溃疡性结肠炎患者血清趋化因子配体19、干扰素调节因子4水平及临床意义

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者血清趋化因子配体19(CCL19)、干扰素调节因子4(IRF4)水平及临床意义。方法选择2020年6月至2022年5月在该院住院治疗的105例UC患者为UC组,另选取83例健康体检者为对照组。根据Mayo评分将UC患者分为缓解期组(n=35)和活动期组(n=70)。根据活动期病情严重程度,将活动期UC患者分为轻度组(n=19)、中度组(n=23)和重度组(n=28)。根据患者预后情况分为预后良好组和预后不良组。采用酶联免疫吸附试验检测血清CCL19、IRF4水平;采用Pearson相关分析血清CCL19、IRF4水平与Mayo评分的相关性;采用多因素Logistic回归分析影响UC患者预后的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CCL19、IRF4水平对UC患者预后不良的预测价值。结果UC组血清CCL19、IRF4水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。缓解期组血清CCL19、IRF4水平低于活动期组,差异均有统计学意义(P<0.05)。重度组血清CCL19、IRF4水平明显高于轻度组和中度组,且中度组明显高于轻度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。预后良好组CCL19、IRF4、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)水平明显低于预后不良组,差异有统计学意义(P<0.05)。相关分析结果显示,UC患者血清CCL19、IRF4水平均与Mayo评分呈正相关(r=0.426、0.471,P<0.05)。血清CCL19、IRF4水平升高是UC患者预后不良的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清CCL19、IRF4水平单独及联合预测UC患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.798、0.752、0.845。结论UC患者血清CCL19、IRF4水平均升高,且与患者病情和临床预后关系密切,可作为UC临床预后评估的潜在指标。

口腔种植体周围炎患者血清干扰素调节因子4、可溶性致癌抑制因子2检测的临床意义

目的探讨口腔种植体周围炎患者血清干扰素调节因子4(IRF4)、可溶性致癌抑制因子2(sST2)检测的临床意义。方法选取2021年1月—2022年12月沧州市人民医院口腔种植体周围炎患者30例(口腔种植体周围炎组)、同一类型种植体的健康口腔种植体者30例(健康口腔种植体组)和体检健康者30名(正常对照组)。检测所有研究对象血清IRF4、sST2水平。采用Pearson相关分析评估血清IRF4、sST2水平与年龄、探诊深度(PD)、龈沟液量、出血指数(SBI)的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清IRF4、sST2诊断口腔种植体周围炎的效能。结果口腔种植体周围炎组PD、龈沟液量、SBI均显著高于健康口腔种植体组和正常对照组(P<0.05)。正常对照组、健康口腔种植体组、口腔种植体周围炎组血清IRF4、sST2水平依次升高(P<0.001)。口腔种植体周围炎患者男性、女性之间血清IRF4、sST2水平差异均无统计学意义(P>0.05)。≥60岁的口腔种植体周围炎患者血清IRF4、sST2水平高于<60岁的患者(P<0.001)。血清IRF4、sST2与年龄、PD、龈沟液量、SBI均呈正相关(P<0.05)。血清IRF4、sST2单项检测和联合检测诊断口腔种植体周围炎的曲线下面积(AUC)分别为0.919、0.890、0.978。结论口腔种植体周围炎患者血清IRF4、sST2水平显著升高,与牙周指标密切相关,或可作为口腔种植体周围炎的诊断指标。

