诱导多能干细胞来源自然杀伤细胞的生物学特性

目的:利用诱导多能干细胞(iPSCs)建立体外扩增分化体系并进一步诱导分化为自然杀伤(NK)细胞。探讨iPSCs来源分化体系诱导分化来的NK细胞的生物学特性。方法:获取iPSCs,通过流式细胞术检测细胞分化功能的水平。结果:iPSCs经扩增和筛选,最后获得了可稳定未分化增殖的iPSCs,利用iPSCs成功分化NK细胞。结论:利用iPSC源分化体系成功在体外诱导出NK细胞,可产生大于90%CD45^(+)CD56^(+)细胞,有统计学差异(P<0.05)。NK细胞分化基本完全完成。其免疫表型的比例差异提示iPSCs-NK细胞具有不同的生物学特性。

当代生命科技的身体伦理学反思——以干细胞、脑科学和合成生物学为例

身体,因兼具工具理性和价值理性,成为生命伦理学回应前沿生物技术伦理挑战的新视角、新理论,特别是具有趋前属性的身体伦理学,为伦理学研究提供了未来想象。譬如,生殖干细胞技术,可能引起技术关系取代性别关系,造成社会权力结构变革;大脑类器官可能造成意识数字化,进而生命变得可读、可编码、可篡改,最终引发意识形态革命;合成生物学可能造成人类“神性尊严”消失、“世俗尊严”丧失,最终走向“技术尊严”的道德异化。总之,回应生物技术的道德诘难,生命伦理学必须以技术的想象为边界,而这个边界正建立在身体体验之上。

负载骨形态发生蛋白-2(BMP-2)对牙周干细胞生物学活性的影响

该探讨旨在理解骨形态发生蛋白-2(BMP-2)负载对牙周干细胞的生物活性影响。方法 实验研究,通过对比阿尔丁紫(ALP)染色结果、BMP-2、Runx2、DSPP和BSP数字符串的表达,以及蛋白表达水平,对照组、单纯诱导组与抑制剂组之间的差异被使显明。结果 单纯诱导组相较对照组,在ALP染色结果、mRNA数串以及蛋白表达水平上,可见一明显的提升(*P<0.05)。抑制剂组虽在这些指标上的表现未达单纯诱导组的水平(**P<0.05),但仍高出对照组(*P<0.05)。结论 综合研究结果表明,负载骨形态发生蛋白-2(BMP-2)能显著提高牙周干细胞的生物学活性,包括ALP活性、BMP-2、Runx2、DSPP和BSP的表达水平及其蛋白表达。然而抑制剂可以部分抑制其活性。这些发现为牙周病的治疗提供了新的研究依据。

骨骼肌中卫星细胞衰老生物学机制及潜在的应对策略

背景:卫星细胞是一种肌源性干细胞,位于肌纤维膜与基底膜之间,但尚未有综述完全揭示卫星细胞衰老机制及其潜在应对策略,这对于当前减缓骨骼肌老化的策略应用难以起到有效的指导效果。目的:综述骨骼肌中卫星细胞衰老的机制及其相关减缓其衰老的应对策略。方法:检索各数据库时间截至2023年5月,包括Web of Science、PubMed、中国知网、万方和维普数据库。英文检索词:“Skeletal muscle,satellite cells,aging,mechanism,solution strategye”;中文检索词:“骨骼肌,卫星细胞,衰老,老化,机制,应对策略”。经过严格按照纳入和排除标准进行筛选,最终纳入78篇文献进行综述分析。结果与结论:①卫星细胞位于肌纤维膜与基底膜之间,具有增殖和分化潜能,通常处于静息状态,但在肌肉组织受刺激时会被激活并参与修复和恢复正常组织结构的过程,衰老会导致卫星细胞数量减少,并引发肌力和耐力的下降等症状。②卫星细胞衰老的机制主要涉及再生能力下降、串扰能力随生态位变化、年龄依赖性损失和异质性变化,衰老的卫星细胞数量减少以及活性降低会导致肌肉再生速度变慢和损伤恢复时间增加,且在分化过程中可能出现错误,从而导致肌肉质量下降和功能退化。③针对卫星细胞衰老的应对策略主要包括调节体内卫星细胞的受体环境、外源手段干预促进卫星细胞再生、人体肌肉模型构建和运动和饮食干预诱导卫星细胞增殖等,这些策略具有一定的潜力,可以为卫星细胞的再生和治疗骨骼肌疾病提供新的思路和方法。④未来的研究建议深入探究卫星细胞衰老机制,探究卫星细胞与生态位之间的相互作用,研究卫星细胞与免疫系统和线粒体功能等因素的关系,开发应用人体肌肉模型来提高研究深度和准确性。

