多重PCR特异检测布鲁氏菌方法的建立

目的建立一种快速检测布鲁氏菌的多重PCR方法,为临床快速检测、准确诊断布鲁氏菌提供依据。方法针对布鲁氏菌外膜蛋白31 kD、22 kD和2a基因,各设计一对引物,扩增片断大小分别为427 bp3、17 bp和830 bp。利用纯培养物和模拟标本,分析这3对引物的特异性和敏感性。结果3对引物均能特异扩增布鲁氏菌的DNA,31 kD、22 kD和2a,扩增纯培养物的敏感性分别为2.8×103、4.6×103和2.1×104cfu,将3对引物组合在一起建立了多重PCR方法,能从模拟的细胞和血液标本中扩增出特异的产物,对模拟的细胞感染标本的敏感性为1×105cfu,对模拟的血标本的敏感性为1.2×106cfu。结论针对外膜蛋白基因,建立了能特异地检测标本中布鲁氏菌的多重PCR检测方法。

AMOS PCR在布鲁氏菌种型鉴定中应用的研究

AMOSPCR是近年来在布鲁氏菌上尝试使用的一种布鲁氏菌检测方法,可作为布鲁氏菌诊断及菌种类型鉴定的PCR方法,可区分牛种布鲁氏菌1、2、4型,羊种布鲁氏菌、猪种布鲁氏菌、绵羊附睾种布鲁氏菌。本试验用来自国内的疫苗S2,M5及国际上常用的布鲁氏菌疫苗S19,104M试验AMOSPCR的效果,同时对AMOSPCR扩增条带进行测序。结果表明,除国内布鲁氏菌S19检测结果与国外菌株不同外,其余的几种疫苗株都得到典型的特征性条带。同时测序结果也表明各种属条带无交叉反应,为今后国内诊断布鲁氏菌病诊断方法研究指出一个方向。

马耳他布鲁氏菌OmpR基因缺失株的构建及其对布鲁氏菌生长与复制的影响

为探究布鲁氏菌OmpR基因的功能,本研究以马耳他布鲁氏菌M28为亲本株,利用同源重组构建OmpR基因缺失株M28ΔOmpR。菌落生长实验显示:M28ΔOmpR生长速度极显著低于亲本株M28(p<0.001),回补株M28ΔOmpR-com可恢复菌落生长速度。巨噬细胞感染试验显示:M28ΔOmpR与M28相比,细菌分离数极显著降低2 Log10以上(p<0.001),回补株M28ΔOmpR-com可恢复其在巨噬细胞中的复制能力。小鼠感染实验显示:感染1周后,M28ΔOmpR接种小鼠比M28接种小鼠脾重极显著降低(p<0.001);第4周,前者细菌分离数极显著降低,二者相差0.8 Log10(p<0.001)。以上结果表明,OmpR基因缺失抑制马耳他布鲁氏菌菌落生长,显著降低其在巨噬细胞和小鼠体内的复制能力,研究结果为探究OmpR在布鲁氏菌中的作用机制奠定了基础。

新疆且末县若羌县家畜布鲁氏菌病血清学调查

根据布鲁氏菌病虎红平扳凝集试验(RBT)和试管凝集试验(SAT)对新疆且末县和若羌县1425份,牛羊血清布鲁氏菌病免疫效果进行了布病血清学检查,结果有2份羊血清检测出阳性,平均阳性率为0.01%。

布鲁氏菌病6例并文献复习

目的 分析布鲁氏菌病流行病学、临床特点、治疗和转归,提高临床医师对布鲁氏菌病的认识,避免误诊、漏诊的发生.方法 回顾性分析2006年至2009年我院肾病风湿科收治并转至感染科治疗的6例布鲁氏菌病患者的临床资料,并做文献复习.结果 6例患者临床表现均有发热、多汗、乏力、体重下降,其中4例伴有关节痛、脾大,2例有肾脏累及,1例有心内膜炎.血培养阳性5例,骨髓培养阳性4例,血清凝集阳性6例.6例患者经确诊后转入感染科治疗,均治愈.结论 布鲁氏菌病临床症状不典型,极易漏诊、误诊,多西环素联合链霉素、庆大霉素或利福平是有效的治疗手段.