布鲁氏菌疫苗株S2全基因组测序及牛羊布鲁氏菌比较基因组学研究

目的为了了解布鲁氏菌S2疫苗株全基因组结构及分子生物学功能。方法对布鲁氏菌疫苗株S2进行全基因组测序,并与GenBank公布的6株牛羊布鲁氏菌进行比较基因组学研究。结果与结论通过全基因组测序发现S2基因组大小为3 331 982bp,预测基因有3 243个,GC含量为57.23%。S2预测基因中大多数基因功能主要与糖代谢﹑氨基酸代谢﹑氨基酸转运和膜转运有关。通过比较基因组学研究发现S2有20个特有基因。另外S2与GenBank公布的S2序列进行比对发现有19个差异基因。

布鲁氏菌疫苗(S2株)气雾免疫绵羊血清抗体阳性率优于口服免疫

本研究旨在检测经气雾和口服途径接种布鲁氏菌疫苗(S2株)后羊特异性血清抗体阳性率的变化以确定其相对免疫功效。布鲁氏菌阴性羊群分别通过口服(1×1010 CFU剂量)和气雾(1×1010、8×109、6×109、4×109、2×109、1×109 CFU和5×108 CFU共7种剂量)接种布鲁氏菌疫苗(S2株)。接种后30、60、90、120 d和320 d分别采集试验羊的血清样品,并用虎红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(SAT)进行血清抗体检测。结果显示,口服免疫组接种后30d抗体阳性率达到最高(羔羊RBPT:38.00%,SAT:32.00%;成年羊RBPT:72.00%,SAT:68.00%),30~90 d抗体阳性率下降较快,90 d后抗体阳性率降到较低水平(RBPT﹤12.00%,SAT﹤10.00%);气雾免疫组,羔羊接种后30d,阳性率最高升至40.00%(RBPT:16.70%~40.00%,SAT:11.10%~30.00%),60d阳性率降至20.00%以内(RBPT:0~20.00%,SAT:5.60%~20.00%),90d阳性率降至10.00%以内,不同剂量气雾免疫羔羊阳性率变化差异不显著(P>0.05)。成年羊(除5×108 CFU组外),接种后30d阳性率升至84.81%(SAT:84.81%~88.50%),60d阳性率低于53.33%(SAT:44.30%~53.33%),90d阳性率低于24.39%(SAT:18.66%~24.39%),120d阳性率低于10.00%;5×108CFU组接种后30d阳性率较低(RBPT:48.70%,SAT:44.73%);成年羊气雾免疫组1×109~1×1010 CFU剂量同一时间点,阳性率结果变化差异不显著(P>0.05),与5×108 CFU组在30d和60d变化差异极显著(P<0.01)。口服免疫组抗体阳性率曲线变化趋势与气雾免疫组基本一致,接种后30d时都达到峰值,羔羊阳性率均较低,成年羊气雾免疫组阳性率高出口服免疫组18.84%。本试验表明,布鲁氏菌疫苗(S2株)气雾免疫在成年羊体内产生的特异性血清抗体阳性率优于口服免疫。

布鲁氏菌病疫苗S2株免疫成年绵羊的抗体消长规律试验

[目的]探索成年绵羊经布鲁氏菌病疫苗S2株免疫后血清抗体的消长规律。[方法 ]采用"灌服100亿菌""灌服200亿菌"和"肌注50亿菌"三种不同免疫方法,对试验羊进行布鲁氏菌病S2株疫苗的免疫接种。在接种前和接种后不同时间点分别采集试验羊血清样品,用虎红凝集试验(RBT)和试管凝集试验(SAT)进行血清抗体检测。[结果 ]肌注组抗体上升较快,于免疫后10天达到峰值,然后快速下降,90天后下降速度减缓,但在180天时RBT和SAT阳性率仍分别为63.2%和84.2%,SAT平均凝集效价为1:178.9。2个口服组均在免疫20天后抗体达到最高,以后下降,分别于90天和120天降到最低,然后有所回升并维持在低水平波动;至180天时,口服组的RBT阳性率均下降为0,SAT阳性率分别下降为40.9%和23.1%,SAT平均凝集效价分别降至1:40.9和1:18.2。[结论 ]对采用布鲁氏菌病S2株活疫苗口服免疫6个月以后的羊群,可用虎红凝集试验进行布鲁氏菌病检疫的初筛。

