补肾活血颗粒对帕金森大鼠脑腺苷A2A受体影响的研究

目的探讨补肾活血颗粒治疗帕金森病的作用机制。方法用6-羟基多巴损毁脑右侧内侧前脑束的方法建立帕金森大鼠模型。将33只SD模型大鼠随机分为治疗组18只和对照组15只,另设正常组15只,治疗组以中药补肾活血颗粒灌胃每日1次,连续8周。对照组及正常组同法以生理盐水灌胃8周,灌胃结束、观察帕金森大鼠旋转行为变化,后断头取脑,免疫荧光法观察大鼠脑腺苷A2A受体变化。结果治疗组大鼠旋转行为较对照组改善,治疗组大鼠脑纹状体A2A受体表达较对照组明显减弱(P<0.01),模型组比正常组表达显著增强(P<0.01)。三组大鼠黑质中A2A受体均无表达。结论补肾活血颗粒能改善帕金森大鼠旋转行为,抑制大鼠纹状体腺苷A2A受体表达,对帕金森病治疗起到较好疗效。

杞菊地黄丸配合针刺阳陵泉对帕金森大鼠神经保护机制研究

目的:探讨杞菊地黄丸配合针刺阳陵泉对帕金森病的防治作用及可能的神经保护机制。方法:采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)注射于脑右侧黑质造成偏侧PD模型。中医综合治疗组用杞菊地黄丸2g/kg灌胃并针刺阳陵泉穴,连续给药4周,此外设立正常对照组、左旋多巴阳性对照组,观察PD大鼠谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)及脑源性神经营养因子(BDNF)表达。结果:PD模型鼠进行中医综合治疗后,GSH、SOD含量,BDNF表达量均明显升高。结论:杞菊地黄丸配合针刺阳陵泉能明显改善PD模型大鼠的抗氧化能力,且有一定的神经保护功能。

单侧帕金森病大鼠模型多巴胺系统损害和感觉运动功能改变

为建立完全毁损型偏侧帕金森病大鼠模型,通过影像学和组织学方法观察完全毁损型偏侧帕金森病大鼠模型的多巴胺系统的改变。在中脑内侧束(MFB)两点注射6-羟基多巴(6-OHDA)建立完全毁损型偏侧帕金森病大鼠模型,观察模型大鼠在自然状态下和阿朴吗啡诱导中出现的行为学改变,并通过小动物PET和免疫组织化学的方法观察大鼠脑组织内多巴胺能神经变化。结果帕金森病大鼠模型在行为学上表现了在自发状态下的患肢运动感觉能力降低;在阿朴吗啡作用下患侧肢体的运动感觉能力有所提高,但是协调性较差;组织学和影像学上表现为损毁侧纹状体、黑质、及中脑内侧传导束内多巴胺转运蛋白缺失。说明完全毁损型偏侧帕金森病大鼠模型表现为单侧肢体的运动感觉功能障碍,通过神经学显像技术和组织学方法能探测到损毁侧纹状体内多巴胺能神经末梢的缺失。

肉苁蓉颗粒剂对帕金森病大鼠模型黑质纹状体多巴胺能神经元的保护作用研究

目的:探讨肉苁蓉颗粒剂对帕金森病大鼠模型黑质纹状体多巴胺能神经元的保护作用。方法:采用6-羟基多巴胺单侧双靶点颅内定向注射法制备帕金森病大鼠模型,3周后据阿朴吗啡诱导的不自主运动,筛选造模成功大鼠,随机分为空白组,模型组,假手术组,肉苁蓉颗粒剂低剂量组(1 g·kg-1·d-1)和肉苁蓉颗粒剂高剂量组(3 g·kg-1·d-1),灌胃相应药物共4周。记录阿朴吗啡诱导的大鼠向健侧旋转的圈数;采用免疫组化研究观察黑质内酪氨酸羟化酶(TH)的表达;和免疫印迹法检测(Western-blot)观察纹状体内α-突出核蛋白(α-synuclein)、酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运蛋白(DAT)的表达;高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法检测定大鼠纹状体多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)的含量。结果:用药4周后,肉苁蓉组向健侧旋转的圈数与模型组比较明显减少(P<0.05),黑质内TH阳性细胞较模型组明显增多,纹状体内α-synuclein表达下调、TH、DAT表达上调。纹状体DA、DOPAC含量明显升高(P<0.05或P<0.01)。高剂量组效果优于低剂量组。结论:肉苁蓉颗粒对帕金森病大鼠模型黑质和纹状体的多巴胺能神经元具有神经保护作用。

