干扰素诱导的跨膜蛋白-1对诊断结直肠癌的临床价值

目的探讨干扰素诱导的跨膜蛋白-1(IFITM1)基因在肿瘤组织中的表达,血清抗IFITM1的抗体反应以及对临床诊断结直肠癌的意义。方法应用半定量RT-PCR方法检测IFITM1基因mRNA在正常大肠粘膜、结直肠癌组织、大肠炎性息肉、腺瘤性息肉、胃癌、食管癌和肝癌组织中的表达。采用Western印迹法检测患者血清抗IFITM1的抗体反应。分析有IFITM1基因表达癌肿的病理特点。结果结直肠癌组织中IFITM1基因mRNA表达率为47.4%(18/38),显著高于大肠腺瘤性息肉的15%(3/20)和胃癌组织的4.8%(1/21)(P<0.05),而正常大肠粘膜、大肠炎性息肉、食管癌和肝癌组织均无表达。结直肠癌组织IFITM1基因mRNA呈强表达,其表达水平(0.8048±0.2273)显著高于大肠腺瘤性息肉(0.4447±0.0989)(P<0.001)。结直肠癌血清相应的抗体反应率为36.8%(14/38),明显高于胃癌的9.5%(2/21)(P<0.05),而在食管癌、肝癌、大肠炎性息肉和大肠腺瘤性息肉以及健康人血清则未检测出相应的抗体反应。有IFITM1基因表达的结直肠癌多数直径大于5cm,侵及浆膜,有淋巴结和远处转移,多属DukesC期和D期,以高分化腺癌为主。结论IFITM1基因可能在结直肠癌的发生、发展和转移过程中起重要作用,有望成为临床诊断结直肠癌的一个良好标志物。

干扰素诱导的跨膜蛋白1在Peutz-Jeghers综合征的表达及意义

目的检测干扰素诱导的跨膜蛋白-1(IFITM1)mRNA及其蛋白在Peutz-Jeghers(P-J)息肉中的表达,探讨其在P-J息肉发生及恶变中的作用。方法采用反转录聚合酶链反应技术分别检测P-J息肉、正常肠黏膜组织、大肠腺瘤性息肉、大肠腺癌各16例组织中IFITM1 mRNA的表达;免疫组织化学方法检测P-J息肉、正常肠黏膜组织、大肠腺瘤性息肉、大肠腺癌各32例组织中IFITM1蛋白的表达和分布,并比较表达程度的差异。结果IFITM1 mRNA及其蛋白在上述组织中均有表达;IFITM1 mRNA在正常肠黏膜组织、P-J息肉、腺瘤性息肉及腺癌组织中的表达水平呈表达增高趋势,组间差异有统计学意义(F=92.704,P=0.000)。免疫组织化学检测IFITM1蛋白的阳性着色分布于胞膜和/或胞浆,IFITM1蛋白在正常肠黏膜组织、P-J息肉组织、腺瘤组织及腺癌组织中的阳性表达率和表达强度依次增高,经多组等级资料的秩和检验(Kruskal-WallisH),差异具有显著性(χ2=36.705,P=0.000)。结论IFITM1在正常肠黏膜组织、P-J息肉组织、腺瘤组织及腺癌组织中均有表达,且表达水平依次增高,提示IFITM1可能与P-J息肉的发生及恶变有关,且有可能成为P-J恶变风险的良好标志物。

干扰素诱导的跨膜蛋白-1基因的扩增、克隆及蛋白表达

目的研究干扰素诱导的跨膜蛋白-1(interferon-inducibletransmembraneprotein-1,IFITMP-1)基因的扩增、克隆及蛋白表达。方法以含IFITMP-1基因的cDNA为模板,用Pfu酶做PCR扩增,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,将目的基因克隆到pUCm-T质粒测序。进一步克隆到pET-Trx蛋白表达载体质粒,优化蛋白表达条件。结果含有IFITMP-1基因的PCR产物约1000bp。重组pUCm-T质粒经EcoRⅠ、HindⅢ双酶切,有相应大小的cDNA片段插入,测序结果显示其序列正确,证实目的基因的扩增、克隆成功,并成功克隆进pET-Trx蛋白表达载体,经IPTG诱导,在BL21(DE3)plysS中有融合蛋白表达。结论成功扩增克隆IFITMP-1基因,并成功表达该基因编码的蛋白,为进一步研究IFITMP-1基因在大肠癌中的作用奠定了基础。

