血清Aβ1-42、P-Tau181和Hcy与帕金森病患者睡眠障碍的相关性

目的探讨血清Aβ1-42、P-Tau181和Hcy与帕金森病(PD)患者睡眠障碍的相关性。方法将80例PD患者根据匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)评估结果分为睡眠正常组(<7分)和睡眠障碍组(≥7分)。采用单因素和多因素logistic回归分析血清Aβ1-42、P-Tau181和Hcy水平与PD患者睡眠障碍的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析不同指标预测PD患者发生睡眠障碍的效能参数。结果单因素和多因素logistic回归分析发现血清Aβ1-42和Hcy分别是PD患者发生睡眠障碍的保护因素和独立危险因素(P<0.05)。血清Aβ1-42、Hcy水平预测PD伴睡眠障碍的AUC分别为0.757(95%CI:0.652~0.861)和0.796(95%CI:0.688~0.905)。结论PD患者血清Aβ1-42、Hcy水平与睡眠障碍密切相关,可作为临床诊断PD伴睡眠障碍的预测因子。

血清α-突触核蛋白、微管相关蛋白1轻链3、载脂蛋白A1与帕金森病认知功能、疾病进展的关系

目的检测α-突触核蛋白(α-synuclein)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、载脂蛋白A1(Apo A1)水平在帕金森病(PD)患者血清中的表达情况,以及三者与PD患者发生认知功能障碍(CI)、疾病进展的相关性。方法选取96例PD患者作为研究组,另外选取同期体检健康者90例为对照组。根据蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分将患者分为CI组(42例)和认知功能正常组(54例)。根据Hoehn-Yahr(H-Y)分期量表将PD患者分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ期,其中Ⅰ~Ⅱ期PD患者纳入早期PD组(57例),Ⅲ~Ⅴ期PD患者纳入中晚期PD组(39例)。测定PD患者血清中α-synuclein、LC3、Apo A1水平。分析α-synuclein、LC3、Apo A1与H-Y分期的相关性。采用多因素Logistic回归分析筛选PD患者发生CI的影响因素。结果研究组α-synuclein水平高于对照组,LC3、Apo A1水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);早期PD组α-synuclein水平低于中晚期PD组,LC3与Apo A1水平高于中晚期PD组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清α-synuclein水平与H-Y分期呈正相关(P<0.05)。三者联合预测PD患者发生CI的曲线下面积(AUC)为0.925,大于α-synuclein、LC3、Apo A1单独预测的AUC(P<0.05)。α-synuclein、LC3、Apo A1、高血压史是PD患者发生CI的影响因素(P<0.05)。结论α-synuclein在PD合并CI患者血清中呈高表达,LC3、Apo A1呈低表达,三者与PD认知功能、疾病进展的关系密切。

电针对MPTP诱导帕金森病小鼠FoXO1/NLRP3通路介导神经炎症的影响

目的探究电针对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导帕金森病(PD)模型小鼠的作用机制是否与叉头盒蛋白O1(FoXO1)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路介导的神经炎症相关。方法将30只小鼠随机分为对照组(Ctrl)、模型组(MPTP)、电针组(EA),每组10只。连续7 d腹腔注射MPTP 30 mg/(kg•d)制备PD小鼠模型。采用旷场实验及爬杆实验观察小鼠行为学;免疫组化观察小鼠中脑黑质α-突触核蛋白(α-syn)表达水平;蛋白免疫印迹测定Iba-1、FoXO1、NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达水平;ELISA法检测中脑黑质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)炎症因子表达水平。结果MPTP组小鼠出现显著的行为学障碍,中脑黑质α-syn明显增加(P<0.01),Iba-1、FoXO1、NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白水平升高(P<0.05,P<0.01),TNF-α、IL-1β含量明显增加(P<0.01)。EA治疗后能有效改善PD小鼠运动障碍,提高运动平衡及协调能力(P<0.01),减少α-syn的异常聚集(P<0.01),减轻小胶质细胞异常活化,缓解神经炎症(P<0.05)。结论电针可能通过调控FoXO1/NLRP3通路介导的神经炎症,在PD中发挥保护作用。