急性心力衰竭患者血清胰岛素样生长因子结合蛋白-7、沉默信息调节因子4表达水平及意义

目的 探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP-7)、沉默信息调节因子4(SIRT4)在急性心力衰竭(AHF)患者血清中的表达水平及其对预后的预测价值。方法 选取151例AHF患者(AHF组)和151例健康体检者(对照组)作为研究对象,检测并比较2组血清IGFBP-7、SIRT4、N-末端钠尿肽前体(NT-proBNP)和活性氧(ROS)水平。分析血清IGFBP-7、SIRT4、NT-proBNP、ROS水平与病情分级的关系;采用Pearson相关系数法分析IGFBP-7、SIRT4与NT-proBNP、ROS的相关性;采用多因素Logistic回归分析法分析AHF患者预后的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血清IGFBP-7、SIRT4对AHF患者预后不良的预测效能。结果 AHF组血清IGFBP-7、SIRT4、NT-proBNP和ROS水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);AHF组患者中,病情分级Ⅳ级者血清IGFBP-7、SIRT4、NT-proBNP和ROS水平高于Ⅲ级者和Ⅱ级者,且Ⅲ级者高于Ⅱ级者,差异有统计学意义(P<0.05);AHF组预后不良者病情分级和血清IGFBP-7、SIRT4、NT-proBNP、ROS表达水平均高于预后良好者,差异有统计学意义(P<0.05)。AHF患者血清IGFBP-7、SIRT4水平均分别与血清NT-proBNP、ROS水平呈正相关(r=0.523、0.498、0.578、0.557,P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,病情分级和血清IGFBP-7、SIRT4、NT-proBNP、ROS水平均为AHF患者预后的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清IGFBP-7、SIRT4对AHF患者预后均有一定预测价值,曲线下面积(AUC)分别为0.794、0.795,且两者与ROS联用的预测价值更高,AUC为0.909(95%CI:0.858~0.959)。结论 IGFBP-7、SIRT4在AHF患者血清中呈高表达,且其表达水平与患者病情分级和预后显著相关,两者联合检测对患者预后具有较高的预测价值。

干扰素调节因子2结合蛋白2在斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达谱分析

目的·探究干扰素调节因子2结合蛋白2(interferon regulatory factor 2 binding protein 2,irf2bp2)基因的2个横向同源物(irf2bp2a和irf2bp2b)在斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达异同。方法·选取发育不同时间点(胚胎期和幼虫期)的斑马鱼胚胎,通过mRNA全胚胎原位杂交技术明确irf2bp2a和irf2bp2b的时空表达谱,并通过实时定量PCR检测其表达水平。结果·irf2bp2a和irf2bp2b在神经系统、眼及胸鳍等部位都有着类似的高表达,而各自在肝脏或斯坦尼小体出现特异性表达,提示其在斑马鱼胚胎早期发育过程中具有独特的表达模式。实时定量PCR检测结果显示irf2bp2a和irf2bp2b在胚胎发育早期都有表达,但表达水平有所不同。结论·尽管斑马鱼irf2bp2a和irf2bp2b这2个横向同源物具有高度保守的功能结构域,但二者在胚胎早期发育过程中的表达谱不尽相同,提示其功能并不完全冗余。

