基于干细胞因子/C-kit信号通路探讨鼠李糖乳酪杆菌Glory LG12的润肠通便作用

目的:基于干细胞因子(stem cell factor,SCF)/C-kit信号通路探讨鼠李糖乳酪杆菌Glory LG12的润肠通便作用。方法:雄性ICR小鼠随机分为空白组、模型组以及鼠李糖乳酪杆菌Glory LG12低剂量(1.5×10^(6)CFU/只)、中剂量(1.5×10^(7)CFU/只)和高剂量(1.5×10^(8)CFU/只)组,各组小鼠分别连续灌胃相应的药物15 d后,灌胃盐酸洛哌丁胺混悬液(4 mg/kg)建立便秘模型,测定各组小鼠的体质量、首粒黑便排出时间、5 h内黑便排出数量及质量、小肠推进率、血清中胃肠调节肽和炎性细胞因子水平及小鼠结肠组织SCF、C-kit转录水平,并观察结肠病理结构。结果:与模型组相比,中、高剂量的鼠李糖乳酪杆菌Glory LG12均能缩短小鼠的首粒黑便排出时间(P<0.001),增加小鼠5 h内排黑便的粒数和质量(P<0.01、P<0.001),提高小肠内的墨汁推进率(P<0.001);升高小鼠血清中胃动素、胃泌素、P物质和白细胞介素(interleukin,IL)10的质量浓度,降低内皮素1、生长抑素、血管活性肠肽和IL-6的质量浓度;增加结肠组织中SCF和C-kit mRNA相对表达量(P<0.01、P<0.001);修复受损结肠屏障。结论:鼠李糖乳酪杆菌Glory LG12能够通过调节SCF/C-kit通路,进而影响胃肠调节肽和炎性细胞因子的释放,发挥其促进胃肠蠕动的功能,改善便秘症状。

六君子合旋覆代赭汤对反流性食管炎大鼠食管Cajal间质细胞及干细胞因子/c-kit通道的影响

目的研究六君子合旋覆代赭汤对反流性食管炎(reflux esophagitis,RE)大鼠食管Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)及干细胞因子(stem cell factor,SCF)/c-kit通道的影响。方法采用幽门半结扎+前胃结扎+大黄灌胃法建立RE脾虚证大鼠模型,造模成功35只Wistar大鼠随机分为模型组、西药组、中药高、中、低剂量组共5组,每组7只,另设正常组10只。西药组予以雷贝拉唑+莫沙比利混悬液灌胃;中药高、中、低剂量3组分别给予六君子合旋覆代赭汤高、中、低剂量灌胃;连续给药14天,1 mL/只,1次/天;正常组以及模型组予以等量生理盐水灌胃。第15天取大鼠下段食管组织,利用透射电镜观察ICC超微结构、 Western blot法检测c-kit及SCF蛋白含量以及RT-PCR法检测c-kit和SCF mRNA相对表达量。结果与模型组比较,各治疗组ICC细胞形态结构改善,与周围细胞之间缝隙连接较紧密。与正常组比较,模型组c-kit、SCF蛋白含量及c-kit mRNA、SCF mRNA相对表达水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,各治疗组c-kit、SCF蛋白含量均升高(P<0.05,P<0.01),中药低剂量组c-kit mRNA、SCF mRNA相对表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),其余各治疗组均较模型组显著升高(P<0.01);中药高、中剂量两组间c-kit、SCF蛋白含量及c-kit mRNA、SCF mRNA相对表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),但中药高剂量组c-kit、SCF蛋白含量及c-kit mRNA、SCF mRNA相对表达水平明显高于低剂量组(P<0.05,P<0.01)。结论六君子合旋覆代赭汤通过促进c-kit、SCF mRNA及其蛋白的表达,能够使受损的ICC恢复正常。

