干扰素β-1α与干扰素β-1b治疗复发缓解型多发性硬化的成本效果分析

目的探讨干扰素(IFN)β-1α与IFNβ-1b治疗复发缓解型多发性硬化(RRMS)的有效性及经济性。方法根据RRMS患者的残疾进展进程,利用扩展残疾状态量表评分(EDSS)评分,划分疾病进展过程中的不同状态。通过查阅文献获取各状态间的转移概率、各状态的健康效用值,应用药品价格估算各状态所花的费用。运用Markov模型分析法分析IFNβ-1α与IFNβ-1b治疗RRMS的成本效果。结果 IFNβ-1α组的累计成本及健康效果为169059.436$和7.913质量调整生命年(QALYs),成本效果比为21364.771$/QALY;IFNβ-1b组的累计成本及健康效果为212572.623$和7.912 QALYs,成本效果比为26867.116$/QALY。IFNβ-1α组的成本效果比低于IFNβ-1b组。结论 IFNβ-1α的成本效果比优于IFNβ-1b。因此选择IFNβ-1α作为延缓RRMS疾病进程的治疗药物,可获得更大的经济学效益。

重组人干扰素βSer^(17)的制备及其对SARS病毒的抑制作用

目的制备重组人干扰素-βSer17(rhIFN-βSer17),并检测其对SARS病毒的抑制作用。方法通过发酵收集菌体,经高压匀浆破碎收集包涵体、有机溶剂抽提、酸沉淀、柱层析纯化重组蛋白,通过细胞病变抑制法检测其对SARS病毒的抑制作用。结果研制的rhIFN-βSer17的纯度超过95%,比活性超过2.0×107IU/mg蛋白,在体外对SARS病毒具有明显的抑制作用。结论已成功制备rhIFN-βSer17,并在体外对SARS病毒具有抑制作用。

干扰素β-1b治疗复发缓解型多发性硬化的疗效

目的探讨干扰素(IFN)β-1b用于治疗中国东北地区复发缓解型多发性硬化(RRMS)患者的临床疗效。方法对21例确诊的RRMS患者给予皮下注射IFNβ-1b治疗并随访1年,观察患者扩展的残疾状况评分(EDSS)、头颅磁共振成像(MRI)T2加权像病灶及Gd-DTPA强化病灶数量、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分、EDSS评分与专用生活质量(MSQOL-54)量表评分相关性及使用IFNβ-1b前后的年复发次数,同时观察药物不良反应。结果 21例患者治疗1年前后神经功能障碍改善,EDSS评分比较差异显著(P<0.05);MS患者治疗前后EDSS评分与生活质量呈负相关(r=-0.808,0.755),生活质量有一定改善;头颅MRI新增的T2上及Gd强化病灶数较治疗前减少(P<0.05);应用IFNβ-1b 1年前后复发的次数,差异有统计学意义(P<0.005);治疗1年前后HAMD评分比较差异无统计学意义(P=0.171)。结论 IFNβ-1b对于RRMS有较好的疗效,延缓临床神经功能障碍程度,改善生活质量,降低复发,减少颅内新发病灶数目,未明显加重抑郁状态;副作用多为应用初期一过性且可耐受。

干扰素β1b对Th17细胞介导的复发-缓解型多发性硬化无效

目的探讨干扰素β1b(IFN-β1b)在复发-缓解型多发性硬化(RRMS)中的疗效与外周血中Th17细胞的关系。方法收集11例RRMS患者,给予6个月IFN-β-1b治疗。评估治疗前后扩展残疾状态评分(EDSS)及核磁共振(MRI)T2病灶数的变化。并通过流式细胞术检测治疗前患者外周血单个核细胞(PBMC)中Th17细胞的数量。结果 11例RRMS患者根据EDSS评分的变化分为治疗有效组和无效组。两组之间EDSS评分及MRI T2病灶数在治疗前无统计学差异(P>0.05),治疗后有效组EDSS评分和MRI T2病灶数较无效组明显减少(P<0.05)。治疗前PBMC中Th17细胞数量在无效组较有效组明显增加(P<0.05)。结论 IFN-β-1b治疗对Th17细胞介导的RRMS无明显疗效。

