重组人干扰素-α2a(IFN-α2a)的圆二色谱分析

目的:研究测量温度和蛋白质浓度对重组人干扰素-α 2a(rhIFN-α 2a)圆二色谱的影响,进而研究对 rhIFN-α 2a 二级结构比例的影响。方法:分别研究了测量温度和蛋白质浓度对 rhIFN-α 2a 圆二色谱的影响,另外还对不同厂家、不同批次的4批 rhIFN-α 2a 的圆二色谱进行了比较。结果:测量温度在60～95℃之间,rhIFN-α 2a 圆二色谱的形状发生改变,三级结构遭到破坏,二级结构发生改变;在5～60℃温度区间,二级结构相对稳定。rhIFN-α2a 的各二级结构比例在1.5～0.006nag·mL^(-1)范围内相对稳定。不同厂家、不同批次的4批 rhIFN-α 2a 的圆二色谱形状基本一致,4种二级结构的比例相近。结论:在一定的温度和浓度范围内,rhIFN-α 2a 的圆二色谱相对稳定,且不同批次的测量结果具有很好的一致性。圆二色谱可用于蛋白质类药物的质量控制。

重组人干扰素-α2a对患者宫颈高危型人乳头瘤病毒感染的临床疗效评价

目的:探究重组人干扰素-α2a对患者宫颈高危型人乳头瘤病毒(hr-HPV)感染的临床疗效及其对hrHPV转阴的影响。方法:选取2015年3月—2018年3月期间妇科门诊收治的宫颈高危型hr-HPV感染者60例资料,按照给药的不同将其随机分为观察组和对照组,每组30例;观察组患者给予采用重组人干扰素栓-α2a阴道内给药治疗,对照组患者则给予采用0.9%氯化钠注射液阴道冲洗,治疗8疗程后比较两组患者HPV转阴率、总有效率和用药期间不良反应的发生率差异。结果:观察组患者治疗后的转阴率为73.33%高于对照组为33.33%(P<0.05),总有效率为90.00%高于对照组为56.67%(P<0.05)。结论:重组人干扰素-α2a用于治疗宫颈高HPV感染患者的疗效较确切,有效促进了HPV转阴。

干扰素-α2a对流感病毒感染的MDCK作用的研究

目的探讨干扰素-α2a对甲型流感病毒感染的狗肾传代细胞系(MDCK)的作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察不同浓度(0.01、0.1、1、10、100U/ml)IFN-α2a在H3N2病毒感染MDCK0h、1h和4h后对细胞活性的影响。结果不同浓度的IFN-α2a能抑制正常生长及病毒感染1h、4h后的MDCK的增殖,但能促进病毒感染0h后的MDCK的生长,其中1.0U/ml组与对照组相比有显著差异(P<0.01)。结论IFN-α2a除了可抑制MDCK生长之外,还能促进H3N2感染初期细胞的增殖。

重组人干扰素-α2a栓联合保妇康栓治疗宫颈高危型人乳头瘤病毒感染对HPV DNA负荷量及转阴率的影响

目的观察重组人干扰素-α2a(rhIFN-α2a)栓联合保妇康栓治疗宫颈高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染对HPV DNA负荷量及转阴率的影响。方法选取医院2016年1月-2018年5月收治的宫颈高危型HPV感染患者80例,按随机数表法分为联合组和常规组各40例,常规组实施rhIFN-α2a栓治疗,联合组患者实施rhIFN-α2a栓联合保妇康栓治疗。比较2组临床疗效、创面愈合时间、治疗前后HPV DNA负荷量、HDV转阴率及不良反应发生情况。结果联合组总有效率为97.5%高于常规组的80.0%,差异有统计学意义(χ~2=6.135,P<0.05)。联合组患者的创面愈合时间(5.7±0.8)d短于常规组的(7.7±1.5)d,差异有统计学意义(t=15.811,P<0.01)。治疗前2组HPV DNA负荷量比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后2组HPV DNA负荷量均低于治疗前,且联合组低于常规组,治疗后联合组HPV转阴率高于常规组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(χ~2=0.213,P>0.05)。结论 rhIFN-α2a栓联合保妇康栓治疗宫颈高危型HPV感染可降低HPV DNA负荷量,促进HPV转阴。

