白细胞介素-6、白细胞介素-8、γ干扰素、肿瘤坏死因子-α联合检测对腹腔镜下胃癌根治术后并发肺炎的预测价值

目的分析白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)联合检测对腹腔镜下胃癌根治术后并发肺炎的预测价值。方法将72例胃癌患者按术后是否并发肺炎分为观察组(并发肺炎)30例和对照组(未并发肺炎)42例。比较两组患者血清IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血清IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α单独及联合检测对腹腔镜下胃癌根治术后并发肺炎的预测价值。结果观察组患者血清IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。血清IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α联合检测预测腹腔镜下胃癌根治术后并发肺炎的灵敏度(94.85%)高于各指标单独检测(75.12%、71.86%、69.82%、72.84%)。结论腹腔镜下胃癌根治术后并发肺炎患者血清IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α水平异常升高,联合检测可提高对肺炎的预测灵敏度,具有一定参考价值。

干扰素调节因子8(IRF8)在髓系细胞形成和相关疾病中的作用

干扰素调节因子8(IRF8)是造血细胞中表达的转录因子,调控一系列转录因子的功能和表观遗传改变。在单核吞噬细胞祖细胞中,IRF8与富含嘌呤盒1(PU.1)联合促进末端增强子的形成,诱导单核细胞相关基因包括关键的下游Krüppel样因子4(KLF4)的表达,调节单核细胞的形成;IRF8还可以促进树突状细胞、嗜酸粒细胞和嗜碱粒细胞的形成;IRF8通过抑制CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)的活性来抑制中性粒细胞的分化程序从而抑制中性粒细胞的产生。IRF8-/-单核吞噬细胞祖细胞不能分化成单核细胞、吞噬细胞,反而异常引起中性粒细胞产生。IRF8-/-小鼠及IRF8表达缺失或突变的人都会表现出免疫缺陷和类慢性粒细胞性疾病。本文主要概括IRF8在髓系细胞形成及在相关疾病中重要作用。

外周血干扰素调节因子-8和组织因子途径抑制剂-2甲基化水平可以作为肝细胞癌的早筛和预后存活的预测因子

目的探究外周血干扰素调节因子-8(IRF-8)和组织因子途径抑制剂-2(TFPI-2)甲基化水平对肝细胞癌的预测作用以及与预后的相关性分析研究。方法以58例肝细胞癌患者为实验组,16例体检健康者作为对照组。抽取入组者的清晨血,利用试剂盒检测血清中的IRF-8和TFPI-2的甲基化水平。同时收集患者的临床相关资料,利用Logistic回归分析肝细胞癌的易感因素,随访2年后患者的存活率,比较IRF-8和TFPI-2启动子甲基化水平与预后的关系。结果58例肝细胞癌患者外周血中发现865918个CpG位点中的2180个(0.25%)在肿瘤组织中差异甲基化。与数据库对比,发现干扰素调节因子-8(IRF-8)和组织因子途径抑制剂-2(TFPI-2)启动子甲基化水平变化最大。Logistic回归分析结果显示,年龄,BMI,HBsAg阳性,肝硬化病史,IRF-8甲基化水平和TFPI-2甲基化与肝细胞癌发病密切相关(P<0.05)。外周血中IRF-8启动子甲基化和TFPI-2启动子甲基化情况与年龄、HBsAg阳性、肝硬化、分化程度、淋巴结转移、浸润深度、卫星灶等呈正相关(P<0.05)。2年随访中存活患者的外周血中IRF-8和TFPI-2甲基化状态与未存活患者比较具差异有统计学意义(P<0.05)。结论外周血中IRF-8和TFPI-2甲基化水平可以作为肝细胞癌患者的早筛和预后的预测因子。

