常春藤皂苷B抗氧化活性研究

目的研究常春藤皂苷B对于自由基的抑制情况和对Vero细胞氧化作用的保护情况。方法采用电子自旋共振仪检测常春藤皂苷B对于羟基自由基、烷基自由基、DPPH自由基的清除作用;采用酶标仪检测常春藤皂苷B对过氧化氢诱导的Vero细胞的保护作用和活性氧生成率的影响。结果常春藤皂苷B清除烷基自由基活性半数抑制浓度IC50为0.123 mg·mL^(-1);羟基自由基活性半数抑制浓度IC50为0.204 mg·mL^(-1);DPPH自由基活性半数抑制浓度IC50为0.439 mg·mL^(-1)。常春藤皂苷B在浓度分别为25μg·mL^(-1)、50μg·mL^(-1)和100μg·mL^(-1)时,Vero细胞存活率分别为42.20%、52.29%和55.11%,其IC50值为(52.29±1.87)μg·mL^(-1)。结论常春藤皂苷B均有良好的抗氧化作用。

常春藤皂苷B对HGC-27胃癌细胞的抑制作用及基于生物信息学的机制探讨

目的:研究常春藤皂苷B对HGC-27胃癌细胞的抑制作用及机制。方法:通过噻唑蓝(MTT)比色法、苏木素-伊红(HE)染色、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色、平板克隆形成实验、划痕实验、流式细胞术测定细胞凋亡和细胞周期等,从不同角度研究了常春藤皂苷B对HGC-27胃癌细胞的抑制作用,进一步利用Pharm Mapper、UniProt、Swissdock、STRING和Metascape等在线平台,进行靶点筛选、基因注释、分子对接验证、蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络构建、基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,探讨其作用机制。结果:与空白组比较,常春藤皂苷B(15、30、60、120μmol·L^(-1))可显著降低HGC-27胃癌细胞存活率(P<0.01),呈浓度和时间依赖性,常春藤皂苷B低于120μmol·L^(-1)时对正常细胞GES^(-1)无增殖抑制作用;与空白组比较,常春藤皂苷B(30、60、120μmol·L^(-1))可诱导HGC-27胃癌细胞胞质空泡的形成和细胞核变形固缩,抑制其迁移能力(P<0.01),诱导HGC-27胃癌细胞凋亡和细胞周期阻滞(P<0.05,P<0.01);当常春藤皂苷B 10、20、30μmol·L^(-1)时,对HGC-27胃癌细胞独立生存能力和增殖能力有抑制作用(P<0.01)。其作用靶点可能与驱动蛋白样蛋白KIF11、3',5'-环磷酸鸟苷特异性磷酸二酯酶、胱天蛋白酶-3、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Chk1)、原癌基因酪氨酸蛋白激酶、表皮细胞生长因子受体和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)8等相关,机制可能与癌症通路中的MAPK信号通路和幽门螺旋杆菌感染的上皮细胞信号通路中的黏附连接、局部连接、癌症中的蛋白聚糖通路等相关。结论:常春藤皂苷B对HGC-27胃癌细胞具有抑制作用,可能是多靶点多通路协同作用的结果。

一测多评法同时测定常春藤口服液中4种皂苷

目的建立一测多评法同时测定常春藤口服液(常春藤)中4种成分的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Waters XTERRA RP-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相水-乙腈,梯度洗脱;柱温25℃;体积流量1.0 m L/min;检测波长205 nm。以常春藤皂苷C为内标,计算其他3种成分的相对校正因子,测定其含有量。结果常春藤皂苷C、常春藤皂苷D、常春藤皂苷B、α-常春藤皂苷分别在0.009 5~0.191 0、0.001 7~0.033 1、0.001 2~0.024 1、0.001 9~0.038 6 mg/m L范围内线性关系良好(r≥0.999 8),平均加样回收率(RSD)分别为98.97%(1.12%)、99.83%(1.37%)、98.47%(1.19%)、99.57%(1.82%)。一测多评法所得结果与外标法接近。结论该方法稳定可靠,可用于常春藤口服液的质量控制。

洋常春藤皂苷类化合物代谢累积规律研究

目的以洋常春藤Hedera helix 1年生扦插苗为材料,通过检测不同部位及1年生长周期内4种常春藤皂苷类化合物(α-常春藤皂苷、常春藤皂苷C、常春藤皂苷B和常春藤皂苷D)的量,分析洋常春藤皂苷类化合物代谢累积规律,以期为确定药用洋常春藤原料的合理采收时间提供理论依据。方法实验通过合理设计洋常春藤材料的采样方法,采用HPLC法测定常春藤皂苷类化合物量。结果洋常春藤不同部位皂苷类化合物量测定结果为老叶>新叶>茎>根,并且在一年的生长周期内,不同常春藤皂苷类化合物在不同采样部位中的动态累积规律均有所不同。结论洋常春藤叶片和茎均可作为高质量药用原料的采收部位,且叶片的最适宜采收时期为3月份开始的生长发育期,而茎的适宜采收时期则可以从3月份开始的生长发育期持续到低温休眠开始前的11月份。