沉默结肠癌细胞中CO-029基因对干扰素诱导的跨膜蛋白1的影响及与结肠癌转移之间的关系

目的通过RNA干扰技术沉默结肠癌细胞株HT-29细胞中CO-029基因的表达,检测其对干扰素诱导的跨膜蛋白1(IFITM1)表达的影响,探讨它们和结肠癌转移之间的关系及作用机制。方法 HT-29细胞分为两组:NS组(未处理)和KD组(转染CO-029 siRNA)。通过荧光定量PCR和Western blot观察两组细胞IFITM1表达的变化。结果 CO-029基因沉默后,IFITM1 mRNA和IFITM1蛋白的相对表达量分别为1.00±0.08、1.05±0.11,明显高于NS组的0.51±0.02、0.41±0.02。结论 CO-029基因沉默后,IFITM1的表达明显升高,提示IFITM1和CO-029存在一定的关系,两者在结肠癌的发展中可能具有拮抗作用。

干扰素诱导跨膜蛋白1对结肠癌SW480细胞株侵袭和转移能力的影响

目的研究干扰素诱导跨膜蛋白1(IFITM1)对结肠癌SW480细胞株侵袭和转移的影响。方法构建IF-ITM1/pEGFP-C3重组质粒并且转染大肠癌细胞株SW480,免疫荧光显微镜和激光共聚焦显微镜(LCSM)、RT-PCR和Westernblotting鉴定IFITM1/pEGFP-C3重组质粒。G418筛选稳定过表达IFITM1的SW480细胞株(IFITM1/SW480),细胞侵袭性实验、明胶酶法测定MMP-2和MMP-9活性,Western blotting检测MMP-9蛋白表达及IFITM1/SW480侵袭和转移能力。结果成功构建IFITM1/pEGFP-C3重组表达质粒,获得IFITM1/SW480细胞株;细胞侵袭实验显示SW480细胞、IFITM1/SW480细胞的细胞穿透数分别为(448.64±38.09)个和(540.45±44.61)个,差异有统计学意义(P<0.01);明胶酶法测定显示IFITM1/SW480细胞MMP-2、MMP-9活性较SW480和pEGPF/SW480细胞明显增强。Western blottin显示IFITM1/SW480细胞MMP-9表达水平明显高于SW480和pEGFP/SW480细胞株。结论 IFITM1可增加大肠癌SW480细胞株侵袭和转移的能力。

干扰素诱导跨膜蛋白1协同干扰素抑制结肠癌细胞增殖

目的：研究干扰素诱导跨膜蛋白1(interferon induced transmembrane protein 1,IFITM1)协同干扰素对结肠癌细胞株SW480增殖的影响。方法：将IFITM1基因亚克隆到真核表达载体pEGFP-C3,IFITM1/pEGFP-C3重组质粒转染结肠癌细胞株SW480,G418 500mg/L筛选阳性克隆细胞。激光共聚焦显微镜及RT-PCR检测IFITM1的表达。实验设pEGFP- C3/SW 480组、IFITM1/SW 480组、IFITM1/anti-IFITM1/SW 480、空白组,除空白组外,每组加入IFN_(-α) 1000 U/mL。MTT检测细胞的增殖性。结果：IFITM1/pEGFP-C3重组质粒转染SW480细胞后,激光共聚焦显微镜观察到绿色荧光融合蛋白位于细胞膜周围,RT-PCR在IFITM1/SW 480细胞中检测到IFITM1 mRNA表达,SW 480细胞及pEGFP-C3/SW480细胞中未见IFITM1 mRNA表达。MTT分析细胞增殖示pEGFP-C3/SW 480组、IFITM1/SW 480组、IFITM1/anti-IFITM1/SW 480组的D_(570mm)处值分别0.745±0.0267、0.346±0.0316、0.696±0.0613,空白组的D_(570mm)值是0.835±0.0362,IFITM1/SW 480细胞增殖比pEGFP-C3/SW 480细胞及IFITM1/anti-IFITM1/SW 480细胞低(P＜0.05)。而pEGFP-C3/SW 480细胞的增殖与IFITM1/anti-IFITM1/SW 480细胞增殖相比无显著差异(P＞0.05)。结论：IFITM1可协同IFN-α抑制SW 480细胞体外增殖。