人类疱疹病毒8型病毒干扰素调节因子编码基因的克隆及在真核细胞中的表达

目的:分离、克隆人类疱疹病毒8型(HHV-8)编码的病毒干扰素调节因子(virusinterferonregulatoryfactor,vIRF)基因K9,并将其导入真核细胞中进行表达。方法:根据GenBank登记的K9基因核苷酸序列设计一对PCR引物,其5′端分别引入HindⅢ和BamHⅠ酶切位点。以原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞系BCBL-1细胞总DNA为模板,PCR扩增K9基因,经双酶切后克隆进真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pK9。为了便于蛋白检测,再设计第二对引物,上游引物不变,在下游引物5′端引入了Flag序列。以质粒pK9为模板再次PCR,扩增K9-Flag基因,并把K9-Flag序列克隆入pcDNA3.1(+)中,得到重组质粒pK9F。重组质粒经酶切鉴定,核酸序列测定和分析后瞬时转染NIH3T3细胞,用RT-PCR、Westernblot分别从核酸和蛋白水平检测K9基因的表达情况。结果:PCR分离、克隆的K9-Flag序列全长1380bp,核酸序列分析显示克隆的K9基因与GenBank中己经登记的K9基因序列100%同源,引入的Flag序列完全正确;RT-PCR和Westernblot都在K9预期位置检测到特异性条带。结论:HHV-8K9基因在NIH3T3细胞中获得了正确表达。

干扰素调节因子8与肿瘤的关系研究

干扰素调节因子8作为干扰素调节因子家族成员,在肿瘤发生以及抗肿瘤免疫中发挥着重要的作用。该文对干扰素调节因子8在肿瘤中的研究进展进行综述。

干扰素调节因子8在骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多亚型中的表达研究

目的研究干扰素调节因子8(interferon regulatory factor 8,IRF-8)在骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多(Myelodysplastic Syndromes with Excess Blasts,MDS-EB)亚型中是否存在表达异常,并分析其与MDS-EB的相关性。方法收集三组共30例实验标本。其中20例为MDS-EB病例标本,分为MDS-EB1组和MDS-EB2组。10例为健康体检的健康对照组。30例标本均采集自受试者外周静脉血,采集后立即进行外周血总RNA提取,并经逆转录PCR后,以实时荧光定量PCR检测各标本的IRF-8 mRNA表达水平。各组平均表达量以RQ值(x±s)表示。结果三组样本实时荧光定量PCR的平均RQ值:MDS-EB1组(0.59±0.08),MDS-EB2组(0.26±0.10),健康对照组(1.20±0.26),三组表达水平存在显著差异(P<0.01)。MDS-EB组的IRF-8表达水平均显著低于健康对照组(P<0.01),MDS-EB2组内IRF-8表达水平低于MDS-EB1组(P<0.05)。结论 IRF-8在MDS-EB中表达水平降低,表明IRF-8在MDS-EB中表达受抑,组间统计结果提示IRF-8的表达可能与疾病的恶性程度及进展相关。

干扰素调节因子8在慢性阻塞性肺病中作用及其机制

目的探讨干扰素调节因子8(IRF-8)对气道再生的影响及其机制。方法收集健康受试者和慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的人支气管上皮细胞(HBEC)和痰液,检测IRF8的表达并分析IRF8表达与FEV1占预计值的百分比(FEV1%)的相关性。实验分为4组:Control组(健康受试者HBEC),COPD组(COPD患者HBEC),NC组(COPD+IRF8-NC),IRF8-siRNA组(COPD+IRF8-siRNA)。分析培养上清中IL-6,IL-8和TNF-α水平,HBEC增殖能力,及p65的蛋白表达水平。荧光素酶报告实验测定IRF8的靶向调控microRNA。结果与健康对照者相比,COPD患者的HBEC和诱导痰中IRF8均显著升高。COPD患者IRF8表达水平与FEV1%呈负相关。IRF8-siRNA组IL-6,IL-8和TNF-α明显降低,细胞增殖被显著抑制,p-p65蛋白水平明显降低。同时,miR-218靶向调控IRF8的表达。结论 IRF8基因敲除能够抑制COPD患者HBEC细胞的炎症反应和细胞增殖,且miR-218靶向调控IRF8的表达。

