基于网络药理学和分子对接探讨干姜附子汤治疗慢性肾功能衰竭的作用机制

目的:运用网络药理学方法探讨干姜附子汤治疗慢性肾功能衰竭的作用机制,旨在为其临床应用及基础研究提供依据。方法:通过HERB数据库和中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)查找干姜附子汤药物的主要活性成分,使用SwissTargetPrediction平台进行靶点预测。检索GeneCards、DisGeNET及OMIM数据库,获取慢性肾功能衰竭的疾病靶点,并获取交集靶点。使用STRING 11.0平台构建蛋白质-蛋白质相互作用关系,使用CytoScape 3.9.1软件构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,筛选核心靶点。通过Metascape数据库进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。运用AutoDock软件将干姜附子汤主要活性成分与慢性肾功能衰竭核心靶点进行分子对接。结果:共获得干姜附子汤有效成分84种,1 810个慢性肾功能衰竭相关基因。根据度值可知主要有效成分为8-甲氧基黄酮、水黄皮素、厚朴酚、脱氢皮质酮等;度值居前6位的靶点为SRC原癌基因(SRC Proto-Oncogene,SRC)、信号转导因子和转录激活因子3(Signal Transducer and Activator of Transcription 3,STAT3)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(Akt Serine/Threonine Kinase 1,AKT1)、表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)、白细胞介素(Interleukin,IL)-6和肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)。GO富集分析得到1 106个结果,其中包括生物过程854个条目、细胞组分89个条目、分子功能163个条目;KEGG富集分析得到170条通路。分子对接结果证实,有效活性成分均能与核心靶点较好结合。结论:干姜附子汤干预慢性肾功能衰竭可能与SRC、STAT3、AKT1、EGFR、IL-6、TNF等靶点有关,推测磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(Phosphatidylinositol 3 Kinase-Akt,PI3K-Akt)、脂质和粥样硬化、钙离子、脂肪细胞因子及过氧化物酶体增殖物激活受体(Peroxisome Proliferator Activated Receptor,PPAR)等信号通路为干姜附子汤抗肾纤维化的潜在通路,为进一步开展干姜附子汤干预慢性肾功能衰竭作用机制研究提供了新思路、新方法。

干姜附子肉桂汤诱导口腔溃疡的机制研究

[目的]通过研究干姜附子肉桂汤诱导的大鼠口腔溃疡的机制,探讨热性药诱发上火的病理生理机制。[方法]将20只健康SD大鼠随机分为两组,分别为对照组和模型组,每组10只,其中对照组用0.9%氯化钠溶液0.1mL/(10g·d)灌胃,模型组用干姜附子肉桂水煎剂0.1mL/(10g·d)灌胃,均为1次/d,连续给药21d后,腹腔主动脉取血行血常规检测,取两组大鼠的口腔黏膜组织,以HE染色检测口腔组织病理变化,免疫组化检测IgG和IgA表达差异,基因芯片技术检测相关基因表达的差异。[结果]血常规结果显示模型组大鼠的白细胞(white blood cell,WBC)总数、中性粒细胞(neutrophil,NEUT)、单核细胞(mononuclear cells,MONO)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophils-lymphocyte ratio,NLR)均升高,对照组无明显变化;HE染色结果显示与对照组比较,模型组大鼠口腔黏膜组织出现表皮脱落、炎性浸润,表明模型组的口腔黏膜损伤,造模成功;免疫组化显示模型组的口腔黏膜组织的IgG和IgA表达升高,提示口腔黏膜组织炎性反应增强。基因芯片结果显示,对照组与模型组相比,差异表达两倍以上的基因有463个,其中上调表达基因299个,参与主要通路有脂肪的消化与吸收、类固醇的生物合成,涉及的主要基因为二酯酰甘油酰基转移酶2(acyl CoA:diacylgycerol acyltransferase 2,DGAT2)、鞘磷脂沉积病C1样蛋白1(Niemann-Pick C1-like 1,NPC1L1)、脂肪酸羟化酶结构域蛋白2(fatty acid hydroxylase domain-containing protein 2,FAXDC2)、类固醇脱氢酶样蛋白(NAD/NADP dependent steroid dehydrogenase like protein,NSDHL)等;下降表达基因164个,参与主要通路为细胞外基质(extracellular matrix,ECM)受体相互作用和黏着斑通路,涉及的主要基因有软骨素(chondroadherin,CHAD)、Ⅺ型胶原α2(collagen typeⅪalpha-2,COL11A2)、肿瘤坏死因子受体(tumor necrosis factor receptor,TNR)、促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)、干扰素alpha 2(interferon alpha 2,IFNA2)等。[结论]干姜附子肉桂汤会引起大鼠上火,并引发口腔溃疡,其机制与多种基因的表达水平改变有关,脂肪的消化与吸收、类固醇的生物合成、ECM受体相互作用和黏着斑通路等信号通路异常可能与其发生密切相关。