注射用重组人干扰素β1b的分离纯化及质量研究

目的:研制注射用重组人干扰素β1b(rhIFN-β1b)并对其质量进行鉴定。方法:采用高压匀浆破菌、离心分离包涵体、有机抽提、酸沉淀、SephacrylS-200、SephadexG-75等进行分离纯化,通过各种方法对终产品进行鉴定。结果:纯化的rhIFN-β1b比活性平均为2·59×107IU·mg-1,纯度超过99%,复性纯化后平均活性回收率为51·89%,其他各项技术指标均符合质量控制标准。结论:建立了大规模制备rhIFN-β1b的纯化工艺,研制出了符合规程要求的注射用rhIFN-β1b纯品,为临床研究奠定了基础。

应用噬菌体展示技术筛选干扰素β基因启动子DNA结合蛋白的基因

目的筛选干扰素β(IFN-β)启动子DNA结合蛋白的基因,探讨IFN-β基因调节的分子生物学机制。方法应用噬菌体展示技术,以IFN-β启动子DNA的聚合酶链反应(PCR)产物作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮“吸附-洗脱-扩增”的生物筛选过程,噬斑PCR扩增后,对所筛选克隆进行DNA序列测定和生物信息学分析。结果噬菌体经富集后,随机挑选52个克隆,序列测定后经过同源性搜索,确定与IFN-β启动子具有结合作用的肝细胞蛋白有6种,包括谷胱甘肽S-转移酶(GST),淀粉酶突变体蛋白,锌指蛋白等与细胞发育和代谢有关的蛋白。结论IFN-β启动子DNA与肝细胞中多种蛋白类型结合,为研究IFN-β基因在肝细胞中的表达调控奠定了基础。

干扰素β1a基因真核表达质粒的构建和表达

目的:构建干扰素β1a(IFN-β1a)的CHO表达体系,探讨人IFN-β1a在真核细胞中的表达效果。方法:采用全基因合成法获取重组人IFN-β1a基因,并通过点突变将IFN-β1a的17位半胱氨酸进行修饰,合成的基因经PCR扩增,连接入pSV2-dhfr质粒中,构建重组真核表达质粒pSV2-dhfr-IFN-β1a。将质粒转染至CHO-dhfr-细胞中,经MTX加压筛选,获得稳定生长的能够持续表达IFN-β1a的单克隆细胞株;提取细胞基因组DNA,进行PCR鉴定。收集细胞培养上清液,采用Wish细胞病变抑制法检测转染细胞中IFN-β1a的抗病毒活性。结果:重组真核表达质粒pSV2-dhfr-IFN-β1a经PCR及双酶切鉴定证明构建正确;以转染细胞基因组DNA为模板,可扩增出IFN-β1a基因;转染后重组细胞表达的IFN-β1a具有抗病毒活性,达到3×105 IU.mL-1。结论:IFN-β1a基因真核表达质粒构建成功,并在CHO细胞中成功表达了具有较高生物学活性的IFN-β1a蛋白。

重组人干扰素β-1a注射液对大鼠肝纤维化模型的治疗作用

目的研究重组人干扰素β-1a注射液及白蛋白注射液对肝纤维化大鼠的治疗作用。方法通过给大鼠灌服50%的四氯化碳花生油溶液1 mL/kg,每周2-3次,5周后开始使用受试药物（隔日注射1次）,同时继续同上灌服50%的四氯化碳花生油溶液。9周后取血、取肝脏,测定血清ALT、AST、TP、ALB、TBIL,测定肝组织羟脯氨酸含量,并对肝脏做病理组织学检查。结果干扰素β-1a、白蛋白注射液均能明显降低肝纤维化模型大鼠血清的ALT、AST、TBIL,能明显升高肝纤维化大鼠血清ALB、ALB/GLB,且能明显降低肝纤维化大鼠肝组织羟脯氨酸含量。结论干扰素β-1a、白蛋白注射液对肝纤维化模型大鼠的肝纤维化程度均有明显的抑制作用。

重组人干扰素βser17工程菌发酵培养条件的优化研究

实验对重组人干扰素βser17(rhIFNβser17)工程菌的发酵培养条件进行了研究,通过实验优化确定了适宜rhIFNβser17表达的培养基、诱导剂使用浓度、诱导时期和诱导后的收获时间等,建立了发酵培养工艺,并在50L发酵罐进行了中试发酵,菌体收获量湿重达13.08g/L,rhIFNβser17表达量占菌体总蛋白的20.2%,纯化后比活性达2×107IU/mg蛋白以上,为进一步的下游开发奠定了基础。

