干扰素介导的跨膜蛋白1在卵巢上皮性癌中的表达

目的探讨卵巢上皮性癌中干扰素介导的跨膜蛋白1(IFITM1)基因的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学检测42例正常卵巢、51例卵巢良性肿瘤、48例卵巢交界性肿瘤和85例卵巢上皮性癌组织中IFITM1的阳性表达,同时分析IFITM1蛋白表达状况与上皮性卵巢癌各临床病理因素之间的关系。结果免疫组化显示IFITM1蛋白表达强度在正常卵巢、良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤、上皮性卵巢癌间有统计学意义(x^2=8.407,P=0.004)。正常卵巢组织中IFITM1阳性表达率为40.5%(17/42),卵巢良性肿瘤组织中70.5%(36/51),卵巢交界性肿瘤组织中为70.8%(34/48),卵巢上皮性癌中为77.6%(66/85),IFITM1的阳性表达率在4种卵巢组织中比较有统计学意义(x^2=18.491,P<0.001)。IFITM1在上皮性卵巢癌中的表达与FIGO分期、细胞分化程度和组织学类型性有关(x^2值分别为4.307、6.959、8.539,均P<0.05),早期卵巢癌(Ⅰ+Ⅱ)中IFITM1蛋白表达低于晚期卵巢癌(Ⅲ+Ⅳ)x^2=4.307,P=0.038),随着肿瘤细胞分化程度的降低,IFITM1表达率逐渐增高。IFITM1蛋白表达与淋巴转移、腹水无统计学相关性(x^2值分别为0.111、0.024,均P>0.05)。耐药性卵巢癌中IFITM1阳性表达显著高于敏感组(x^2=34.843,P<0.001)。结论 IFITM1表达在卵巢上皮性癌组织中明显高于正常卵巢、卵巢良性肿瘤和卵巢交界性肿瘤,提示IFITM1参与了卵巢癌的发生和进展,并对以铂类为基础的化疗耐药性产生有临床预测价值。

干扰素诱导的跨膜蛋白1在Peutz-Jeghers综合征的表达及意义

目的检测干扰素诱导的跨膜蛋白-1(IFITM1)mRNA及其蛋白在Peutz-Jeghers(P-J)息肉中的表达,探讨其在P-J息肉发生及恶变中的作用。方法采用反转录聚合酶链反应技术分别检测P-J息肉、正常肠黏膜组织、大肠腺瘤性息肉、大肠腺癌各16例组织中IFITM1 mRNA的表达;免疫组织化学方法检测P-J息肉、正常肠黏膜组织、大肠腺瘤性息肉、大肠腺癌各32例组织中IFITM1蛋白的表达和分布,并比较表达程度的差异。结果IFITM1 mRNA及其蛋白在上述组织中均有表达;IFITM1 mRNA在正常肠黏膜组织、P-J息肉、腺瘤性息肉及腺癌组织中的表达水平呈表达增高趋势,组间差异有统计学意义(F=92.704,P=0.000)。免疫组织化学检测IFITM1蛋白的阳性着色分布于胞膜和/或胞浆,IFITM1蛋白在正常肠黏膜组织、P-J息肉组织、腺瘤组织及腺癌组织中的阳性表达率和表达强度依次增高,经多组等级资料的秩和检验(Kruskal-WallisH),差异具有显著性(χ2=36.705,P=0.000)。结论IFITM1在正常肠黏膜组织、P-J息肉组织、腺瘤组织及腺癌组织中均有表达,且表达水平依次增高,提示IFITM1可能与P-J息肉的发生及恶变有关,且有可能成为P-J恶变风险的良好标志物。