基于胚胎干细胞模型的Cry1Ab蛋白发育毒性

目的:通过胚胎干细胞发育毒性评价模型研究Cry1Ab蛋白对于细胞增殖和分化能力的影响,以评估其发育毒性。方法:设置Cry1Ab蛋白7个剂量组(31.25、62.50、125.00、250.00、320.00、1 000.00、2 000.00μg/L),以5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)为阳性对照,以磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline, PBS)为溶剂对照,分别处理小鼠胚胎干细胞D3(embryonic stem cell line D3,ES-D3)和小鼠成纤维细胞3T3。通过CCK-8法检测细胞活性,计算受试物对于不同细胞的增殖半抑制浓度(50%inhibition concentration of growth and viability, IC_(50))。设置Cry1Ab蛋白5个剂量组(125.00、250.00、320.00、1 000.00、2 000.00μg/L),设置溶剂对照(PBS),同时以5-FU为受试物进行模型验证,分别处理细胞后,通过拟胚胎体(embryonic bodies, EBs)培养法诱导ES-D3分化出心肌细胞;镜下观察EBs生长情况并测量其第3天和第5天的直径,观察并记录同批次EBs分化出搏动心肌细胞的比例,计算受试物的心肌分化半抑制浓度(50%inhibition concentration of differentiation, ID50),根据发育毒性判别函数对受试物的胚胎发育毒性进行分类;收集培养终点的EBs样本,进行实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative po-lymerase chain reaction, qPCR),检测心肌分化相关标志物(Oct3/4、GATA-4、Nkx2.5和β-MHC)的mRNA表达情况。结果:5-FU的IC_(50,3T3)为46.37μg/L,IC_(50,ES)为32.67μg/L,ID_(50,ES)为21.28μg/L,根据判别函数结果将5-FU分类为强胚胎毒性物质。不同浓度的Cry1Ab蛋白处理组的3T3细胞和ES-D3细胞活性与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,Cry1Ab蛋白处理组分化第3天和第5天的EBs直径差异无统计学意义(P>0.05),EBs形态也未见明显差异;不同浓度Cry1Ab蛋白处理组的心肌分化率与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。5-FU使β-MHC、Nkx2.5和GATA-4的mRNA表达水平降低(P<0.05),且具有剂量依赖趋势(P<0.05),而与细胞多能性相关的标志物Oct3/4 mRNA表达水平则呈升高趋势(P<0.05);Cry1Ab蛋白处理组的成熟心肌标志物β-MHC、心肌早期分化标志物Nkx2.5和GATA-4、多能性相关标志物Oct3/4的mRNA表达水平与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:本实验模型中未观察到31.25~2 000.00μg/L的Cry1Ab蛋白具有发育毒性。

椎间盘退变干细胞生物学修复的临床研究进展与挑战

椎间盘退变(IDD)是多数脊柱退变性疾病共同的病理基础,是下腰痛最主要的致病因素。以间充质干细胞(MSCs)为基础的生物学修复为IDD的治疗提供了新思路。近年来临床应用MSCs治疗IDD取得了良好的疗效。该文就IDD干细胞生物学修复的临床研究现状、所面临的问题和挑战及潜在的突破点进行述评,为IDD干细胞生物学修复的临床研究提供参考。