脓毒症并发急性肾损伤患者外周血单个核细胞中微小RNA-16-5p、干扰素诱导跨膜蛋白3表达及临床意义

目的检测脓毒症及脓毒症并发急性肾损伤(sepsis-associated acute kidney injury,S-AKI)患者外周血单个核细胞中微小RNA-16-5p(microRNA-16-5p,miR-16-5p)、干扰素诱导跨膜蛋白3(interferon-induced transmembrane protein,IFITM3)表达情况,分析两者对S-AKI患者的临床意义。方法本研究以2019年2月至2021年2月武汉市蔡甸区人民医院确诊的脓毒症患者为研究对象,共纳入106例,将合并急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的脓毒症患者作为AKI组(52例),未合并AKI的患者为非AKI组(54例)。收集所有患者的血液样本3 mL并分离单核细胞,利用实时荧光定量技术检测外周血单个核细胞中miR-16-5p、IFITM3 mRNA的表达水平,酶联免疫吸附法测定外周血中白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)水平,全自动生化分析仪检测外周血中胱抑素(cysteine,Cys)和尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平;比较两组间的临床指标及miR-16-5p、IFITM3 mRNA表达水平,Pearson法分析miR-16-5p、IFITM3 mRNA分别与BUN、Cys水平的相关性,以及miR-16-5p与IFITM3 mRNA表达水平的相关性,采用多元线性回归分析S-AKI患者miR-16-5p、IFITM3 mRNA表达水平的影响因素,受试者工作特性曲线(receiver operator characteristic curves,ROC)评估miR-16-5p和IFITM3 mRNA对脓毒症患者发生S-AKI的诊断价值。结果AKI组患者急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ)评分(15.67±4.39比13.31±3.56)、序贯器官衰竭评分(sequential organ failure assessment,SOFA)评分(5.62±1.28比4.89±1.41)、IL-1β[(22.03±5.78)mg/L比(10.44±3.05)mg/L]、Cys[(2.72±0.45)mg/L比(1.98±0.31)mg/L]和BUN[(7.93±2.24)μmol/L比(4.49±2.07)μmol/L]水平均高于非AKI组患者(P<0.05),AKI组患者的miR-16-5p(1.64±0.30比1.17±0.28)表达水平显著上调,IFITM3 mRNA(2.87±0.62比4.06±0.92)及蛋白(1.63±0.41比3.15±0.85)(r=0.560,P<0.05)水平呈正相关,IFITM3 mRNA表达水平与IL-1β(r=-0.754,P<0.05)、Cys(r=-0.554,P<0.05)、BUN(r=-0.695,P<0.05)水平呈负相关,miR-16-5p与IFITM3 mRNA的表达水平呈负相关(r=-0.496,P<0.05);多元线性回归分析结果显示,IL-1β升高、Cys升高是miR-16-5p、IFITM3 mRNA表达水平的影响因素(P<0.05);miR-16-5p、IFITM3 mRNA单一检测诊断脓毒症患者发生S-AKI的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.876(95%CI:0.809~0.944)、0.874(95%CI:0.811~0.938),miR-16-5p和IFITM3 mRNA联合检测的AUC为0.956(95%CI:0.929~0.992)。结论S-AKI患者中miR-16-5p表达上调,IFITM3表达下调,与S-AKI的病理过程密切相关,可能通过促进炎症反应加重肾损伤,有助于早期诊断S-AKI,为临床治疗S-AKI提供了有希望的靶点。

干扰素诱导的跨膜蛋白1在结直肠癌中表达及其临床意义

目的探讨干扰素诱导的跨膜蛋白1(IFITM1)在结直肠癌中的表达及临床意义。方法收集144例具有完整临床病理资料的结直肠腺癌组织标本,运用组织芯片技术和免疫组化法检测IFITM1在结直肠癌及其对应癌旁组织中的表达,分析IFITM1表达与临床病理特征、总生存时间(OS)的关系,以及影响预后的因素。结果 IFITM1在结肠腺癌组织中的高、中、低表达率分别为7.7%、36.9%、55.4%,癌旁组织中分别为3.1%、27.7%、69.2%,差异有统计学意义(P=0.044);IFITM1在直肠腺癌组织中高、中、低表达率分别为1.3%、39.2%、59.5%,在癌旁组织中分别为5.1%、36.9%、58.2%,差异无统计学意义(P=0.569)。IFITM1表达水平和结直肠癌组织分化有关(P=0.031),与年龄、性别、淋巴结转移、远处转移及TNM分期等无关(P>0.05)。IFITM1高、中、低表达结直肠癌患者的中位OS分别为34.3个月、45.7个月和46.7个月(P=0.700);结肠癌患者的中位OS分别为38.2个月、48.0个月和43.5个月;直肠腺癌患者的中位OS分别为15.0个月、42.7个月和50.1个月(P=0.037)。单因素和多因素分析显示,IFITM1的表达水平不是影响结直肠癌预后的因素。结论结直肠癌组织中IFITM1表达与组织分化无关。