帕金森病相关蛋白DJ-1对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的影响

目的:研究帕金森病相关蛋白DJ-1对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:Western印迹检测骨肉瘤细胞株(MG-63,Saos-2和U2OS)及正常人成骨细胞株hFOB1.19中DJ-1和第10号染色体上缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted from chromosome 10,PTEN)基因的表达。DJ-1 siRNA处理人骨肉瘤细胞后,采用Western印迹检测DJ-1的蛋白表达水平;细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞存活率;膜联蛋白V(annexin V)-异硫氰酸荧光素(uorescein isothiocyanate,FITC)/碘化吡啶(propidium iodide,PI)双染检测细胞凋亡;Transwell侵袭和迁移实验检测细胞侵袭和迁移水平。结果:与hFOB1.19细胞比较,骨肉瘤细胞DJ-1蛋白表达水平显著升高(均P<0.05),其中U2OS细胞升高最为显著(P<0.01)。DJ-1 siRNA可显著降低U2OS细胞中DJ-1蛋白表达水平、降低细胞存活率、促进细胞凋亡、抑制细胞侵袭和迁移水平,以及增加PTEN蛋白表达水平(均P<0.05)。另外,与hFOB1.19细胞比较,PTEN在骨肉瘤细胞中的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:DJ-1可抑制人骨肉瘤细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞侵袭和迁移水平,其机制可能与增加PTEN蛋白的表达水平有关。

帕金森病相关基因α-突触核蛋白和PINK1对Nurr1的调节作用

目的探讨帕金森病相关基因α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)和PTEN诱导的蛋白激酶1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)对转录因子Nurr1的调节作用。方法利用荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)的方法检测α-syn与Nurr1的相互作用。同时,在PINK1基因敲减的细胞模型中,通过双荧光素酶报告系统检测PINK1对Nurr1转录激活活性的调节作用。结果 FRET检测显示,CFP-α-syn与YFP-Nurr1之间发生了荧光共振能量转移的现象。其FRET效率大约为20.52%。提示α-syn与Nurr1之间可能存在直接的相互作用。对于PINK1基因敲减的细胞进行研究发现,在PINK1被抑制表达24 h或48 h后,Nurr1的活性显著下调。结论以往研究提示α-syn可能是Nurr1的抑制因子。研究显示α-syn可能与Nurr1直接结合而抑制其活性。而PINK1对Nurr1可能存在一个正性调节作用。因此,二者对Nurr1的调节可能存在一个相互协调、相互制约的关系。

帕金森病患者唾液中α-syn、DJ-1、HO-1、AchE水平变化及其辅助诊断价值

目的分析帕金森病患者唾液中α-突触核蛋白(α-syn)、DJ-1、血红素加氧酶-1(HO-1)、乙酰胆碱酯酶(AchE)水平变化及其辅助诊断价值。方法选取2021年8月至2022年8月该院收治的帕金森病患者96例作为帕金森病组,另选取同期在该院体检的健康人群80例作为健康对照组。根据蒙特利尔认知量表(MoCA)评分将帕金森病患者分为合并认知障碍组和无认知障碍组,采集所有受检者的唾液标本,采用酶联免疫吸附试验检测HO-1、α-syn、DJ-1水平,酶比色法检测AChE水平,比较各组受检者的唾液指标水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析α-syn、DJ-1、HO-1、AchE指标单独及联合诊断帕金森病的效能。结果帕金森病组患者唾液α-syn、DJ-1、HO-1水平低于健康对照组,AchE水平高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。合并认知障碍组患者唾液α-syn、DJ-1、HO-1水平低于无认知障碍组,AchE水平高于无认知障碍组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,α-syn、DJ-1、HO-1、AchE单独检测诊断帕金森病的曲线下面积(AUC)分别为0.723、0.781、0.816、0.671,4项指标联合检测诊断帕金森病的AUC为0.876。结论帕金森病患者唾液中α-syn、DJ-1、HO-1、AchE水平呈明显异常,且与患者认知功能改变相关,4项指标在辅助诊断帕金森病方面具有一定价值。

补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白7在心血管代谢性疾病中的作用及机制

心血管代谢性疾病(cardiometabolic disease,CMD)是指代谢系统和心血管系统单一或者同时发生、可相互影响的病理改变,是代谢性疾病和心血管疾病的总称。包括肥胖、胰岛素抵抗、代谢综合征、糖尿病以及冠心病等。脂肪因子在CMD的发生发展中发挥关键性作用。补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白7(complement C1q TNF-related protein 7,CTRP7)是新近发现的脂肪因子,与肥胖、糖尿病及冠心病等CMD密切相关。本文围绕CTRP7生物学特性,综述其在CMD(包括肥胖、2型糖尿病和冠心病)发生发展中的作用,及可能的作用机制如多种途径调控糖脂代谢、降低胰岛素敏感性、促进炎症反应和增加氧化应激等,以期为CTRP7作为CMD的治疗靶标提供依据和参考。

