布罗莫结构域4抑制剂jQ1对Ph阳性急性淋巴细胞白血病细胞增殖的抑制作用和机制研究

目的观察布罗莫结构域4（brd4）抑制剂JQ1对Ph阳性急性淋巴细胞白血病（Ph＋ALL）细胞株SUP．B15的增殖抑制、凋亡作用及对brd4及其下游基因myc、p53表达的影响，探讨其是否对bcr—ab1有逆转作用。方法采用不同浓度的JQ1处理SUP-B15细胞。四甲基偶氮唑蓝（MTr）法检测细胞的增殖抑制率；AnnexinV—FITC／PI荧光染色流式细胞术检测细胞凋亡率；实时荧光定量PCR（RT—PCR）法检测bcr-ab1、brd4、myc、p53的mRNA表达。结果不同浓度的JQ1均能抑制SUP-B15细胞的增殖，诱导细胞发生凋亡，凋亡率较对照组明显增高，并呈时间-剂量依赖性，作用72h半数抑制浓度为1．0μmol／L。同时JQ1可以使bcr—ab1、brd4、myc的mRNA水平下降，而使p53mRNA的水平升高。结论brd4抑制剂JQl可通过下调brd4的表达，影响其下游基因myc及p53的表达，同时逆转bcr-ab1表达，达到抑制Ph＋ALL细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用。

CUL4A、BRD4在非小细胞肺癌患者中的表达及临床意义

目的检测Cullin4A(CUL4A)、布罗莫结构域蛋白4(BRD4)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中的表达,探讨CUL4A、BRD4与NSCLC的临床病理特征的关系。方法 120例NSCLC患者和30例非癌症组织在免疫组织化学SP法下检测CUL4A、BRD4表达情况,分析CUL4A、BRD4表达与患者的临床病理资料的相关性。结果 NSCLC癌组织中CUL4A、BRD4阳性表达率明显高于正常对照组织(P<0.01),CUL4A阳性表达与年龄、TNM分期存在明显相关(χ~2分别为6.485和8.442,P=0.011和0.004),BRD4阳性表达与年龄、组织类型、TNM和有无淋巴结转移分期有明显相关(χ~2分别为4.350、6.389、12.105和13.841,P=0.009、0.006、0.000和0.000)。结论 CUL4A、BRD4在NSCLC癌组织中表达明显增高,可能在肿瘤发生发展过程中发挥重要作用,并成为预测NSCLC诊断、预后的参考指标之一。

BRD4蛋白作为恶性胶质瘤治疗靶点的研究进展

近年来研究表明,脑胶质瘤中广泛存在表观遗传学异常现象。与基因突变不同,表观遗传学是可逆的,它可以调控胶质瘤细胞致瘤和非致瘤状态间的转换。组蛋白乙酰化是一种重要的表观遗传学修饰方式。组蛋白乙酰化阅读器——布罗莫结构域蛋白4(bromodomain-containing protein 4,BRD4)作为胶质瘤治疗靶点,为恢复胶质瘤细胞正常的表观遗传学状态,更有效地治疗恶性胶质瘤提供了新的研究角度[1-3]。目前研究表明,下调BRD4基因或采用BRD4选择性抑制剂JQ1,能够有效地抑制胶质母细胞瘤干细胞(glioblastoma stem cells,GSCs)增殖,促进细胞凋亡,但作用效果有一定的局限性,这提示不能被JQ1抑制的胶质瘤细胞存在其它途径维持异常的自我更新,因此BRD4抑制剂与其它药物联用治疗脑胶质瘤可能具有广阔的前景。

原虫的bromodomain研究进展

原生动物寄生虫感染是当今全球面临的最紧迫的健康问题之一,且某些种类寄生虫可造成巨大的经济损失。耐药性寄生虫的不断产生,迫切需要揭示其分子致病机理,希望找到新的潜在药物靶点。通过干扰赖氨酸乙酰化破坏基因表达对原生动物寄生虫(疟原虫、弓形虫、锥虫等)的存活具有重要影响,赖氨酸乙酰化的bromodomain蛋白已经成为基因表达的关键调控因子,甚至有希望成为新一类药物靶标。虫体bromodomain蛋白质在寄生虫的生存活力、侵袭和生长阶段转换中发挥重要作用,并且bromodomain抑制剂具有作为新型抗寄生虫药的功效。论文对代表性寄生虫的bromodomain蛋白等相关方面的研究进展做一综述。

BRD4抑制剂通过靶向BTK杀伤ABC-DLBCL细胞(英文)

目的:研究含布罗莫结构域蛋白4(BRD4)抑制剂JQ1和I-BET-762对活化B细胞样弥漫大B细胞淋巴瘤(ABC-DLBCL)的杀伤作用及其分子机制。方法:以不同浓度的BRD4抑制剂JQ1和I-BET-762及布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)抑制剂依鲁替尼(ibrutinib)处理ABC-DLBCL细胞,CCK-8法检测细胞活力,PI染色检测细胞凋亡,real-time PCR检测B细胞受体(BCR)/核因子κB(NFκB)信号通路BTK、磷脂酶Cγ(PLCγ)、LYN、SYK、白细胞介素6(IL-6)、蛋白激酶Cβ(PKCβ)、黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤易位蛋白1(MALT1)等分子及转录因子MYC和RELA的m RNA表达,Western blot检测BTK、PLCγ、MYC和RELA的蛋白表达;通过生物信息学分析ABC-DLBCL细胞系HBL-1和生发中心B细胞样弥漫大B细胞淋巴瘤(GCB-DLBCL)细胞系Ly1中的BTK基因是否受超级增强子调控。结果:与Burkit淋巴瘤细胞系Raji和GCB-DLBCL细胞系BJAB相比,ABC-DLBCL细胞系HBL-1和Ly10对BRD4抑制剂JQ1更加敏感,JQ1能够抑制BCR/NFκB靶分子IL-6的表达。另一种BRD4抑制剂I-BET-762同样具有杀伤ABC-DLBCL细胞的作用。进一步机制研究发现,JQ1和I-BET-762能明显抑制BCR/NFκB信号通路关键分子BTK,而对其它分子影响较小。生物信息学分析显示,BTK基因附近无超级增强子,但JQ1处理可显著抑制BRD4结合到BTK基因区。有意思的是,BRD4抑制剂对耐ibrutinib的SU-DHL-2细胞也具有较强的杀伤作用。结论:BRD4抑制剂通过抑制BTK对ABC-DLBCL细胞有显著杀伤作用,与BCR信号通路抑制剂联合应用效果更为显著。JQ1或可用于治疗耐BTK抑制剂ibrutinib的ABC-DLBCL。