趋化因子受体8和调节性T细胞在三阴性乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer, TNBC)组织中趋化因子受体8(chemokine receptor 8,CCR8)及调节性T细胞(regulatory T cells, Tregs)的表达及其临床意义。方法:以叉头翼状转录因子(transcription factor forkhead box P3 protein, Foxp3)作为Tregs的分子标记,应用免疫组织化学方法检测90例TNBC及30例癌旁组织标本中CCR8及Foxp3的表达情况,并对其表达水平与TNBC患者临床病理特征及预后的关联加以分析,同时研究二者的表达之间是否存在相关性,应用多因素Cox回归分析模型探讨影响TNBC患者的预后因素。结果:CCR8和Foxp3^(+)Tregs在TNBC组织中的表达均显著高于癌旁组织(均P<0.001)。在TNBC组织中CCR8和Foxp3^(+)Tregs的表达与TNM分期和淋巴结转移显著相关(均P<0.05),在TNM分期晚、有淋巴结转移的患者中CCR8和Foxp3^(+)Tregs表达明显升高,而与患者的年龄、肿瘤大小、组织学分级无关(均P>0.05)。TNBC组织中CCR8和Foxp3^(+)Tregs的表达成正相关(r=0.278,P<0.05)。截止至末次随访时间,CCR8阴性组的5年无病生存率(DFS)和总生存率(OS)均高于CCR8阳性组,两组间差异具有统计学意义(P <0.05)。Foxp3^(+)Tregs阴性组的5年DFS率和OS率也均高于Foxp3^(+)Tregs阳性组,但两组间差异无统计学意义(P> 0.05)。Kaplan-Meier生存曲线表明,CCR8与Foxp3^(+)Tregs双阴性表达患者的生存明显优于双阳性表达的患者,但本研究中两组间差异无统计学意义(P> 0.05)。多因素Cox回归模型表明TNM分期、CCR8的表达是影响TNBC预后的独立因素(P <0.05)。结论:CCR8和Foxp3^(+)Tregs在TNBC中均呈高表达,二者表达成正相关,并且均与不良预后有关。CCR8的表达是患者预后不良的独立影响因素,可能成为TNBC的新型预后标志物,为TNBC的免疫治疗策略提供新思考。

IRF8新发移码突变的基因功能分析

目的对反复肺炎患儿队列病因筛查中发现的干扰素调节因子8基因(interferon regulator factor 8,IRF8)新发突变(c.1266dupA)进行分子细胞水平的功能研究与验证。方法针对IRF8突变序列构建野生与突变蛋白过表达载体,通过质粒转染或构建慢病毒感染不同工具细胞,通过qPCR、Western blot、免疫荧光等实验手段检测其表达差异及对下游炎症相关基因表达调控的改变。结果IRF8野生及突变过表达载体构建成功,且转染效率可观,包装成的慢病毒感染效率亦较高。突变基因IRF8(c.1266dupA)相较于野生型IRF8转录水平降低,表达蛋白的相对分子质量略增大,表达量降低,突变蛋白IRF8mut相对野生型IRF8蛋白核质比增加,IRF8(c.1266dupA)对下游ISRE元件的抑制功能增强。结论IRF8新发移码突变属于功能获得型(gain of function,GOF)突变。

斜带石斑鱼干扰素调节因子8基因的鉴定与表达模式分析

干扰素调节因子8(IRF8)是IRF家族转录因子中的一个成员.利用简并PCR和cDNA末端快速克隆(RACE)技术获得了斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)IRF8基因(EcIRF8)全长cDNA序列,其编码422个氨基酸残基的蛋白质,含有脊椎动物IRF家族的特征性结构域,即N端保守的DNA结合结构域(DBD)和C端多样化的干扰素调控因子结合结构域(IAD),其中DBD中包含5个特征性的色氨酸残基和1个核定位信号.与绝大多数脊椎动物的IRF8基因相似,EcIRF8基因组序列也是9个外显子和8个内含子的结构.EcIRF8在斜带石斑鱼肝脏中高水平表达.活体聚肌胞苷酸刺激后6h,EcIRF8在头肾、中肾、胸腺、肝脏和肠中的表达量显著上调(p<0.05),其中在中肾中上调幅度最大,是对照组的106倍;副溶血弧菌(Vibrio paraheamolyticus)刺激后24h,EcIRF8在肝脏中的表达量也显著上调(p<0.05),但上调倍数仅为对照组的9.37倍.结果表明,EcIRF8基因可能主要参与斜带石斑鱼的抗病毒免疫反应.

