HPLC法测定中药常山散中常山乙素、常山甲素的系统适用性研究

【目的】为制订中药常山散的国家质量标准和指导临床科学用药,进行了高效液相色谱法测定常山乙素、常山甲素含量的系统适用性研究.【方法】选择3种不同类型的液相和色谱柱,包括安捷伦1290型液相色谱仪(配套SB-C_(18)色谱柱)、沃特斯2695型液相色谱仪(配套XTerra@MS C_(18)色谱柱)和岛津SPD-10A型液相色谱仪(配套Amethyst C_(18)-H色谱柱).流动相:乙腈-0.3%冰醋酸(30∶70),三乙胺调pH值至5.2～6.2,流速:1.0mL/min,检测波长:265nm,柱温:25℃,进样量:10μL.【结果】3种类型的高效液相检测结果表明,三批次常山散中常山乙素和常山甲素的含量基本一致,常山乙素和常山甲素峰型较好,与周围杂质分离度较好.【结论】以上色谱条件可用来检测常山散中常山乙素和常山甲素的含量,适用于中药常山散及其相关制剂的质量控制,具有操作简便、稳定性好、精密度高等优点.

鸡骨常山和普通常山中常山乙素含量比较

目的:比较鸡骨常山和普通常山中常山乙素的含量。方法:应用高效液相色谱法测定常山乙素含量。结果:鸡骨常山和普通常山中常山乙素的平均含量分别为0.36%和0.05%,普通常山仅为鸡骨常山的1/7。结论:本实验为常山药材的HPLC检测和常山碱的工业化生产提供了技术支持。

常山提取物和常山乙素对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

为了明确常山提取物和常山乙素的免疫学活性,应用MTT法测定2种药物体外对小鼠脾T、B淋巴细胞增殖的影响。结果显示,常山碱提取物质量浓度达到200mg/L时显著抑制了小鼠脾淋巴细胞的增殖(P<0.05);质量浓度在10mg/L时对ConA诱导T淋巴细胞增殖有显著的促进作用(P<0.05);质量浓度在10～200mg/L对LPS诱导B淋巴细胞增殖有一定的促进作用(P>0.05)。常山乙素质量浓度达到0.1mg/L时显著抑制了小鼠脾淋巴细胞的增殖(P<0.05);质量浓度在0.001～0.01mg/L时对ConA诱导T淋巴细胞增殖有一定的促进作用(P>0.05),质量浓度在0.000 1mg/L时具有显著的促进作用(P<0.05);质量浓度在0.000 1～0.005mg/L对LPS诱导B淋巴细胞增殖有一定的促进作用(P>0.05)。结果表明,常山提取物和常山乙素具有良好的免疫增强活性,为今后相关研究提供了免疫学参考。

回流法和超声法从中药常山中提取常山乙素的比较研究

目的比较回流法和超声法从中药常山中提取常山乙素的提取效果。方法采用高效液相色谱法测定常山乙素含量,以浸膏得率和常山乙素含量作为评价指标。结果回流法和超声提取法浸膏平均得率分别为10.11%和12.87%;浸膏中常山乙素平均含量分别为0.160%和0.181%。结论回流法和超声法提取工艺具有省时、操作简便和提取率高等优点,超声法相对更好一点。

中药常山高效液相色谱检测方法的建立

建立常山药材的HPLC指纹图谱测定方法,为建立常山药材的质量标准提供依据。方法:采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.03%H3PO4(20∶80);p H值:5.0~6.5;流速:1.0m L/min;检测波长:265 nm;柱温:25℃;进样量:10μL;采用以上条件进行线性关系考察、精密度试验、重复性试验、稳定性试验和加样回收率试验,并测定了3批样品中常山乙素的含量。结果:通过对常山药材HPLC指纹图谱结果进行分析,得出常山乙素标准品在0.5~50μg/m L范围内线性关系良好,相关系数为0.999 8,精密度试验、重复性试验和稳定性试验的RSD值均小于2.0%,符合《中国兽药典》的相关规定。结论:中药常山的高效液相色谱检测方法所得图谱清晰,特征直观,所建立的HPLC指纹图谱可作为评价常山药材质量的参考。

中药常山和黄柏中常山碱含量的比较研究

鉴别常山和伪品黄柏,应用高效液相色谱法进行常山碱含量测定。结果表明,3批常山和黄柏中常山甲素的平均含量分别为0.326%和0.004%,常山乙素的平均含量分别为0.243%和0.002%。提示黄柏中常山甲素和常山乙素的含量极低,不具备常山的药效活性,为常山药材鉴别和质量评价提供了参考。