。结论巴西苏木素能抑制Tca8113细胞增殖并促进其凋亡,同时可通过AMPK/mTOR通路诱导细胞发生自噬。

巴西苏木素调控自噬对高糖诱导血管内皮细胞损伤的影响

目的探讨巴西苏木素对高糖诱导血管内皮细胞损伤的保护作用及其可能机制,为中药苏木治疗糖尿病大血管病变提供实验依据。方法培养人脐静脉内皮细胞,采用MTT法确定巴西苏木素浓度,高糖诱导损伤后加入巴西苏木素,透射电镜观察自噬体;小管形成实验观察血管生成;蛋白免疫印迹检测自噬相关基因BECLIN1、LC3-Ⅱ、p62蛋白的表达。结果选定用于实验的巴西苏木素浓度为15 mg/L;透射电镜显示高糖组细胞中自噬体数量较对照组少,而巴西苏木素组细胞中自噬体数量较对照组和高糖组多;BECLIN1、LC3-Ⅱ的蛋白表达在高糖组较对照组低,在巴西苏木素组较高糖组高(P<0.05);p62的蛋白表达在高糖组较对照组高,在巴西苏木素组较对照组和高糖组低(P<0.05)。结论巴西苏木素可能通过调控自噬而对高糖诱导血管内皮细胞损伤发挥保护作用。

巴西苏木素对骨关节炎模型中软骨保护作用及内质网应激通路变化的实验研究

目的研究巴西苏木素(Brazilin)对IL-1β诱导的骨关节炎(OA)细胞模型中的软骨细胞保护作用及内质网应激通路(ERS)的变化。方法甲苯胺蓝对软骨细胞进行鉴定,CCK8检测Brazilin对正常软骨细胞增殖的影响;实验分组为正常软骨细胞组(Control组),其余组均用IL-1β(10 ng/mL)处理48 h建立OA体外模型,分为模型组(IL-1β组)、Brazilin低剂量组、Brazilin中剂量组、Brazilin高剂量组。显微镜拍照观察各组细胞形态变化,qRT-PCR和Western blot分别检测GRP78、CHOP、Collagen TypeⅡ、MMP-13的基因和蛋白的表达。结果本实验获得纯度较高的大鼠乳鼠原代软骨细胞;Brazilin在小于10μg/mL的浓度对细胞的增殖无影响;IL-1β诱导的OA模型中,IL-1β组较多细胞发生皱缩、染色质固缩、细胞质和细胞核裂解碎片现象,提示细胞凋亡的发生,Brazilin可以降低IL-1β诱导的凋亡发生,且成剂量依赖;MMP-13的表达上调,Collagen TypeⅡ的表达下调,导致了软骨细胞的损伤,Brazilin处理后有效地逆转了相关因子的表达和激活(P均<0.05);IL-1β组ERS通路标志分子GRP78表达水平下调、CHOP表达水平上调,提示IL-1β诱导的软骨损伤机制可能与ERS通路有关,而Brazilin处理后通过促进GRP78的表达,抑制CHOP的表达,在软骨细胞修复中发挥作用(P均<0.05)。结论Brazilin改善IL-1β诱导的骨关节炎细胞模型中软骨损伤,其机制可能与激活ERS通路有关。

多壁碳纳米管修饰电极对巴西苏木素的定量测定

采用多壁碳纳米管修饰玻碳电极测定巴西苏木素的含量，在优化条件下，巴西苏木素在pH为5．45的B-R缓冲液中在6.8×10^-5～8．2×10^-3mol·L^-1浓度范围内与峰电流量线性关系（R^2=0．989，n=7）,对应的线性回归方程为轴（A）=1．17510^-4C（mol·L^-1）-5．73210^-7，最低检出浓度为2．2×10^-5mlo·L^-1。方法操作简单，灵敏度高。

巴西苏木素药理作用及机制研究进展

巴西苏木素是一种小分子高异黄酮类化合物,以S立体异构体形式广泛存在于豆科芸实属植物苏木Caesalpinia sappan的干燥心材中,且含量丰富。现代药理研究表明,巴西苏木素具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、抑菌、血管舒张、降血糖、免疫调节和神经保护等多种生物学活性,在预防和治疗心血管疾病、肿瘤、糖尿病、神经退行性疾病以及骨关节病等方面有着广阔的开发应用前景。因此,通过对巴西苏木素的药理作用及相关机制进行综述,重点总结巴西苏木素在发挥药效过程中可能涉及的重要靶点和分子信号通路,以期为巴西苏木素的研究开发和临床应用提供参考和依据。