干扰素调节因子8抑制辅助性T淋巴细胞17分化在白塞病发病机制中的作用

白塞病是一种主要表现为复发性口腔溃疡、生殖器溃疡、眼炎和皮肤损害的慢性系统性血管炎。白塞病发病机制尚不明确,可能是遗传易感个体在感染或环境等因素触发下发生的自身免疫性疾病,辅助性T淋巴细胞17(Th17)在白塞病发病过程中有重要作用。干扰素调节因子8(IRF8)可抑制Th17分化,从而抑制Th17及白细胞介素17产生的炎性反应。基因组学研究提示,IRF8相关单核苷酸多态性位点是白塞病的风险基因位点。近年来,IRF8抑制Th17分化在白塞病发病机制中的作用已经成为研究热点。

鞘内注射干扰素调节因子8小干扰RNA对术后持续性疼痛大鼠痛阈及脊髓小胶质细胞活化的影响

目的:探究鞘内注射干扰素调节因子8小干扰RNA(IRF8 SiRNA)对PPsP大鼠痛阈及脊髓小胶质细胞活化的影响。方法:120只雄性SD大鼠随机分为假手术组(SH,n=12),模型组(SM,n=48),溶媒组(SD,n=12)和IRF8沉默组(SS,n=48),其中,SM组于大鼠后足中部隐静脉内侧按皮肤/肌肉切开牵拉(SMIR)法建立术后持续性疼痛(PPsP)模型,SH组仅切开不牵拉;SD组与SS组建模前一周先于L4/5椎间隙行鞘内置管术,SS组于建模后第5、6日连续鞘内给予IRF8 SiRNA溶液20μl(溶于DEPC水中,150 pmol),SD组给予等量DEPC水。测量并记录建模前(D0),建模后第1(D1)、3(D3)、7(D7)、12(D12)、22(D22)、33(D33)日等时点各组大鼠术侧后足机械刺激缩足反应阈值(PWT);建模后第12日各取6只,Western blot法检测脊髓背角Iba-1蛋白表达情况,并取SH组和SM组各3只,取术野隐神经行电镜观察其超微结构改变;再取SM组和SS组于上述各时点各6只,流式细胞术检测脊髓背角小胶质细胞活化情况。结果:与D0相比,SM组在D1~D22PWT降低(P<0.05或P<0.01),并在D33恢复至正常水平(P>0.05);与SH组相比,SM组PWT在D1~D22均降低(P<0.05或P<0.01);与SD组相比,SS组PWT在D7~D22增高(P<0.05或P<0.01);与SH组相比,SS组D7~D22降低(P<0.05或P<0.01);隐神经髓鞘平均厚度:SH组为(377.03±69.60) nm, SM组为(369.50±73.26) nm,两组间相比无统计学意义(P>0.05);与SH组相比,SM组Iba-1明显上调(P<0.01);与SD组相比,SS组Iba-1表达受到抑制(P<0.05),与SH组相比,SS组Iba-1表达也具有统计学差异(P<0.05),而SM组与SD组之间,Iba-1的表达无统计学意义(P>0.05);与D0相比,SM组小胶质细胞活化比率在D3~D22均显著增加(P<0.01),而SS组小胶质细胞活化于D3达到高峰(P<0.01);鞘内给药后,SS组脊髓背角小胶质细胞活化比率明显下降,与SM组相比,在D7~D12显著下降(P<0.01)。结论:SMIR诱导的PPsP大鼠显著且持续的机械痛觉过敏为非明显的外周神经损伤所致,可能是基于脊髓背角小胶质细胞活化所介导,而鞘内给予IRF8小干扰RNA可抑制脊髓背角小胶质细胞的激活,并逆转SMIR诱导的痛觉过敏。

