大鼠肝癌诱导过程中肝癌干细胞标志及炎症因子的动态变化

背景:近年来已有研究者从肝癌组织和细胞系中发现了CD133、乙醛脱氢酶(ALDH)、CD90、CD44、Epc AM、CD13、OV6、K19、c-kit、ABCG2等多种肝癌干细胞的标志物,其中CD家族的CD133、CD90、CD44等被认为与肝癌的复发和转移密切相关。目的:探讨大鼠肝癌诱导过程中肝癌干细胞标志及炎症因子的动态变化及两者相关性。方法:应用二乙基亚硝胺(DEN)溶液饲养SD大鼠24周诱导大鼠肝癌模型,并设立普通水喂养的健康对照组。结果与结论:免疫组织化学检测显示,模型组肝癌诱导过程中Kupffer细胞相关ED2表达呈现出逐渐增多的情况,与健康对照组比较,模型组ED2在诱癌第12,16,20,24周的表达均显著升(P<0.05)。定量PCR检测显示,肝癌诱导过程中CD90呈逐渐上升趋势(P<0.05),较之健康肝脏组织,肝癌组织中CD90上升更明显(P<0.05);CD133呈现出一定升高趋势,但经单因素方差分析无统计学意义(P>0.05);在诱癌过程中其他肝癌干细胞标志物未出现明显改变(P>0.05)。肝癌诱导过程中,肿瘤坏死因子α、转化生长因子β、MCP-1及白细胞介素6均明显上升(P<0.05),较之健康肝脏组织,肝癌组织中转化生长因子β、MCP-1、白细胞介素6表达显著偏高(P<0.05),其余炎症因子在诱癌过程中则未出现明显改变(P>0.05)。经Pearson相关性分析,MCP-1、转化生长因子β、白细胞介素6与CD90的表达之间呈显著正相关(P<0.05)。表明Kupffer细胞所释放的部分炎症因子与肝癌干细胞标志之间存在一定的相关性,Kupffer细胞可促进肝癌的发生。

DC-CIK细胞免疫治疗联合化疗对复发性卵巢癌患者免疫功能、凝血功能及肿瘤干细胞标志物的影响

目的:探讨树突状细胞(DC)-细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)免疫治疗联合化疗对复发性卵巢癌患者免疫功能、凝血功能及肿瘤干细胞标志物的影响。方法:选取80例于我院接受治疗的复发性卵巢癌患者作为研究对象,根据是否接受细胞免疫治疗分为单纯化疗组(n=35)及联合治疗组(n=45),单纯化疗组给予常规TC方案化疗,联合治疗组给予DC-CIK细胞免疫治疗联合TC方案化疗,两组均以21d为一个周期,共治疗3个周期;比较治疗前及治疗结束7d后患者免疫功能、凝血功能及肿瘤干细胞标志物水平变化。结果:治疗结束7d后,联合治疗组CD3^+、CD3^+CD4^+、CD4^+/CD8^+、NK细胞数目均显著高于治疗前,CD4^+CD25^+数目显著低于治疗前,且联合治疗组治疗后外周血T细胞亚群各细胞改善情况均优于单纯化疗组,差异均具有统计学意义(P<0.05);治疗结束7d后,两组FIB水平均较治疗前显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);治疗结束7d后,两组CD133、DDX4水平均显著低于治疗前,且联合治疗组显著低于单纯化疗组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:应用DCCIK细胞免疫联合化疗治疗复发性卵巢癌可明显增强患者免疫力,改善FIB水平,调节患者血清肿瘤干细胞标志物水平,对改善患者预后具有积极意义,值得在临床上推广应用。