山羊不同途径免疫S2株布鲁氏菌病活疫苗后的抗体消长规律

布鲁氏菌病简称布病,是由布鲁氏菌（Brucella）引起的危害严重的人畜共患病,世界动物卫生组织（OIE）将其列为多种动物共患病之一,我国将其列为二类动物疫病,世界范围内每年出现约50万例人布鲁氏菌病病例,我国尤甚。进入2000年以后,人布鲁氏菌病在我国成为报告发病数上升速度最快的传染病之一。

布鲁氏菌疫苗A19与S2株免疫奶牛抗体消长规律与4种检测方法比较

为了解奶牛免疫A19疫苗和S2疫苗后的抗体消长规律,比较目前地市级实验室常用的3种血清学检测方法的效果,研究分别按厂家说明书对分别对60头试验奶牛进行免疫,使用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)和竞争ELISA(c Elisa)对免疫前1 d至免疫后260 d的血清样品进行检测。结果:2组奶牛血清样品经RBT、SAT、cELISA检测,抗体在28 d达到峰值,且在21~56 d保持较高水平,A19疫苗组260 d仍未全部转阴,S2疫苗组在免疫后140 d已全部转阴。A19疫苗的阳转率明显高于S2疫苗组并且抗体持续时间更长。

羊布鲁氏菌疫苗(S2株)口服免疫试验

为了解羊只布鲁氏菌疫苗(S2株)口服免疫的安全性及免疫效果,在甘肃省平凉市2个乡镇,各选1个行政村,选择散养户饲养的264只羊作为试验羊,进行小范围的布鲁氏菌S2株活疫苗口服免疫试验,其中3月龄以上羊只(包括怀孕母羊)每只口服活菌100×2亿,3月龄以下羊每只口服活菌100亿。分别在免疫后的30、60、180、210 d,采集试验羊血清样品,采用虎红平板凝集(RBT)+试管凝集联合试验(SAT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)进行血清抗体检测。结果显示:试验组羊只免疫后均未出现异常反应,口服免疫30 d后,试验羊只2种检测方法检测的免疫抗体阳性率分别为47.3%和53.8%,不同时间2种方法的检测结果基本一致(P>0.05)。结果表明,布鲁氏菌S2株活疫苗按照试验剂量免疫安全有效,适用于所有月龄羊只以及怀孕母羊的整群免疫,可先行试点,逐步推广应用。

布鲁氏菌病M5、S2疫苗免疫血清半抗原-琼脂扩散试验方法检测评价

目的应用NH-AGID方法对布鲁氏菌M5、S2疫苗株免疫血清进行检测,评价该方法适用性。方法选取3~5月龄羔羊74只,随机分为3组。分别以S2株1.0×1010 CFU、5.0×109 CFU灌服和皮下注射接种羔羊各25只,M5株以1.0×10^(9) CFU皮下注射接种羔羊24只。免疫后7 d~150 d采集羊全血,分离血清,经RBT初筛和SAT确诊免疫抗体阳性血清。评估NH-AGID方法对M5和S2株疫苗免疫抗体与感染抗体的鉴别诊断特异性。结果NH-AGID方法对M5株疫苗免疫阳性血清的LPS抗体检出率为100%,NH抗体检出率8.3%~29.2%,鉴别诊断特异性为82.8%。对S2株疫苗口服组免疫阳性血清的LPS抗体检出率为31.2%~66.7%,NH抗体检出率为0%;皮下注射组免疫阳性血清的LPS抗体检出率为45.4%~100%,NH抗体检出率为4.5%~20%。对S2株疫苗免疫血清的鉴别诊断特异性为96.5%。结论NH-AGID方法不完全适用于羊用布鲁氏菌疫苗M5株和S2株的鉴别诊断,该方法的鉴别诊断特异性与疫苗毒力、免疫剂量和途径等因素相关,应进一步研究明确该方法的适用范围及条件,以期合理应用于布病防控诊断工作中。

S2株布鲁氏菌活疫苗免疫效果实验及防控建议

本文通过对S2株布鲁氏菌活疫苗免疫效果实验及防控建议进行了阐述,发现采用正常剂量和加强剂量免疫羊血清抗体的阳转率明显低于加倍剂量免疫羊的血清抗体的阳转率。为此在免疫的过程中要严格按照S2株布鲁氏菌活疫苗说明书进行操作,确保免疫结果达到国家要求标准,在布病防控中,各部门加强合作,坚持以人为本,加强个人防护,对患病人员积极治疗,最大限度的减轻农牧民的经济负担。