小议干姜附子汤

以干姜附子名方者市多见者于三书,《伤寒论》、《千金方》及《伤寒全生集》,然无论是从历史渊源还是以知名度而言,当首推仲景之干姜附子汤方,其方以干姜附子为名,以干姜附子为方,以干姜附子为用,方中姜附大辛大热、温阳散寒,全方无阴药相佐,纯阳无阴,药性峻猛迅急,与附子汤、四逆汤之辈同类而不同功,文章参考诸家著述,对比类方,力求理清其汤证之病机、方义,希望对是方之临床应用有一定的帮助。

干姜附子汤对窒息型大鼠心肺复苏后血流动力学的影响

目的:观察干姜附子汤对心脏骤停后心肺复苏大鼠血流动力学的影响,探讨干姜附子汤温通心阳的作用。方法:将SD大鼠随机分为3组:正常对照组、模型对照组、干姜附子汤组,每组8只,采用窒息法制作大鼠心脏骤停后心肺复苏动物模型。利用BL-420F生物信号机能实验系统记录造模前、复苏后5min、10min、20min、30min、40min、50min、60min、90min、120min各组大鼠心率(HR)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室内压最大上升速率和左心室内压最大下降速率(±LVdp/dtmax)血流动力学指标的变化。结果:干姜附子汤可明显加快心肺复苏后大鼠的心率(HR),提高左心室收缩压(LVSP)、左心室内压最大上升和下降速率(±LVdp/dtmax),并降低左心室舒张末期压(LV-EDP)。结论:干姜附子汤对窒息型大鼠心肺复苏后血流动力学的改善显著,这与其温通心阳的作用一致,并表明干姜附子汤对心脏骤停急救动物模型有一定的治疗作用。

干姜附子汤温通心阳作用的实验研究

目的:研究干姜附子汤温通心阳的作用。方法:采用有创血流动力学实验方法,制作心脏骤停后心肺复苏大鼠急救动物模型,观察干姜附子汤对大鼠血流动力学的改善状况。结果:经干姜附子汤治疗后,大鼠的心率明显加快,左心室收缩压、左心室内压最大上升和下降速率明显升高。结论:干姜附子汤可以明显改善心肺复苏后大鼠的心功能,与其具有温通心阳的作用相符。

干姜附子汤治疗尿毒症不安腿综合征验案1则

不安腿综合征是指在静息状态下出现难以名状的肢体不适感,而迫使肢体发生不自主运动。本病是终末期肾病患者在维持性血液透析治疗中常见的并发症。笔者采用干姜附子汤治疗尿毒症不安腿综合征,每获良效,现举验案1则介绍如下。