巴西苏木素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌葡萄黄质的抑制作用及其机制

目的 探究巴西苏木素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)葡萄黄质(STX)的抑制作用及其机制。方法 基于转录组学数据,分析巴西苏木素作用于MRSA后编码STX合成的操纵子crtOPQMN基因变化情况;将不同浓度巴西苏木素(16、32、64μg/ml)与MRSA共培养:转平板观察菌落、离心沉淀观察菌体颜色变化及酶标仪检测STX含量;逆转录实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测STX合成中主要影响颜色的基因表达水平变化;光谱定量检测STX代谢中间产物变化情况;过氧化氢敏感性试验观察抑菌圈大小及存活菌数量;全血杀伤试验观察存活菌数量。结果 调控STX生成的操纵子基因表达均下调,其中主要影响颜色的基因crtM和crtN分别为-6.542479954、-6.107726632;随药物浓度增加,平板菌落及菌沉淀黄色变浅变白,STX含量减少,其中64μg/ml药物对STX抑制率最大,达50%;qRT-PCR结果显示随药物浓度增加crtM和crtN表达量下降;光谱定量结果显示STX代谢中间产物含量随药物浓度增加而减少;过氧化氢敏感性试验结果显示随药物浓度增大,抑菌圈直径增大,存活菌数量减低(P<0.05);全血杀伤试验结果显示随药物浓度增大,存活菌数量减低(P<0.05)。结论 巴西苏木素通过抑制crtM和crtN的表达减少MRSASTX生成;巴西苏木素抑制STX后可降低细菌抗氧化及抗宿主免疫杀伤能力,为开发新型抗毒力药物提供参考。

巴西苏木素对金黄色葡萄球菌生物膜形成的抑制作用及其机制

目的探究巴西苏木素对金黄色葡萄球菌生物膜的影响、抑制生物膜的机制。方法收集耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)40株,刚果红平板法和96孔板结晶紫染色法鉴定其产膜能力;采用二倍稀释法测定药物对强产膜菌最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);绘制生长曲线观察药物对生物膜生长的影响;油镜下观察药物对生物膜生长的影响;观察在药物处理后的生物膜内存活菌的数量反映对生物膜的作用效果;紫外分光光度计检测DNA及RNA等大分子物质的外渗水平;聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定对可溶性蛋白的影响;检测溶血环大小反映对分泌α-溶血素的影响。结果筛选出19株生物膜阳性菌,其中强产膜菌9株、弱产膜菌10株;巴西苏木素对强产膜菌的MIC为64μg/ml,MBC为128μg/ml;生长曲线提示对强产膜菌的抑制效果与药物浓度呈正相关;镜下观察到药物浓度越高,菌体数量越少、聚集越松散;药物浓度增加,生物膜内的存活菌量减少;巴西苏木素对强产膜菌的DNA、RNA的外渗随药物浓度增加,外渗量增大;SDS-PAGE结果表明药物浓度增加,对强产膜株可溶性蛋白形成的抑制作用增强;药物浓度增加,溶血环直径减小。结论巴西苏木素对强产膜菌生物膜具有良好的抑制作用且具有浓度依赖性,可能通过减少其可溶性蛋白的形成、破坏生物膜、减少生物膜胞外DNA和RNA、减少溶血素来发挥作用。

巴西苏木素通过激活Wnt/β-catenin通路调控卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的研究