帕金森病患者血清PRDX1、AOPP水平与病情、认知功能的关系

目的 探讨帕金森病(PD)患者血清过氧化还原蛋白1(PRDX1)、晚期氧化蛋白产物(AOPP)水平与病情、认知功能的关系。方法 选取2021年12月至2023年1月该院收治的103例PD患者作为研究对象,根据Hoehn-Yahr(H-Y)分期分为早期组(H-Y分期0~2.5期,62例)和中晚期组(H-Y分期3~5期,41例),根据蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分结果分为认知正常组(MoCA评分≥26分,75例)和认知异常组(MoCA评分<26分,28例)。采用酶联免疫吸附试验检测血清PRDX1、AOPP水平;采用Pearson相关分析探讨血清PRDX1、AOPP与MoCA评分的相关性;采用单因素及多因素Logistic回归分析PD患者认知功能异常的相关因素。结果 中晚期组患者血清PRDX1、AOPP水平高于早期组(P<0.05)。认知异常组患者血清PRDX1、AOPP水平高于认知正常组(P<0.05),MoCA评分低于认知正常组(P<0.05)。PD患者血清PRDX1、AOPP水平与MoCA评分均呈负相关(r=-0.603、-0.537,均P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,高龄(OR=2.392,95%CI:1.591~3.595)、H-Y分期高(OR=2.232,95%CI:1.505~3.310)、PRDX1≥9.05 ng/mL(OR=3.522,95%CI:2.141~5.794)、AOPP≥113.23μmol/L(OR=3.013,95%CI:1.846~4.871)是PD患者认知功能异常的影响因素(P<0.05)。结论 高水平PRDX1、AOPP与PD患者病情加重、认知功能异常关系密切,二者可作为评估患者认知功能异常的辅助血清标志物,有临床推广应用价值。

帕金森病模型小鼠皮质神经元树突棘变化观察

目的观察帕金森病(PD)小鼠模型初级运动皮质锥体神经元树突棘变化情况并探索其可能机制。方法采用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)建立PD小鼠模型,行为学实验和免疫组化检测黑质多巴胺神经元损伤情况进行模型鉴定,高尔基染色法观察锥体神经元树突和树突棘变化,免疫组化分析血清诱导激酶(SNK)和树突棘相关的Rap特异性GTPase活化蛋白(SPAR)的变化情况。结果MPTP组小鼠行为学得分、多巴胺阳性神经元平均光密度和树突棘密度低于正常对照组,MPTP组小鼠锥体神经元树突棘长度高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组的神经元树突复杂度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论MPTP模型小鼠皮质神经元树突棘受损,树突棘的改变可能与SNK和SPAR表达变化有关。

唾液α-突触核蛋白和DJ-1蛋白水平对帕金森病的诊断价值

目的探讨唾液α-突触核蛋白和DJ-1蛋白水平在帕金森病(Parkinson disease,PD)诊断中的应用价值。方法纳入临床确诊的原发性帕金森病患者27例,健康对照组27例。收集一般临床资料,采用HohnYahr分期、帕金森病统一评定量表(UPDRS)-Ⅱ/Ⅲ、嗅觉得分、蒙特利尔认知评估量表(Mo CA)、简易精神状态评价量表(MMSE)进行病情评估。酶联免疫吸附实验(ELISA)方法定量测定唾液中α-突触核蛋白和DJ-1蛋白含量,所得数据与对照组进行统计学差异分析,并分析与年龄、性别、病程之间的相关性。结果 PD组的α-突触核蛋白浓度(1269.02±16.09 pg/m L)和DJ-1浓度(6.07±3.23 ng/m L)均明显低于对照组的α-突触核蛋白浓度(1350.51±25.79 pg/m L)和DJ-1浓度(8.43±4.33 ng/m L),且差异均具有统计学意义(P值分别为0.010、0.027)。对于区别PD和正常对照组,α-突触核蛋白和DJ-1蛋白水平的敏感度分别为55.56%、77.8%,特异度分别为89.19%、55.6%。PD患者的年龄、性别、UPDRS-Ⅱ/Ⅲ评分、Hohn-Yahr分期、嗅觉得分、MMSE评分、Mo CA评分与唾液中α-突触核蛋白、DJ-1蛋白浓度均无显著相关(P>0.05)。结论检测唾液α-突触核蛋白和DJ-1蛋白水平可能是PD的一种辅助诊断手段。