运动干预通过减缓纹状体多巴胺丢失改善帕金森病模型大鼠行为功能的研究

目的:探讨跑台运动干预对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型大鼠行为功能、纹状体多巴胺(dopamine,DA)含量的影响。方法:健康雄性SD大鼠,随机分为假手术安静组(Control组)、假手术运动组(Control+Ex组)、6-OHDA安静组(PD组)、6-OHDA运动组(PD+Ex组)。依据实验设计要求,PD和PD+Ex组右脑内侧前脑束(MFB)注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)建立偏侧PD大鼠模型,假手术组于相同位点注射等量生理盐水。在造模后的第7天颈部皮下注射阿朴吗啡(APO)进行旋转行为测试,评价PD模型的可靠性,不符合PD模型标准的大鼠剔除。运动组术后1周开始进行跑台训练,运动方案为11 m/min,30 min/day,5 days/week,共4周。采用旷场试验评价PD模型大鼠的自主活动能力;微透析-高效液相色谱电化学联用技术检测纹状体DA浓度;免疫组织化学检测纹状体酪氨酸羟化酶(TH)阳性纤维的表达。结果:PD和PD+Ex组移动距离较Control组显著降低(P<0.01);PD+Ex组第3、4周移动距离较PD组显著增加(P<0.01)。PD和PD+Ex组纹状体DA含量较Control组显著降低(P<0.01);但PD+Ex组第3、4周纹状体DA浓度较PD组显著升高(P<0.01)。结论:PD模型大鼠总移动距离与纹状体DA浓度之间存在高度正相关,且二者均随6-OHDA药物及运动干预持续时间延长出现"时序性"变化特征。运动干预通过减缓纹状体DA丢失改善PD模型大鼠自主行为功能,推测其机制可能与运动的神经保护作用减轻了6-OHDA神经毒素对DA能神经元的毒性损伤、促进其存活有关。

电针对帕金森病模型大鼠黑质细胞线粒体形态及复合物Ⅰ的影响

目的:探讨电针对帕金森病(PD)模型大鼠黑质细胞线粒体形态及复合物Ⅰ的影响。方法:80只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、溶剂对照组、模型组、治疗组,每组各20只;背部皮下连续注射鱼藤酮28d以制备PD大鼠模型,治疗组大鼠取风府、太冲给予电针治疗,比较各组大鼠的行为学改变,大脑黑质区酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数,线粒体形态,线粒体复合物Ⅰ的差异。结果:经电针治疗后,治疗组与模型组的行为学评分分别为(6.23±1.09)分和(7.12±1.21)分,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。经电针治疗后,模型组大鼠脑黑质的TH阳性细胞数明显低于治疗组(P<0.05)。治疗组大鼠经电针治疗后脑黑质的线粒体复合物Ⅰ活性明显高于模型组(P<0.05),但仍显著低于正常对照组和溶剂对照组(P<0.05)。电镜下大鼠脑黑质细胞线粒体超微结构显示:模型组大鼠脑黑质细胞中线粒体超微结构改变大于治疗组,且部分线粒体中可见重度空泡样改变。结论:电针能改善PD大鼠的行为学改变,增加大脑黑质区PH阳性细胞数,提高线粒体复合物Ⅰ的活性以及减少线粒体超微结构的改变。