地高辛标记探针检测重组人干扰素β_(1b)中DNA残留量

为检测注射用重组人干扰素β1b半成品中外源性DNA残留量,以重组人干扰素β1b工程菌基因组DNA为模板,用地高辛标记探针,并以此探针进行点杂交。结果证明,该方法检测灵敏度较好,特异性较强,操作较安全简便,可用于重组人干扰素β1b制备过程中的质量监控及半成品的检定。

注射用重组人干扰素βser17的分离纯化及鉴定

重组人干扰素βser17(rhIFN βser17)工程菌经发酵培养后,采用高压匀浆破菌、离心分离包涵体、有机抽提、酸沉淀、SephacrylS -200、SephadexG -75等进行分离纯化,通过各种方法对终产品进行鉴定。结果显示,纯化的rhIFN- βser17比活性超过 2×107IU/mg,纯度超过 99%,其它各项质量指标均符合质量标准。通过研究建立了大规模制备rhIFN- βser17的纯化工艺,研制出了符合规程要求的注射用rhIFN -βser17纯品,为临床研究奠定了基础。

e抗原阳性慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞干扰素β的表达

目的探讨慢性乙型肝炎患者树突状细胞干扰素β(IFN-β)表达与乙型肝炎病毒(HBV)感染后宿主免疫清除障碍的关系。方法选择e抗原阳性慢性乙型肝炎患者52例,健康对照48例,用免疫磁珠细胞分选乙型肝炎e抗原(HBeAg)法从外周血获得纯化的CD14+单核细胞,并用hGM-CSF、hIL-4诱导单核细胞成为未成熟的髓样树突状细胞(mDC),加入polyI:C(25μg/ml)刺激后获得成熟的mDC,在刺激后0h、12h、24h、48h用流式细胞仪检测细胞表面分化抗原CD86、HLA-DR、CD1a,real-time PCR检测IFN-β的表达变化。用ELISA方法检测mDC细胞上清液中IFN-β、IL-12、IL-10的浓度变化。结果两组mDC上0hIFN-β mRNA表达水平及细胞上清液中IFN-β浓度差异无统计学意义(P>0.05)。健康对照组mDC在12hIFN-β mRNA表达水平及IFN-β浓度与0h相比显著升高(P<0.05),较患者组0h、12h、24h、48hIFN-β表达显著升高(P<0.05)。而患者组mDC刺激后12h、24h和48hIFN-β mRNA及IFN-β表达水平与0h相比无显著变化。与0h比较,健康对照组12h、24h、48hCD86表达水平较患者组显著上升(P<0.05)。两组之间CD1a、HLA-DR表达差异无统计学意义。二组IL-10及IL-120h表达水平差异无统计学意义(P>0.05),患者组IL-10表达24h及48h与0h相比明显上升(P<0.05),而对照组12h、24h、48hIL-10表达水平没有明显上升。与之相反,患者组12h、24h、48hIL-12表达与0h相比表达水平没有明显上升,对照组在12hIL-12表达水平与0h相比差异有统计学意义(P<0.05),24h、48hIL-12表达水平继续升高(P<0.05)。结论慢性HBV感染者mDC受polyI:C刺激后IFN-β表达异常,协同刺激因子CD86表达低下,可能造成宿主对HBV感染的免疫清除障碍,导致疾病慢性化。

干扰素β治疗复发-缓解型多发性硬化

干扰素 β已经成功用于治疗复发 缓解型多发性硬化。其免疫调节作用表现为减少复发 缓解型多发性硬化病人临床症状和在MRI水平观察到的复发率和病灶负荷 ,以及延缓功能障碍的进展。还可以延缓相关的继发性进展型多发性硬化病人功能障碍的进展 ,以及延缓临床孤立综合征发展成临床确诊的多发性硬化。虽然干扰素治疗过程中可出现一些轻微的不良反应 ,但大多数情况下无需减量或停药。中和抗体的出现可能影响疗效 ,但尚无证据表明抗体出现后就可能会完全失效。基于该疗法的安全性和可靠性 ,可以说干扰素