干扰素诱导的跨膜蛋白-1对诊断结直肠癌的临床价值

目的探讨干扰素诱导的跨膜蛋白-1(IFITM1)基因在肿瘤组织中的表达,血清抗IFITM1的抗体反应以及对临床诊断结直肠癌的意义。方法应用半定量RT-PCR方法检测IFITM1基因mRNA在正常大肠粘膜、结直肠癌组织、大肠炎性息肉、腺瘤性息肉、胃癌、食管癌和肝癌组织中的表达。采用Western印迹法检测患者血清抗IFITM1的抗体反应。分析有IFITM1基因表达癌肿的病理特点。结果结直肠癌组织中IFITM1基因mRNA表达率为47.4%(18/38),显著高于大肠腺瘤性息肉的15%(3/20)和胃癌组织的4.8%(1/21)(P<0.05),而正常大肠粘膜、大肠炎性息肉、食管癌和肝癌组织均无表达。结直肠癌组织IFITM1基因mRNA呈强表达,其表达水平(0.8048±0.2273)显著高于大肠腺瘤性息肉(0.4447±0.0989)(P<0.001)。结直肠癌血清相应的抗体反应率为36.8%(14/38),明显高于胃癌的9.5%(2/21)(P<0.05),而在食管癌、肝癌、大肠炎性息肉和大肠腺瘤性息肉以及健康人血清则未检测出相应的抗体反应。有IFITM1基因表达的结直肠癌多数直径大于5cm,侵及浆膜,有淋巴结和远处转移,多属DukesC期和D期,以高分化腺癌为主。结论IFITM1基因可能在结直肠癌的发生、发展和转移过程中起重要作用,有望成为临床诊断结直肠癌的一个良好标志物。

干扰素诱导的跨膜蛋白-1基因的扩增、克隆及蛋白表达

目的研究干扰素诱导的跨膜蛋白-1(interferon-inducibletransmembraneprotein-1,IFITMP-1)基因的扩增、克隆及蛋白表达。方法以含IFITMP-1基因的cDNA为模板,用Pfu酶做PCR扩增,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,将目的基因克隆到pUCm-T质粒测序。进一步克隆到pET-Trx蛋白表达载体质粒,优化蛋白表达条件。结果含有IFITMP-1基因的PCR产物约1000bp。重组pUCm-T质粒经EcoRⅠ、HindⅢ双酶切,有相应大小的cDNA片段插入,测序结果显示其序列正确,证实目的基因的扩增、克隆成功,并成功克隆进pET-Trx蛋白表达载体,经IPTG诱导,在BL21(DE3)plysS中有融合蛋白表达。结论成功扩增克隆IFITMP-1基因,并成功表达该基因编码的蛋白,为进一步研究IFITMP-1基因在大肠癌中的作用奠定了基础。

干扰素诱导跨膜蛋白1对结肠癌SW480细胞株侵袭和转移能力的影响

目的研究干扰素诱导跨膜蛋白1(IFITM1)对结肠癌SW480细胞株侵袭和转移的影响。方法构建IF-ITM1/pEGFP-C3重组质粒并且转染大肠癌细胞株SW480,免疫荧光显微镜和激光共聚焦显微镜(LCSM)、RT-PCR和Westernblotting鉴定IFITM1/pEGFP-C3重组质粒。G418筛选稳定过表达IFITM1的SW480细胞株(IFITM1/SW480),细胞侵袭性实验、明胶酶法测定MMP-2和MMP-9活性,Western blotting检测MMP-9蛋白表达及IFITM1/SW480侵袭和转移能力。结果成功构建IFITM1/pEGFP-C3重组表达质粒,获得IFITM1/SW480细胞株;细胞侵袭实验显示SW480细胞、IFITM1/SW480细胞的细胞穿透数分别为(448.64±38.09)个和(540.45±44.61)个,差异有统计学意义(P<0.01);明胶酶法测定显示IFITM1/SW480细胞MMP-2、MMP-9活性较SW480和pEGPF/SW480细胞明显增强。Western blottin显示IFITM1/SW480细胞MMP-9表达水平明显高于SW480和pEGFP/SW480细胞株。结论 IFITM1可增加大肠癌SW480细胞株侵袭和转移的能力。