支气管哮喘急性发作期患儿外周血去整合素金属蛋白酶8、干扰素调控因子1水平观察

目的观察支气管哮喘急性发作期患儿外周血去整合素金属蛋白酶(disintegrins metalloproteinase,ADAM)8、干扰素调控因子(interferon regulatory factor,IRF)1的水平变化。方法支气管哮喘急性发作期患儿91例(急性发作组),按照全球哮喘防治倡议标准将其分为轻度组27例、中度组35例、重度组29例,并于同期随机选取60例支气管哮喘缓解期患儿为缓解组,60例健康体检儿童为对照组。采用荧光定量PCR法检测各组研究对象外周血ADAM8 mRNA、IRF1 mRNA,Western blotting检测外周血ADAM8、IRF1蛋白,并检测各组肺功能指标,包括第1秒用力呼气量(forced expiratory volume in one second,FEV1)、用力肺活量(forced vital capacity,FVC)、用力呼气峰流速(peak expiratory flow,PEF)。结果急性发作组中轻度组、中度组、重度组患儿外周血ADAM8 mRNA、IRF1mRNA表达水平高于缓解组和对照组(P均<0.05),且轻度组、中度组、重度组患儿外周血ADAM8 mRNA、IRF1mRNA表达水平逐渐升高(P均<0.05)。急性发作组中轻度组、中度组、重度组患儿外周血ADAM8蛋白、IRF1蛋白水平高于缓解组和对照组(P均<0.05),且轻度组、中度组、重度组患儿外周血ADAM8蛋白、IRF1蛋白水平逐渐升高(P均<0.05)。急性发作组患儿外周血ADAM8 mRNA与IFR1 mRNA水平呈正相关(r=0.793,P<0.05),ADAM8 mRNA水平与肺功能指标FEV1、FVC、FEV1/FVC、PEF呈负相关性(r分别为-0.659、-0.702,-0.683、-0.761,P均<0.05),IFR1 mRNA水平与肺功能指标FEV1、FVC、FEV1/FVC、PEF呈负相关性(r分别为-0.712、-0.735,-0.728、-0.756,P均<0.05)。结论支气管哮喘急性发作期患儿外周血ADAM8、IRF1水平升高,可能与小儿支气管哮喘的发生、发展有关,检测外周血ADAM8、IRF1有助于支气管哮喘急性发作期患儿病情判断。

干扰素调节因子5(IRF5)调控小鼠骨髓源性巨噬细胞的极化

目的诱导小鼠骨髓来源的巨噬细胞极化为M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞,检测干扰素调节因子5(IRF5)在M1型和M2型巨噬细胞中的表达差异,并用IRF5小干扰RNA(IRF5 siRNA)沉默巨噬细胞中IRF5基因表达,观察其极化状态的改变。方法用γ干扰素(IFN-γ)和脂多糖(LPS)诱导小鼠骨髓来源的巨噬细胞向M1型巨噬细胞分化,白细胞介素4(IL-4)诱导其向M2型巨噬细胞分化,实时定量PCR检测IRF5、IL-12、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、精氨酸酶1(Arg1)和巨噬细胞甘露糖受体(MMR)mRNA在M1型和M2型巨噬细胞中的表达。用IRF5 siRNA转染巨噬细胞,实时定量PCR检测M1型巨噬细胞标志物IRF5、IL-12、TNF-α、i NOS和M2型巨噬细胞标志物Arg1、MMR mRNA的表达,评估其极化状态的改变。结果流式细胞术检测巨噬细胞分化率达81.7%,实时定量PCR检测显示M1型巨噬细胞中IRF5、IL-12、i NOS mRNA的表达量明显高于M2型巨噬细胞,TNF-α亦高于M2型巨噬细胞;M2型巨噬细胞中Arg1、MMR mRNA表达量同M1型巨噬细胞比较显著增高。IRF5 siRNA转染巨噬细胞后,IRF5、IL-12、TNF-α、i NOS mRNA的表达量显著降低,Arg1、MMR mRNA的表达量明显增加。Western blot法检测结果显示IRF5、IL-12、TNF-α、i NOS蛋白的表达量显著降低,Arg1、MMR蛋白的表达量明显增加,极化状态向M2型巨噬细胞偏移。结论 IRF5对巨噬细胞的极化调控有重要作用,可作为鉴别M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞的重要标志物。

结核性和恶性胸腔积液中白介素-2、白介素-8、肿瘤坏死因子α和干扰素γ的变化

目的观察胸腔积液中白介素-2(IL-2)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)在结核性和恶性胸腔积液中的含量及其对鉴别诊断的价值。方法测定并比较111例结核性、恶性、肺炎性及漏出液4组不同病因胸腔积液患者血清IL-2、IL-8、TNF-α和IFN-γ水平。结果结核性、恶性组患者胸腔积液和血清中的IL-8、TNF-α和IFN-γ水平显著高于漏出液组(P均<0.01);结核性胸腔积液组患者胸液中IL-8、TNF-α和IFN-γ含量明显高于恶性胸腔积液组(P均<0.05);结核性胸腔积液组患者血清中IFN-γ含量明显高于恶性胸腔积液组(P<0.05)。结论胸腔积液中IL-8、TNF-α和IFN-γ联检可能对结核性和恶性胸腔积液之间的鉴别都有较高的临床意义。