天麻最细粉对帕金森病大鼠脑内神经递质及环磷酸腺苷/环磷酸鸟苷的调节作用

目的观察天麻最细粉和普通粉对帕金森病(PD)大鼠脑内神经递质及血清中环磷酸腺苷(c AMP)/环磷酸鸟苷(c GMP)的调节作用,对比最细粉和普通粉的疗效差别。方法采用脑内定位注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)建立PD大鼠模型。设立正常组、模型组、天麻普通粉组(1.8 g/kg)和天麻最细粉组(1.8 g/kg)。每天灌胃给药1次,连续给药3周后,应用水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力;采用高效液相色谱-电化学检测法测定大鼠脑组织中神经递质——多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)的含量变化;酶联免疫法测定大鼠血清中c AMP和c GMP的含量及c AMP/c GMP的比值。结果经过天麻普通粉和天麻最细粉的治疗后,两组大鼠的逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),且天麻最细粉组对大鼠学习记忆能力的改善作用优于普通粉组(P<0.05);天麻治疗后大鼠脑组织的DA、NE、5-HT水平均显著高于模型组(P<0.05),且天麻最细粉组的改善作用优于天麻普通粉组(P<0.05);天麻治疗后大鼠血清中的c AMP显著上升(P<0.05),c GMP显著降低(P<0.05),导致c AMP/c GMP的比值显著升高(P<0.05),趋于正常,而且天麻最细粉组的疗效明显优于天麻普通粉组(P<0.05)。结论经过天麻普通粉和天麻最细粉的治疗后,PD大鼠的学习记忆能力得到改善,提高了PD大鼠脑组织中降低了的DA、NE、5-HT水平,调节了血清中c AMP/c GMP平衡,且天麻最细粉的疗效优于普通粉,为天麻最细粉的临床使用提供了科学依据。

电针对帕金森病模型大鼠黑质多巴胺能神经元凋亡的影响

目的观察电针对帕金森病大鼠黑质DA神经元凋亡的影响。方法将6OHDA注入中脑右侧黑质造成单侧黑质损毁的帕金森病大鼠模型,采用电针对模型大鼠进行治疗,并用TH和TUNEL双标法检测正常组、假手术组、模型组、电针组黑质DA神经元凋亡数目。结果帕金森病大鼠损毁侧DA神经元凋亡数目显著高于正常组(P<0.01)及未损毁侧(P<0.01),电针可有效地减少帕金森病大鼠DA神经元凋亡数目(P<0.05)。结论DA神经元凋亡可能参与帕金森病的发生,电针可有效地改善这一病理过程。

龟羚帕安丸对帕金森病大鼠模型多巴胺能神经元凋亡影响的研究

目的:观察龟羚帕安丸对帕金森病模型大鼠多巴胺能神经元凋亡的影响,探究龟羚帕安丸治疗帕金森病的可能机制。方法:用6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导建立帕金森病(Parkinson's dieses,PD)大鼠模型,随机分为5组,分别给予龟羚帕安丸大、中、小剂量,美多芭,同等容积的生理盐水灌胃治疗;同时设立假手术组,给予同等容积的生理盐水灌胃;1 d 1次,共30 d。用TUNEL观察多巴胺能神经元凋亡的变化,用免疫组织化学技术观测黑质神经元Bcl-2和Bax的表达及Bcl-2/Bax的比值。结果:龟羚帕安丸大、中、小剂量组及美多芭组TUNEL检测阳性细胞数及Bax阳性细胞明显降低,Bcl-2及Bcl-2/Bax的比值显著升高(P<0.05)。结论:龟羚帕安丸可以通过调节Bcl-2和Bax的表达,减少PD大鼠的神经细胞凋亡而发挥保护神经元的作用,此是其治疗帕金森病的作用机制之一。