干姜附子汤的临床应用

干姜附子汤原方主治肾阳虚而烦躁。笔者采用寒热辨证法,以干姜附子汤合方治疗发热、泄泻、产后恶露不尽、胃痛等疾病,取得了较好的临床疗效。

干姜附子汤治疗不寐4则

不寐是临床常见病,治疗上多以安神、清痰热、补气血等法治疗。笔者通过4例门诊验案,认为不寐临床凡有"虚寒"表现者,可应用干姜附子汤为基础方,根据辨证随症加减治疗。

基于网络药理学探讨干姜附子汤抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制

目的基于网络药理学探讨干姜附子汤抗心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)的作用机制。方法通过TCMSP数据库筛选检索干姜、附子的主要成分,并通过TCMSP和CTD数据库筛选成分靶点,结合Disgenet数据库获取干姜附子汤抗MI/RI的作用靶点。应用STRING平台构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络模型,应用DAVID数据库进行GO富集分析和KEGG通路富集分析,进一步进行实验验证,以揭示干姜附子汤抗MI/RI的机制。结果筛选得到16个活性成分,171个靶点,治疗MI/RI靶点80个。GO功能富集分析得到GO条目158个,包括生物过程条目118个,细胞组成条目22个,分子功能条目18个。KEGG通路富集筛选得到102条信号通路,主要涉及PI3K-Akt、TNF、HIF-1、甲状腺激素、细胞凋亡等信号通路。流式细胞仪检测结果显示干姜附子汤可减少缺氧损伤的H9C2细胞凋亡率。试剂盒检测Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活力,发现干姜附子汤可显著提高Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性。结论干姜附子汤治疗MI/RI呈现多分子、多靶点、多通路的协同作用机制,且治疗机制与凋亡密切相关。

对干姜附子汤作用的认识

从《伤寒论》干姜附子汤条文及对方中的药物干姜、附子的认识入手,结合条文内容对前人的研究进行深入探讨。在质疑的基础上,对干姜附子汤证少阴心肾阳虚之病机及干姜附子汤温补少阴心肾的作用进行分析。干姜附子汤证病机为少阴心肾阳虚,作用为先机温补而解除虚阳上越之势,而温补的方法在于一方面直接温补少阴,另一方面通过温补中焦起到培土治水的作用。本方的作用特点是先机温补而解除虚阳上越之势,间接促使少阴君火恢复的效果。通过对方中药物之间的配伍关系进行探索,深化对经方以及对应条文的认识与理解,从而可以帮助指导临床应用。

干姜附子汤预防心动过缓的实验观察

目的探讨干姜附子汤预防心动过缓的作用。方法将家兔随机分为4组:正常对照组、模型对照组、干姜附子组和阿托品对照组,每组10只。然后用乙酰胆碱制备家兔心动过缓模型,并用BL-420F系统记录各组家兔的心率及心率减慢持续时间。结果干姜附子汤可明显加快乙酰胆碱诱发心动过缓家兔的心率,并显著缩短心率降低的持续时间。结论附子汤能够对抗药物诱发的心动过缓作用,这与其温通心阳的作用一致,并表明干姜附子汤对心动过缓动物模型有一定的治疗作用。

《伤寒论》干姜附子汤方证的临床意义

本文从理、法、方、药、剂、工、质、效八个方面论述《伤寒论》干姜附子汤方证的临床意义,分析整理出张仲景"重阳气"之学术体系,并指导临床实践。

干姜附子汤

一枚生附一两姜，日间烦躁夜安当， 脉微无表身无热，幸藉残阳未尽亡。

基于网络药理学和体外实验探讨附子-干姜抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制

运用网络药理学方法探讨附子-干姜(Aconiti Lateralis Radix Preparata-Zingiberis Rhizoma,AZ)抗心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MI/RI)的潜在机制。通过中药系统药理数据库TCMSP筛选AZ的活性成分;Disgenet数据库获得MI/RI靶点;STITCH数据库获得蛋白互作;用DAVID数据库获得GO功能富集与KEGG信号通路并利用Cytoscape 3.8.0进行绘图;细胞实验验证网络药理学预测的结果。结果共获得AZ活性成分16个、治疗靶点171个;作图分析发现AKT1、IL6、TNF为潜在靶点;GO富集分析发现AZ可能通过凋亡、炎症、血管舒张发挥治疗作用;KEGG分析发现AZ可能通过PI3K-AKT信号通路、TNF信号通路、HIF信号通路发挥治疗作用;体外研究发AZ可使缺氧复氧损伤的大鼠血管内皮细胞存活率提高、降低凋亡率、氧化损伤;提高HIF-α、VEGF、eNOS蛋白的表达。附子-干姜激活HIF/VEGF/eNOS信号通路,降低血管内皮细胞氧化损伤、凋亡率发挥抗心肌缺血再灌注损伤的作用。