重组人粒细胞集落刺激因子调节IL-27和IRF8表达诱导供受者免疫耐受机制的初步研究

目的 rhG-CSF既是造血干细胞动员剂,也是免疫耐受诱导剂,可减轻移植物抗宿主病(GVHD);干扰素调节因子8(IRF8)拮抗小鼠RORγt的作用,可以抑制小鼠初始T细胞向Th17细胞分化;本文旨在研究rhG-CSF动员对IRF8基因表达及蛋白水平、外周血Th17和Treg细胞的比例和Th17分化的负性调控因子IL-27的调节作用。方法 采集10名造血干细胞移植供者rhG-CSF动员前后(第5天)外周血,通过免疫磁珠法分离CD4+T细胞,qRT-PCR及Western blotting检测CD4+T细胞IRF8基因及蛋白水平,流式细胞术检测Th17(CD3+CD8-IL-17+)和Treg细胞(CD4+CD25+Foxp3+)比例,ELISA法检测血清中IL-17及IL-27的浓度。结果 动员前、后外周血外周血单个核中细胞的比例(%):Th17细胞(2.597±1.993)%比(0.355±0.129)%(P<0.01)),Treg细胞(0.468±0.522)%比(1.491±1.216)%(P<0.01);动员前、后IL-17A(pg/ml):(21.75±18.77)pg/ml比(15.53±10.89)pg/ml(P<0.01);动员前、后IL-27(pg/ml):(5 180.06±1 860.75)pg/ml比(3 806.56±1 658.89)pg/ml(P<0.01)。IRF8基因表达在动员后基因表达相对增加1.69倍,IRF8蛋白在动员后比动员前表达显著增加。结论 rhG-CSF抑制供者外周血Th17细胞、促进Treg细胞群分化,诱导免疫耐受,可能与rhG-CSF促进CD4+T细胞中IRF8、IL-27和IRF8负性调控Th17细胞分化有关。

维生素D3辅助治疗小儿支气管哮喘急性发作及对外周血EOS、IRF1、ADAM8的影响

目的研究维生素D3(VD3)辅治小儿支气管哮喘(BA)急性发作及对外周血嗜酸性粒细胞(EOS)、干扰素调控因子1(IRF1)、解整合素样-金属蛋白酶8(ADAM8)的影响。方法前瞻性纳入2021年7月至2023年6月淮安市第二人民医院收治的BA急性发作患儿118例,依据随机数字表法将其分为试验组(n=59)与对照组(n=59)。对照组给予基础治疗+孟鲁司特钠+布地奈德治疗。在对照组基础上,试验组给予VD3治疗。两组均治疗7 d。观察两组临床症状消失时间,治疗前后肺功能指标[第1秒用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)及FEV1/FVC]、外周血炎症因子[白细胞介素(IL)-17、IL-35]水平、外周血EOS、IRF1蛋白、ADAM8蛋白水平。结果试验组胸闷、气促、喘息、肺内哮鸣音及咳嗽消失时间分别为(5.97±0.62)、(3.64±0.38)、(3.58±0.37)、(6.59±0.68)、(7.22±0.77)d,均小于对照组[(6.31±0.65)、(3.87±0.40)、(3.82±0.40)、(6.94±0.73)、(8.30±0.85)d],差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,试验组FEV1、FVC及FEV1/FVC分别为(2.41±0.26)L、(3.24±0.33)L、(74.38±7.55)%,均高于对照组[(2.18±0.24)L、(3.11±0.30)L、(70.09±7.24)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。试验组外周血IL-17水平为(44.55±4.63)pg/mL,低于对照组[(47.33±4.86)pg/mL],IL-35水平为(215.83±23.06)pg/mL,高于对照组[(202.95±21.36)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,试验组外周血外周血EOS水平及IRF1蛋白、ADAM8蛋白水平分别为(0.15±0.02)×10^(9)/L、(1.07±0.12)pg/mL、(1.14±0.13)pg/mL,均低于对照组[(0.16±0.02)×10^(9)/L、(1.14±0.14)pg/mL、(1.21±0.15)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。试验组总有效率为94.92%,高于对照组(81.36%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,两组均无显著不良反应发生。结论VD3辅助治疗小儿BA急性发作可纠正机体免疫炎症反应失衡,缓解气道炎症反应,抑制生成EOS、IRF1、ADAM8,缩短治疗时间,提高肺功能,疗效显著,安全性高。