肾综合征出血热乳鼠脑Ⅱ型纯化疫苗病毒株R_(22)全S基因的特征

为了解肾综合征出血热乳鼠脑Ⅱ型纯化疫苗侯选病毒株R2 2 的分子生物学特征 ,应用PCR方法克隆了R2 2株的全S基因 ,并测序分析比较。结果R2 2 株的S片段的全基因序列共 1774个核苷酸 ,编码 42 9个氨基酸。与汉坦病毒I型 76 118株核苷酸和氨基酸同源率分为 73 7%、83 3 % ,而与同型的SR 11株则高达 95 6 %、97 9%。核苷酸序列比较发现R2 2 在 170 1～ 170 9有一ACCTCCTA 7个碱基的插入 ,175 6～ 176 0处有一 5个碱基的缺失。应用DNASTAR软件 ,绘出了R2 2 株病毒S基因编码的蛋白质的二级结构。

S2株布氏杆菌减毒活疫苗免疫效果观察

2010年初,某规模养殖场奶牛群发生布氏杆菌病流行和蔓延,能繁母牛出现流产、死胎的症状。根据检疫结果对布病阳性牛隔离淘汰处理,对布病阴性牛(假定健康牛)进行免疫接种。奶牛群口服接种S2株活疫苗后15d,即可检出疫苗诱导的布氏杆菌抗体,30d抗体水平达到高峰(36%),45～90d抗体阳性率呈现缓慢下降的趋势。免疫接种能有效控制布病感染牛群流产、死胎率,减少由此导致的经济损失。本试验还对鲜乳样本中布氏杆菌核酸开展了PCR检测,对疫苗接种奶牛是否存在乳汁排菌风险进行了讨论。

口蹄疫O型抗原(O/MYA98/BY/2010株)146S含量与疫苗免疫效力相关性研究

为了确定成品疫苗免疫效力达到6个PD50时,抗原146S最小含量,以及分析疫苗有效146S含量与百分保护率之间的相关性,将纯化O/MYA98/BY/2010株抗原分别按146S含量0.5μg/mL、1.0μg/mL、1.5μg/mL、2.0μg/mL配制成4批疫苗小样。4批疫苗分别重复三次进行免疫效力(PD50)测定,并对试验动物接种的有效146S含量与相关百分保护率进行线性相关回归分析。结果表明,抗原146S含量0.5μg/ml组三次试验PD50数分别为3.58、4.53、3.60;1.0μg/mL组三次试验PD50数分别为6.34、7.19、6.42;1.5μg/mL组三次试验PD50数分别为10.81、9.00、11.84;2.0μg/mL组三次试验PD50数分别为10.32、11.84、10.81。疫苗有效146S含量与百分保护率呈显著正相关,线性回归方程为y=50.533x+94.466,相关系数为0.90。以上结果说明,当抗原146S含量不低于1.0μg/mL时,所生产疫苗免疫效力在6个PD50以上。

湖羊布鲁氏菌S2疫苗免疫血清抗体消长规律研究

[目的]探究湖羊经布鲁氏菌S2疫苗免疫后的血清抗体消长规律。[方法 ]采用皮下注射25亿CFU(正常剂量)、口服免疫100亿CFU(正常剂量)、口服免疫150亿CFU(1.5倍剂量)3种免疫方法,对试验湖羊进行S2疫苗接种。在免疫前后的不同时间点,采集血液,分离血清,通过虎红平板凝集试验(RBT)和试管凝集试验(SAT)检测血清抗体水平。[结果 ]皮下免疫组在免疫后7 d出现抗体,21 d达到峰值,平均抗体效价最高为1:400,RBT和SAT抗体阳性率均为100%;免疫后120 d,RBT、SAT血清抗体阳性率分别为53%、56%;血清抗体存续时间为240 d。1.5倍剂量口服组免疫后21 d,RBT、SAT抗体阳性率分别为80%、83%,平均抗体效价最高为1:230.9,血清抗体存续时间为150 d。正常剂量口服免疫组在免疫后14 d产生抗体,21 d的抗体阳性率最高,RBT、SAT抗体阳性率分别为50%、57%,平均抗体效价最高为1:156,血清抗体存续时间为120 d。[结论 ]布鲁氏菌S2疫苗皮下免疫效果明显优于口服免疫效果,但可能存在免疫副反应;1.5倍剂量口服优于正常剂量口服。