干扰素β-1α治疗多发性硬化临床观察与护理

目的探讨干扰素β-1α（Interferonβ-1α，IFNβ-1α）在治疗缓解复发型多发性硬化（relapsing remitting multiple sclerosis，RRMS）患者中的应用及护理要点。方法对我科2004年12月～2007年1月间19饲使用干扰素β-1α治疗RRMS患者临床资料进行回顾性分析。结果使用干扰素β-1α治疗后患者复发率由1．73±0．65降为0．53±0．92（P〈0．05）；扩展残疾状态量表（expanded disability status scale，EDSS）评分由2．40±2．22降为1．89±2.70（P〈0．05）；73．68％患者出现药物副反应，2例患者因不能耐受副反应停药。结论干扰素β-1α可降低RRMS多发性硬化年复发率，减少EDSS进展，大多数患者对IFNβ-1α可以耐受。加强临床用药观察，预防副作用的发生，是保证治疗的关键。

基因芯片技术筛选干扰素β刺激HepG2细胞后的差异表达基因

目的:应用基因芯片技术阐明重组干扰素β(IFN-β)作用HepG2细胞后,对HepG2细胞基因表达谱的影响。方法:以2×10~6U·L^(-1)浓度的重组IFN-β刺激对数生长期的HepC2细胞系,以生理盐水处理的 HepG2细胞为平行对照,制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA。应用基因表达谱芯片技术对差异表达的 mRNA进行检测和分析。结果:HepG2细胞经重组IFN-β刺激之后,有80条差异基因表达,其中38条基因表达增强,42餐基因表达降低。这些差异表达基因与细胞的增生,分化和细胞的信号转导密切相关。结论:应用基因表达谱芯片技术筛选到重组IFN-β作用HepC2细胞后差异表达基因,为进一步了解IFN-β治疗病毒性肝炎的作用机制提供新的依据。

干扰素β-1b对再发缓解型多发性硬化患者脑萎缩影响的MRI定量评估(英文)

背景:核磁共振成像的定量测量已被广泛用于评估多发性硬化症的治疗效果。目的:确定是否干扰素β-1b对多发性硬化脑萎缩的影响能通过MRI测量表达出来。设计:随机对照观察。单位:日本京都宇多野病院神经疾病研究中心。对象:选择1998-01/12在在日本京都宇多野病院神经疾病研究中心收治的188例多发性硬化患者,男55例,女133例,年龄16～59岁,平均(36±11)岁。纳入标准:①按poser再发缓解型诊断标准临床确诊为多发性硬化。②扩展残疾状况评分表得分≤7分。③在过去的1年中至少1次复发,或在就诊之前的2年间有至少2次复发,但就诊前30d无复发,神经系统体征稳定至少1个月,干扰素β-1b皮试阴性。④均对检测项目知情同意。纳入患者中,视神经脊髓型148例,经典型50例。方法:①药物治疗:所有患者给予干扰素β-1b注射剂,根据注射剂量不同将患者分为低剂量组(n=93)和高剂量组(n=95),分别给予160万U和800万U隔日干扰素β-1b注射剂皮下注射,共使用2年。②磁共振扫描检查:对所有患者包括病灶的部位(视神经、大脑、小脑、脑干和脊髓)进行磁共振扫描,T1和T2加权轴面磁共振检查由同一神经病学家评估,T2加权像病灶面积是逐层相加计算出总面积以mm2表示,检查指标为第三脑室、侧脑室宽度、脑宽度进行测量,结果采用萎缩率表示。③神经功能缺损检查:采用Kurtzke扩展残疾状况评分表(从0分到10分,0分为正常,分数越高病情越严重)评估。④相关因素分析:对148例典型多发性硬化患者脑萎缩情况和T2病灶面积和扩展残疾状况评分表得分变化两项因素进行相关性分析,同时对起始时变量(年龄,病程,复发率,T2病灶面积和扩展残疾状况评分表得分)和脑萎缩情况进行相关性分析。主要观察指标:①两组患者脑萎缩情况比较。②脑萎缩测量相关因素分析。结果:纳入198例患者全部进入结果分析。①两组患者脑萎缩情况比较结果:高剂量组经典型多发性硬化患者侧脑室宽度、三脑室宽度、脑宽度萎缩率分别是2.84%,3.15%和1.3%,明显低于低剂量组(4.09%,5.36%,1.97%,P<0.01)。高剂量组视神经脊髓型多发性硬化患者侧脑室宽度、三脑室宽度、脑宽度的萎缩率分别是0.9%,1.55%和0.6%,与低剂量组无明显差异(1.65%,1.75%,0.7%,P>0.05)。②经典型多发性硬化患者侧脑室宽度与T2病灶面积和EDSS得分均有明显相关性(r=0.33,0.27,P<0.01),三脑室宽度与T2病灶面积和EDSS得分有明显相关性(r=0.31,0.29,P<0.05),脑宽度与T2病灶面积和EDSS得分也有明显相关性(r=0.11,0.14,P<0.05),起始时EDSS得分和T2病灶面积变化与侧脑室宽度明显相关(r=0.23,0.33,P<0.05),其他起始时的参数未能显示出有意义的关系。结论:干扰素β-1b对脑萎缩的影响是有积极意义的,在高和低剂量组之间,有意义的差别被显示出来。脑萎缩测量提供了一个独立的关于干扰素β-1b治疗多发性硬化的肯定作用和剂量的影响。