百草枯中毒患者外周血对氧磷酯酶1、程序性死亡因子-1、γ干扰素诱导蛋白-10水平检测的意义

目的探讨百草枯中毒患者外周血对氧磷酯酶1(PON1)、程序性死亡因子-1(PD-1)、γ干扰素诱导蛋白-10(IP-10)水平对预后的价值。方法对2017年5月—2023年4月中国人民解放军联勤保障部队第九八〇医院120例百草枯中毒患者进行前瞻性研究,统计百草枯中毒患者30 d内死亡与生存情况,比较不同预后患者临床资料及外周血PON1、PD-1、IP-10水平。采用Pearson相关性分析探讨外周血PON1、PD-1、IP-10水平与中毒剂量、序贯器官衰竭估计(SOFA)评分、急性生理与慢性健康评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价外周血PON1、PD-1、IP-10水平预测百草枯中毒患者预后的价值。结果随访期间共35例患者死亡(29.17%)。死亡患者中毒剂量、SOFA评分、APACHEⅡ评分及外周血IP-10、PD-1水平均高于生存患者,外周血PON1水平低于生存患者,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,百草枯中毒患者外周血PON1水平与中毒剂量、APACHEⅡ评分及SOFA评分均呈负相关,PD-1、IP-10水平与中毒剂量、APACHEⅡ评分及SOFA评分均呈正相关(P<0.05);PON1、PD-1、IP-10预测百草枯中毒的曲线下面积(AUC)分别为0.738、0.774、0.770,三者联合预测的AUC为0.922,三者联合预测效能高于各指标单独预测。结论百草枯中毒患者外周血PON1、PD-1、IP-10联合检测对判断患者预后具有较高价值。

干扰素诱导跨膜蛋白1对猪源冠状病毒吸附宿主细胞的影响

为探索干扰素诱导跨膜蛋白1(interferon-inducible transmembrane protein 1,IFITM1)对猪源冠状病毒复制的影响,本研究选用猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)高致病毒株及其宿主细胞PK15作为研究对象。正常PK15细胞接种TGEV后,实时荧光定量PCR检测感染后不同时间点PK15细胞中一些干扰素刺激基因(interferon-stimulated genes,ISGs)的mRNA表达水平;利用慢病毒表达系统构建稳定表达和稳定干扰IFITM1表达的PK15细胞系。将一段靶向干扰猪源IFITM1的shRNA序列及猪源IFITM1全长,分别插入pLKO.1-EGFP-Puro载体及pLVML-Myc-MCS-IRES-Puro载体中,分别构建出pLKO.1-IFITM1shRNA-EGFP-Puro及pLVML-Myc-IFITM1-IRES-Puro重组质粒。将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞后获得带有目的基因的重组慢病毒,慢病毒侵染PK15细胞后用嘌呤霉素进行筛选,获得稳定表达及稳定干扰IFITM1表达的PK15细胞系,分别命名为PK15-IFITM1及PK15-IFITM1-/-,并分别用实时荧光定量PCR、间接免疫荧光试验(IFA)及Western blotting检测IFITM1干扰效率及表达情况;TGEV接种PK15-IFITM1-/-和PK15-IFITM1,实时荧光定量PCR测定细胞中TGEV的拷贝数。结果显示,PK15细胞接种TGEV后的48 h内,一些ISGs的mRNA水平均有所上升;PK15-IFITM1-/-细胞系的干扰效率为70%,PK15-IFITM1细胞系表达成功;在PK15-IFITM1-/-细胞系中,IFITM1的mRNA水平显著下调,促进了TGEV的复制。反之,在PK15-IFITM1细胞系中,TGEV的复制受到了抑制。但IFITM1的表达或缺失却不影响TGEV对PK15的吸附作用。总之,IFITM1对TGEV有显著的抗病毒作用,IFITM1不影响TGEV对PK15细胞的早期吸附,这为后续IFITM1抗冠状病毒机制的研究奠定了基础。

