带有血小板凝血酶敏感蛋白结构域的解聚素与金属蛋白酶4、5在骨关节炎中作用的研究进展

目的对带有血小板凝血酶敏感蛋白结构域的解聚素与金属蛋白酶4(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motif 4,ADAMTS-4)、5及其在骨关节炎中作用的研究进展作一综述。方法查阅近年国内外关于ADAMTS-4、5以及骨关节炎的相关文献,总结分析ADAMTS-4、5的分子结构、生物学特性、抑制剂及在骨关节炎中的作用。结果 ADAMTS-4、5通过降解聚集蛋白聚糖、软骨寡聚基质蛋白等进行性减少软骨细胞和细胞外基质成分,从而诱发骨关节炎。结论 ADAMTS-4、5在骨关节炎发生过程中起重要作用;深入研究ADAMTS-4、5的相关机制,可促进临床药物靶点的确立,更好地指导骨关节炎的预防和治疗。

iPSC-MSCs体外抑制ADAMTS保护骨关节炎患者软骨基质

目的研究诱导多能干细胞来源的间充质干细胞(iPSC-MSCs)体外对膝骨关节炎(KOA)患者软骨基质的保护作用及其部分机制。方法收集KOA患者关节置换手术切除的软骨组织,分别进行组织和细胞实验。软骨组织剪成小块,随机分为对照组、白介素-1β(IL-1β)诱导组和iPSC-MSCs组。除对照组外,各组软骨组织予以IL-1β(10 ng/ml)刺激96 h,再与不同数量iPSC-MSCs(1×10^(4),1×10^(5),1×10^(6))细胞共培养72 h后取出软骨组织进行石蜡包埋切片,免疫组化法检测组织中带有血小板凝血酶敏感蛋白结构域的解聚蛋白样金属蛋白酶家族(ADAMTS-4、ADAMTS-5)及Ⅱ型胶原(COL2)表达,ELISA法检测共培养上清中基质金属蛋白酶13(MMP13)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)水平,苏木精伊红(HE)染色检测离体软骨组织的病理改变。分离KOA患者软骨组织中软骨细胞,经IL-1β(10 ng/ml)刺激48 h后,将软骨细胞与不同数量iPSC-MSCs(1×10^(4),1×10^(5),1×10^(6))共培养72 h。免疫荧光和蛋白免疫印迹法检测软骨细胞中矮小相关转录因子2(RUNX2)、ADAMTS-4、ADAMTS-5的表达。结果与对照组比较,IL-1β可诱导软骨组织RUNX2、ADAMTS-4、ADAMTS-5水平升高、COL2水平降低,培养上清中MMP-13、IL-6水平升高(P<0.05),IL-10水平减少(P<0.05);与IL-1β诱导组比较,不同数量iPSC-MSCs共培养可降低上清中MMP-13、IL-6水平,降低RUNX2、ADAMTS-4、ADAMTS-5的表达,促进COL2表达,并升高IL-10水平。结论iPSC-MSCs体外可抑制ADAMTS-4、ADAMTS-5表达,减少软骨细胞外基质降解,起到关节软骨保护作用。