干扰素诱导跨膜蛋白1协同干扰素抑制结肠癌细胞增殖

目的：研究干扰素诱导跨膜蛋白1(interferon induced transmembrane protein 1,IFITM1)协同干扰素对结肠癌细胞株SW480增殖的影响。方法：将IFITM1基因亚克隆到真核表达载体pEGFP-C3,IFITM1/pEGFP-C3重组质粒转染结肠癌细胞株SW480,G418 500mg/L筛选阳性克隆细胞。激光共聚焦显微镜及RT-PCR检测IFITM1的表达。实验设pEGFP- C3/SW 480组、IFITM1/SW 480组、IFITM1/anti-IFITM1/SW 480、空白组,除空白组外,每组加入IFN_(-α) 1000 U/mL。MTT检测细胞的增殖性。结果：IFITM1/pEGFP-C3重组质粒转染SW480细胞后,激光共聚焦显微镜观察到绿色荧光融合蛋白位于细胞膜周围,RT-PCR在IFITM1/SW 480细胞中检测到IFITM1 mRNA表达,SW 480细胞及pEGFP-C3/SW480细胞中未见IFITM1 mRNA表达。MTT分析细胞增殖示pEGFP-C3/SW 480组、IFITM1/SW 480组、IFITM1/anti-IFITM1/SW 480组的D_(570mm)处值分别0.745±0.0267、0.346±0.0316、0.696±0.0613,空白组的D_(570mm)值是0.835±0.0362,IFITM1/SW 480细胞增殖比pEGFP-C3/SW 480细胞及IFITM1/anti-IFITM1/SW 480细胞低(P＜0.05)。而pEGFP-C3/SW 480细胞的增殖与IFITM1/anti-IFITM1/SW 480细胞增殖相比无显著差异(P＞0.05)。结论：IFITM1可协同IFN-α抑制SW 480细胞体外增殖。

干扰素诱导的跨膜蛋白1在结直肠癌中表达及其临床意义

目的探讨干扰素诱导的跨膜蛋白1(IFITM1)在结直肠癌中的表达及临床意义。方法收集144例具有完整临床病理资料的结直肠腺癌组织标本,运用组织芯片技术和免疫组化法检测IFITM1在结直肠癌及其对应癌旁组织中的表达,分析IFITM1表达与临床病理特征、总生存时间(OS)的关系,以及影响预后的因素。结果 IFITM1在结肠腺癌组织中的高、中、低表达率分别为7.7%、36.9%、55.4%,癌旁组织中分别为3.1%、27.7%、69.2%,差异有统计学意义(P=0.044);IFITM1在直肠腺癌组织中高、中、低表达率分别为1.3%、39.2%、59.5%,在癌旁组织中分别为5.1%、36.9%、58.2%,差异无统计学意义(P=0.569)。IFITM1表达水平和结直肠癌组织分化有关(P=0.031),与年龄、性别、淋巴结转移、远处转移及TNM分期等无关(P>0.05)。IFITM1高、中、低表达结直肠癌患者的中位OS分别为34.3个月、45.7个月和46.7个月(P=0.700);结肠癌患者的中位OS分别为38.2个月、48.0个月和43.5个月;直肠腺癌患者的中位OS分别为15.0个月、42.7个月和50.1个月(P=0.037)。单因素和多因素分析显示,IFITM1的表达水平不是影响结直肠癌预后的因素。结论结直肠癌组织中IFITM1表达与组织分化无关。

沉默结肠癌细胞中CO-029基因对干扰素诱导的跨膜蛋白1的影响及与结肠癌转移之间的关系

目的通过RNA干扰技术沉默结肠癌细胞株HT-29细胞中CO-029基因的表达,检测其对干扰素诱导的跨膜蛋白1(IFITM1)表达的影响,探讨它们和结肠癌转移之间的关系及作用机制。方法 HT-29细胞分为两组:NS组(未处理)和KD组(转染CO-029 siRNA)。通过荧光定量PCR和Western blot观察两组细胞IFITM1表达的变化。结果 CO-029基因沉默后,IFITM1 mRNA和IFITM1蛋白的相对表达量分别为1.00±0.08、1.05±0.11,明显高于NS组的0.51±0.02、0.41±0.02。结论 CO-029基因沉默后,IFITM1的表达明显升高,提示IFITM1和CO-029存在一定的关系,两者在结肠癌的发展中可能具有拮抗作用。