干扰素诱导跨膜蛋白3在结肠癌组织中的表达及对结肠癌细胞凋亡的调控作用研究

目的探讨干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM 3)在结肠癌组织中的表达及对结肠癌细胞凋亡的调控作用。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测结肠癌组织和对应的癌旁组织中IFITM 3的表达水平。细胞转染si-IFITM 3抑制IFITM 3的表达,同时转染si-control作为对照,MTT检测转染后48 h的细胞增殖情况。流式细胞术检测细胞凋亡情况。Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax、p-STAT3、STAT3蛋白表达水平。结果 IFITM 3在结肠癌组织中的表达水平高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。si-IFITM 3组结肠癌细胞HT29和HCT116的存活率与si-control组相比下降,差异有统计学意义(均P<0.05)。转染si-IFITM 3后的结肠癌细胞HT29和HCT116凋亡率高于si-control组,差异有统计学意义(均P<0.05)。转染si-IFITM 3后的结肠癌细胞HT29和HCT116中STAT3蛋白表达水平没有变化,p-STAT3、Bcl-2蛋白表达水平低于si-control组,Bax蛋白表达水平高于si-control组。结论干扰素诱导跨膜蛋白3在结肠癌组织中过度表达。抑制干扰素诱导跨膜蛋白3的表达,可以抑制结肠癌细胞的增殖,促进癌细胞凋亡,其作用机制与Bcl-2、Bax、STAT3有关。

沉默干扰素诱导跨膜蛋白3可抑制肝癌细胞HepG2增殖和侵袭

目的研究干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)在原发性肝癌中的异常表达,探讨沉默IFITM3表达对肝癌细胞系Hep G2生物学特征的影响。方法通过Western blot和免疫组织化学染色法检测60例肝癌组织及对应癌旁组织中IFITM3的表达情况及相关性;构建IFITM3小干扰RNA片段(IFITM3 si-RNA),采用脂质体介导转染肝癌细胞(Hep G2细胞系),同时设置无义序列组和空白对照组,实时荧光定量PCR检测转染后IFITM3 m RNA的表达;CCK8(cell counting kit 8)检测转染后细胞增殖能力;Western blot检测IFITM3在蛋白水平的表达;Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化。结果和癌旁组织相比,IFITM3在肝癌组织中的明显高表达。与无义序列组和空白对照组比较,IFITM3 si-RNA转染组细胞IFITM3表达和细胞增值率降低,穿膜细胞数也明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。划痕实验也表明迁移能力降低。结论 IFITM3在原发性肝癌中高表达;IFITM3在肝癌细胞增殖和侵袭过程中发挥重要作用,有望成为原发性肝癌基因治疗的侯选靶点。

拉米夫定联合α干扰素序贯处理增强干扰素诱导跨膜蛋白表达的研究

目的了解α干扰素(IFN-α)单独处理和拉米夫定联合IFN-α序贯处理对人肝胚瘤细胞株HepG2.2.15表达干扰素诱导跨膜蛋白(IFITM1、IFITM2、IFITM3)的影响,探讨拉米夫定与IFN-α序贯处理抗病毒机制。方法以0～1 000 kU·L-1IFN-α连续处理的HepG2.2.15细胞为α干扰素单独处理组,以20μmol·L-1拉米夫定联合0～1 000kU·L-1IFN-α处理的HepG2.2.15细胞为序贯处理组;分别用免疫印迹法和Southern blot法检测不同组别细胞内干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1、IFITM2、IFITM3的表达和细胞内HBV复制水平,再将表达抗病毒蛋白IFITM1的真核表达质粒pEGFP-IFITM1转染入HepG2.2.15细胞,以ELISA和荧光定量PCR法分别分析细胞外HBV抗原分泌和HBV-DNA水平。结果免疫印迹分析提示IFN-α单独处理和拉米夫定联合IFN-α序贯处理均能诱导HepG2.2.15细胞表达干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1、IFITM2、IFITM3,并且拉米夫定联合IFN-α序贯处理能够明显增强干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1的表达;Southern blot法分析表明IFN-α单独处理HepG2.2.15细胞不能有效抑制细胞内HBV复制,而拉米夫定联合IFN-α序贯处理能够完全抑制细胞内HBV复制。进一步研究发现,拉米夫定联合IFN-α序贯处理诱导的干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1具有一定抗HBV活性。结论在体外细胞模型中,IFN-α能够诱导HepG2.2.15细胞表达干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1、IFITM2、IFITM3;拉米夫定联合IFN-α序贯处理能够增强HepG2.2.15细胞表达干扰素诱导跨膜蛋白IFITM1,这可能是拉米夫定联合IFN-α序贯治疗慢性乙型肝炎重要机制之一。