血清成纤维细胞生长因子21和脂肪酸结合蛋白4检测对急性ST段抬高型心肌梗死患者经皮冠状动脉介入治疗术后心力衰竭的预测价值

目的探究血清成纤维细胞生长因子21(FGF21)和脂肪酸结合蛋白4(FABP4)检测对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后心力衰竭的预测价值。方法选取2020年9月至2022年9月内蒙古医科大学附属医院接诊的113例STEMI患者为研究对象,依据PCI术后1年是否发生心力衰竭(心衰),将其分为心衰组(n=32)和非心衰组(n=81)。应用ELISA法测定血清FGF21、FABP4表达水平,比较两组血清FGF21、FABP4水平,多因素logistic回归分析影响STEMI患者PCI术后发生心力衰竭的相关因素,ROC曲线评估血清FGF21、FABP4水平对STEMI患者PCI术后心力衰竭发生的预测价值。结果心衰组心率次数、C反应蛋白(CRP)、心肌肌钙蛋白(cTnI)、N末端B型利钠肽原(BNP)、利尿剂使用比例均显著高于非心衰组,左心室射血分数(LVEF)显著低于非心衰组(P<0.05)。心衰组血清FGF21、FABP4表达水平均明显高于非心衰组[(228.37±33.07)ng/L比(185.68±25.52)ng/L、(34.26±5.51)ng/ml比(26.87±4.67)ng/ml,t=7.345、7.195,P<0.05]。血清FGF21(95%CI 1.371~8.191)、FABP4(95%CI 1.176~4.090)及发病到至导丝通过时间(95%CI 1.058~8.157)是影响STEMI患者PCI术后发生心力衰竭的危险因素(OR>1,P<0.05),LVEF(95%CI 0.473~0.913)是保护因素(OR<1,P<0.05)。血清FGF21、FABP4单独及二者联合预测STEMI患者PCI术后发生心力衰竭的曲线下面积(AUC)分别为0.828、0.856、0.934,二者联合优于单一(Z二者联合-FGF21=1.971、Z二者联合-FABP4=2.417,P=0.048、P=0.015)。结论STEMI患者PCI术后发生心力衰竭血清FGF21、FABP4水平均明显升高,二者联合对STEMI患者PCI术后发生心力衰竭的风险具有更高的预测价值。

冠心病患者血清环磷酸腺苷反应元件结合蛋白调节转录辅激活因子3及氧化应激指标与颈动脉粥样硬化的相关性

目的探讨冠心病患者血清环磷酸腺苷反应元件结合蛋白调节转录辅激活因子3(CRTC3)及氧化应激指标与颈动脉粥样硬化的相关性。方法选取2021年6月—2023年6月本院收治的154例冠心病患者为研究组,根据颈动脉粥样硬化程度分为轻度硬化组、中度硬化组和重度硬化组;另选取154例同期健康体检者为对照组。采用Pearson法分析血清CRTC3及氧化应激指标与颈动脉粥样硬化指标的相关性。结果研究组血清CRTC3、丙二醛(MDA)、颈动脉斑块面积和中层内膜厚度(IMT)高于或大于对照组,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。轻度硬化组、中度硬化组和重度硬化组血清CRTC3、MDA、颈动脉斑块面积和IMT依次升高或增大,SOD、GSH-Px水平依次降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清CRTC3、MDA水平与颈动脉斑块面积、IMT呈正相关(P<0.05),SOD、GSH-Px与颈动脉斑块面积、IMT呈负相关(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线显示,CRTC3、SOD、MDA和GSH-Px联合诊断重度颈动脉粥样硬化的曲线下面积(AUC)为0.990(95%CI:0.982~0.998),灵敏度为96.27%,特异度为76.28%。4项指标联合诊断的价值高于各指标单独诊断,差异有统计学意义(Z_(联合-CRTC3)=2.723,Z_(联合-SOD)=2.698,Z_(联合-MDA)=2.673,Z_(联合-GSH-Px)=2.803,P均<0.05)。结论冠心病患者血清CRTC3、MDA水平显著升高,SOD、GSH-Px水平显著降低;血清CRTC3、氧化应激水平均与颈动脉粥样硬化密切相关。