干扰素诱导跨膜蛋白1对猪源冠状病毒吸附宿主细胞的影响

为探索干扰素诱导跨膜蛋白1(interferon-inducible transmembrane protein 1,IFITM1)对猪源冠状病毒复制的影响,本研究选用猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)高致病毒株及其宿主细胞PK15作为研究对象。正常PK15细胞接种TGEV后,实时荧光定量PCR检测感染后不同时间点PK15细胞中一些干扰素刺激基因(interferon-stimulated genes,ISGs)的mRNA表达水平;利用慢病毒表达系统构建稳定表达和稳定干扰IFITM1表达的PK15细胞系。将一段靶向干扰猪源IFITM1的shRNA序列及猪源IFITM1全长,分别插入pLKO.1-EGFP-Puro载体及pLVML-Myc-MCS-IRES-Puro载体中,分别构建出pLKO.1-IFITM1shRNA-EGFP-Puro及pLVML-Myc-IFITM1-IRES-Puro重组质粒。将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞后获得带有目的基因的重组慢病毒,慢病毒侵染PK15细胞后用嘌呤霉素进行筛选,获得稳定表达及稳定干扰IFITM1表达的PK15细胞系,分别命名为PK15-IFITM1及PK15-IFITM1-/-,并分别用实时荧光定量PCR、间接免疫荧光试验(IFA)及Western blotting检测IFITM1干扰效率及表达情况;TGEV接种PK15-IFITM1-/-和PK15-IFITM1,实时荧光定量PCR测定细胞中TGEV的拷贝数。结果显示,PK15细胞接种TGEV后的48 h内,一些ISGs的mRNA水平均有所上升;PK15-IFITM1-/-细胞系的干扰效率为70%,PK15-IFITM1细胞系表达成功;在PK15-IFITM1-/-细胞系中,IFITM1的mRNA水平显著下调,促进了TGEV的复制。反之,在PK15-IFITM1细胞系中,TGEV的复制受到了抑制。但IFITM1的表达或缺失却不影响TGEV对PK15的吸附作用。总之,IFITM1对TGEV有显著的抗病毒作用,IFITM1不影响TGEV对PK15细胞的早期吸附,这为后续IFITM1抗冠状病毒机制的研究奠定了基础。

干扰素诱导的跨膜蛋白1在宫颈鳞癌中的表达及其生物学作用

目的:探讨干扰素诱导的跨膜蛋白1(IFITM1)在宫颈鳞癌中的表达及其生物学作用。方法:通过免疫组化、RT-PCR和Western blot检测宫颈鳞癌组织和癌旁组织中IFITM1的表达。使用靶向IFITM1的si RNA(si-IFITM1组)和高表达IFITM1基因的重组pcDNA3.1质粒(pcDNA3.1-si-IFITM1组)转染Si Ha细胞下调或上调IFITM1的表达。通过伤口愈合实验、Transwells迁移实验和基质胶侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力。细胞计数试剂盒-8 (CCK-8)检测细胞增殖;流式细胞术测定细胞凋亡。Western blot检测PTEN、PI3K和AKT的表达。通过对BALB/c Nude裸鼠接种Si Ha细胞来考察IFITM1在体外对肿瘤生长的影响。结果:癌组织中IFITM1的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05)。与对照组比较,si-IFITM1组的迁移和侵袭能力明显增强,而pcDNA3.1-si-IFITM1组明显降低(P<0.05)。细胞转染48 h和72 h后,与对照组比较,si-IFITM1组的细胞增殖明显增强,而pcDNA3.1-si-IFITM1组明显减弱(P<0.05)。与对照组比较,si-IFITM1组的细胞凋亡率明显降低,而pcDNA3.1-si-IFITM1组明显升高(P<0.05)。与对照组比较,si-IFITM1组的PTEN被下调,而PI3K和AKT被上调(P<0.05);pcDNA3.1-si-IFITM1组的PTEN的被上调,而PI3K和AKT被下调(P<0.05)。与对照组比较,si-IFITM1组裸鼠的肿瘤体积显著增大,而pcDNA3.1-si-IFITM1组显著减小(P<0.05)。结论:IFITM1过表达抑制人宫颈鳞癌细胞Si Ha的生长和转移能力,并在体外抑制肿瘤的形成,从而发挥抗癌作用。IFITM1可能通过调控PTEN/PI3K/AKT信号通路发挥抗癌作用。

干扰素诱导跨膜蛋白抗甲型流感病毒感染的作用及其机制

甲型流感病毒是呼吸道感染的重要病原体，曾多次引起世界大流行，严重威胁人类健康。2009年席卷全世界214个国家的新型甲型H1N1流感暴发，引起全球至少18449例患者死亡，高致病性甲型H5N1病毒自1997年被报道能够感染并致人死亡以来，

