高效液相色谱法测定鸡血浆中帕托珠利和托曲珠利含量研究

为建立一种测定鸡血浆中帕托珠利和托曲珠利含量的高效液相色谱法,试验采用C18色谱柱,分别以0.2%乙酸水-乙腈(47∶53)和0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.0)-乙腈(40∶60)为流动相,柱温分别为35℃和30℃,流速为1 mL/min,紫外检测器检测,检测波长分别为250 nm、240 nm,外标法定量建立检测方法。结果显示,帕托珠利和托曲珠利的浓度与色谱峰面积在0.10~20.00μg/mL浓度范围内线性关系良好(R2>0.999),帕托珠利平均加样回收率为89.65%~96.12%,托曲珠利平均加样回收率90.84%~94.27%,批内和批间变异系数均小于5%。结果表明,建立的高效液相色谱法简便、有效、重现性良好,可用于鸡血浆中帕托珠利和托曲珠利含量的测定。

顶空气相色谱法测定帕托珠利原料药中乙醇的残留量

帕托珠利是一类与妥曲珠利相关的三嗪类抗球虫药物,是妥曲珠利的主要代谢产物,又名妥曲珠利砜。该药于2001年由美国FDA批准上市,用于治疗洪氏新孢子虫（Neosporahughesi）和肉孢子虫（S.neurona）引起的哺乳动物中枢性疾病,有效的缓解EPM症状。研究表明,帕托珠利在动物体内杀死球虫的同时不影响动物自身免疫力的产生[1,2]。为确保药品质量,建立了同时测定帕托珠利中可能含有的残留溶剂的顶空气相色谱方法[3]。

高效液相色谱法测定猪排泄物中帕托珠利

【目的】建立高效液相色谱(HPLC)结合二极管阵列检测器(PDA)检测猪排泄物中帕托珠利的方法。【方法】尿液样品用0.2%(φ)乙酸酸化乙腈和二氯甲烷进行2次提取;粪便样品经乙腈涡旋提取,亲水−亲油平衡(HLB)固相萃取柱净化。流动相为0.005 mol/L磷酸二氢钾溶液(A)−乙腈(B),尿液和粪便样品的流动相比例V(A)∶V(B)分别为55∶45和56∶44。检测波长为255 nm,柱温为35℃,进样量为30μL。【结果】猪尿液中帕托珠利的检测限和定量限分别为0.02和0.05μg/mL,在0.05~5.00μg/mL范围内呈良好的线性关系,决定系数(R2)为0.9998;在3个添加剂量(0.05、1.00和5.00μg/mL)下,帕托珠利在猪尿液中的平均回收率为93.49%~99.16%,批内和批间相对标准偏差(RSD)为0.97%~7.62%。猪粪便中帕托珠利的检测限和定量限分别为0.10和0.25μg/g,在0.25~100.00μg/g范围内呈良好的线性关系,R2为0.9995;在3个添加剂量(0.25、25.00、100.00μg/g)下,帕托珠利在猪粪便中的平均回收率为89.55%~95.88%,批内和批间RSD为1.76%~3.63%。帕托珠利在尿液和粪便样品中的提取回收率均大于89.50%,批内和批间RSD均小于8%。【结论】本研究方法对样品的前处理操作简单、灵敏度高,可用于猪排泄物中帕托珠利的检测分析。

口服帕托珠利溶液在鸡体内的生物利用度及其与托曲珠利溶液的药动学比较研究

为研究帕托珠利溶液口服给药在健康肉鸡的药动学特征和生物利用度,并与其前体药物托曲珠利溶液在鸡口服给药进行药动学比较,试验将30只健康肉鸡(公母各半,平均体重约为1.55 kg)随机分为三组,分别为帕托珠利溶液口服组(5 mg/kg bw)、帕托珠利溶液静注组(5 mg/kg bw)和托曲珠利溶液口服组(5 mg/kg bw)。所有受试动物于给药后按规定时间点采集血样。血药浓度-时间数据使用Winnolin 8.1.0拟合药动学参数。结果显示:帕托珠利溶液单剂量口服后在鸡体内的平均达峰浓度(C_(max))、达峰时间(T_(max))、半衰期(T_(1/2β))和药时曲线下面积(AUC_(0-t))分别为4.52μg/mL、24.00 h、101.78 h和609.23 h·μg/mL;帕托珠利溶液单剂量静注后在鸡体内的AUC0-t为778.27 h·μg/mL,绝对生物利用度(F)为78.67%;托曲珠利溶液单剂量口服后的平均C_(max)、T_(max)、T_(1/2β)和AUC_(0-t)分别为6.17μg/mL、2.80 h、16.65 h和92.00 h·μg/mL。研究表明,帕托珠利溶液口服吸收良好,在鸡体内分布范围较窄,有较高的体清除率但消除缓慢,比托曲珠利口服吸收C_(max)明显延迟,消除半衰期显著延长。

HPLC法测定猪血浆中帕托珠利的方法学建立

建立了HPLC法测定猪血浆中帕托珠利含量的方法。色谱柱为安捷伦ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相0.2%乙酸水溶液-乙腈(47∶53),柱温35℃,流速为1 m L/min,检测波长为250 nm。在本方法条件下,帕托珠利在0.1~10μg/m L浓度范围内线性关系良好(r>0.999),检测限(LOD)为0.04μg/m L,定量限(LOQ)为0.1μg/m L,批内和批间回收率均大于90%,批内和批间精密度RSD均小于9%。本方法简单、准确、快速,可用于测定猪血浆中帕托珠利的含量。

液相色谱-质谱法测定饲料中的3种三嗪类抗球虫药

本研究建立了高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中的5种三嗪类抗球虫药，包括地克珠利（DIC）、妥曲珠利（TOL）和帕托珠利（PON）。样品经乙腈提取，HLBSPE柱净化，Unitary C18色谱柱分离，电喷雾串联四极杆质谱多反应监测方式测定。3种化合物溶液浓度在1μg／L至1000μg／L之间有良好的线性关系，相关系数（R2）〉0．999。6种空白饲料中分别添加3种三嗪类药物，添加水平为5μg/kg、20μg/kg、100μg/kg，回收率在74．66％～111．50％之间、相对标准偏差〈10％。方法定量限为地克珠利1μg/kg、妥曲珠利和帕托珠利5μg/kg。该方法稳定、可靠，适合饲料样品中地克珠利、妥曲珠利和帕托珠利含量的测定。