利用胚胎干细胞骨分化实验评价Cry1Ab蛋白的发育毒性

目的通过小鼠胚胎干细胞骨分化实验研究Cry1Ab蛋白对胚胎干细胞成骨分化过程的影响,以评估Cry1Ab蛋白的发育毒性。方法以Cry1Ab蛋白为受试物,设置5个剂量(125,250,320,1000,2000 ng/ml)染毒小鼠胚胎干细胞形成的拟胚胎体(embryonic body,EB),设置溶剂对照和阳性对照,同时向培养基中添加β-甘油磷酸盐(10 mmol/L)、抗坏血酸(50μg/ml)和维生素D3(500μmol/L)诱导EB向骨细胞分化,通过茜素红S染色和吸光度检测确定骨细胞钙化结节生成情况;收集EB制备细胞裂解液,通过BCA法测量细胞总蛋白浓度,采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)检测试剂盒检测细胞裂解液中ALP活性;收集EB样本提取总RNA,通过qPCR检测骨细胞分化相关标志物Runx2、SPARC和I型胶原的基因表达情况。结果与对照组相比,不同浓度Cry1Ab蛋白处理组的EB细胞团大小、钙化结节数量无统计学差异(P>0.05);Cry1Ab蛋白各浓度组的细胞总蛋白浓度和ALP活性与对照组相比无统计学差异(P>0.05);Cry1Ab蛋白各浓度组的Runx2、SPARC和I型胶原基因表达水平与对照组相比均无统计学差异(P>0.05)。结论本次试验中,未观察到Cry1Ab蛋白对小鼠胚胎干细胞成骨分化过程产生影响,125~2000 ng/ml的Cry1Ab蛋白不具有发育毒性。

间充质干细胞治疗早产儿支气管肺发育不良研究进展

支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)是一种常见于早产儿的慢性呼吸系统疾病,对于早产儿的生命健康有着巨大的威胁,并对患儿神经系统等各个系统发育有着不良影响。随着新生儿重症监护技术的不断发展,极低出生体质量儿及超低出生体质量儿的存活率不断上升,BPD的发病率也随之升高,然而早产儿BPD的预防、治疗和管理仍然是一大难题.

小鼠骨髓和鹿茸来源间充质干细胞基本生物学特征比较

为研究塔里木马鹿茸间充质干细胞(MSCs)的生物学特征,本试验对来源于小鼠骨髓和塔里木马鹿茸的2种MSCs进行了体外培养,检测比较了其生长曲线;同时利用光学显微镜和透射电镜对细胞形态特征、结构、细胞器组成和数量进行观察对比。研究发现鹿茸MSCs体外培养呈“S”形生长趋势,增殖速度极显著高于小鼠BMSCs(P<0.01)。鹿茸MSCs形态呈梭形,排列规律,形态均一;小鼠BMSCs形态不规则,呈三角形,多边形;鹿茸MSCs胞体、胞核面积分别为963.053μm^(2)和134.093μm^(2),极显著高于小鼠BMSCs的551.026μm^(2)和79.938μm^(2)(P<0.01);鹿茸MSCs的核质比为0.167,显著低于小鼠BMSCs的0.206(P<0.05);超微结果显示鹿茸MSCs胞体面积较大,细胞器种类简单,线粒体、内质网等细胞器形态具备早期幼稚细胞发育特征。塔里木马鹿茸MSCs增殖能力高于小鼠BMSCs,在开发利用方面具备更广泛的优势。

大耳白兔骨髓间充质干细胞的分离培养与生物学鉴定

骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)来源于发育早期的中胚层和外胚层,作为干细胞中的种子细胞,具有强大的自我复制和更新能力,并对治疗、修复、补充受损或缺损的肝、肌肉等组织有修复和治疗作用。为了研究BMSCs的生物学特性和多化潜能,对日本大耳白兔BMSCs进行体外分离培养及生物学鉴定研究。取日本大耳白胎兔骨髓组织,采用全骨髓贴壁法分离纯化、体外培养,鉴定日本大耳白兔BMSCs生物学特性,并进行细胞形态学观察、生长动力学检测及其成骨、成软骨、成脂肪能力鉴定。结果表明,采用全骨髓贴壁法成功从日本大耳白胎兔骨髓中分离得到生长状态良好的大耳白兔BMSCs,细胞形态为长梭形,生长曲线呈典型“S”形;免疫荧光和RT-PCR结果显示,大耳白兔BMSCs表达CD29、CD44、CD73、CD105间充质干细胞表面标记物基因,但不表达原始造血祖细胞标志物CD45;经特异性染色和RT-PCR分析表明,分离的细胞是间充质干细胞;体外诱导大耳白兔BMSCs能够分化为骨骼细胞、软骨细胞、脂肪细胞。建立了大耳白兔BMSCs体外分离培养体系,为利用骨髓间充质干细胞进行组织与工程学研究和动物遗传资源保存研究奠定了一定的理论基础。