DJ-1蛋白在帕金森病嗅觉障碍中作用研究进展

嗅觉障碍已成为一个全球性公共健康问题,发病率占老年人口的13.9%~31.7%,被认为是老年人患有神经退行性疾病的先兆。帕金森病(PD)是目前世界上第二大神经系统变性疾病,好发于中老年人,以震颤、肌强直、运动迟缓和步态异常四大主征为主要临床表现,但嗅觉减退等非运动障碍症状亦是影响其生活质量的重要因素。据流行病学调查显示^([1]),多数PD患者患病早期表现有不同程度嗅觉障碍,发生率高达45.0%~96.7%,故嗅觉障碍被认为是PD首发症状和早期诊断的临床指标之一^([2])。研究发现一种与PD密切相关蛋白名为DJ-1蛋白,又名PD蛋白(PARK)7,主要参与神经元的保护过程^([3]),该蛋白在PD患者血液及唾液中高度表达^([4]),而PD患者中DJ-1蛋白表达异常时出现明显嗅觉障碍^([5]),但其内在机制仍不清楚。因此,本文就DJ-1蛋白概况及DJ-1蛋白在PD嗅觉障碍中的作用相关研究进行总结,以期为PD嗅觉障碍提供早期诊断标志物和基因治疗靶点。

血清CTRP1、CTRP5和CTRP7水平与冠心病的相关性研究

目的分析冠心病(CAD)患者血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白(CTRP)1、CTRP5和CTRP7水平的变化,探讨各指标水平与CAD的相关性。方法选取在开滦总医院行冠状动脉造影的247例患者为研究对象,根据冠状动脉造影结果将其分为CAD组(200例)和非CAD组(47例),根据Gensini积分(GS积分)的中位数将CAD组分为轻度狭窄组(GS积分≤42,102例)和重度狭窄组(GS积分>42,98例)。比较各组临床资料和血清CTRP1、CTRP5和CTRP7水平,运用多因素Logistic回归分析确定CAD的独立危险因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析CTRP1、CTRP5和CTRP7对CAD的诊断效能。结果CAD组血清CTRP1、CTRP5和CTRP7水平明显高于非CAD组(P<0.05),重度狭窄组血清CTRP1、CTRP5和CTRP7水平明显高于轻度狭窄组(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,CTRP1是CAD发生的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清CTRP1、CTRP5和CTRP7预测CAD的曲线下面积分别为0.747、0.640和0.599,CTRP1的特异度较高(76.6%),CTRP5的灵敏度较高(81.0%)。结论CAD患者血清CTRP1、CTRP5和CTRP7水平升高,且其水平与CAD严重程度有关,检测三者水平有助于CAD的筛查和病情评估。

自噬及自噬相关蛋白在帕金森病模型大鼠黑质纹状体中的表达及意义

目的观察自噬及自噬相关蛋白Beclin1及微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1light chain 3,MAPlLC3,简称LC3)在帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠黑质纹状体中的表达及变化,探讨自噬在PD发病中的作用。方法将90只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、PD模型组(模型组),每组又分为模型制备后4d、8d两个亚组,每个亚组各15只。采用颈背部皮下注射鱼藤酮制作PD模型,透射电镜观察自噬体的形成,免疫组化法和Western blotting法检测黑质纹状体自噬相关蛋白Beclin1和LC3的表达水平。结果 (1)电子显微镜下PD模型组黑质纹状体中出现自噬体,呈圆形,大多位于细胞核旁,溶酶体数量增多。8d时,自噬体、溶酶体数量显著增多。(2)与正常组比较,假手术组黑质纹状体中Beclin1和LC3表达略增多,但差异无统计学意义(均P>0.05);与假手术组比较,模型组黑质纹状体Beclin1和LC3的表达明显增多(均P<0.01),8d高于4d,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论 PD模型大鼠黑质纹状体中自噬活性被激活,自噬可能参与了PD的发病过程。