IFITM1克隆测序及生物信息学分析

目的研究干扰素诱导的跨膜蛋白-1基因（interferon induced transmembrane protein 1．IFITM1）克隆、测序，对序列进行分析，并获取生物学信息。方法以IFITM1的cDNA为模板，用Pfu酶做PCR扩增，在EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切后，将IF—ITM1的cDNA片段克隆到pUCm—T质粒，对重组的pUCm—T-IFITM1测序后，采用All GenBank＋EMBL＋DDBJ＋PDBSe—quences Database和Simple Modular Architecture Research Tool（SMART）对IFITM1的eDNA进行生物信息学分析。结果扩增后，含有IFITM1基因eDNA的PCR产物约1000bp，IFITM1的eDNA成功克隆到pUCm—T质粒并进行测序。序列分析结果显示，IFITM1结构cDNA全长683bp，有2个外显子。IFITM1的mRNA编码的氨基酸在37～57和87～107有2个跨膜区，编码125个氨基酸的多肽，其蛋白相对分子质量为14kDa。结论，IFITM1基因的成功扩增、克隆、测序，获取了IFITM1基因的eDNA、mRNA以及编码蛋白质氨基酸的生物学信息，有利于研究IFITM1基因与大肠癌的关系。

重组人干扰素α1b抗肠道病毒71型的作用机制研究

目的研究重组人干扰素α1b（IFN-α1b）体外对肠道病毒71型（EV71）复制的抑制作用，并初步探讨其抗病毒机制。方法测定IFN—α1b对RD细胞的毒性和IFN-α1b在EV71感染前后给药对EV71感染所致的RD细胞病变的抑制作用，检测IFN—α1b对EV71RNA和VP蛋白表达量以及病毒复制的影响，并通过构建瞬时表达干扰素诱导的跨膜蛋白3（M3）的RD细胞探索IFN—α1b通过促进IFFFM3的表达，抑制EV71侵入的作用机制。结果在EV71感染前12h和感染后1h给药，IFN-αlb抑制EV71细胞病变的IC50值分别为258．53IU／ml和2113．58IU／ml，选择指数SI分别为〉16497和〉3271，提示IFN—α1b具有明显的抗EV71活性，且在EV71感染前给药效果更明显。机制研究显示，与对照组相比，IFN—α1b可显著抑制EV71的RNA复制、蛋白合成和子代病毒释放，且可能通过对IFITM3的诱导表达阻止EV71侵入。结论IFN-αb具有抗EV71活性，可通过影响病毒生命周期的侵入、复制、装配和释放过程达到抗病毒作用。

不同民族妇女子宫颈癌组织中IFITM1蛋白表达

干扰素介导的跨膜蛋白1（interferon-induced transmembrane protein 1,IFITM1）是干扰素诱导跨膜蛋白家族的成员之一〔1-2〕。IFITM1是一个细胞生长和肿瘤生长的重要的负调控因子,是一个潜在的抑癌基因〔3〕,但目前尚不清楚该基因对子宫颈癌的影响。为了解IFITM1基因对子宫颈癌的作用,

稳定干扰IFITM1表达的细胞系建立及对PRV、PCV2、TGEV在细胞内复制的影响

为构建稳定干扰(IFITM1)基因表达的猪空肠上皮细胞系J2-KD(knockdown,KD),并研究干扰IFITM1表达后对伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)感染的影响。应用基因克隆技术,构建pLKO.1-EGFP-Puro-IFITM1重组载体,与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞,产生绿色荧光蛋白标记的表达IFITMshRNA的慢病毒,48 h后收集病毒上清。用收获的慢病毒感染猪小肠上皮细胞(J2细胞)后,经过嘌呤霉素筛选及细胞有限稀释法,通过RT-PCR鉴定后,获得稳定干扰IFITM1基因的细胞系,并由MTT法验证干扰IFITM1表达对J2细胞生长无影响,将成功构建的干扰IFITM1表达的J2稳定细胞系命名为J2-KD。分别用PCV2、PRV和TGEV感染J2-KD细胞,用实时荧光定量PCR方法检测病毒的复制情况。结果显示,成功建立了稳定干扰IFITM1表达的J2细胞系(J2-KD);在J2-KD细胞中PCV2和TGEV病毒复制拷贝数出现升高,而PRV出现降低的现象。表明,干扰IFITM1基因明显抑制PRV病毒复制,而促进TGEV和PCV2的复制,这为进一步研究猪源IFITM1蛋白功能及阐明其抗病毒分子机制奠定了基础。