针刺对帕金森模型大鼠血清IL-1β及TNF-α的影响

目的:观察针刺对帕金森模型大鼠血清IL- 1β及TNF- α的影响。方法:采用酶联免疫吸附试验检测血清IL- Iβ及INF- α的水平。结果:与帕金森模型组相比较,针刺治疗组大鼠血清中TNF-α含量明显降低( P<0 .0 1 ) ,而血清IL- 1 β无明显改变( P>005 )。结论:降低血清中TNF-

多巴胺转运蛋白PET成像在建立帕金森病大鼠模型中的作用

目的:研究多巴胺转运蛋白(11C-β-CFT)PET成像技术在判别帕金森病(PD)大鼠模型中的作用。材料和方法:22只成功的PD大鼠模型分别进行11C-β-CFTPET显像,ROI方法测量模型大鼠两侧纹状体/小脑比值并进行统计分析,比较两侧有无显著性差异。正常与模型大鼠分别进行TH免疫组化染色。结果:模型大鼠毁损侧纹状体放射性明显下降(P=0.000)。同时模型大鼠TH染色黑质处阳性神经元数量减少。结论:PET多巴胺转运蛋白成像可结合行为学观察作为证实模型成功的检验方法之一,为基础研究及临床诊断PD提供了一种分子成像工具。

盐酸多奈哌齐对帕金森大鼠认知功能及大脑海马组织Klotho、Akt和Foxo3a表达的影响

目的探讨盐酸多奈哌齐对于6-羟基多巴胺(6-OHDA)致帕金森大鼠认知功能及海马组织Klotho、Akt和Foxo3a mRNA及蛋白的影响。方法选取同批次饲养健康雄性SD大鼠,分为对照组(同剂量生理盐水)、帕金森疾病模型组(4μg/μl 6-OHDA+同剂量生理盐水)、盐酸多奈哌齐低剂量组(4μg/μl 6-OHDA+3 mg/kg·bw盐酸多奈哌齐)和盐酸多奈哌齐高剂量组(4μg/μl 6-OHDA+6 mg/kg·bw盐酸多奈哌齐),使用6-OHDA制作帕金森病模型大鼠,利用Morris水迷宫实验评价大鼠认知功能,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠海马区病理变化,ELISA法检测各组大鼠血清中SOD和MDA含量,用Western blot法检测海马区Klotho、p-Akt和p-Foxo3a蛋白的表达水平,荧光定量PCR检测大鼠脑海马区Klotho、Akt和Foxo3a mRNA表达。结果帕金森大鼠神经元细胞排列疏松、紊乱,细胞核固缩、深染,细胞质减少。高剂量组大鼠水迷宫试验完成时间明显低于模型组和低剂量组大鼠(P<0.05),海马区Klotho蛋白及mRNA表达高于模型组和低剂量组大鼠(P<0.05),p-Akt和p-Foxo3a蛋白表达明显低于模型组和低剂量组(P<0.05),Akt和Foxo3a mRNA表达高于模型组和低剂量组(P<0.05),血清SOD表达高于模型组和低剂量组(P<0.05),MDA表达低于模型组和低剂量组(P<0.05),差异均有统计学意义。结论盐酸多奈哌齐可能通过上调海马区Klotho mRNA表达,抑制Akt和Foxo3a磷酸化,提高血清SOD含量,在一定程度上改善帕金森模型大鼠的学习记忆能力。

电针对帕金森病模型大鼠纹状体多巴胺及代谢产物的影响

目的:研究电针对帕金森病大鼠纹状体多巴胺及代谢产物的影响并进行对比分析。方法:将6-OHDA注入中脑右侧黑质造成单侧黑质损毁的帕金森病大鼠模型,并随机分为正常组、假手术组、模型组和电针组,检测其损毁侧纹状体区多巴胺及代谢产物的含量。结果:电针组与模型组相比,纹状体区多巴胺、多巴克及高香草酸均有不同程度的升高(P<0.05)。结论:电针能提高帕金森病大鼠纹状体区多巴胺的含量,对帕金森病有一定的治疗作用。