结直肠癌组织中miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白的表达变化及其意义

目的观察结直肠癌(CRC)组织中miR-138-5p、miR-876-5p、DNA损伤结合蛋白1和CUL4相关因子7(DCAF7)蛋白的表达变化,并探讨其临床意义。方法CRC患者98例,均接受手术治疗,术中留取CRC组织和癌旁组织,采用Real-time PCR法检测CRC组织和癌旁组织中miR-138-5p、miR-876-5p,采用蛋白印迹法检测CRC组织和癌旁组织中DCAF7蛋白,分析miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量与CRC患者临床病理参数的关系。以CRC组织中miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量的中位数为临界值,将CRC患者分为miR-138-5p高表达组和miR-138-5p低表达组、miR-876-5p高表达组和miR-876-5p低表达组、DCAF7蛋白高表达组和DCAF7蛋白低表达组,并分析miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量与CRC患者预后的关系。结果CRC组织中miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量分别为1.36±0.29、1.41±0.36、0.59±0.19,癌旁组织中miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量分别为2.15±0.48、2.08±0.44、0.20±0.08,两者相比,P均<0.05。miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量与CRC患者是否合并淋巴结转移、TNM分期、浸润深度有关(P均<0.05)。miR-138-5p低表达组3年总体生存率为67.3%,miR-138-5p高表达组3年总体生存率为86.6%,两组相比,P<0.05。miR-876-5p低表达组3年总体生存率为66.7%,miR-876-5p高表达组3年总体生存率为85.1%,两组相比,P<0.05。DCAF7蛋白高表达组3年总体生存率为67.2%,DCAF7蛋白低表达组3年总体生存率为87.5%,两组相比,P<0.05。结论CRC组织中miR-138-5p低表达、miR-876-5p低表达、DCAF7蛋白高表达,miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量与CRC患者是否合并淋巴结转移、TNM分期、浸润深度有关。与miR-138-5p高表达、miR-876-5p高表达、DCAF7蛋白低表达的CRC患者相比,miR-138-5p低表达、miR-876-5p低表达、DCAF7蛋白高表达的CRC患者术后3年总体生存率低。

血清α-突触核蛋白及类胰岛素1号增长因子水平与帕金森病患者认知功能的相关性分析

目的分析血清α-突触核蛋白(α-syn)、类胰岛素1号增长因子(IGF-1)水平与帕金森病(PD)患者认知功能障碍的关系。方法选取2018-03—2020-01洛阳市中心医院接受治疗的58例PD患者,均接受左旋多巴制剂治疗5个月。依据治疗后是否发生认知功能障碍分为发生组与未发生组,于开始治疗当天早晨检测血清α-syn、IGF-1水平,分析血清α-syn、IGF-1表达与PD患者发生认知功能障碍的关系。结果58例PD患者治疗后发生认知功能障碍20例。发生组血清TNF-α、IL-6、α-syn水平均高于未发生组,IGF-1水平低于未发生组(P<0.05);相关性分析显示,PD患者治疗前血清α-syn水平与IGF-1水平呈负相关(r<0,P<0.05);经二元Logistic回归分析后建立多元回归模型,结果显示血清TNF-α、IL-6、α-syn水平过表达及IGF-1低表达均是PD患者发生认知功能障碍的影响因素(OR>1,P<0.05);绘制ROC曲线,结果显示血清α-syn、IGF-1水平预测PD患者发生认知功能障碍的曲线下面积(AUC)均>0.80,预测价值较理想。结论PD患者经治疗后认知功能障碍发生风险可能与治疗前α-syn水平过表达、IGF-1低表达有关,临床可考虑通过检测PD患者治疗前血清α-syn、IGF-1表达,预测认知功能障碍发生风险,以指导早期干预,促进良性预后。

可溶性耐药相关钙结合蛋白在MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞帕金森病模型中的表达及意义

