干乳期奶牛隐性乳腺炎主要致病菌的分离、鉴定及2种抗菌药物的体外抗菌效果评价

[目的]对新疆维吾尔自治区奶牛隐性乳腺炎常见致病菌进行分离、鉴定,评价头孢洛宁和利福昔明对临床分离菌株的体外抗菌效果。[方法]采用兰州隐性乳腺炎诊断液对新疆维吾尔自治区昌吉回族自治州某奶牛养殖场的干乳期奶牛进行诊断;利用平板划线法及细菌16S rDNA序列分析法对采集的74份乳样进行细菌分离及种属鉴定;应用微量肉汤稀释法测定头孢洛宁和利福昔明对致病菌临床分离株的最低抑菌浓度(MIC)以及最低杀菌浓度(MBC)。[结果]从74份乳样中共分离、鉴定致病菌9种、103株,其中,金黄色葡萄球菌35株,占总菌株数量的33.98%;大肠杆菌24株,占总菌株数量的23.30%;产色葡萄球菌15株,占总菌株数量的14.56%;模仿葡萄球菌(10株)、表皮葡萄球菌(6株)、屎肠球菌(5株)、溶血性葡萄球菌(4株)、地衣芽孢杆菌(3株)和腐生葡萄球菌(1株)的数量分别占总菌株数量的9.70%、5.83%、4.85%、3.88%、2.91%、0.97%。体外抗菌试验结果显示,头孢洛宁对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、产色葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、屎肠球菌、模仿葡萄球菌和地衣芽孢杆菌的MIC分别为0.12、3.91、0.98、0.06、0.98、0.98、3.91、0.06、0.49μg/mL,MBC分别为0.24、7.81、1.95、0.12、1.95、1.95、7.81、0.24、1.95μg/mL;利福昔明对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、产色葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、屎肠球菌、模仿葡萄球菌和地衣芽孢杆菌的MIC分别为0.20、6.25、1.56、0.78、1.56、1.56、12.50、0.20、0.20μg/mL,MBC分别为0.78、12.50、3.13、1.56、3.13、3.13、12.50、0.78、1.56μg/mL。[结论]引起该养殖场干乳期奶牛隐性乳腺炎的主要致病菌为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、产色葡萄球菌;头孢洛宁和利福昔明对临床分离的致病菌株均有良好的抑菌效果。

硫酸头孢喹肟乳房注入剂治疗干乳期奶牛乳房炎的研究

为研究硫酸头孢喹肟乳房注入剂对干乳期奶牛乳房炎的预防与治疗效果,试验选择100头临近干乳期的奶牛,随机分成5组进行临床疗效观察,其中I、II、III组分别给予高、中、低剂量的硫酸头孢喹肟乳房注入剂（300、150、75 mg）治疗;IV组给予对照药物氨苄西林钠＋氯唑西林钠乳房注入剂4.5 g（氨苄西林0.25 g＋氯唑西林0.5 g）/支治疗;V组为空白对照组。间隔3周,各组随机选择10头奶牛以相同剂量追加一次用药。试验结果显示,高、中剂量硫酸头孢喹肟乳房注入剂治疗干乳期奶牛乳房炎的头、乳区清除率均为75%~100%,头、乳区新增感染率分别为0~16%、0~7%;1次用药和2次用药对治疗奶牛乳房炎效果无显著性差异（P〉0.05）。综合比较后认为,每个乳区单次注入1支（3 g∶150 mg）硫酸头孢喹肟乳房注入剂效果更好,能显著降低乳房内链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等的细菌感染率（P〈0.01）,并能有效预防和治疗干乳期奶牛乳房炎。

用表达人溶菌酶基因的重组质粒防治干乳期奶牛乳腺炎

将人溶菌酶(human lysozyme,hLYZ)cDNA插入由pcDNA3改造而成的pcDNAK表达载体,用获得的重组载体pcDNAKLYZ转染COS-1细胞,经免疫荧光试验证明能进行正确表达。将重组载体注射于哺乳母鼠,取其乳汁进行溶菌酶活性测定,结果显示,分泌在乳汁中的重组hLYZ高达139mg/L。根据乳汁体细胞检测结果,选择健康奶牛和乳腺炎阳性奶牛,分别在干奶时和产犊前2周2次注射重组质粒pcDNAKLYZ,注射途径为乳腺基部穿刺,注射剂量为300μg/乳区,于产犊后1个月采集奶样进行体细胞检测,结果显示,对前一泌乳期发生的奶牛乳腺炎的治愈率为91.5%,对下一泌乳期奶牛乳腺炎的预防有效率至少为96.97%。由此认为,构建的表达hLYZ基因的重组表达质粒,可以替代抗菌素类油乳剂用于干乳期乳腺炎的防治。