不同无血清培养体系对人脐带间充质干细胞生物学功能的影响

目的 探讨3种不同无血清培养体系对人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)体外培养的生物学功能的影响。方法 取3株脐带组织,各分3组实验组,经贴壁法分别置于3组不同无血清培养体系(A组:纯化学成分合成的无血清培养体系,B组:血小板裂解物+基础培养基的无血清培养体系,C组:纤维蛋白原包被+含重组人蛋白质的无血清培养体系)中培养至第3代,比较其细胞增殖能力、细胞表型、三系分化能力以及免疫调节功能。结果 3组实验组细胞均呈长而扁平的梭形,贴壁生长,大小均一。其增殖曲线趋势相似,A组和B组P2、P3代次的增殖能力优于C组(P均<0.05)。3组实验组细胞均符合国际干细胞协会对hUC-MSC细胞表面标志物鉴定的要求,A组和B组P3代次的CD29和CD90的表达量均高于C组(P均<0.05),并且3组实验组均具有三系分化能力。3组实验组中P3代次的T淋巴细胞增殖率、Th1和Th17细胞亚群分泌的细胞因子比例均低于对照组,调节性T细胞(CD4+CD25+FOXP3+)比例均高于对照组,而3组实验组之间两两比较差异无统计学意义(P均> 0.05)。结论 3种不同无血清培养体系的hUC-MSC均能保持其基本的生物学特性和免疫调节活性,纯化学成分合成的无血清培养体系和血小板裂解物+基础培养基的无血清培养体系的增殖能力和细胞表面标志物表达均优于纤维蛋白原包被+含重组人蛋白质的无血清培养体系。

长白猪骨髓和脂肪间充质干细胞复制性衰老过程中生物学特性和抗氧化损伤能力的比较

为研究对比长白猪骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)和脂肪间充质干细胞(adiposederivedmesenchymalstemcells,AMSCs)在体外衰老过程中的生物学特性和抗氧化损伤能力,分别利用贴壁筛选法、Ⅰ型胶原酶消化法分离获得BMSCs和AMSCs,利用流式细胞术鉴定细胞,EdU检测细胞增殖能力,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测基因表达,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)染色检测细胞衰老情况,油红O和茜素红染色检测细胞的成脂和成骨分化能力,TUNEL检测细胞的凋亡情况.分离的BMSCs和AMSCs均高表达CD44和CD90,不表达CD45和CD34.与AMSCs相比,P8代BMSCs增殖能力强,OCT4和Ki67表达高,β-gal阳性细胞数少,成骨分化能力高.但在成脂分化能力方面,AMSCs强于BMSCs.进一步发现H_(2)O_(2)处理P8代细胞时,AMSCs比BMSCs对氧化损伤更敏感,细胞凋亡率显著增加,究其原因可能与抗氧化损伤基因表达的显著降低有关.

低氧条件下颌骨骨髓间充质干细胞生物学活性及长链非编码RNAs表达谱差异的分析

背景近年来,颌骨骨髓间充质干细胞(jaw bone marrow-derived mesenchymal stem cell,JBMMSCs)以其优秀的生物学特性备受瞩目。低氧作为一种常见的微环境,在增强JBMMSCs抗性方面发挥的作用尚未见报道,值得探究。目的探索低氧对JBMMSCs生物学活性的影响以及低氧处理JBMMSCs后差异表达的长链非编码RNA(long noncoding RNAs,lncRNAs)及mRNAs,为进一步探究lncRNAs在调控JBMMSCs生物学性能中的作用机制提供理论基础。方法从C57BL/6N小鼠下颌骨中分离培养JBMMSCs并对其进行鉴定。利用50μmol/L氯化钴(CoCl_(2))培养JBMMSCs,建立JBMMSCs低氧细胞模型,以常氧条件下细胞为对照,通过免疫荧光、Western blot检测低氧诱导因子-1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)的表达情况,对细胞模型进行验证。在此基础上,区分低氧和常氧组,通过CCK-8、细胞划痕实验及Ki67免疫荧光染色观察低氧对JBMMSCs增殖、迁移等的影响。对低氧及常氧条件下的JBMMSCs进行高通量测序,以|log2FC|≥1且P<0.05为筛选标准,筛选差异表达的lncRNAs和m RNAs,并对其生物学功能和作用机制进行预测。结果从小鼠下颌骨中提取的JBMMSCs呈长梭形、漩涡状生长,经鉴定符合间充质干细胞特点。采用50μmol/L CoCl_(2)处理72 h后低氧标记物HIF-1α表达较对照组升高(P=0.0023)。CCK-8和Ki67免疫荧光染色结果显示,低氧可促进JBMMSCs的增殖能力(P=0.0057)。细胞划痕实验结果显示,低氧可增强JBMMSCs迁移能力(P=0.0040)。利用高通量测序技术,筛选出低氧条件下12个差异表达的lncRNAs,其中4个表达上调,8个表达下调。利用生物信息学分析对差异最为显著的lncRNA-4632427E13Rik的下游miRNAs和靶基因进行预测,初步形成lncRNA-miRNA-mRNA互作网络。通过GO和KEGG分析发现,低氧处理后可显著富集到14条信号通路,并且其中多条信号通路可能与调控干细胞增殖分化和可塑性维持相关。结论低氧可促进JBMMSCs的增殖、迁移等能力,预测lnc-4632427E13Rik可能在低氧调控JBMMSCs生物学性能过程中发挥作用。