基于SCF/c-Kit信号通路探讨柴胡疏肝散联合左金丸治疗肝胃郁热证RE大鼠的作用机制

目的 探讨柴胡疏肝散与左金丸联合应用对大鼠反流性食管炎(RE)食管组织保护作用及机制。方法 将40只大鼠均匀随机分为:假手术组、模型组、西药组、中药组,除假手术组外均采用外置金属棒部分幽门结扎术联合贲门肌切开法进行造模,干预结束后取各组食管下段组织,透射电镜观察大鼠食下段组织Cajal间质细胞(ICC)超微结构,苏木素-伊红(HE)染色观察食管组织病理变化,免疫组化测定酪氨酸激酶受体(c-Kit)、干细胞因子(SCF)表达水平。结果 HE染色显示,与假手术组比较,模型组、西药组、中药组食管结构均紊乱,食管黏膜层可见不同程度的炎性细胞浸润和上皮增生。经过治疗后,西药组、中药组食管黏膜层炎性细胞浸润降低,电镜下观察正常组ICC细胞呈长梭形,细胞核大呈梭形,核周边缘呈异染色致密带,胞质较少,有两条以上突起;模型组ICC超微结构受到严重破坏,突起减少,核异常缩小,占比减少,细胞质出现较多囊泡;西药组、中药组ICC超微结构破坏不明显,突起正常。免疫组化结果表明,模型组食管组织中c-Kit、SCF蛋白表达降低,而西药组、中药组SCF、c-Kit表达均明显升高,差异显著(P<0.05)。结论 柴胡疏肝散合左金丸能改善反流性食管炎大鼠食道组织的炎症程度,并减少ICC破坏,其机制可能与激活SCF/c-Kit信号通路有关。

神经病理性疼痛药物治疗新靶点研究进展

神经病理性疼痛是一种常见且严重的慢性疾病,严重影响病人的生活质量。目前神经病理性疼痛的药物治疗总体有效率不高,迫切需要寻找新的更为安全有效的治疗药物。随着对神经病理性疼痛研究的不断深入,药物治疗的新靶点不断涌现,本文主要就神经生长因子抗体、电压门控钠离子通道阻滞剂、WNT信号通路抑制剂、线粒体靶向抗氧化剂、消退素及干细胞的研究现状及趋势发展进行详细综述。

诱导骨髓间质干细胞分化为神经样细胞的体内外调控机制

近年来研究表明骨髓间质干细胞是一种具有多向分化潜能的种子细胞。它不仅可以向中胚层来源的细胞分化,还能打破胚层起源的局限性向外胚层的神经细胞转分化(transdifferentiation)。本文主要综述了骨髓间质干细胞分化为神经样细胞可能的体内、体外调控机制。骨髓间质干细胞在体内受其所处微环境的变化、相邻或相近或相接触的细胞可能的诱导趋化作用,可能还与细胞融合有关;骨髓间质干细胞在体外分化为神经样细胞主要是在抗氧化剂、钙离子通道阻断剂、细胞因子等的作用下进行诱导分化的,而且可能还与PKA或p38、ERK1/2等信号途径的激活、RNAi的作用有关。