干姜附子汤对大鼠缺血-再灌注心肌细胞损伤的实验研究

目的:观察干姜附子汤对大鼠心肌缺血-再灌注所致心肌细胞损伤的保护作用,探讨干姜附子汤温通心阳的作用机制,为该药的进一步研究开发与临床应用提供实验依据。方法:采用在体结扎大鼠左冠状动脉前降支30分钟,再灌注60分钟的方法制备心肌缺血再灌注模型。观察干姜附子汤对心电图ST段、心肌梗死百分率、血清肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)的含量及血清乳酸脱氢酶(LDH)活性等指标的影响。结果:干姜附子汤能有效对抗大鼠心肌缺血再灌注损伤导致的心电图ST段抬高,明显缩小心肌梗死百分率,降低血清中CK-MB、cTn-Ⅰ的含量及LDH的活性。结论:干姜附子汤对大鼠心肌缺血-再灌注引起的心肌细胞损伤有明显的保护作用。

试从《伤寒论》干姜附子汤方证谈中医药学的理法方药与剂工质效

依据《伤寒论》干姜附子汤方证,初步探讨了中医学的理、法、方、药与中药学的剂、工、质、效。认为干姜附子汤方证反映了中医时间医学的精华,提示了症状排除法的诊断方法,树立了应用小方的典范,引导了后世"火神派"的形成,指引着中药药剂学的研究思路,鞭策着中药的质量管理模式及疗效。认真学习干姜附子汤方证,对于继承仲景之学,探讨中医药学系统工程的关键问题,推动中医药学术与事业的发展,都有重要意义。

“干姜附子汤”非治阴寒危证之剂辨析

对干姜附子汤证,历来诸多医家认为其证候险恶,属阳气暴虚,阴寒内盛,故治当以干姜附子挽暴虚之阳气,祛内盛之阴邪。既如此,为何历代医家们在临证挽危救亡之时却更多青睐四逆汤、茯苓四逆汤、通脉四逆汤等方药,令人困惑。文章从仲景条文及病机等角度对干姜附子汤是否为治疗精气欲脱、阴寒危证之剂进行辨析,明确该方仅为治疗一般阳虚内寒之方,非治阴寒危证之剂。

附子干姜与辛伐他汀及其联用治疗马兜铃酸肾病研究

目的:观察附子干姜、辛伐他汀及联用对关木通所致马兜铃酸肾病模型的影响。方法:将雄性ICR小鼠随机分为5组:正常组(C)、模型组(M)、附子干姜组(FG)、辛伐他汀组(X)、附子干姜+辛伐他汀组(FGX);模型组及各治疗组小鼠灌胃给予关木通水煎剂(7g/kg·d),正常组小鼠灌胃给予等量水,给药4天后停药3天,持续4周;各治疗组自第3周起分别给予附子干姜(5g/kg·d)、辛伐他汀(10mg/kg·d)、附子干姜(5g/kg·d)+辛伐他汀(10mg/kg·d)。4周后取小鼠血清测定肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,取肾组织测定丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)浓度,并记录左肾、左睾丸系数。结果:与模型组比较,各治疗组均可降低血清肌酐、尿素氮、尿酸、谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平,且两者合用可增加附子干姜对肌酐、尿酸的排泄;与模型组比较,各给药组均能升高肾组织中γ-GT含量,且FG组与FGX能升高肾组织MDA水平,降低GSH水平。结论:附子干姜与辛伐他汀对马兜铃酸肾病均有保护作用,且两者联用可相互补充,提高治疗马兜铃酸肾病的效应。