干扰素β-1α治疗多发性硬化副作用的护理

目的观察干扰素β-1α治疗缓解复发型多发性硬化的副作用以及护理方法。方法对我科2004年12月至2007年6月间22例应用干扰素β-1α治疗缓解复发型多发性硬化患者的临床资料及护理方法进行回顾性分析。结果72.23%患者出现药物副反应,采取针对性护理减轻副作用的严重程度,2例患者因不能耐受副反应停药。结论加强用药观察和针对性护理,可以及时发现及减轻副作用的程度。

禽6型副粘病毒V蛋白对抗宿主细胞干扰素β的产生

[目的]研究禽6型副粘病毒V蛋白对抗宿主细胞干扰素β的产生的机制。[方法]构建真核表达禽6型副粘病毒P、V、W蛋白的重组载体,分别与IFN-β-Luc、NF-κB-Luc、PRDⅢ/I-Luc、AP-1-luc报告质粒共转染HEK-293T细胞,接种仙台病毒刺激细胞后,测定细胞内萤火虫荧光素酶及海肾荧光素酶活性。[结果]禽6型副粘病毒V蛋白能通过降低NF-κB的活性,进而显著抑制宿主细胞产生IFN-β。[结论]该研究初步阐明了禽6型副粘病毒V蛋白对抗宿主天然免疫的机制。

干扰素β对临床孤立综合征的疗效及安全性Meta分析

目的评价干扰素β与安慰剂对照治疗临床孤立综合征(CIS)的有效性及安全性。方法采用Cochrane系统评价的方法,检索Cochrane图书馆、Medline、EMbase、中国生物医学文献数据库及中文全文期刊数据库(CNKI)关于干扰素β与安慰剂对照治疗CIS随机对照试验,对满足质量评价标准的文献,使用Cochrane协作网提供的RevMan4.2.10统计软件进行Meta分析。结果纳入干扰素β与安慰剂对照治疗CIS的随机对照试验4项,共计患者1362例,根据随机分配、分配方案隐藏及盲法描述三项指标进行文献质量评分,A级1项,B级3项,Meta分析结果显示,干扰素β治疗使CIS转化为临床确诊的多发性硬化(CDMS)发生率的RR值为0.64,P<0.01。流感样症状发生的RR值为1.88,P<0.05;注射部位异常反应发生的RR值为5.28,P<0.01。发热发生的RR值为2.55,P<0.05;肌痛发生的RR值为1.87,P<0.05;白细胞减少发生的RR值为3.19,P<0.01;转氨酶升高发生的RR值为4.69,P<0.01;而抑郁发生的RR值为1.22,P=0.26;寒战发生的RR值为1.51,P=0.35,尚不能认为两组间差异有统计学意义。结论干扰素β治疗使CIS转化为CDMS的发生率降低;不良事件以干扰素β治疗组更为常见。

多发性硬化干扰素β治疗效果初步观察

目的初步探讨干扰素（IFN-β）用于中国早期多发性硬化（MS）的疗效。方法对6例MS患者采用IFN-β治疗，并随访4～27个月。根据扩展的功能缺损状况量表评分（EDSS）、磁共振（MRI）T2加权病灶演变及持续缓解的时间，综合评价IFN-β的治疗疗效。结果6例患者随访期EDSS评分明显改善，T2W病灶负荷明显缩小。无复发者。结论IFN-β用于中国MS患者能改善其神经功能障碍．并减少复发。