散发性嗜铬细胞瘤中希佩尔林道蛋白与缺氧诱导因子-α的相关性研究

目的:讨论希佩尔林道蛋白和缺氧诱导因子-α在散发嗜铬细胞瘤中的相关性及临床意义。方法:免疫组织化学法研究pVHL和HIF-α在40例散发嗜铬细胞瘤及20例正常肾上腺髓质中的表达。结果:pVHL在散发性嗜铬细胞瘤中的表达和正常肾上腺髓质中的表达无显著差异(P=0.502>0.05),HIF-1α和HIF-2α在散发性嗜铬细胞瘤中的表达明显高于正常肾上腺髓质中的表达(P=0.012<0.05);Spearman相关性分析发现嗜铬细胞瘤组织中pVHL与HIF-1α和HIF-2α表达程度均呈负相关。HIF-1α和HIF-2α无明显相关。结论:嗜铬细胞瘤中pVHL与HIF-α存在相关性,这在嗜铬细胞瘤发生发展中有重要意义,可能成为治疗和诊断嗜铬细胞瘤的靶点之一。

类风湿关节炎滑膜组织中脯氨酸羟化酶及希佩尔林道肿瘤抑制蛋白的表达及意义

背景:缺氧诱导因子在类风湿关节炎中的作用已经得到广泛证实,而作为缺氧诱导因子重要的调节因子脯氨酸羟化酶及希佩尔林道肿瘤抑制蛋白(von-Hippel-Lindau tumor suppressor protein,pVHL)是否在类风湿关节炎中作用国内外尚无明确报道。目的:分析类风湿关节炎和骨关节炎滑膜组织中脯氨酸羟化酶和pVHL的表达及其相互关系,探讨低氧信号蛋白在类风湿关节炎中的影响机制。方法:取行膝关节置换的类风湿关节炎患者滑膜组织11例,并取行膝关节置换的骨关节炎患者滑膜组织20例做对照。研究的实施符合青海大学附属医院医院对研究的相关伦理要求,患者对治疗过程及试验过程完全知情同意。采用免疫组织化学Envision二步法,检测2组滑膜组织中脯氨酸羟化酶1,2,3及pVHL的表达。结果与结论:①免疫组织化学结果显示,脯氨酸羟化酶1,2,3及pVHL在类风湿关节炎和骨关节炎滑膜组织中均有表达;脯氨酸羟化酶1在类风湿关节炎滑膜组织中的表达显著低于骨关节炎组(P<0.01),脯氨酸羟化酶2在类风湿关节炎滑膜组织中的表达显著高于骨关节炎组(P<0.05);脯氨酸羟化酶3、pVHL的表达2组差异无显著性意义(P>0.05);②相关分析显示,类风湿关节炎组脯氨酸羟化酶2与脯氨酸羟化酶3(rs=-0.875,P<0.01),脯氨酸羟化酶1与红细胞分布宽度标准差(rs=-0.374,P<0.03),脯氨酸羟化酶2与血红蛋白(rs=-0.457,P<0.01),脯氨酸羟化酶3与红细胞分布宽度标准差(rs=-0.363,P<0.04)均呈负相关;脯氨酸羟化酶2与嗜酸性粒细胞(rs=0.363,P<0.04),脯氨酸羟化酶2与球蛋白(rs=0.405,P<0.02),均呈正相关;③类风湿关节炎组类风湿因子、C-反应蛋白、血清淀粉样蛋白A、球蛋白检测值均显著高于骨关节炎组(P<0.05);④结果说明,脯氨酸羟化酶1和脯氨酸羟化酶2与类风湿关节炎的发生、发展密切相关,抑制脯氨酸羟化酶2的表达及激活脯氨酸羟化酶1的表达可能在类风湿关节炎滑膜组织的病理改变中起到重要保护作用,或可为类风湿关节炎发生的分子生物学途径及临床之中提供有针对性的治疗措施。

乙肝病毒X蛋白上调肝癌细胞缺氧诱导因子-1α的作用和机制研究

背景与目的:乙肝病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在肝癌发生、发展过程中起重要作用。有研究显示,两者在肝癌组织中的表达呈正相关,但相关机制尚不明确。本研究拟进一步在细胞水平上探讨HBx对HIF-1α的调控作用及机制。方法:用LipofectemineTM 2000包裹HBx表达质粒转染到肝癌Huh7细胞。蛋白[质]印迹法(Western blot)检测Huh7细胞中HIF-1α和HIF-1β蛋白的表达;特异性试剂盒检测HIF-1α转录活性;实时定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)检测HIF-1α及其靶基因血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和多药耐药基因1(multi-drug resistance gene 1,MDR1)m RNA表达变化;免疫共沉淀法检测HIF-1α、HBx和希佩尔林道病肿瘤抑制蛋白(protein von Hippel-Lindau,p VHL)间的相互作用。结果:转染HBx质粒后,Huh7细胞中HIF-1α蛋白表达、转录活性及其靶基因VEGF和MDR1的m RNA表达水平明显上调(P<0.05),然而HBx对HIF-1αm RNA表达水平没有明显影响(P>0.05)。同时,HBx显著削弱p VHL介导的泛素化水解蛋白酶降解HIF-1α的活性。免疫共沉淀法检测进一步提示,HBx可直接结合p VHL,而对HIF-1α没有结合作用。结论:HBx可能通过直接结合p VHL,抑制其与HIF-1α的相互作用,从而增强HIF-1α蛋白的稳定性及转录活性。