基于骨髓间充质干细胞分离培养的原代细胞培养技术在细胞生物学实验课程中的应用和思考

细胞是生命活动的基本结构和功能单位,细胞生物学各项研究的开展都离不开细胞。细胞培养是开展细胞生物学研究的基础,也是生物学最基本的实验操作技术之一。原代细胞培养是获取细胞的主要手段,将基于骨髓间充质干细胞分离培养的原代培养技术纳入细胞生物实验课程中,可以加深学生对骨髓间充质干细胞多潜能性分化的认识,巩固学生培养细胞的科研能力,激发学生的多元实验设计思维和开展综合性创新实验的动力。

黄芪甲苷对高糖受损间充质干细胞生物学功能和分泌HGF的影响

目的:探讨黄芪甲苷(astragaloside IV,AS-IV)对高糖受损间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)生物学功能和分泌肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的影响。方法:无菌条件下取足月健康新生儿胎盘脐带血,经密度梯度离心分离出人脐带血间充质干细胞(human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,hUCBMSCs),分别进行成骨、成软骨和成脂诱导分化鉴定。将鉴定成功的hUCBMSCs用30 mmo1/L葡萄糖预处理120 h后,用不同浓度梯度AS-IV(0、50、100、200、300、400 mg/L)进行干预,确定AS-IV促进高糖受损hUCBMSCs增殖的最适浓度。另将高糖受损hUCBMSCs随机分为实验组和模型组,实验组用最适浓度AS-IV处理,模型组用等体积PBS液处理,同时设置正常组,即等量PBS液处理正常hUCBMSCs。通过CCK-8细胞增殖试验、黏附能力测定试验、细胞划痕试验及ELISA试验检测最适浓度AS-IV对hUCBMSCs增殖、黏附、迁移及分泌HGF功能的影响。结果:AS-IV改善受损hUCBMSCs增殖功能的最适浓度为300 mg/L;模型组高糖受损hUCBMSCs的增殖、黏附、迁移及分泌HGF功能低于正常组(P<0.05);实验组高糖受损hUCBMSCs的增殖、黏附、迁移及分泌HGF功能明显改善,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芪甲苷可促进高糖受损间充质干细胞增殖,改善其分泌功能。

不同体积分数氧气预处理人羊膜间充质干细胞的生物学特性

背景:近年来,干细胞在组织损伤修复中发挥着重要作用,其中间充质干细胞移植应用最为广泛,间充质干细胞可以通过旁分泌细胞因子促进损伤组织的修复,低氧预处理可以改善间充质干细胞的生物学特性,因而,低氧预处理的人羊膜间充质干细胞可能在组织损伤修复中起到更好的治疗作用。目的:探讨不同体积分数氧气预处理对人羊膜间充质干细胞增殖、抗凋亡能力、旁分泌作用的影响。方法:利用酶消化法获得原代人羊膜间充质干细胞,将第3代人羊膜间充质干细胞通过不同体积分数氧气进行预处理48 h,随机分为1%,3%,5%,10%低氧预处理组和常氧对照组体积分数21%氧气,倒置显微镜下观察人羊膜间充质干细胞的形态,CCK-8检测人羊膜间充质干细胞的增殖能力,Annexin V-FITC/PI试剂盒检测人羊膜间充质干细胞的凋亡情况,实时定量PCR法检测人羊膜间充质干细胞凋亡基因和缺氧诱导因子的表达,酶联免疫吸附法检测人羊膜间充质干细胞分泌的细胞因子水平。结果与结论:显微镜下观察不同体积分数氧气预处理组人羊膜间充质干细胞的形态无明显差异,低氧预处理能提高人羊膜间充质干细胞的增殖、抗凋亡和旁分泌细胞因子的能力,且体积分数1%氧气预处理效果优于体积分数3%,5%,10%,21%氧气预处理。