密云地区羊布鲁氏菌病S2疫苗抗体消长规律分析研究

为掌握羊布鲁氏菌病疫苗免疫后的效果,掌握密云区羊布鲁氏菌病的整体动态和风险程度,从而为羊布鲁氏菌病强制免疫提供参考和理论支撑,达到密云区不发生羊布鲁氏菌病疫情、逐步退出免疫的目的,本研究对北京市密云区羊采用口服S2活疫苗后抗体的消长规律进行了研究。结果表明:羊在免疫后21~35d时血清抗体阳性率达到最高峰,与绵羊相比,山羊的抗体阳性率偏高;试管凝集试验、虎红平板凝集试验以及酶联免疫吸附试验检测的结果有较高的一致性。通过对研究中大量准确详实的实验数据分析,以期为掌握机体产生抗体的时间和规律、制定出适时科学的免疫程序达到尽快控制和净化疫病提供科学依据。

布氏菌病活疫苗(S2株)临床安全及免疫效果试验研究

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌侵入机体引起的人畜共患的传染变态反应性疾病。在家畜中牛、羊、猪最常发生,且可由牛、羊、猪传染给人和其他家畜。我国将其列为二类动物疫病,世界动物卫生组织(OIE)列为B类动物疫病。目前研究认为,在绝大多数情况下,使用疫苗是控制牛、羊布病的有效方法。山丹县牛羊布病流行病学调查显示,该县牛羊布病发病率呈现逐年上升的趋势,2016年羊布病血清学阳性率达到7.4%.

布鲁氏菌活疫苗(S2)口服接种不同感染羊群免疫效果观察

为探讨不同程度布鲁氏菌病感染羊群口服布鲁氏菌活疫苗(S2)的血清抗体消长规律,试验设置8个采样点,每个采样点包含布鲁氏菌病阴性羊群、布鲁氏菌病低感染羊群(感染率低于2.4%)、布鲁氏菌病高感染羊群(感染率大于2.4%)各20只,每只羊口服布鲁氏菌活疫苗(S2)1×108CFU,分别于免疫后0 d、15 d、30 d、45 d、60 d、90 d、120 d、180 d随机采集血清共计1 920份,使用虎红平板凝集试验初筛,竞争酶联免疫吸附试验(C-ELISA)检测抗体消长。结果显示,布鲁氏菌病阴性羊群、布鲁氏菌病低感染羊群、布鲁氏菌病高感染羊群在免疫后第15天抗体阳转率分别为49.37%、30.00%和32.50%;免疫后第120天抗体阳转率分别为6.67%、8.33%和8.33%;免疫后第180天抗体阳转率分别为0%、11.11%和15.56%。试验结果表明,布鲁氏菌活疫苗(S2)免疫15 d后抗体阳转率最高,180 d后血清抗体即已下降到不干扰检测的水平。

羊布氏杆菌病活疫苗(S2株)不同免疫方法效果观察

布鲁氏菌病是一种人畜共患的传染病,作为一种公共卫生疾病,世界OIE将其列为B类疫病,我国将其列为二类动物疫病。由于近年人畜间疫情不断上升,越来越受到国家、省、市的关注和重视,现已作为重大动物疫病防控。各地均采取检疫、扑杀、免疫、监测相结合的措施。布氏杆菌病活疫苗（S2株）作为家畜布病免疫的首选疫苗,具有使用范围广和使用方便的特点,可供猪、牛、羊等动物免疫使用,其免疫方法有肌肉注射、口服、饮水免疫等多种接种方法。

S2株、M5株布氏杆菌减毒活疫苗对山羊免疫效果比较试验

通过对36只不同日龄、不同性别的健康山羊（含妊娠母羊6只）随机平均分组，分别口服S2株、M5株布氏杆菌减毒活疫苗后，在7d、14d、21d、42d、90d对血液中布氏杆菌抗体进行检测，对S2、M5诱导的抗体消长动态进行分析及疫苗安全性评价，最终研究确定出S2可适用于不同日龄、不同性别山羊广泛使用，也适用于妊娠期间山羊的免疫，能有效预防布病的发生，减少由此导致的经济损失；M5可引起妊娠母羊免疫副反应及严重的流产症状。