可溶性程序性死亡受体-1和干扰素调节因子4在类风湿关节炎患者血清中的表达与疾病活动性、免疫炎症的关系

目的检测可溶性程序性死亡受体-1(sPD-1)、干扰素调节因子4(IRF4)在类风湿关节炎(RA)患者血清中的表达并探讨其临床意义。方法选取RA患者100例为研究对象(RA组),其中缓解期患者50例(RA缓解组),活动期患者50例(RA活动组)。另外,选取同期接受治疗的骨关节炎(OA)患者50例(OA组)和进行体检的健康者50例(对照组)。采集静脉血,分离血清,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测受试者血清sPD-1、IRF4、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17(IL-17)、干扰素γ(IFN-γ)表达水平,采用Pearson法分析RA患者血清sPD-1、IRF4水平与血清IL-4、IL-17、IFN-γ水平的相关性。结果与对照组比较,OA组和RA组受试者血清sPD-1、IRF4、IL-4、IL-17、IFN-γ水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);与OA组比较,RA组受试者血清sPD-1、IRF4、IL-4、IL-17、IFN-γ水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与RA缓解组比较,RA活动组血清sPD-1、IRF4水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);RA患者血清sPD-1水平与血清IL-4、IL-17、IFN-γ水平均呈正相关(P<0.05);RA患者血清IRF4水平与血清IL-4、IL-17、IFN-γ水平均呈正相关(P<0.05)。结论RA患者血清中sPD-1、IRF4表达水平均升高,且与疾病活动性及患者体内炎症因子水平异常有关,有潜力成为新的治疗靶点。

CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞、黏蛋白1、干扰素-γ水平与多发性骨髓瘤关系的研究

多发性骨髓瘤（MM）是以骨髓中恶性浆细胞克隆性增生为特点的B细胞性肿瘤。骨髓瘤细胞的某些生物学特性，如生长、存活、转移是肿瘤微环境中的生长因子、黏附因子和其他一些细胞因子共同作用的结果。本研究通过检测13例MM患者CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞（Treg细胞）、黏蛋白1（MUC1）及干扰素-γ（IFN-γ）的水平，旨在探讨三者间关系及在MM疾病进程中的意义。

类风湿关节炎患者干扰素调节因子4基因表达变化的研究

目的通过检测类风湿关节炎(RA)人群和正常对照人群干扰素调节因子4(IRF4)基因表达的差异,探讨其在RA发病中的意义。方法选择30例RA患者与28名正常对照者,取外周血抽提总RNA并反转录为cDNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应扩增IRF4基因,计算RA组和正常对照组的IRF4 mRNA表达水平的差异(以-△△CT值表示),并与血沉、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸多肽(抗CCP)抗体水平等指标进行相关性分析。结果 RA组、对照组外周血IRF4 mRNA的表达水平分别为-6.94±0.10,-7.62±0.13,RA患者外周血IRF4 mRNA的表达水平较正常对照组明显增高(P<0.01),IRF4 mRNA水平与疾病活动性指标呈明显相关性改变。结论 RA患者外周血存在IRF4基因表达异常,且与疾病活动指标具有相关性,可能在RA发病中起一定作用。

干扰素调节因子4与T细胞分化及免疫性疾病的研究进展

干扰素调节因子4(IRF4)是IRFs家族一员,经一系列信号转导作用发挥转录激活或阻遏,调节干扰素的表达、淋巴细胞的分化发育及活性,参与免疫调控。IRF4与白细胞介素、信号转导及转录激活因子、活化T细胞核因子等细胞因子相互作用调节T细胞分化,形成复杂的平衡网络调控系统,平衡网络遭到破坏则免疫功能紊乱,并诱发免疫性疾病,如哮喘、炎症性肠病、关节炎、自身免疫性疾病,其与复发性流产的关系正在探索之中。

TNF-α调节多聚免疫球蛋白受体和干扰素调节因子-1的表达

目的研究TNF-α对Caco-2细胞表达多聚免疫球蛋白受体(PIGR)和干扰素调节因子-1(IRF-1)的影响。方法用不同浓度的TNF-α刺激Caco-2细胞后,采用Real-time PCR方法检测Caco-2细胞表达PIGR和IRF-1的变化。结果 TNF-α浓度为50、100、200和400 ng/mL时,PIGR mRNA和IRF-1 mRNA的相对含量分别为(3.14±0.14)、(5.23±0.19)、(6.45±0.23)、(8.44±0.18)和(6.20±0.21)、(9.00±0.19)、(10.90±0.23)、(14.50±0.25),与无TNF-α刺激时比较,Caco-2细胞表达PIGR和IRF-1明显增加(P<0.01)。结论 TNF-α上调Caco-2细胞中PIGR和转录因子IRF-1的表达。