ARD1、DDR2和IFITM1在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的探讨逮捕缺陷1蛋白(ARD1)、盘状结构域受体2(DDR2)、干扰素介导的跨膜蛋白1(IFITM1)在慢性鼻咽炎组织和鼻咽癌组织中的表达差异及其与患者临床预后的关系。方法选取2012年10月至2015年7月经病理组织活检确诊和存档的42例鼻咽癌组织和20例慢性鼻咽炎组织,采用实时荧光定量PCR法检测两组ARD1mRNA、DDR2 mRNA、IFITM1 mRNA表达水平;免疫组化法检测ARD1、DDR2、IFITM1蛋白表达水平;分析ARD1、DDR2、IFITM1蛋白表达与临床病理特征的关系;Kaplan-Meier法分析鼻咽癌组织中ARD1、DDR2、IFITM1表达与患者生存率的关系。结果与慢性鼻咽炎组织相比,鼻咽癌组ARD1 mRNA、DDR2 mRNA表达水平及蛋白阳性率均升高(P<0.05),IFITM1 mRNA表达水平及蛋白阳性率下降(P<0.05);ARD1、DDR2、IFITM1在有淋巴结转移、低分化、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期患者中阳性表达率高于无淋巴结转移、中高分化、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05);ARD1阴性表达者3年生存率(85.7%)高于阳性表达者(45.7%)(P<0.05),DDR2阴性表达者3年生存率(84.6%)高于阳性表达者(37.9%)(P<0.05),IFITM1阳性表达者3年生存率(81.8%)高于阴性表达者(41.9%)(P<0.05)。结论鼻咽癌组织中ARD1、DDR2高表达,IFITM1低表达,与患者临床病理特征及预后有关。

抗IFITM1单克隆抗体的制备及检测

目的:制备抗干扰素诱导的跨膜蛋白-1(interferon-induced transmembrane protein 1,IFITM1)的单克隆抗体,为检测IFITM1及进一步研究其在结肠肿瘤发生过程中的作用提供实验基础。方法:以结肠癌患者的癌组织为材料,提取总RNA,以RT-PCR扩增得到IFITM1 cDNA序列,经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后,克隆入pGEX-4T-3进行原核表达并纯化得IFITM1-GST;以该融合蛋白免疫BALB/c小鼠,淋巴细胞杂交瘤法制备单克隆抗体;采用ELISA、Western-blot及免疫组织化学法以制备的抗体检测结肠癌患者结肠癌组织中的IFITM1。结果:成功构建了IFITM1原核表达载体,获得了IFITM1-GST重组蛋白;制备得到了1株抗IFITM1单克隆抗体,腹水ELISA效价为1:30000,抗体亚类为IgG1,可用于ELISA、Western-blot及免疫组织化学法检测结肠癌患者结肠癌组织中的IFITM1。结论:获得了1株可用于ELISA、Western-blot及免疫组织化学法的抗IFITM1单克隆抗体2F-1,为进一步研究IFITM1在结肠肿瘤发生过程中的作用提供了实验基础。

IFIT 1和IFITM 3在子宫内膜异位症病灶中的表达研究

目的检测子宫内膜异位症(以下简称内异症)患者异位、在位内膜组织中干扰素诱导蛋白-1(interferon-induced protein with tetratricopetide repeats 1,IFIT 1)、干扰素诱导跨膜蛋白-3(interferon-induced transmembrane protein 3,IFITM 3)表达,并探究其对子宫内膜间质细胞的增殖作用。方法选取2018年3月至2019年10月于武汉市第一医院就诊并行腹腔镜或开腹手术治疗、术后经病理证实为内异症的患者86例为研究对象,选取其在位内膜及异位内膜组织分别为在位内膜组与异位内膜组;选取同期因子宫肌瘤或宫颈病变行子宫切除术、病理证实为正常子宫内膜的患者74例为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测组织中IFIT 1 mRNA、IFITM 3 mRNA表达水平,免疫组织化学法检测各组织中IFIT 1、IFITM 3蛋白表达,采用CCK-8法检测IFIT 1、IFITM 3在子宫内膜异位间质细胞分裂增殖中的作用;分析内异症患者在位内膜组织、异位内膜组织中IFIT 1 mRNA、IFITM 3 mRNA表达水平相关性。结果内异症异位内膜组中IFIT 1 mRNA、IFITM 3 mRNA表达水平及其蛋白阳性表达率高于内异症在位内膜组和对照组,内异症在位内膜组中IFIT 1 mRNA、IFITM 3 mRNA表达水平及其蛋白阳性表达率高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);内异症患者在位内膜组织、异位内膜组织中IFIT 1 mRNA、IFITM 3 mRNA表达水平均呈正相关(r=0.534、0.574,P<0.05);IFIT 1、IFITM 3可促进子宫内膜间质细胞的增殖和分裂,该作用随着IFIT 1、IFITM 3剂量的增加而增强;当IFIT 1、IFITM 3剂量增加到10μg/L时,其促进子宫内膜间质细胞的增殖和分裂作用是对照组的1.86和1.88倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论IFIT 1、IFITM 3在内异症异位内膜组织、在位内膜组织中表达明显高于正常子宫内膜组织,且对子宫内膜间质细胞的增殖和分裂有促进作用。