2018—2021年甘肃省武威市羊布鲁氏菌S2疫苗免疫抗体监测

为全面了解甘肃省武威市羊布鲁氏菌S2疫苗的口服免疫效果,掌握大群体免疫的抗体变化情况,2018—2021年,通过虎红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(SAT),对71个口服免疫S2疫苗的规模羊场户,采集8243份羊血液样本进行免疫抗体检测。结果显示:口服免疫S2疫苗(1×10^(10)CFU剂量)后28d的免疫抗体转阳率为55.62%,60 d为16.72%;2018—2021年,免疫后28 d的免疫抗体转阳性率为53.21%~57.91%,60 d为15.55%~17.81%,年度间无显著差异(P>0.05);天祝县免疫后28 d的免疫抗体转阳率最高,民勤县最低,差异显著(0.010.05),县区间免疫后60 d的免疫抗体转阳率均无显著性差异(P>0.05);藏羊(59.04%)、高山细毛羊(58.06%)免疫后28 d的抗体转阳率较高,小尾寒羊最低(51.94%),差异显著(0.010.05),免疫后60 d品种间均无显著性差异(P>0.05);免疫后28 d,存栏量小于100只和大于100只的羊场户抗体转阳率无显著性差异(P>0.05),而免疫后60 d差异极显著(P<0.01)。结果表明:武威市羊群S2疫苗口服免疫后的抗体转阳率总体不高,抗体存续时间较短;不同年度、不同县区的免疫效果基本一致;藏羊、高山细毛羊的免疫效果好于小尾寒羊,小规模羊群的免疫效果略好于大规模羊群。结果提示,布鲁氏菌病免疫需综合考虑大群免疫影响因素,探索适宜的疫苗免疫模式和免疫剂量,确保免疫覆盖率,以提升群体的整体免疫效果。

羊布病S2疫苗抗体消长试验

布鲁氏菌病作为一种人畜共患病,疫区遍布全球,包括中东,亚洲,非洲,南美洲。在10~100个感染剂量内,造成经济风险的几率仅次于炭疽热和兔热病。虽然在近半个世纪以来有关布鲁氏菌病的研究越来越深入,但在许多国家仍然在人和动物中反复持续发作,人类的感染不但降低了生产力,治疗的费用使得成本增加,家畜的感染使得生产能力低,这种人畜共患病造成了世界范围的经济损失,每年约有50万人受到感染,我国将其列为35种“家畜家禽防疫条例实施细则”中二类动物疫病之首。目前已发现的布鲁氏菌种类有10种,牛种、羊种、犬种、猪种、绵羊附睾布鲁氏菌、沙林鼠布鲁氏菌、人典型菌株BO1和不典型菌株BO2、鲸种、鳍种、田鼠种。用于布鲁氏菌病的血清学诊断方法也有试管凝集试验、虎红平板凝集试验、酶联免疫吸附试验等近10种方法。迄今为止国内外已有多个弱毒活疫苗在使用,其中使用最为广泛的有光滑型牛种S19株、粗糙型牛种RB51株、猪种S2株等。不同疫苗各有其优缺点,各类新型疫苗也在不断研发中。目前为止在北京市范围内对于羊布病强制免疫方案也已得到实施。通过本次试验,了解昌平区羊布鲁氏菌病的整体态势和风险程度,对羊S2疫苗免疫的免疫方式和检测方法进行筛选,对免疫后抗体的消长规律进行研究。从而为昌平区乃至北京市施行的羊布鲁氏菌病控制与净化方案提供参考和理论依据。

对免疫区布鲁氏菌病有效防控方法的讨论

目前,布鲁氏菌病(简称布病)在我国人间和畜间呈现多发态势,人间布病主要是由家畜传染。对布病流行区,常使用布病疫苗进行防控,该地区也称为免疫区。以县域为基本单元的网格化布鲁氏菌病防控,采取有力的免疫控制和检测净化手段,可有效控制布病的发生。通过探讨免疫区布病防控策略,探索出一条符合基层布病防控有效、低成本的防控路子,对本地区,乃至全国布病防控均具有特殊意义。