干扰素诱导跨膜蛋白3、半乳糖凝集素-7和半乳糖凝集素-9表达与胸中段食管鳞癌改良Ivor-lewis术后淋巴结转移性复发的关系

目的探讨胸中段食管鳞癌(ESCC)干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)、半乳糖凝集素-7(Galectin-7)和Galectin-9表达及与改良Ivor-lewis术后淋巴结转移性复发的关系。方法改良Ivor-lewis手术治疗的胸中段食管癌病人91例,采用免疫组织化学法(IHC)检测肿瘤组织及癌旁正常组织中IFITM3、Galectin-7、Galectin-9表达情况,并分析其与术后淋巴结转移性复发的关系。结果 ESCC病灶组织中IFITM3、Galectin-7表达量高于癌旁组织,Galectin-9表达量低于癌旁组,差异有统计学意义(P<0.05);ESCC病灶组织中IFITM3、Galectin-7、Galectin-9阳性表达率分别为57.14%、65.93%和60.44%,癌旁组织分别为13.19%、5.49%和89.01%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。随着TNM分期的升高,IFITM3、Galectin-7的阳性表达率也明显升高(P<0.05)。术后3年内有37例(40.66%)淋巴结复发性转移,TNM分期、IFITM3和Galectin-7过表达、Galectin-9欠表达是淋巴结转移性复发的独立危险因素(P<0.05)。结论 IFITM3、Galectin-7过表达和Galectin-9欠表达参与了胸中段ESCC的发生及发展,且与改良Ivor-lewis术后淋巴结转移性复发密切相关。

干扰素诱导蛋白-10介导的Th1型炎症反应

IP-10是CXC类趋化因子之一,研究表明IP-10具有重要的生物学功能,参与多种疾病的发生,主要介导Th1型炎症反应。本文就IP-10的编码基因、表达、调控及其蛋白质结构、功能、受体,以及IP-10在Th1型炎症反应中的作用做一简要综述。

干扰素-γ诱导的单核因子、单核细胞趋化蛋白-1和转化生长因子-β1在变应性鼻炎的表达及其意义

目的探讨干扰素-γ诱导的单核因子(monokine induced by IFN-γ,Mig)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、转化生长因子-β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)在变应性鼻炎发病中的作用及变应性鼻炎患者Th1/Th2/Th3亚群的功能状态。方法抽取变应性鼻炎患者和健康对照者外周血,用ELISA法检测血清Mig、MCP-1及TGF-β1的含量。结果健康对照组血清Mig为(90.99±21.92)pg/ml,高于变应性鼻炎组的(-4.91±28.01)pg/ml及变应性鼻炎合并哮喘组的(-8.33±8.34)pg/ml(P=0.000)。变应性鼻炎患者血清MCP-1浓度为(81.16±1.40)pg/ml,明显高于健康对照组的(51.56±2.91)pg/ml(P=0.000);变应性鼻炎合并支气管哮喘患者血清MCP-1浓度为(103.31±11.32)pg/ml,较单纯变应性鼻炎患者高(P=0.003);MCP-1与速发相反应的相关典型症状,如鼻塞(r=0.380,P=0.001)、喷嚏(r=0.314,P=0.006)、流涕(r=0.417,P=0.000)、体征(r=0.455,P=0.000)呈正相关。变应性鼻炎及变应性鼻炎合并哮喘患者血清TGF-β1分别为(51.66±5.42)和(54.43±5.10)ng/ml,高于健康对照组的(44.17±7.33)ng/ml(P=0.000),TGF-β1与鼻塞(r=0.882,P=0.000)、流涕(r=0.288,P=0.013)、体征(r=0.559,P=0.000)呈正相关。健康对照组、变应性鼻炎组、变应性鼻炎合并哮喘组血清MCP-1及TGF-β1表达不存在因年龄、性别引起的统计学差异。结论变应性鼻炎和支气管哮喘存在Th2亚群强势,变应性鼻炎患者体内出现保护性(或调节性)Th3功能增强,不同年龄、性别不影响血清MCP-1及TGF-β1表达。