慢性乙肝患者外周血单个核细胞中CXCR1、CXCR2及IL-8 mRNA表达与干扰素治疗关系

目的:了解乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染患者外周血单个核细胞(PBMC)中CXCR1、CXCR2及IL-8 mRNA表达水平及与α干扰素(IFN-α)治疗的关系。方法:采用实时定量PCR法动态观察30例慢性乙型肝炎患者接受IFN-α治疗前、治疗3个月、6个月后其外周血单个核细胞CXCR1、CXCR2及IL-8 mRNA表达水平。结果:治疗前慢性乙肝患者CXCR1、CXCR2及IL-8 mRNA表达水平分别为(0.44740.0386)、(0.4720 0.0458)、(1.1897 0.1028),均高于正常对照组(n=36),其中CXCR1及IL-8 mRNA水平升高显著,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗过程中CXCR1、CXCR2及IL-8表达水平均显著下降。IFN-α治疗6个月后CXCR1、CXCR2及IL-8 mRNA表达水平分别为(0.41290.0395)、(0.4461 0.0477)、(0.8660 0.1307),与治疗前相比,差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。治疗前的CX-CR1、CXCR2及IL-8的表达水平在HBV高复制组(HBV-DNA>106,n=22)明显高于HBV低复制组(HBV-DNA<106,n=8),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:慢性乙肝患者外周血单个核细胞中CXCR1和IL-8表达水平显著升高,在干扰素治疗后,其表达水平下调,证明其可能与慢性乙肝炎症的发生机制相关。

转录因子IRF8抑制Th17细胞分化并减轻T细胞免疫介导的小鼠结肠炎

目的:转录因子干扰素调节因子(interferon regulatory factor,IRF)家族与Th17的发育密切相关,近年来发现Th17细胞在炎症性肠病的发病中发挥重要作用,本研究探讨IRF8对Th17发育及T细胞转染免疫介导的小鼠实验性肠炎的影响。方法:(1)采用流式细胞术分选野生型(WT)或IRF8全基因敲除(IRF8-/-)小鼠脾脏和淋巴结的naive CD4+T细胞(CD4+CD62L+CD44low),在Th1、Th2或Th17极化的条件下培养,采用流式细胞术检测Th1、Th2和Th17的比例。(2)建立实验性肠炎模型:采用免疫磁珠法分选WT或IRF8-/-小鼠中的脾脏和淋巴结中CD4+CD25+Treg,WT小鼠的CD4+CD45RBhiT细胞单独或者分别联合WT或IRF8-/-小鼠的CD4+CD25+Treg腹腔注射给RAG1-/-小鼠;WT或IRF8-/-小鼠的naive CD4+CD45RBhiT细胞腹腔注射给RAG1-/-小鼠;观察上述小鼠每周体重的变化,第5周时处死小鼠,进行结肠炎病理评分和肠系膜淋巴结T淋巴细胞亚群检测。结果:(1)IRF8-/-较WT的naive CD4+T细胞在极化条件下向Th17细胞分化更明显(P<0.01),而对Th1和Th2细胞的分化无影响(P>0.05)。(2)CD4+CD45RBhiT细胞转染给RAG1-/-小鼠,IRF8-/-较WT供体鼠引起的RAG1-/-小鼠体重显著降低(P<0.05),结肠炎评分显著增高(P<0.05),且肠系膜淋巴结中IL-17+CD4+细胞比例明显增高(P<0.01),而IFN-γ+CD4+和Foxp3+CD4+细胞比例无影响(P>0.05);IRF8-/-小鼠的CD4+CD25+Treg对WT小鼠CD4+CD45RBhiT细胞转染给RAG1-/-小鼠诱发的免疫介导的结肠炎显示出正常的免疫抑制作用。结论:转录因子IRF8基因敲除促进CD4+T细胞向Th17细胞分化,促进转染naive CD4+T细胞诱导的实验性结肠炎的发生,IRF8基因敲除小鼠Treg细胞免疫抑制功能正常。