基于SCF/c-kit信号通路探讨艾灸干预对腹泻型肠易激综合征大鼠免疫功能稳态的影响

目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠干细胞因子(SCF)/酪氨酸激酶受体(c-kit)信号通路及免疫功能的影响,探讨艾灸干预IBS-D的机制。方法:从6只健康SPF级孕鼠产下的52只幼鼠中随机选取12只作为正常组,剩余40只采用母子分离、醋酸灌肠、慢性束缚应激三因素联合复制IBS-D大鼠模型,将造模成功的36只大鼠随机分为模型组、艾灸组、西药组,每组12只。艾灸组予悬灸“天枢”“上巨虚”,西药组予利福昔明悬浊液(150 mg/kg)灌胃,均每天1次,连续干预7 d。分别于醋酸灌肠前(35日龄)、造模后(45日龄)、干预后(53日龄)检测各组大鼠体质量、稀便率(LSR)、腹壁回缩反射(AWR)评分达3分时最小容量阈值;干预后(53日龄),HE染色观察大鼠结肠组织形态,测定脾脏及胸腺脏器系数,ELISA法检测血清炎性因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-10、IL-8]、T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+、CD45+)、CD4+/CD8+值及免疫球蛋白(Ig A、Ig G、Ig M)含量,实时荧光定量PCR法、Western blot法检测大鼠结肠组织SCF、c-kit m RNA及蛋白表达,免疫荧光法检测大鼠结肠组织SCF、c-kit阳性表达。结果:干预后,与正常组比较,模型组体质量、AWR评分达3分时最小容量阈值降低(P<0.01),LSR、脾脏及胸腺系数与血清TNF-α、IL-8、CD4+、CD8+、CD45+、CD4+/CD8+值、Ig A、Ig G、Ig M含量升高(P<0.01),血清IL-10与结肠组织SCF、c-kit蛋白及m RNA表达降低(P<0.01),结肠组织SCF、c-kit阳性表达降低(P<0.01)。与模型组比较,艾灸组和西药组体质量、AWR评分达3分时最小容量阈值升高(P<0.01,P<0.05),LSR、脾脏及胸腺系数与血清TNF-α、IL-8、CD4+、CD8+、CD45+、CD4+/CD8+值、Ig A、Ig G、Ig M含量降低(P<0.01,P<0.05),血清IL-10与结肠组织SCF、c-kit蛋白及m RNA表达升高(P<0.01),结肠组织SCF及c-kit阳性表达升高(P<0.01)。与西药组比较,艾灸组血清CD4+含量降低(P<0.05),CD4+/CD8+值升高(P<0.01),其余指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。SCF、c-kit m RNA表达与AWR评分达3分时最小容量阈值、IL-10呈正相关(P<0.01),与其余指标均呈负相关(P<0.01,P<0.05)。结论:艾灸干预可降低IBS-D模型大鼠内脏高敏感性,改善其腹痛、腹泻等症状,其作用机制可能与上调SCF/c-kit信号通路的表达、改善IBS-D免疫功能状态有关。

竹盐对便秘小鼠的影响及其机制研究

研究竹盐对盐酸洛哌丁胺诱导的慢传输型便秘(STC)小鼠模型的缓解作用和机制。对小鼠连续7 d灌胃盐酸洛哌丁胺(10 mg/kg)造便秘模型,第8天开始,灌胃盐酸洛哌丁胺1 h后,再灌胃低中高剂量(0.5,1.0和1.5 g/kg)竹盐,2.5mg/kg枸橼酸莫沙必利和生理盐水。第14天灌胃结束后统计6 h排便粒数,测量小肠计算肠推进率。采用苏木精-伊红染色法观察结肠病理学变化。采用试剂盒测定血清中胃泌素(Gas)、P物质(SP)和一氧化氮(NO)含量。采用蛋白质印迹法测定结肠中c-kit原癌基因(c-kit)、血管活性肠肽(VIP)、蛋白激酶A (PKA)、水通道蛋白3 (AQP3)蛋白的表达,采用实时荧光定量法测定结肠组织中干细胞因子(SCF)和环磷酸腺苷(cAMP)的mRNA的相对表达。结果显示:与模型组相比,竹盐中高剂量组和枸橼酸莫沙必利组中STC小鼠结肠组织肌层逐渐变厚,杯状细胞增多,缓解了便秘导致的黏膜损伤;与模型组相比,中高剂量竹盐和枸橼酸干预后明显增加了STC小鼠肠推进率和血清中Gas和SP含量,减少了NO含量,促进了结肠组织中c-kit、VIP、PKA、AQP3蛋白表达水平和SCF、cAMP的mRNA的相对表达,均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。竹盐对盐酸洛哌丁胺诱导的STC小鼠具有通便作用,可能通过调节SCF/c-kit和VIP/cAMP/PKA/AQP3信号通路达到缓解便秘效果,该研究为开发相关功能性食品提供理论基础和科学依据。