目的探讨巴西苏木素对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,随机分为空白组及低、中、高剂量实验组和联合组。低、中、高剂量实验组分别用20、30和40μmol·L-1巴西苏木素处理细胞,联合组用40μmol·L-1巴西苏木素和10 ng·mL-1DKK1共同处理细胞,空白组给予常规培养。用流式细胞术检测细胞的凋亡率,用细胞划痕、Transwell小室实验分别检测细胞的迁移、侵袭能力,用蛋白质印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白的表达水平。结果中、高剂量实验组和空白组的凋亡率分别为(15.24±1.20)%、(25.13±1.46)%和(3.26±0.78)%,划痕愈合率分别为(20.55±3.16)%、(9.58±1.92)%和(45.76±2.24)%,侵袭细胞数分别为(100.00±4.00)、(44.66±10.44)和(207.66±15.11)个,Bax蛋白相对表达水平分别为0.78±0.03、1.32±0.09和0.25±0.11,Bcl-2蛋白相对表达水平分别为0.76±0.05、0.48±0.02和1.02±0.01,E-carderin蛋白相对表达水平分别为0.80±0.05、1.19±0.02和0.30±0.03。中、高剂量实验组的上述指标与空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论巴西苏木素能够抑制SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭和EMT进程,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

HPLC测定苏木中的巴西苏木素和原苏木素B

目的建立HPLC测定苏木中巴西苏木素和原苏木素B含量的方法。方法色谱柱为Agilent Zorbax XDB C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%醋酸(20:80),流速为1.0mL·min-1,检测波长为280nm。结果巴西苏木素和原苏木素B的线性范围均为0.025～0.50mg·mL-1,r均为0.9994;平均回收率分别为95.44%(RSD=2.57%)和94.69%(RSD=1.38%)。结论新建方法简单、快速、准确,适用于苏木中巴西苏木素和原苏木素B的含量测定。

高效液相色谱法同时测定苏木中的巴西苏木素和原苏木素B

建立了同时测定苏木中巴西苏木素和原苏木素B的高效液相色谱检测方法。采用Agela Venusil XBP-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.2%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,测定温度为35℃,检测波长285 nm。巴西苏木素和原苏木素B的质量浓度均在0.005～1.0 mg/mL时与色谱峰面积之间线性关系良好,相关系数都为0.9999;回收率范围分别为96.7%～101.4%和99.4%～103.0%,相对标准偏差(RSD)为2.0%和1.3%。该法可以用于苏木药材的鉴定。

巴西苏木素逆转耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对阿米卡星和庆大霉素的耐药性

目的：研究巴西苏木素（BN）对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的体外抗菌活性及其与阿米卡星和庆大霉素的联合杀菌效果。方法：采用色谱法从中药材苏木（Caesalpinia sappan L.）中分离BN。微量稀释法测定BN对10株临床MRSA的最低抑菌浓度（MIC）。采用棋盘法和时间-杀菌曲线评价其与阿米卡星和庆大霉素联合杀菌的效果。结果：BN单用的MIC为16～32μg·ml-1,MBC为16～128μg·ml-1。BN与阿米卡星和庆大霉素合用的部分抑菌浓度指数（FICI）为0.25～2,合用效果均以协同或相加为主,无拮抗作用。同时,合用使二者的MIC值大多降低至单用的1/8～1/4,从而逆转了MRSA菌株的耐药性。时间-杀菌曲线法,结果显示BN与阿米卡星和庆大霉素合用在24 h时的活菌菌落计数下降最大分别为2.62和2.85 log10CFU·ml-1,亦均呈现协同杀菌作用。结论：巴西苏木素具有剂量依赖性协同阿米卡星和庆大霉素抗MRSA的作用,且能够逆转MRSA对阿米卡星和庆大霉素的耐药性。

巴西苏木素对肝癌细胞增殖能力的影响

目的探索巴西苏木素对人肝癌细胞MHCC97H增殖能力的影响。方法把人肝癌细胞MHCC97H分为对照组和实验组。对照组在DMEM培养基中加入与巴西苏木素等体积的无水乙醇进行培养;实验组给予含60μg·mL^(-1)巴西苏木素的DMEM培养基进行培养。用CCK8检测细胞的增殖能力,用蛋白质印迹法检测多肿瘤抑制基因1(P16)和周期蛋白依赖性激酶4/6(CDK4/6)的表达水平。结果实验组和对照组的第5天细胞活力(光密度)分别为1.39±0.08和2.21±0.11,P16蛋白相对表达量分别为1.18±0.21和0.43±0.05,CDK4蛋白相对表达量分别为0.87±0.12和1.46±0.17,CDK6蛋白相对表达量分别为0.90±0.11和1.53±0.21,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论巴西苏木素能通过上调肝癌细胞MHCC97H中P16的表达,降低CDK4/6的表达,从而抑制其增殖能力。