沉默干扰素调控因子2降低胰腺癌细胞有氧糖酵解水平的实验研究

目的:研究干扰素调控因子2(interferon regulatory factor 2,IRF-2)对胰腺癌细胞有氧糖酵解水平的影响。方法:胰腺癌细胞感染含有IRF-2-shRNA的慢病毒及对照空载体病毒记为干扰组和阴性组,以不做处理的细胞作为对照组,用Realtime PCR和Western blot方法测定细胞中IRF-2水平,MTT方法测定胰腺癌细胞的增殖情况,Western blot方法测定细胞内糖酵解关键酶己糖激酶2(HK2)、丙酮酸激酶M2亚型(PKM2)蛋白、NF-κBp65(NF-κBp65亚型)、细胞核增殖抗原(Ki-67)表达水平,用试剂盒检测细胞乳酸生成及葡萄糖消耗水平,同时检测细胞中三磷酸腺苷(ATP)合成水平。结果:干扰组细胞中的IRF-2 mRNA和蛋白水平均明显低于对照组,而阴性组细胞中IRF-2 mRNA和蛋白水平与对照组比较没有明显差异。干扰组细胞的OD值明显降低,细胞中HK2、PKM2、NF-κBp65、Ki-67蛋白水平降低,同时细胞乳酸生成及葡萄糖消耗量均降低,细胞合成的ATP减少,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。阴性组细胞OD值、HK2蛋白水平、PKM2蛋白水平、Ki-67蛋白水平、NF-κBp65蛋白水平、乳酸生成、葡萄糖消耗量、ATP水平与对照组相比,差异均没有统计学意义(P> 0. 05)。结论:沉默IRF-2抑制胰腺癌细胞中糖酵解关键酶表达,降低细胞糖酵解水平,抑制胰腺癌细胞增殖。

IRF-2对胰腺癌细胞生物学特性及化疗敏感性的影响

目的探讨干扰素调控因子2(interferon regulatory factor 2,IRF-2)在胰腺癌细胞中的生物学特性及其对吉西他滨化疗敏感性的影响。方法 Western blot检测IRF-2基因在胰腺癌细胞株PANC-1及MIAPa Ca-2中的表达水平,采用MTT检测吉西他滨对PANC-1及MIAPa Ca-2的半数有效浓度(IC50),选择较为耐药的PANC-1细胞进行IRF-2基因干扰表达,并采用MTT检测吉西他滨对PANC-1及干扰IRF-2表达的PANC-1 si 1#的半数有效浓度(IC50)。结果PANC-1及MIAPa Ca-2中细胞中均存在IRF-2基因的表达,且PANC-1细胞中表达水平比MIAPa Ca-2高。吉西他滨对PANC-1细胞的IC50显著高于MIAPa Ca-2细胞,差异有统计学意义(P<0.05);干扰IRF-2表达的PANC-1 si 1#细胞其IC50值显著低于PANC-1对照细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IRF-2基因可作为影响胰腺癌对吉西他滨化疗敏感性的基因之一,干扰IRF-2基因能够有效地提升胰腺癌细胞对吉西他滨化疗的敏感性。