重组人干扰素-α2a栓与保妇康栓对慢性宫颈炎患者伴高危型人乳头瘤病毒感染的临床疗效评价

目的:评价重组人干扰素-α2a栓与保妇康栓联用对慢性宫颈炎患者伴高危型人乳头瘤病毒(Human papilloma virus,以下简称HPV)感染的临床疗效。方法:选取2015年9月—2016年9月期间收治的慢性宫颈炎伴高危型HPV感染患者80例资料,将其随机分为对照组和观察组,每组40例;对照组患者给予保妇康栓治疗,观察组患者给予重组人干扰素-α2a栓与保妇康栓联用治疗,比较两组患者治疗后的总有效率以及治疗1、3月后的HPV-DNA转阴率的差异。结果:观察组患者治疗后的总有效率为92.50%高于对照组为80.00%(P<0.05),治疗1、3月后的HPV-DNA转阴率分别为55.00%和87.50%均高于对照组为22.50%和40.00%(P<0.05)。结论:重组人干扰素-α2a栓与保妇康栓联用对慢性宫颈炎患者伴高危型HPV感染的临床疗效较为显著,且治疗1、3月后患者的HPV-DNA转阴率较高。

聚乙二醇干扰素-α2a与利巴韦林联用对慢性丙型肝炎患者的疗效及其对肝功能和纤维化指标水平的影响

目的:评价聚乙二醇干扰素-α2a与利巴韦林联用对慢性丙型肝炎(chronic hepatitis C,以下简称CHC)患者的疗效及其对肝功能和纤维化指标水平的影响。方法:选取2017年5月—2018年5月期间收治的CHC患者80例资料,将其随机分为观察组与对照组(每组40例);对照组患者给予单用聚乙二醇干扰素-α2a治疗,观察组患者在对照组基础上加用利巴韦林治疗,比较两组患者治疗后的总有效率的差异,以及治疗前后血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)与层黏连蛋白(LN)水平测得值的变化情况。结果:观察组者治疗后的总有效率高于对照组(P<0.05);治疗前两组患者的AST、ALT、HA、PCⅢ、Ⅳ-C与LN水平测得值经组间比较其差异均无统计学意义(P>0.05),治疗后的AST、ALT、HA、PCⅢ、Ⅳ-C与LN水平测得值均低于治疗前(P<0.05);观察组患者治疗后的AST、ALT、HA、PCⅢ、Ⅳ-C与LN水平测得值均低于对照组(P<0.05)。结论:聚乙二醇干扰素-α2a与利巴韦林联用治疗CHC患者的疗效较为确切,有效改善了患者肝功能及纤维化指标水平。

干扰素-α2a对肾综合症出血热越期治疗的观察

肾综合症出血热(HFRS)发病急,变化快,病情凶险,尤其是低血压休克与少尿期严重危及患者的生命.临床观察及文献资料证实HFRS越期治疗,即通过对抗病毒血症及免疫损伤,减轻了重要脏器的损害,降低了死亡率,缩短了病程,为此,我们选用干扰素-α2a与病毒唑(又名三氮唑核苷)治疗HFRS各43例,现分析如下:

小剂量干扰素-α2a外用液对口腔黏膜单纯疱疹病毒感染患者的临床疗效评价

目的:评价小剂量干扰素-α2a外用液对口腔黏膜单纯疱疹病毒感染患者的临床疗效。方法:选取2015年1月—2016年1月期间在医院接受治疗的口腔黏膜单纯疱疹病毒感染患者96例,按入院时间将其分为对照组和观察组,每组48例;对照组患者给予常规治疗,观察组患者在对照组治疗的基础上加用小剂量干扰素-α2a外用液治疗,评价两组患者治疗后的总有效率、不良反应的发生率以及症状复常时间。结果:观察组患者治疗后的总有效率为95.83%高于对照组为81.25%(P<0.05),用药期间不良反应的发生率为6.25%低于对照组为20.83%(P<0.05),口腔疼痛、红肿、溃疡等症状复常时间均短于对照组(P<0.05)。结论:小剂量干扰素-α2a外用液对口腔黏膜单纯疱疹病毒感染的临床疗效显著,其具有较高的安全性,且能促使患者的口腔症状快速消失。

亚低温干预通过改善线粒体功能抑制干扰素-α2b诱导的人心肌细胞AC16凋亡

目的:分析亚低温在Ⅰ型干扰素(干扰素-α2b)诱导的人心肌细胞AC16凋亡过程中的作用及分子机制。方法:不同浓度的干扰素-α2b在不同时间点刺激人心肌细胞AC16,CCK-8检测心肌细胞增殖;流式细胞仪检测干扰素-α2b刺激心肌细胞后常温、亚低温对细胞的影响;线粒体Mito-Tracker绿色荧光探针染色激光共聚焦成像观察线粒体形态的变化;流式细胞仪检测不同干预条件下线粒体膜电位变化情况;通过线粒体Mito-Tracker绿色荧光探针染色激光共聚焦成像评估线粒体动力相关蛋白1(Drp1)与线粒体的共定位情况及不同干预条件对线粒体的影响;使用蛋白免疫印迹法检测不同干预条件下,磷酸化Drp1 Ser616、Drp1、核酶多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1(PARP1)、剪切型PARP1(cleaved-PARP1)蛋白表达变化。结果:CCK-8及流式细胞仪检测发现干扰素-α2b抑制AC16细胞增殖,并可诱导AC16细胞凋亡,亚低温干预发挥心肌保护作用;不同干预条件下,AC16细胞线粒体损伤程度不一,表现为亚低温干预细胞具有较好的线粒体形态和更高的线粒体膜电位;Mito-Tracker绿色荧光探针检测发现心肌细胞损伤时Drp1从胞浆转移至线粒体中参与线粒体分裂,且亚低温干预发挥抑制作用;蛋白免疫印迹法检测发现亚低温干预后磷酸化Drp1 Ser616/Drp1和cleaved-PARP1/PARP1显著降低,且线粒体分裂抑制剂1(Mdivi-1)预处理可部分逆转上述现象。结论:亚低温干预通过改善线粒体功能抑制Ⅰ型干扰素-α2b诱导的人心肌细胞AC16凋亡。

恩替卡韦联合聚乙二醇干扰素-α2b治疗代偿期乙型肝炎肝硬化患者疗效研究

目的探讨应用恩替卡韦(ETV)联合聚乙二醇干扰素-α2b(Peg-IFN-α2b)治疗乙型肝炎肝硬化患者的近期疗效。方法2019年3月~2021年3月安徽医科大学附属巢湖医院诊治的代偿期乙型肝炎肝硬化患者78例,被随机分为对照组40例和观察组38例,分别给予ETV或ETV联合Peg-IFN-α2b治疗24 w,然后两组均继续接受ETV治疗,随访至48 w。常规检测肝功能指标、血清肝纤维化指标、血清HBV标志物定量和HBV DNA载量。结果在随访24 w末,观察组血清白蛋白水平为(45.7±3.2)g/L,显著高于对照组【(38.5±4.3)g/L,P<0.05】;观察组血清IV-C、HA、PⅢP和LN水平分别为(154.3±11.7)μg/L、(130.9±17.5)μg/L、(110.6±16.2)μg/L和(152.7±14.3)μg/L,均显著低于对照组【分别为(200.7±12.4)μg/L、(161.8±18.7)μg/L、(157.4±17.3)μg/L和(200.9±16.3)μg/L,P<0.05】;观察组血清HBsAg水平为1363.8(623.1,2767.6)IU/ml,显著低于对照组【2119.6(1144.9,5094.3)IU/ml,P<0.05】,而血清HBsAg阴转率为15.8%,显著高于对照组的0.0%(P<0.05)。结论联合应用ETV和Peg-IFN-α2b治疗代偿期乙型肝炎肝硬化患者可改善血清肝纤维化指标,提高血清HBsAg阴转率,可能有助于病情恢复。

