bvfA基因对布鲁氏菌S19株生物学特性及睾丸支持细胞影响的研究

为研究布鲁氏菌毒力因子A(bvfA)对牛布鲁氏菌(B.abortus)S19菌株生物学特性及其感染睾丸支持细胞(TM4细胞)的影响,本研究利用振荡比浊法(D值法)测定S19(亲本株)、S19ΔbvfA(缺失株)及S19ΔbvfA/bvfA(回补株)3株菌的生长曲线;利用平板菌落计数法测定菌株对环境的应激水平、对TM4细胞的侵入能力及损伤性和对小鼠毒力的影响。结果显示:缺失株较亲本株和回补株生长速度显著降低(P<0.05);缺失株在热、高盐、高渗、强酸和多粘菌素B条件下生长均受到抑制,而在氧化应激条件下生长良好(P<0.05)。感染TM4细胞3 h时,缺失株未能侵入TM4细胞;12 h时,缺失株侵入TM4细胞的数量少于亲本株(P<0.01);24 h和48 h时,3株菌侵入TM4细胞的数量无显著性差异(P>0.05)。在感染12 h和24 h时,感染缺失株的TM4细胞死亡率高于感染亲本株的细胞死亡率(P<0.01);在48 h时,感染缺失株和感染亲本株的TM4细胞死亡率无显著性差异(P>0.05)。将各菌株腹腔注射感染小鼠,结果显示感染2周时缺失株感染小鼠的脾指数明显低于亲本株(P<0.01),且感染1周、2周和4周时,感染缺失株小鼠的脾分离菌量均小于亲本株(P<0.05)。本研究结果首次证实:bvfA基因参与调控布鲁氏菌S19菌株对环境的适应性,影响S19菌株对TM4细胞的侵入,抑制TM4细胞的死亡以维持细菌的生长增殖及其缺失能够降低S19菌株对小鼠的毒力。本研究结果为布鲁氏菌致病机制和bvfA基因的功能解析提供实验依据。

布鲁氏菌S-2与S-19株提取的脂多糖在人布鲁氏菌病诊断抗原中的应用

目的使用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)提取试剂盒提取布鲁氏菌S-19与S-2菌株中的脂多糖,检测这2种脂多糖的抗原性与诊断价值。方法用工业化生产的布鲁氏菌S-19与S-2菌株菌液用LPS纯化试剂盒通过裂解、纯化、洗涤的方法提取LPS,用提取的LPS进行斑点酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)与布鲁氏菌病阳性、正常阴性、疱疹病、血吸虫病患者血清反应,观察反应结果并判断诊断价值。结果斑点ELISA实验结果显示从S-19与S-2株中提取的LPS与布鲁氏菌病阳性血清能作出反应,反应颜色明显,诊断价值高。结论S-19与S-2菌株中提取的LPS能与布鲁氏菌病阳性血清反应,有较好的诊断价值。

广东省2009-2013年人间布鲁氏菌病疫情分析

目的分析2009-2013年广东省布鲁氏菌病（简称布病）疫情特征,为今后制定防治策略提供参考依据。方法对广东省人间布病病例及布病监测点监测结果进行描述性分析。结果 2009-2013年广东省共报告人间布病病例281例。70.46%的病例发生在3~8月;广州市、江门市、佛山市三地市报病数合计占总报告病例数的54.09%;男性发病率高于女性,差异有统计学意义（χ^2=4.058,P〈0.05）;病例主要分布在40~60岁年龄组;病例中家务及待业、农民、商业服务3种职业所占比例较高。共抽血检测5 012人,其中血检虎红平板凝集试验阳性114人,阳性率2.27%。结论广东省人间布病主要以外地染疫羊只输入引起疫情为主,布鲁氏菌羊种3型为主要致病菌。

影响布鲁氏菌病抗体检测的因素分析

目的探讨不同实验条件和操作方法下对实验结果的影响和解决方法,提高实验的准确度。方法对使用不同的采血管、放置不同的时间、在不同的温度下的标本进行检测,对实验结果进行分析比对。结果虎红平板凝集试验时,选择无抗凝剂空管,标本放置时间≥12 h,检测温度20~30℃条件下实验结果较准确。试管凝集试验对虎红平板凝集试验筛查出的强阳性标本进行定量实验时,血清稀释度应≥1∶1 600。结论通过不同实验条件和操作方法分析比对可获得最稳定的实验条件,以减少实验误差。