人血清白蛋白和干扰素α2b融合蛋白在毕赤酵母中表达及质量控制

筛选获得毕赤酵母工程菌GS115/pPIC9K/hsa-ifnα2b,胞外分泌表达rHSA-IFNα2b药物蛋白。经摇瓶及5 L发酵罐条件优化,确定最佳发酵条件。经50 L发酵罐工艺放大,发酵产量稳定,可达到350 mg/L。离心获得发酵上清液,超滤浓缩10倍,再依次通过Blue Sepharose 6FF亲和层析、Phenyl Sepharose 6FF疏水层析及Q Sepharose 6FF离子柱纯化。纯化产品进行SDS-PAGE纯度检测、SEC-HPLC检测、相对分子质量测定、N端测序、内毒素检测和生物活性检测。筛选获得一株高产菌,优化获得最佳的发酵条件。纯化产品检测(SEC-HPLC)纯度大于95%,相对分子质量为85 821,氨基酸的N端测序为DAHKSEVAHRFKDLG,与预期的相符。内毒素含量小于5EU/mg,符合国家药典的要求。体外生物细胞活性高达1.6×106IU/mg。具有良好的工业应用价值。

α干扰素治疗慢性乙型肝炎早期外周血T淋巴细胞亚群和血清肝纤维化指标的变化

目的 研究IFNα治疗慢性乙型肝炎患者早期阶段外周血T淋巴细胞亚群及血清肝脏纤维化指标的变化,判断这些指标早期预测IFNα疗效的价值。方法 2 0 0 0年～2 0 0 3年收治的5 6例慢性乙型肝炎患者接受IFNα1b治疗6个月,于治疗前及治疗3个月时分别检测外周血T淋巴细胞亚群及血清肝脏纤维化指标。结果 IFNα治疗应答组和无应答组治疗前的CD3 + 、CD4+ 、CD8+ 及CD4+ /CD8+ 比值并无显著性差异(P >0 .0 5 )。应答组治疗前血清丙氨酸氨基转移酶及透明质酸水平要高于无应答组(P <0 .0 5 )。IFNα治疗3个月后,应答组HA、CD3 + 、CD4+ 及CD4+ /CD8+ 比值均较治疗前有显著提高(P <0 .0 5 ) ,而无应答组无这种现象(P >0 .0 5 )。结论 IFNα治疗早期阶段CD4+ 、CD4+ /CD8+ 比值及血清HA显著升高可以作为预测IFNα持续应答的指标。

红色毛癣菌病患者血清IL-12及IFN-γ测定的实验研究

近年研究表明，天然免疫和细胞免疫在皮肤癣菌病发病机制中起主要作用。白介素（IL）-12及干扰素（IFN）-γ是联系天然免疫和细胞免疫的两个重要的细胞因子。因此，笔者测定了2006年11月至2007年7月就诊皮肤科门诊的60例红色毛癣菌病患者IL-12及IFN-γ的血清浓度，以探讨其在红色毛癣菌病发病中的可能作用。

基因多态性与慢性乙肝患者对α干扰素应答的相关性分析

乙型肝炎（hepatitis B）是由乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）引起的传播广、治愈难、危害性大的流行性肝病之一。每年都有约50万人死于HBV长期感染所导致的肝硬化和肝癌。α干扰素（interferon alpha,IFN-α）是治疗慢性乙型肝炎的一线用药,过往研究表明,乙肝患者对IFN-α治疗应答存在差异,乙肝病毒基因型、谷丙转氨酶（ALT）水平等都会影响IFN-α的治疗效果。

α—干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎疗效观察

目前国内、外治疗慢性乙型肝炎的方法、药物种类、剂量及疗程有较大的差异,报道的疗效亦各不相同。近年来我们用精制人白细胞a—干扰素(IFN)联合小牛胸腺肽治疗慢性乙型肝炎10例,结果报告如下。

干扰素概述及应用前景

干扰素是一类高活性、多功能细胞因子,由细胞基因控制并在特定诱导剂的作用下产生,是第一个用于肿瘤治疗的细胞因子。随着生物工程技术的不断进步,干扰素已经成为治疗肿瘤疾病不可或缺的药物之一,而干扰素副作用的日益凸显也成为其临床应用的障碍,但是由于干扰素的适应症范围广,其在疾病治疗方面起的作用仍然十分重要。综述了干扰素的生物学作用研究进展、适应症、毒副作用、临床应用前景。