人脐带间充质干细胞生物学特性及其在难治性疾病中的应用进展

人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)是一种多能干细胞,具有免疫调节功能、旁分泌功能和多向分化潜能等生物学特性。在一定条件下,HUCMSCs经诱导可分化为多种细胞,也可再生成其他组织器官,在临床上具有广泛的应用前景。目前关于难治性疾病多采用药物治疗,很难使受损或功能障碍的细胞恢复正常。因此,深入研究HUCMSCs在移植物抗宿主病、系统性红斑狼疮、肝纤维化、心血管疾病、呼吸系统疾病等疾病中的治疗效果,可以为难治性疾病的治疗提供新思路。同时,HUCMSCs库的建设和发展可促进HUCMSCs技术的产业化和临床应用,从而为临床提供高质量的HUCMSCs注射液。

圈养孟加拉虎脂肪间充质干细胞的分离培养和生物学特性

圈养孟加拉虎(Panthera tigris tigris)是保护该濒危物种的有效途径,但限制性的圈养环境导致圈养虎的健康问题日益凸显,尤其是肾炎,当前的治疗方法预后效果较差。为分离获取、鉴定并培养具有治疗孟加拉虎肾炎治疗潜力的孟加拉虎脂肪间充质干细胞,通过采集孟加拉虎的脂肪组织,利用Ⅰ型胶原酶消化法分离脂肪间充质干细胞并进行传代培养;采用CCK8法测定P3、P6和P9代细胞活性并绘制生长曲线;采用PCR法扩增间充质干细胞表面特殊标记物基因;通过成脂肪和成骨诱导分化试验分别测定脂肪间充质干细胞的成脂与成骨诱导分化能力。结果发现:孟加拉虎脂肪间充质干细胞为长梭形,折光性较好,生长情况良好;P3、P6和P9代细胞生长曲线呈典型的“S”型,符合间充质干细胞生长曲线规律;PCR扩增得到CD44、CD90、CD105和CD29特异性表面标记物基因;诱导分化试验表明,脂肪间充质干细胞具有成脂成骨诱导分化能力。综上,分离培养获得的细胞符合间充质干细胞特征,表明成功分离出孟加拉虎脂肪间充质干细胞。虎脂肪间充质干细胞的成功分离将作为一种潜在的细胞治疗手段,可能为虎肾炎的治疗提供新的选择,有望在维持虎的健康状态和延长寿命方面产生积极的临床效果。

颅神经嵴干细胞的发育生物学特征

颅神经嵴干细胞可特征性地分化成颌面部硬组织,形成上下颌骨及牙体(釉质除外)牙周组织。颅神经嵴干细胞发生于早期胚胎神经板,具有多能分化、广泛迁移、模式预成、可塑性等生物学特性,在内外多因素调控下发生不同的分化。

糖尿病骨质疏松来源颌骨骨髓间充质干细胞成骨分化能力的研究

目的探究糖尿病骨质疏松来源颌骨骨髓间充质干细胞(rJBMMSCs)成骨分化能力及生物学特性是否发生改变。方法使用GK大鼠建立糖尿病骨质疏松(DOP)模型,建模成功后取大鼠下颌骨提取细胞,并进行干细胞鉴定,以正常Wistar大鼠作为对照组。CCK-8检测细胞增殖能力,平板克隆法检测细胞克隆形成能力,划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞周期。通过碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红(ARS)染色、qRT-PCR以及Westernblot检测其成骨分化能力。结果DOPrJBMMSCs的细胞增殖能力、克隆形成能力、细胞迁移能力均较对照组减弱。ALP染色及活性分析显示DOP组较对照组染色面积小且颜色浅,ALP活性显著降低。ARS染色显示DOP组矿化结节明显较对照组少,其OD值明显小于对照组。qRT-PCR以及Western blot结果显示DOP组的成骨相关因子在mRNA水平及蛋白水平表达均显著下降。结论相较于对照组,DOP rJBMMSCs的生物学特性发生改变,其成骨分化能力明显受损。