聚乙二醇干扰素-α2b治疗骨髓增殖性肿瘤的疗效及安全性

目的评价聚乙二醇干扰素-α2b对慢性骨髓增殖性肿瘤患者的临床疗效及不良反应。方法回顾性分析107例慢性骨髓增殖性肿瘤病例,其中包括95例原发性血小板增多症(ET),12例真性红细胞增多症(PV),接受聚乙二醇干扰素-α2b治疗12月以上,分析其临床数据,评价疗效和不良反应。结果接受聚乙二醇干扰素-α2b治疗后,ET及PV患者均获得较高的血液学缓解率(P<0.05),ET与PV治疗组间缓解率差异无统计学意义(0.86 vs 0.78,P>0.05),脾脏长厚径(脾脏指数)下降13.5%(95%CI:8.5%~18.5%),获得血液学缓解的患者MPN10评分下降较为显著(P<0.01)。PV患者JAK2V617F等位基因突变负荷中位值由67.23%(49.6%~84.86%)下降至19.7%(0.57%~74.6%)(P<0.05);ET患者JAK2V617F突变定量阳由48.97%(0.45%~74.24%)下降至22.1%(0.33%~65.42%)(P<0.05)。ET和PV患者观察到轻微不良反应(1-2级),差异无统计学意义。治疗期间血栓事件发生率为2.8%。未观察到严重不良反应。结论聚乙二醇干扰素-α2b治疗PV和ET获得较高的外周血细胞缓解率,具有缩脾疗效,并降低JAK2V617F基因突变负荷,不良反应轻微,多数患者可耐受。

聚乙二醇干扰素ɑ-2a联合利巴韦林治疗儿童慢性丙型肝炎疗效及不良反应观察

目的：总结观察聚乙二醇干扰素-α2a （ PEG IFN α-2a，派罗欣）联合利巴韦林（ RBV）治疗124例儿童慢性丙型肝炎的疗效及不良反应。方法：所有患儿均给予PEG IFNα-2a和RBV治疗，疗程24～48周。分别在治疗前、治疗后4周、12周、24周、36周、48周、治疗结束后12周及24周，检测患儿血清HCV RNA、血常规、肝肾功能、甲状腺功能5项等，观察疗效及不良反应情况。结果：124例中有121例患儿在治疗4周时即获得快速病毒学应答（RVR）， HCV RNA已转阴，占97.6％；123例患儿在治疗12周时获得早期病毒学应答（EVR）占99.2％；延迟病毒学应答（DVR）0例；完成全程治疗者占98.4％（122/124）。治疗结束后12周复查114例， HCV RNA继续为阴性，治疗结束后24周时复查86例，均获得持续病毒学应答（SVR）；另有无应答（NR）1例0.8％（1/124）；治疗中反弹（BT）1例0.8％（1/124）；治疗后复发0例。主要不良反应为血常规异常、消化道症状、流感样症状、其他病症及精神异常，发生过暂时性的严重不良反应者共10例占8.1％（10/124）。结论： PEG IFNα-2a联合RBV治疗儿童慢性丙型肝炎疗效高、安全性尚好，复发率甚低。对发生的不良反应及时处理，以保证治疗顺利完成。