聚乙二醇干扰素治疗慢性乙型肝炎（上）

目前，在慢性乙型肝炎患者中尚缺乏有效根除HBV的抗病毒药物。因此短期治疗目标是：持续地抑制HBV复制、减低肝炎活动度、获得HBeAg血清转换和改善肝纤维化。现今已经被批准用于治疗慢性乙型肝炎的5种药物是：常规干扰素α（IFNα）、拉米夫定、阿德福韦酯、聚乙二醇干扰素α-2a（PEGIFNα-2a）和最新的恩替卡韦。

乙型肝炎患者血清中肿瘤坏死因子α、γ干扰素及白细胞介素-12检测结果

实验应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测急性乙型肝炎(AHB)、慢性乙型肝炎(CHB)、非甲～非戊型肝炎(NA～NE)3部分人群血清中肿瘤坏死因子α(TNF α)、γ干扰素(IFN γ)及白细胞介素-12(IL-12)3种细胞因子水平.从细胞因子角度探讨非溶细胞性清除乙型肝炎病毒(HBV)的机制.

生物反应器培养分泌重组人干扰素β1a的CHO细胞工艺的建立

目的建立生物反应器培养分泌重组人干扰素β1a(IFNβ1a)的CHO细胞的工艺,探讨CHO细胞表达分泌IFNβ1a的反应动力学规律。方法应用15 L生物反应器悬浮微载体方式培养CHO工程细胞,比较不同时期细胞的生长形态、数量、生物活性、灌流量、葡萄糖消耗量及其他物理参数的变化规律。结果 15 L生物反应器中在初始pH 6.86～7.20,溶氧30%～70%,温度36.8～37.2℃,微载体4 g/L,罐流量6.5 L/h的条件下连续培养40 d,CHO工程细胞的密度维持在5×105个/ml之间,收获的细胞液中重组人IFNβ1a的生物活性为2.5×104～4.0×105IU/ml,葡萄糖消耗量在0.5～2.5 mg/ml之间。结论初步建立了15 L生物反应器培养分泌重组人IFNβ1a的CHO细胞的工艺,为进一步建立工业化生产工艺奠定了基础。

慢性乙型肝炎患者血清干扰素α水平的检测和临床意义

IFN是人体内的一种细胞因子，在健康人体内维持一定水平，具有抗病毒、免疫调节等多种功能。慢性乙型肝炎（慢乙肝）患者体内的IFN在疾病的发生发展过程中发挥重要作用，国内外普遍应用外源性IFN治疗慢乙肝。

HBsAg冲击致敏的自体DCs诱导的CIK细胞对慢性乙型肝炎的治疗作用

目的:探讨HBsAg冲击致敏的自体DCs及其诱导的HBsAg特异性CIK细胞对慢性乙型肝炎(CHB)的治疗作用.方法:研究对象分为HBsAg特异性CIK细胞治疗组(特异性CIK组,23例),拉米夫定组(LAM组,17例)和干扰素组(IFNα2b组,13例),所有病例均按标准诊断为慢性乙型肝炎(CHB),轻度.常规分离外周血单个核细胞,进一步培养诱导成为HBsAg冲击致敏的DCs及HBsAg特异性CIK细胞,分别经皮下和静脉回输.另选LAM和IFNα2b常规治疗作为对照.观察HBV标记物、肝功能的变化和毒副作用,治疗结束后随访.结果:自体HBsAg冲击致敏的DCs及其诱导的HBsAg特异性CIK(细胞可促进CHB患者HBeAg和HBVDNA阴转,HBeAg/HBeAb的血清转换,肝功能的恢复,疗效高于拉米夫定治疗组(P<0.05),与干扰素治疗组比,无显著差异(P>0.05).结论:HBsAg冲击致敏的DCs及其诱导的HBsAg特异性CIK细胞对CHB有治疗作用,有临床应用前景.

口蹄疫病毒蛋白对先天免疫的影响

口蹄疫病毒(FMDV)抑制宿主的翻译机制,阻断蛋白质分泌,并裂解与信号转导和先天免疫应答有关的细胞蛋白。FMDV是一种单链阳性RNA病毒,由衣壳和核酸组成,其基因组长度约为8500个碱基,该基因组被一个二十面体衣壳包裹,衣壳由VP1、VP2、VP3和VP4四种结构蛋白各60个拷贝组成(图1)。