Y-box结合蛋白1通过沉默信息调节因子1 mRNA稳定性调节抑制人颗粒细胞凋亡在早发性卵巢功能不全中的作用与机制

目的:探讨Y-box结合蛋白1(YBX1)调节沉默信息调节因子1(SIRT1)对颗粒细胞增殖和凋亡的影响,研究YBX1和SIRT1在早发性卵巢功能不全(POI)患者及卵巢功能正常患者间表达水平差异及临床意义。方法:留取2022年6月至2023年7月于江苏大学第四附属医院生殖医学中心进行体外受精(IVF)/卵胞浆内单精子注射(ICSI)助孕的POI患者(POI组)及卵巢储备功能正常患者(对照组)的颗粒细胞和血清,利用免疫印迹(WB)检测YBX1蛋白表达水平;利用实时荧光定量核酸扩增法(RT-qPCR)检测YBX1及SIRT1 mRNA表达水平,并分析血清中其与卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E_(2))、抗苗勒管激素(AMH)、窦卵泡数(AFC)的相关性;利用5-溴-2-脱氧尿嘧啶(EdU)、细胞计数试剂8(CCK8)检测细胞增殖、原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡;RT-qPCR检测细胞内增殖细胞核抗原(PCNA)、B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达情况;RNA免疫沉淀(RIP)实验检测YBX1与SIRT1的相互作用。结果:与对照组患者相比,POI组患者颗粒细胞和血清中YBX1蛋白及SIRT1 mRNA的表达降低(P<0.05);血清中YBX1、SIRT1 mRNA表达与FSH、LH负相关(r<0,P<0.05),与E_(2)、AMH、AFC正相关(r>0,P<0.05);在颗粒细胞中上调YBX1后SIRT1蛋白表达量、SIRT1 mRNA的稳定性、EdU阳性率、细胞活性、PCNA mRNA表达量、Bcl2/BAX比值均增加(P<0.05),Caspase-3 mRNA表达量、TUNEL阳性率均降低(P<0.05)。结论:YBX1和SIRT1在POI患者中表达水平显著下调,且其表达水平与临床卵巢功能指标相关;YBX1结合SIRT1 mRNA增强其稳定性,可能促进颗粒细胞增殖,抑制细胞凋亡,提示YBX1和SIRT1有望成为POI诊疗的新靶点。

人干扰素/β肿瘤坏死因子重组杂合蛋白的免疫调节功能

报道了人干扰素／β肿瘤坏死因子（ｒｈＩＦＮ－／ｒｈＴＮＦ－β）杂合蛋白对正常动物免疫反应的影响，结果如下：经ＬＰＳ激活的豚鼠腹腔巨噬细胞，当与适宜剂量的杂合蛋白温育后，其无细胞上清液中的Ｈ２Ｏ２浓度高于对照组。ＤＮＣＢ致敏的大鼠在半抗原攻击前，如在一侧耳翼内注入适宜剂量的ｒｈＩＦＮ－／ｒｈＴＮＦ－β，则由ＤＮＣＢ诱导的迟发超敏（ＤＴＨ）反应大于在另一侧耳翼内注入ＰＢＳ作为对照的反应强度。在抗体形成细胞（ＡＦＣ）反应检测系统中，经异种红细胞致敏的小鼠免疫脾细胞用杂合蛋白做短暂处理后，其ＡＦＣ反应比对照组有所增强。