目的:观察1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的SH-SY5Y细胞帕金森病(PD)模型中可溶性抗药性相关钙结合蛋白(sorcin)表达的变化,寻求参与PD多巴胺能神经元细胞神经变性的蛋白质改变,为阐明PD的发病机制提供理论依据。方法:应用1.0mmol.L-1 MPP+处理未分化的SH-SY5Y细胞24h,在体外建立PD细胞模型,应用荧光染色双向差异凝胶电泳(2D-DIGE)、图像分析、基质-辅助激光解析/电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和生物信息学的方法,对该模型的差异表达蛋白质进行研究。结果:蛋白质组学分析在对照组和MPP+处理组之间发现22个差异表达蛋白质,其中1个蛋白质点被确切的鉴定为sorcin。sorcin的表达明显上调,荧光丰度比值为1.97倍。该蛋白的最小肽片段覆盖率、最大概率期望值、相对分子质量和等电点分别为25.7、0.006、21 940和5.3。结论:sorcin在功能上与钙离子稳态和凋亡有关,可能参与了MPP+在SH-SY5Y细胞诱导的毒性,并可能与PD的发病机制有关。

丙炔苯丙胺对帕金森病模型大鼠结肠自噬相关蛋白Beclin1及LC3表达的影响

目的观察丙炔苯丙胺对帕金森病(PD)模型大鼠肠功能障碍、自噬相关蛋白Beclin1及微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达的影响,探讨丙炔苯丙胺对PD肠功能障碍的治疗作用及可能机制。方法2013年1月-2017年10月唐山市开平医院与华北理工大学附属医院合作实验。选取健康SD大鼠72只按随机数字表法分为假手术组(n=24)、帕金森病模型组(模型组,n=24)、丙炔苯丙胺干预组(干预组,n=24),后2组采用颈背部皮下注射鱼藤酮制备PD模型,而后模型组大鼠每日生理盐水灌胃,干预组予丙炔苯丙胺0.5 mg/kg灌胃。分别于4 d、8 d各取大鼠12只采用免疫组化法和蛋白印迹法检测结肠Beclin1和LC3的表达水平,并测定1 h粪便排出量及含水率。结果与假手术组比较,模型组4 d、8 d结肠Beclin1、LC3阳性细胞及蛋白表达均增加,1 h粪便排出量及含水率均减少(4 d:t/P=-28.614/0.000、-28.472/0.000、-21.561/0.000、-92.225/0.000、86.986/0.000、26.175/0.000。8 d:t/P=-24.523/0.000、-15.922/0.000、-26.262/0.000、-72.051/0.000、16.288/0.000、23.270/0.000);与模型组比较,干预组4 d、8 d结肠Beclin1、LC3阳性细胞及蛋白表达均减少,1 h粪便排出量及含水率均增加(4 d:t/P=8.254/0.000、7.572/0.000、11.846/0.000、43.157/0.000、-12.137/0.000、-7.727/0.000。8 d:t/P=18.981/0.000、8.480/0.000、21.154/0.000、63.285/0.000、-21.597/0.000、-17.980/0.000);与干预4 d组比较,干预8 d组大鼠结肠Beclin1、LC3阳性细胞及蛋白表达均明显减少,1 h粪便排出量及含水率显著增加(t/P=47.432/0.000、46.778/0.000、18.048/0.000、5.801/0.002、-7.045/0.001、-4.183/0.009)。结论丙炔苯丙胺可改善PD大鼠肠功能障碍,其作用机制可能与其抑制结肠过度自噬有关。

温针灸对兔膝骨关节炎软骨中ASC、Caspase-1和P2X7蛋白表达的影响

目的 观察温针灸对膝骨关节炎(KOA)模型兔关节软骨组织中凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、嘌呤能离子通道型受体7(P2X7)表达的影响,研究温针灸治疗KOA的作用机制。方法 取40只雄性新西兰兔随机分为空白组、模型组、抑制剂组和温针灸组,每组10只。除空白组外,其余各组采用经典右后肢膝关节伸直位,用石膏管型固定4周制备兔KOA模型。造模成功后,各组给予相应干预措施。应用Lequesne MG评分量表评估兔膝关节状态改变与行为学改变,HE染色观察膝关节软骨病理形态学改变,免疫组织化学法和Western blot法检测软骨组织中ASC、Caspase-1、P2X7蛋白的表达,免疫荧光检测Caspase-1蛋白的表达。结果 造模前,各组实验兔Lequesne MG评分差异无统计学意义(P>0.05);造模后,与空白组相比,其余组Lequesne MG评分均上升(P<0.05);干预治疗后,与模型组比较,温针灸组和抑制剂组评分降低(P<0.05)。HE染色显示,空白组软骨表面结构完整,软骨细胞排列均匀;模型组软骨表面粗糙不平,软骨受损明显,软骨细胞形态大小不一,排列紊乱;抑制剂组和温针灸组软骨表面相对光滑、完整,软骨细胞分布较为均匀,软骨层结构相对清晰。与空白组比较,模型组Mankin’s评分升高(P<0.05);与模型组比较,温针灸组和抑制剂组Mankin’s评分降低(P<0.05)。免疫组织化学法、免疫荧光及Western blot检测结果显示,与空白组比较,模型组ASC、Caspase-1、P2X7的表达均升高(P<0.05);与模型组比较,温针灸组和抑制剂组ASC、Caspase-1、P2X7的表达均降低(P<0.05);温针灸组和抑制剂组相比,ASC、Caspase-1、P2X7表达差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 温针灸可减轻兔KOA软骨损伤,其机制可能与ASC、Caspase-1、P2X7表达降低及细胞焦亡抑制有关。