完全毁损型偏侧帕金森病大鼠模型的行为及影像特征

为研究完全毁损型偏侧帕金森病大鼠模型的行为和影像学改变,建立完全毁损型偏侧帕金森病大鼠模型。观察模型大鼠在自然状态下和阿朴吗啡诱导中出现的异常行为学改变,M icro-PET模型大鼠神经系统功能改变。帕金森病大鼠模型在行为学上表现了在自发状态下的患肢运动感觉能力降低。在阿朴吗啡诱导下出现对侧旋转及异常不自主运动。影像学上表现为损毁侧纹状体内多巴胺转运蛋白缺失及毁损侧纹状体、皮层及丘脑的功能活性降低。说明完全毁损型偏侧帕金森病大鼠模型表现为单侧肢体的运动感觉功能障碍和损毁侧纹状体内多巴胺能神经末梢的缺失及相应区域的脑功能降低,类似于人类严重的帕金森末期阶段强直运动功能障碍的表现。

黑质致密部和内侧前脑束注射6-OHDA制备的帕金森病大鼠模型纹状体中DA含量比较

目的:比较黑质致密部(SNc)损毁和内侧前脑束(MFB)损毁2种方法制备的帕金森病(PD)大鼠模型对纹状体中多巴胺(DA)递质含量的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组(n=12)、SNc损毁组(n=15)和MFB损毁组(n=14)。采用高效液相色谱-电化学检测法,观察3组大鼠损毁侧纹状体中DA的含量。结果:与假手术组相比较,SNc损毁组(P<0.001)和MFB损毁组(P<0.001)大鼠纹状体中DA含量均显著降低,与SNc损毁组相比较,MFB损毁组大鼠纹状体中DA含量下降更为显著(P=0.005)。结论:MFB损毁制备的PD大鼠模型对DA能神经元的损伤范围较SNc损毁有所扩大,为不同研究选择制备模型的方法提供一定的理论依据。

鱼藤酮致帕金森病大鼠黑质中Smac和Bcl-2的表达及意义

目的:研究鱼藤酮致帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠脑黑质中凋亡相关蛋白Smac和Bcl-2表达的改变。方法:将Witstar大鼠随机分为对照组和实验组。对照组10只背部皮下注射葵花油1ml/kg,实验组25只分为A、B、C三组,按照3.0(5只)、2.0(10只)和1.0(10只)mg/(kg·d)背部皮下注射鱼藤酮(鱼藤酮溶解在葵花籽油中,充分震荡混匀后4℃避光保存)。结果:透射电镜观察下,鱼藤酮处置的实验组神经元细胞皱缩,胞质致密,核染色质边集,有部分细胞胞核裂解,胞质芽突脱落,形成凋亡小体。并且随着鱼藤酮染毒剂量的增大,凋亡小体形成更加明显。免疫组化染色显示,Smac的阳性表达实验组高于对照组,Bcl-2的阳性表达实验组低于对照组。结论:鱼藤酮具有明显的神经毒性,能导致大鼠脑内DA能神经元的损伤,细胞凋亡参与了鱼藤酮帕金森模型大鼠黑质多巴胺神经细胞的损伤。