干扰素调节因子3促结直肠癌细胞增殖与侵袭相关探索

目的·分析结直肠癌中干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF3)表达水平与临床病理特征及患者预后的关系,观察IRF3过表达对结直肠癌细胞增殖与侵袭能力的影响及其相关蛋白通路。方法·下载癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据,分析IRF3表达水平与恶性肿瘤患者(肾癌、结直肠癌、肝癌、前列腺癌)预后的关系。采用免疫组织化学法检测10例结直肠癌或肾癌患者的癌组织与癌旁正常组织切片中IRF3表达水平的差异。针对IRF3蛋白的C端残基位点进行改造,构建拟磷酸化IRF3-5D(396/398/402/404/405-D)高表达的HEK-293T细胞。分别在细胞培养12、24 h时,采用TANK结合激酶1(TANK-binding kinase 1,TBK1)抑制剂进行处理,并采用蛋白质印迹法检测细胞IRF3、p-IRF3(Ser386)蛋白表达水平。采用RNA测序技术探索IRF3-5D高表达与肿瘤相关蛋白表达水平的相关性。构建野生型IRF3(IRF3-WT)和IRF3-5D过表达的结直肠癌细胞CT26、COLON26,采用细胞计数法、细胞划痕试验和克隆形成试验检测细胞增殖及迁移能力。结果·TCGA数据分析提示癌组织中IRF3蛋白表达水平与患者的不良预后呈正相关。癌症患者病理组织免疫组织化学法显示,结直肠癌、肾癌组织中IRF3的表达水平显著上调,且蛋白表达集中于细胞核内。TBK1抑制剂分别在细胞培养12、24 h时间点作用后,HEK-293T细胞p-IRF3(Ser386)蛋白表达减弱。RNA测序和蛋白质印迹法结果显示,多个与癌症预后不良相关的蛋白[IRF9、细胞程序性死亡-配体1(programmed cell death 1-ligand 1,PD-L1)等]表达水平在IRF3-5D高表达的条件下显著上调。结直肠癌细胞中过表达IRF3-5D,可导致癌细胞的增殖、迁移能力显著上调。结论·结直肠癌中IRF3表达水平与患者不良预后呈正相关。IRF3-5D蛋白在结直肠癌细胞内高表达后,促进癌细胞恶性生物学行为。此外,IRF3-5D依赖于TBK1介导的IRF3活化激活通路,并上调多个肿瘤相关蛋白的表达水平。

胰岛素样生长因子结合蛋白4基因对内皮细胞衰老的调节作用

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)对血管内皮细胞衰老进程的影响。方法分离培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)并构建传代性衰老模型,分别将过表达IGFBP4、沉默IGFBP4表达的慢病毒及空载慢病毒转染HUVEC,结合光镜、β-半乳糖苷酶活性测定及细胞周期测定等方法观察各组细胞传代过程中的衰老现象。结果慢病毒感染细胞后,过表达组[IGFBP4(+)组]内皮细胞传代代数较空载病毒组(对照组)和IGFBP4基因沉默组[IGFBP4(-)组]明显增加[14.33±0.67比9.67±0.33、10.67±0.33;P<0.05];实验中各代细胞IGFBP4(+)组衰老率均低于对照组和IGFBP4(-)组[以第6代为例,分别为(24.60±0.90)%比(34.92±0.92)%、(33.74±0.62)%,P<0.05];随传代代龄增加,高代龄细胞(第6代)较低代龄细胞(第2代)降低的细胞增殖指数IGFBP4(+)组均低于对照组和IGFBP4(-)组[(10.35±0.57)%比(14.90±0.85)%、(13.99±0.65)%,P<0.05];各组实验在对照组与IGFBP4(-)组间比较差异无统计学意义。结论提高IGFBP4的表达能够延缓血管内皮细胞的衰老进程。