冀东地区干乳期奶牛日粮中微量元素盈缺分析

该试验应用原子吸收光谱法对冀东地区干乳期奶牛基础混合日粮中的铜、铁、锰、锌含量进行测定和盈缺分析,以便为干乳期奶牛日粮配制提供借鉴。试验结果表明,基础混合日粮中铁、铜、锰和锌含量分别为299.87,14.38,37.70和32.67mg/kg。其中,铁含量为NRC(2001)报道干乳期奶牛铁需要量的16倍,是其他文献报道需要量的3倍;铜含量达到干乳期奶牛需要量;锰、锌的含量达到NRC(2001)报道干乳期奶牛铁需要量,而低于文献推荐需要量。

硫酸头孢喹肟乳房注入剂防治奶牛干乳期乳房炎的效果研究

研究硫酸头孢喹肟乳房注入剂对干奶期奶牛乳房炎的防治效果,为该药在临床的应用提供参考。选择75头即将进入干奶期的奶牛,随机分为5组,分别为高、中、低剂量的硫酸头孢喹肟乳房注入剂3 g(300、150、75 mg)/支、对照药物氨苄西林钠-苄星氯唑西林钠乳房注入剂4.5 g(氨苄西林0.25 g+苄星氯唑西林0.5 g)/支治疗组及不给药组。测定头孢喹肟对3种奶牛乳房炎病原菌(大肠埃希菌、葡萄球菌和链球菌)的体外敏感性。受试药物的中、高剂量组和对照药物对进入干乳期奶牛乳房感染病原菌有较好的细菌学治愈作用,对整个干乳期过程中主要病原菌的新感染有较好的预防作用,可用于干乳期奶牛乳房炎的防治。每个感染乳区使用高剂量与中剂量头孢喹肟相比较,细菌学治愈率、新感染率和乳汁体细胞改善效果基本相当,无显著差异。体外敏感性试验结果显示,来自养殖场分离的大肠埃希菌、葡萄球菌和链球菌对头孢喹肟较敏感。结果表明,硫酸头孢喹肟乳房注入剂按1支(3 g∶150 mg)/(乳区·次)干乳前用药1次,可有效预防和治疗由大埃希杆菌、葡萄球菌和链球菌引起的奶牛乳房炎。

盐酸头孢噻呋乳房注入剂治疗奶牛干乳期乳房炎的临床疗效观察

本试验进行了盐酸头孢噻呋乳房注入剂(干乳期)治疗奶牛干乳期乳房炎的临床疗效观察。试验选择75头即将进入干乳期且体细胞数在40万~80万个/mL的奶牛,分为5组进行临床疗效观察。结果显示,按照临床推荐剂量每个乳区注入1支(含500mg头孢噻呋)盐酸头孢噻呋乳房注入剂,对由乳房内链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等细菌引起的奶牛乳房炎具有良好的治疗作用。

头孢洛宁乳房注入剂对奶牛干乳期乳房炎的防治效果

选择山东省潍坊市某奶牛场临近干乳期的80头奶牛,选取受试药物头孢洛宁乳房注入剂(干乳期)和对照药物利福昔明乳房注入剂(干乳期)进行奶牛干乳期乳房炎预防与治疗的研究。试验奶牛乳区感染率为37.50%(120/320),优势病原菌为金黄色葡萄球菌和链球菌(无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌),以单纯感染为主。Ⅰ(高剂量)、Ⅱ(中剂量)、Ⅲ(低剂量)试验组和对照组乳区细菌学治愈率分别为89.74%、87.23%、73.53%和85.29%,相互间差异不显著(P>0.05)。试验组和对照组新感染乳区数分别只有1、2、4、2个。综合判定,每个乳区注入250 mg头孢洛宁乳房注入剂(干乳期)能够较好防治干乳期乳房炎。

奶牛干乳期营养水平及饲养管理技术的研究

奶牛完成一个泌乳期,到分娩前两个月应停止泌乳,称干乳期。加强这一时期奶牛营养水平及饲养管理技术的研究,对提高奶牛一生的产乳量具有十分重要的意义。有数据表明,无干乳期连续挤奶的牛比有干乳期的牛,在同样的饲养条件下,第二胎产奶量下降25%,第三胎则下降38%;且随胎次的增加,不干奶的牛产奶量下降的幅度更大。