肌酸对帕金森病模型大鼠黑质多巴胺能神经元保护作用的研究

目的:观察肌酸对帕金森病模型大鼠黑质多巴胺能神经元的保护作用及其机制。方法:30只雄性SD大鼠随机分成3组:对照组(A组),6-羟多巴胺(6-OHDA)组(B组),肌酸+6-OHDA组(C组),每组各10只。A组不注射6-OHDA,B组进行6-OHDA造模,C组在造模前5天每天给予肌酸(100 mg/kg)灌胃,连续两周,B组给予生理盐水4 ml灌胃。分别观察各组动物行为学、黑质多巴胺能神经元数量及氧化应激指标谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平变化。结果:6-OHDA立体定向注射后,实验大鼠出现阿朴吗啡诱导的旋转行为,黑质致密部多巴胺能神经元显著减少,GSH含量降低、MDA水平升高;肌酸能够减轻动物行为学异常(P<0.01)、显著增加黑质致密部多巴胺神经元数量(P<0.01),拮抗6-OHDA诱导的氧化应激水平升高(P<0.01)。结论:肌酸对6-OHDA诱导的多巴胺神经元损伤具有明显保护作用,其机制与抑制氧化应激损伤有关。

移植BDNF修饰骨髓间充质干细胞对帕金森病模型大鼠TH表达的影响

目的:观察移植pIRESneo-EGFP-BDNF修饰骨髓间充质干细胞(MSCs)对帕金森病模型大鼠TH表达的影响。方法:采用电穿孔法将pIRESneo-EGFP-BDNF转染至骨髓MSCs;通过脑内注射6-OHDA制备PD大鼠模型,随机分为Sham组,PD组,MSCs组,BDNF组,经侧脑室移植MSCs或pIRESneo-EGFP-BDNF修饰骨髓MSCs,术后2、4、8周,腹腔注射阿朴吗啡诱导PD大鼠旋转行为,移植BDNF修饰骨髓MSCs在大鼠脑组织内的迁移,采用免疫组化及Western blot方法测定各组大鼠中脑黑质TH蛋白表达的变化。结果:移植术后2、4、8周MSCs组和BDNF组大鼠与PD组比较旋转次数明显减少(P<0.05),以BDNF组较MSCs组比较改善更为明显(P<0.05),移植细胞干预PD模型大鼠8周后中脑黑质TH表达,BDNF组较MSCs组、PD组明显增高(P<0.05),移植pIRESneo-EGFP-BDNF修饰骨髓MSCs可以在PD大鼠脑内存活,并迁移至远处。结论:经侧脑室移植pIRESneo-EGFP-BDNF修饰的骨髓MSCs通过提高中脑黑质TH的活性,能够明显改善PD模型大鼠的行为能力。

偏侧帕金森病大鼠纹状体多巴胺D_(2)R功能的放射自显影

目的观察偏侧帕金森病 (PD)大鼠纹状体多巴胺D2 受体 (D2 R)的功能变化 ,评价12 5I-IBZMD2 R显像的应用价值。 方法应用 6 -羟基多巴胺 (6 -OHDA)建立部分和完全损毁的偏侧PD大鼠模型 ,静脉注射12 5I -IBZM 5 0～ 80 μCi 2h后进行脑组织放射自显影 ;高效液相色谱—电化学法 (HPLC -ECD)检测纹状体多巴胺 (DA)及其代谢产物的含量 ;免疫组化酪氨酸羟化酶 (TH)染色观察黑质及纹状体的细胞和纤维。 结果偏侧PD大鼠损毁侧纹状体12 5I-IBZM摄取增加 ,部分和完全损毁模型的损毁侧较未损毁侧纹状体 /皮层 (ST/CX)比值分别增加了2 3%和 5 4% ;纹状体DA含量分别降低了 39%和 98% ;TH染色可见损毁侧黑质和纹状体TH阳性细胞和纤维明显减少。 结论偏侧PD大鼠模型损毁侧D2 R功能上调 ,且与损毁程度相一致 ;IBZMD2

帕金森病模型大鼠与正常大鼠外侧缰核神经元放电频率变化比较

帕金森病（PD）是一种进行性的神经系统变性疾病。PD的病理改变不局限于黑质纹状体多巴胺能系统,研究发现在PD患者和动物也有边缘系统形态或（和）功能的变化。在PD病人中有40%存在抑郁症状,这种抑郁症状可早于运动症状出现[1]。位于背侧间脑的外侧缰核（LHb）,