干扰素调节因子4在B细胞淋巴瘤细胞株中表达及其与细胞耐药的关系

背景:干扰素调节因子4是B细胞终末分化的重要转录因子,限制性表达于淋巴细胞,在基因调控中起重要作用,但其与疾病预后的最终关系仍未确定。目的:假设干扰素调节因子4在B淋巴细胞中的表达与细胞耐药有关,观察新型抗肿瘤药蛋白酶体抑制剂硼替佐米对干扰素调节因子4的影响。设计、时间及地点:细胞学体外实验,于2006-03/2007-02在河南省肿瘤医院中心实验室完成。材料:Daudi和Namalwa细胞株由上海血液学研究所提供。阿霉素为山西普德药业有限公司产品,硼替佐米为西安杨森公司产品。方法:将Daudi和Namalwa细胞各自接种于200μLRPMI-1640培养体系中,分别加入0,5,10,20,30,50,100μg/L阿霉素;对于Namalwa细胞,另设立联合用药组,即15nmol/L硼替佐米+上述各浓度阿霉素;药物处理48h后,加入MTT继续培养。选择单药50μg/L阿霉素、15nmol/L硼替佐米以及两药联合作用Namalwa细胞12,24,48,72h,行半定量RT-PCR和Western印迹分析。主要观察指标:干扰素调节因子4在细胞株中的表达。MTT法检测细胞增殖抑制率。AnnexinV/PI法检测细胞凋亡情况。药物对Namalwa细胞干扰素调节因子4基因和蛋白表达的影响。结果:Namalwa细胞表达干扰素调节因子4基因和蛋白,Daudi细胞中未检测出其表达。各浓度阿霉素作用48h后,Daudi细胞增殖抑制率显著高于Namalwa细胞(P<0.05);阿霉素联合硼替佐米共培养48h,Namalwa细胞增殖抑制率显著高于单药阿霉素(P<0.05)。硼替佐米、阿霉素联合硼替佐米作用48h细胞凋亡率显著高于单药阿霉素(P<0.01)。单药阿霉素处理12,24,48,72h,干扰素调节因子4基因和蛋白均未发生明显变化;单药硼替佐米处理48h干扰素调节因子4基因表达开始下调,72h出现蛋白表达下调;两药联合处理24h即出现干扰素调节因子4基因表达下调,48h随之出现蛋白表达下调。结论:Namalwa细胞中干扰素调节因子4的表达与阿霉素耐药有关,硼替佐米能够下调干扰素调节因子4的表达,克服阿霉素的耐药。

干扰素调节因子4基因在慢性HBV携带者外周血中的表达及临床意义

目的:从mRNA和蛋白水平两个层面探讨健康人群和慢性HBV携带者外周血干扰素调节因子4(IRF-4)基因表达情况。方法:选取慢性HBV携带者19例(病例组),健康对照者22例(对照组),采集外周血分离PBMC,利用流式细胞技术观测CD4+T细胞中IRF-4+细胞比例,利用实时定量PCR技术检测IRF-4mRNA水平,比较两组人群IRF-4表达差异。结果:通过FACS分析在CD4+T细胞群中明显出现IRF-4+细胞群;病例组和对照组IRF-4+细胞比例分别为(3.29±0.83)%、(2.26±0.82)%,差异具有统计学意义(t=3.98,P=0.000 3);病例组IRF-4 mRNA表达水平显著高于对照组(10.66±5.15 vs 5.53±2.74,t=4.06,P=0.000 2)。结论:慢性HBV携带者IRF-4表达在mRNA和蛋白水平均高于正常人群,可以作为免疫干预的潜在靶点。

益肾固本法对慢性HBV携带者外周血干扰素调节因子-4表达的影响

目的:从mRNA和蛋白水平两个层面探讨益肾固本方对慢性HBV携带者外周血IRF(干扰素调节因子)-4表达的影响。方法:选取慢性HBV携带者46例,其中27例服用益肾固本方进行中药干预,19例作为对照组不予任何药物治疗,动态随访24周后,采集外周血分离外周血单个核细胞(PBMC),利用流式细胞技术(FACS)观测CD4+T细胞中IRF-4+细胞比例,利用实时定量PCR(聚合酶链反应)技术检测两组人群IRF-4 mRNA水平,比较其IRF-4表达差异。结果:FACS可以有效鉴定IRF-4+细胞群,中药组IRF-4+细胞群峰值偏移程度小于对照组;中药组和对照组IRF-4+细胞比例分别为(2.61±0.19)%、(3.29±0.18)%,差异具有统计学意义(t=2.48,P=0.02);中药组IRF-4 mRNA表达量显著低于对照组[(6.78±0.89)vs(10.66±1.18),t=2.67,P=0.01]。结论:益肾固本方可以有效降低慢性HBV携带者IRF-4表达水平,对于纠正Th1/Th2细胞失衡、打破免疫耐受具有重要意义。