探讨重组人干扰素-α2b凝胶联合保妇康栓治疗宫颈HPV感染患者疗效及对HPV转阴的影响

目的探讨重组人干扰素-α2b凝胶联合保妇康栓治疗宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染患者疗效及对HPV转阴的影响。方法选取60例宫颈HPV感染患者,根据治疗方法不同分为对照组(采用重组人干扰素-α2b凝胶治疗)与研究组(采用重组人干扰素-α2b凝胶联合保妇康栓治疗),各30例。比较两组临床效果、HPV转阴率。结果治疗后研究组总有效率(93.33%)高于对照组(73.33%),差异具有统计学意义(P<0.05);治疗结束1周后,研究组HPV转阴27例,转阴率为90.00%(27/30);对照组HPV转阴20例,转阴率为66.67%(20/30)。研究组HPV转阴率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈HPV感染患者采用重组人干扰素-α2b凝胶联合保妇康栓治疗,有助于提高HPV转阴率,疗效显著。

聚乙二醇化干扰素α-2a治疗慢性乙型肝炎2例报道及文献复习

目的:观察2例接受聚乙二醇化干扰素α-2a治疗慢性乙型肝炎患者的临床疗效及安全性。方法:对2例慢性乙型肝炎患者采用聚乙二醇干扰素α-2a单药治疗,治疗过程中定期检测血常规、乙肝五项、HBV-DNA及肝功能指标。结果:例1治疗至12周出现HBeAg阴转,48周实现HBeAg血清学转换,同时HBV-DNA阴转;例2治疗至6周HBV-DNA阴转,12周HBsAg阴转,24周HBsAg血清学转换。结论:聚乙二醇化干扰素α-2a能够在有限的疗程调动免疫反应,获得血清e/s抗原的清除或转换,达到免疫控制,是治疗慢性乙型肝炎的重要治疗手段。

雾化给药对重组人干扰素-α2b生物活性和分子结构的影响

目的:评估雾化吸入给药对重组人干扰素-α2b(rhIFN-α2b)生物活性和分子结构的影响。方法:采用病毒抑制法检测rhIFN-α2b的生物活性,通过比较雾化前后rhIFN-α2b生物活性的变化分析空气射流对其生物活性的影响。采用高效液相色谱(HPLC)法和十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法分析干扰素分子结构的改变。结果:雾化给药不会造成rhIFN-α2b蛋白质肽键断裂,但是空气射流会造成二硫键断裂,断裂比例与雾化前rhIFN-α2b浓度有关,600万IU/m L、300万IU/m L和100万IU/m L rhIFN-α2b雾化后纯度分别为82.9%、90.1%和94.9%。600万IU/m L rhIFN-α2b溶液雾化后17.1%的rhIFN-α2b分子出现二硫键的断裂,其中0.5%的rhIFN-α2b分子出现双二硫键断裂,雾化后喷雾壶内未完全汽化的剩余液中rhIFN-α2b的生物活性保留率为98.2%,雾化后收集的凝集液中rhIFN-α2b的生物活性保留率为96.1%。结论:rhIFN-α2b能以雾化状态稳定传输给药,生物活性基本保留。雾化后绝大部分rhIFN-α2b分子结构保持完整,少数分子出现单个或双二硫键断裂,为了尽量减少rhIFN-α2b分子的损耗,临床上雾化吸入rhIFN-α2b的浓度不应超过100万IU/m L。

干扰素-α2b对慢性髓系白血病抗血管生成作用的体外研究

本研究旨在应用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)及K562细胞探讨干扰素-α2b在慢性髓系白血病(CML)中抗血管生成作用。用ELISA法检测K562细胞系培养上清液中VEGF和bFGF水平;应用real-time RT-PCR法检测103、102、10U/ml IFN-α2b作用K562细胞24、36、48小时VEGF、bFGF mRNA的表达;通过MTT法、Transwell室及体外微管形成实验研究K562细胞培养上清液及IFN-α2b对HUVEC增殖、迁移及体外分化的影响。结果表明:K562细胞系表达和分泌VEGF和bFGF,细胞培养上清液能明显促进HUVEC的增殖、迁移、体外微管形成,其作用随着细胞培养上清液浓度的增加而增强;IFN-α10U/ml作用K562细胞24、36、48小时,VEGF相对表达量为1.64±0.18、1.49±0.14、1.31±0.05,bFGF相对表达量分别为1.53±0.10、1.29±0.15、0.79±0.13(p=0.002),随着药物浓度增高,细胞VEGF、bFGF相对表达量无明显差异。结论:CML存在血管新生,K562细胞分泌和表达促血管新生因子VEGF和bFGF,促进HUVEC的增殖、迁移、体外微管形成,干扰素通过抑制HUVEC的增殖、迁移、微管形成,下调K562细胞VEGF和bFGF mRNA表达,具有一定程度的抗血管新生作用。