DDR2和IFITM1在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的探讨盘状结构域受体2(DDR2)、干扰素诱导跨膜蛋白1(IFITM1)在鼻咽癌患者中的表达及其临床意义。方法选取2014年11月至2015年11月本院收治的鼻咽癌患者65例,所有患者均实施鼻咽活检术,活检术后组织标本石蜡包埋,所有标本均经病理学证实。另选取同期65例病理证实为慢性炎症的鼻炎黏膜标本作为对照组。收集两组患者的临床病理资料,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测DDR2、IFITM1 mRNA表达水平,免疫组化检测鼻咽癌组织DDR2、IFITM1蛋白表达,Pearson法进行相关性分析,对所有患者进行3年随访,采用Kaplan-Meier法对患者进行3年生存期分析。结果qRT-PCR检测结果显示,鼻咽癌组织DDR2、IFITM1 mRNA相对表达水平均显著高于对照组(P<0.05);免疫组化检测结果显示DDR2、IFITM1在鼻咽癌组织中阳性表达率显著高于对照组(P<0.05);DDR2表达与TNM分期、分化程度、浸润深度有关(P<0.05),IFITM1表达与淋巴结转移、TNM分期、分化程度及浸润深度有关(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示DDR2与IFITM1呈正相关(r=0.608,P<0.01);Kaplan-Meier分析结果显示,DDR2阴性表达组3年无进展生存率(41.17%)、总生存率(52.94%)显著高于阳性表达组无进展生存率(16.67%)、总生存率(18.75%)(P<0.05),IFITM1阴性表达组无进展生存率(42.86%)、总生存率(61.90%)显著高于阳性表达组无进展生存率(18.18%)、总生存率(20.45%)(P<0.05)。结论DDR2、IFITM1在鼻咽癌组织中均异常高表达,其可能参与鼻咽癌的发生发展过程,且影响患者的预后。

IFITM1在胰腺癌中的表达及对胰腺癌细胞生物学行为的影响

背景与目的:干扰素诱导的跨膜蛋白1(IFITM1)是一种在淋巴细胞中转导同型黏附信号的膜复合物,在胰腺癌组织中表达量异常,但是其在胰腺癌中的作用机制则仍不清楚,因此,本研究初步探讨IFITM1的表达对胰腺癌细胞生物学行为的影响。方法:用Western blot法检测78例胰腺癌患者(32例转移,46例未转移)的癌组织和癌旁正常组织中IFITM1的表达。将胰腺癌PANC-1细胞转染IFITM1过表达质粒(IFITM1组)或转染IFITM1过表达质粒同时添加ERK_(1/2)通路抑制剂LY3214996(IFITM1+LY3214996组)后,以无处理的PANC-1细胞为对照组,分别用检测Western blot、CCK-8实验、流式细胞术、划痕愈合实验、Transwell实验检测IFITM1蛋白与ERK_(1/2)蛋白磷酸化水平(ERK_(1/2)/p-ERK_(1/2))、细胞增殖活力、凋亡以及迁移与侵袭能力的变化。结果:IFITM1蛋白相对表达量在胰腺癌组织中明显高于癌旁正常组织,在有转移的胰腺癌组织中明显高于无转移的胰腺癌组织(均P<0.05)。与对照组PANC-1细胞比较,IFITM1组PANC-1细胞的IFITM1蛋白表达水平、ERK_(1/2)/p-ERK_(1/2)水平明显升高,凋亡率明显降低,细胞增殖活力、迁移与侵袭能力均明显增强(均P<0.05);IFITM1+LY3214996组PANC-1细胞除IFITM1蛋白表达水平明显升高外(P<0.05),其余指标均无明显变化(均P>0.05)。结论:IFITM1在胰腺癌组织中表达上调,且与胰腺癌的恶性生物学行为密切相关,其作用机制可能是通过磷酸化激活ERK_(1/2)路调控胰腺癌细胞的生长、迁移和侵袭能力有关。