心血管调节肽、脂肪酸结合蛋白4与子痫前期孕妇疾病严重程度和预后的关联分析

目的分析研究血清心血管调节肽(Salusin-β)、脂肪酸结合蛋白4(Fatty acid binding protein 4,FABP4)与子痫前期孕妇疾病严重程度和预后的关联。方法以2021年3月-2022年3月武汉市汉阳医院妇产科收治的112例子痫前期孕妇为子痫前期组,根据患者疾病严重程度分为轻度子痫前期组和重度子痫前期组,选取同时期124例健康体检孕妇作正常血压组,测定各组孕妇的血清Salusin-β、FABP-4水平。记录各组孕妇分娩孕周、新生儿出生体重、血压恢复正常的时间。采用Pearson相关系数分析各组孕妇血清Salusin-β、FABP-4水平与预后指标的相关性。结果子痫前期组和正常血压组孕妇平均年龄、平均孕次、平均产次、孕前平均体重指数、入院时平均孕周差异均无统计学意义(P>0.05)。与正常血压组相比,子痫前期组孕妇血清Salusin-β、FABP-4水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与轻度子痫组前期比较,重度子痫前期组血清Salusin-β、FABP-4水平均升高,孕妇分娩孕周缩短,新生儿体重降低,血压恢复正常的时间增长,差异均有统计学意义(P<0.05)。子痫前期组孕妇血清中Salusin-β、FABP-4水平与分娩孕周及新生儿出生体重均呈负相关,与血压恢复正常时间呈正相关(P<0.05)。正常血压组血清中Salusin-β、FABP4水平与分娩孕周、新生儿出生体重、血压恢复正常时间无相关性(P>0.05)。结论子痫前期孕妇血清中Salusin-β、FABP-4水平与疾病严重程度及不良预后有相关性。

C/EBPα通过结合鸡神经调节蛋白4基因外显子2正调控其表达

神经调节蛋白4(NRG4)是一个新发现的脂肪细胞因子,它在机体能量平衡、糖脂代谢等许多生理过程中发挥重要调控作用。目前,NRG 4基因的转录调控机制尚不清楚。我们前期的5′RACE分析显示,鸡NRG 4基因转录起始位点(TSS)弥散分布于一段约200 bp的区域,提示鸡NRG 4基因的启动子为分散型启动子(dispersed promoter)。本研究开展了鸡NRG 4基因近端外显子和内含子的启动子活性分析,报告基因分析显示,包含NRG 4基因外显子1、内含子1和外显子2的基因组片段(-122/+452)具有很强的双向启动子活性。生物信息学分析显示,鸡NRG 4基因外显子2上存在1个转录因子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)的潜在结合位点;报告基因分析发现,删除或突变C/EBPα结合位点会导致C/EBPα丧失对NRG 4基因片段(-122/+452)启动子活性的调控作用。基因表达相关性分析显示,鸡脂肪组织中C/EBPα和NRG 4基因的mRNA表达存在显著正相关(P<0.01)。进一步的脂肪组织ChIP-qPCR分析显示,C/EBPα直接结合鸡NRG 4基因的外显子2。本研究发现,鸡NRG 4基因的近端外显子和内含子具有双向启动子活性,C/EBPα通过直接结合外显子2调控鸡脂肪组织NRG 4基因的表达。