乙型肝炎病毒基因型与干扰素-α2b疗效的关系

目的研究乙型肝炎病毒基因型与干扰素-α2b治疗疗效的关系。方法采用DNA测序法对222例慢性乙型肝炎患者进行HBV基因分型。其中106例接受干扰素-α2b治疗6个月,观察治疗后应答率与基因型的关系。结果在106例接受干扰素-α2b治疗的患者,C基因型患者肝组织学改变明显重于B基因型。在6个月治疗结束时,B型感染者HBVDNA阴转、HBeAg血清转换和ALT复常率分别为41.9%,38.7%和58.1%,均显著高于C型患者(P<0.05)。结论HBV基因型与肝损害程度及对干扰素-α2b的应答率有一定的关系。

突变人干扰素-α2b基因5′端提高其在大肠杆菌中的表达

目的对人干扰素-α2b(hIFN-α2b)基因的5′端进行突变,构建重组人干扰素-α2b(rhIFN-α2b)原核高表达工程菌,以提高rhIFN-α2b的表达水平。方法依据大肠杆菌密码子偏好性,在不改变hIFN-α2b的氨基酸序列的情况下,定点突变hIFN-α2b基因5′端序列并PCR扩增出rhIFN-α2b′,克隆至温控型表达载体pJW2,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性重组子,温度诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE、Western blot鉴定分析并以WISH-VSV系统检测其抗病毒活性。结果SDS-PAGE分析表明rhIFN-α2b表达量约占菌体总蛋白20.6%,Western blot表明rhIFN-α2b具有与hIFN-α2b相同的免疫原性,WISH细胞-VSV病毒系统证实其比活性达1.2×108IU/mg,与未突变工程菌一致。结论突变hIFN-α2b基因5′端可以提高其表达水平,并成功构建出rhIFN-α2b原核高表达工程菌。

中药益肾消结方联合白介素-2和干扰素-α2b治疗Ⅲ/Ⅳ期肾细胞癌的疗效分析

目的评价中药益肾消结方联合白介素-2(IL-2)和干扰素-α2b(IFN-α2b)治疗Ⅲ/Ⅳ期肾细胞癌的临床疗效。方法将40例Ⅲ/Ⅳ期肾细胞癌患者随机分为2组,每组20例。治疗组接受益肾消结方联合IL-2和IFN-α2b进行治疗,对照组单纯接受IL-2和IFN-α2b进行治疗。治疗2个疗程后,比较2组患者的近期疗效,常见症状及Karnofsky评分的变化,以及治疗前后细胞免疫功能(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)及神经特异性烯醇化酶(NSE)、铁蛋白(FERR)、β2微球蛋白(β2 MG)、癌胚抗原(CEA)等肿瘤指标的变化。结果治疗后,治疗组倦怠乏力及食少纳呆改善明显优于对照组,且症状有效率显著高于对照组。治疗后,2组患者Karnofsky评分均明显升高,但治疗组升高程度显著大于对照组。2组NSE及β2 MG水平均较治疗前明显降低,而治疗组治疗后NSE水平显著低于对照组。此外,治疗后治疗组CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平升高程度显著大于对照组,且CD8+水平降低程度明显小于对照组。结论中药益肾消结方联合IL-2和IFN-α2b能缓解Ⅲ/Ⅳ期肾细胞癌患者的临床症状,提高细胞免疫功能,改善体力状况,提高生命质量。