γ-干扰素诱导蛋白10及载脂蛋白A1、B在川崎病早期诊断中的意义

目的探讨γ-干扰素诱导蛋白10（IP-10）、载脂蛋白A1（APOA1）和载脂蛋白B（APOB）在川崎病（KD）早期诊断中的意义。方法使用酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测16例KD患儿（KD组）及15例发热非KD患儿（发热对照组）外周血IP-10和APOA1、APOB的浓度。结果 （1）KD组中发热1~3 d者IP-10浓度为（3 034±254）pg/m L,发热4~8 d者为（3 485±167）pg/m L,均高于发热对照组的（975±114）pg/m L（P〈0.05）;（2）两组APOA1差异无统计学意义;（3）KD组中发热1~3 d者APOB的浓度为（94.7±15.2）mg/d L,发热4~8 d者为（99.8±24.0）mg/d L,均显著高于发热对照组的（71.5±15.1）mg/d L（P〈0.05）。结论 IP-10及APOB的浓度在KD发热早期就有明显的上升,可作为KD早期诊断的重要指标。

干扰素诱导跨膜蛋白2在胃癌预后中的作用及临床意义

目的探讨干扰素诱导跨膜蛋白2(IFITM2)在胃癌预后中的作用及其临床意义。方法回顾性分析重庆三峡市中心医院普外科收治的经手术治疗的103例胃癌患者,分别运用Western blotting和RT-qPCR法检测胃癌组织和癌旁组织内IFITM2蛋白及mRNA的表达水平;利用ELISA法检测胃癌组织和癌旁组织中IFITM2的表达量,及其与患者性别、年龄、癌肿大小、TNM分期及分化程度的关系。通过Kaplan-Meier法分析患者术后5年的随访结果。结果 103例胃癌患者癌旁组织中IFITM2蛋白及mRNA的表达量明显低于癌旁组织。ELISA法检测得出胃癌组织及癌旁组织内IFITM2表达量平均值分别为(654.42±149.10) ng/L、(301.94±83.30) ng/L。癌肿体积越大及TNM分期越高的癌组织内IFITM2的表达量越高,但分化程度越高的癌组织内IFITM2表达量越低。IFITM2表达量越高,其5年生存率越低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IFITM2可能起着促进胃癌发生和发展作用,且其表达量与胃癌术后生存时间呈负相关。

干扰素-γ诱导的单核因子、单核细胞趋化蛋白-1、转化生长因子-β与变应性气道炎症的关系

变应性气道炎症的免疫失衡受多种免疫因子调节。Th1/Th2失平衡及 Th3细胞的免疫抑制作用是这方面的研究热点。本文主要阐述干扰素-γ诱导的单核因子、单核细胞趋化蛋白-1、转化生长因子-β在变应性气道炎症中的作用机制。了解调节性 T 细胞的免疫调节机制有助于开拓变应性气道炎症治疗的新方法。

猪干扰素诱导跨膜蛋白3的克隆表达及多克隆抗体制备

为原核表达猪干扰素诱导跨膜蛋白3(swine interferon-induced transmembrane protein 3,SwIFITM3)并制备其多克隆抗体(polyclonal antibody,pAb),从干扰素刺激的猪外周血淋巴细胞中克隆到SwIFITM3编码基因,然后采用大肠埃希氏菌表达系统表达并纯化目的蛋白免疫小鼠制备其pAb;并以制备的pAb为一抗用Western blot检测了猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAMs)中SwIFITM3表达情况。结果显示,获得了438 bp的SwIFITM3基因,将获得的目的基因插入pColdⅠ载体构建重组质粒转入E.coli BL21(DE3)感受态细胞,用0.2 mmol/L IPTG在16℃诱导24 h后获得了大小约19 ku可溶性表达的目的蛋白,以Anti-His单克隆抗体为一抗进行Western blot检测,获得了与预期大小一致的印迹条带;用纯化的目的蛋白腹腔注射免疫小鼠3次,采用间接ELISA方法检测,小鼠血清中SwIFITM3抗体效价最高达1∶1024000;以制备的pAb为一抗的Western blot检测显示PRRSV感染导致PAMs中SwIFITM3蛋白表达显著降低。试验结果为猪IFITM3的生物学功能及相关研究积累了材料。