DJ-1的结构和功能及其在帕金森病发病机制中的作用

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是常见的神经系统退行性疾病,病理特征为黑质纹状体内多巴胺能神经元变性坏死。大多数帕金森病患者为散发病例,仅5%～10%的病例与遗传因素有关,DJ-1基因突变是常染色体隐性遗传早发型PD发病的常见原因。DJ-1可以作为分子伴侣、半胱氨酸蛋白酶、乙二醛酶及过氧化物酶相关蛋白等,与多种细胞功能的调节有关,包括氧化应激、细胞转化以及转录与翻译的调节等。DJ-1在脑内广泛表达于海马区、杏仁核、黑质及皮层区域,其突变所致的PD具有一定的临床与影像学特点。目前很多研究通过构建DJ-1基因敲除小鼠验证DJ-1在病生理过程中的作用机制,寻找各种形式的DJ-1作为PD生物标志物的研究为今后的特异性精准诊断与治疗提供了方向。

帕金森病患者ApoA-1、ET-1与认知功能的相关性分析

目的探讨帕金森病(PD)患者载脂蛋白A-1(ApoA-1)、内皮素-1(ET-1)与认知功能的相关性.方法选择2017年7月至2019年7月西安国际医学中心医院神经内科接诊的90例PD患者为本研究对象,设为观察组,另选择同期在本院体检的70例健康人群作为对照组,分析血清ApoA-1、ET-1水平变化情况,及其与PD综合评分量表(UPDRS)、简易智能状态量表(MMSE)、蒙特利尔认知评估(MoCA)之间的相关性分析.结果观察组患者血清ApoA-1、ET-1及UPDRS水平(2.35±0.44 g·L^(-1)、85.05±18.49 ng·L^(-1)、16.79±2.19分)显著高于对照组(1.45±0.24 g·L^(-1)、54.21±14.12 ng·L^(-1)、1.28±0.54分),MMSE、MoCA水平(19.19±2.15分、18.70±2.12分)显著低于对照组(26.83±2.31分、26.81±2.41分),差异显著(P<0.05);痴呆组患者ApoA-1、ET-1及UPDRS水平(3.02±0.52g·L^(-1)、94.66±17.73ng·L^(-1)、22.74±2.37分)显著高于认知正常(1.97±0.38g?L^(-1)、78.57±18.15ng·L^(-1)、13.21±2.21分)、轻度认知障碍患者(2.41±0.46g·L^(-1)、86.94±19.17ng·L^(-1)、17.54±2.09分),MMSE、MoCA水平(13.06±1.85分、14.02±1.65分)显著低于认知正常(22.27±2.19分、21.35±2.29分)、轻度认知障碍患者(19.01±2.25分、18.27±2.17分);轻度认知障碍患者ApoA-1、ET-1及UPDRS水平显著高于认知正常组患者,MMSE、MoCA水平显著低于认知正常组患者,差异显著(P<0.05);将UPDRS、MMSE、MoCA作为因变量,将血清ApoA-1、ET-1分别作为自变量,在相关性分析结果中显示,ApoA-1、ET-1和UPDRS之间均呈正相关(r=0.740、0.653,P<0.05),ApoA-1、ET-1和MMSE、MoCA之间均呈负相关(r=-0.593、-0.627、-0.667、-0.601,P<0.05).结论在PD患者中ApoA-1、ET-1与认知功能之间存在着密切关系,可为靶向药物治疗PD提供新思路.