胃癌组织中干细胞标志物Sox2的表达及临床意义

目的：探讨胃癌组织中干细胞标志物Sox2的表达及临床意义。方法 RT-PCR检测60例胃癌患者癌组织（胃癌组）和癌旁组织（癌旁组）中Sox2 mRNA表达，免疫组织化学法检测2组Sox2蛋白表达水平。比较Sox2 mRNA阳性表达情况在不同年龄、性别、肿瘤大小、组织类型、TNM分期、分化程度、浸润深度及淋巴结转移中的差异。结果胃癌组Sox2 mRNA阳性表达率53.3%（32/60）高于癌旁组的20.0%（12/60）；Sox2 mRNA的相对表达强度高于癌旁组（0.724±0.209 vs.0.256±0.065，P＜0.01）。胃癌组Sox2蛋白的阳性表达率50.0%（30/60）高于癌旁组的16.7%（10/60，P＜0.01）。胃癌组Sox2 mRNA阳性表达率临床TNM分期（Ⅲ＋Ⅳ）组高于（Ⅰ＋Ⅱ）组，低、未分化组高于中、高分化组，浸润深度T3～T4组高于T1～T2组，淋巴结转移组高于无转移组（均P＜0.05或P＜0.01）。结论胃癌组织中Sox2高表达与其发生、侵袭、进展及转移有关，可作为胃癌诊疗新的分子标志物。

非小细胞肺癌肿瘤组织干细胞标志物CD133的表达

背景:非小细胞肺癌肿瘤组织中干细胞标志物CD133表达会呈现出一定的变化,并与疾病的发生和发展存在一定的联系。目的:探讨非小细胞肺癌肿瘤组织干细胞标志物CD133的表达情况,分析其与临床病理因素以及预后之间的关系。方法:收集135例非小细胞肺癌组织标本和60例正常肺组织标本。采用免疫组织化学染色法检测两组标本CD133的表达,并分析非小细胞肺癌肿瘤组织中CD133蛋白的表达与临床病理因素之间的关系。结果与结论:1非小细胞肺癌组CD133蛋白阳性表达率显著高于正常对照组(P<0.05)。2CD133蛋白阳性表达与非小细胞肺癌患者年龄、性别以及肿瘤大小、肿瘤位置、组织学类型无关(P>0.05);随着非小细胞肺癌肿瘤组织分化越差,CD133蛋白阳性表达呈现出不断上升趋势(P<0.05);CD133蛋白阳性表达率在不同临床分期以及淋巴结有无转移之间差异也有显著性意义(P<0.05)。3CD133以及TNM分期是非小细胞肺癌患者预后独立影响因素(P<0.05),CD133蛋白表达阳性组中位生存时间显著短于阴性组(P<0.05)。以上结果表明CD133参与非小细胞肺癌的发生和发展以及浸润和转移,对疾病的进展以及预后判断有重要的临床意义。

炎症因子与肝癌干细胞标志在肝癌诱导过程中的相关性研究

目的探讨Kupffer细胞相关炎症因子在大鼠肝癌诱导过程中的动态变化与肝癌干细胞标志的相关性。方法选取雄性SD大鼠35只,分为正常对照组(n=5)和诱导模型组(n=30)。诱导模型组大鼠饮水中加入二乙基亚硝胺溶液,正常对照组给予普通饮水。在诱癌过程中每隔4周取材5只大鼠肝脏,运用免疫组化法测定Kupffer细胞ED2抗体在肝组织的表达和定量PCR方法检测肝组织中Kupffer细胞释放的炎症因子及肝癌干细胞标志物的基因表达。并采用Pearson检验分析相关炎症因子与肝癌干细胞标志物之间相关性。结果成功建立大鼠肝癌诱导模型,在24周时诱导模型组大鼠出现肝脏肿瘤;ED2抗体在诱癌过程中呈明显升高的趋势(P<0.001);PCR结果提示,Kupffer细胞分泌的相关炎症因子IL-6、MCP-1、TGF-β、TNF-α在诱癌过程中逐渐升高(P<0.05),同时,肝癌干细胞标志物CD90在诱癌过程中呈明显升高趋势(P<0.001)。Pearson相关性检验提示:IL-6、MCP-1、TGF-β的表达变化与CD90呈明显正相关(P<0.001)。结论 Kupffer细胞释放的炎症因子IL-6、MCP-1、TGF-β的表达升高与CD90上调呈明显正相关,进一步明确了Kupffer细胞促进肝癌发生的重要作用。

肿瘤干细胞标志物的确定与争议

肿瘤中除了普通肿瘤细胞以外还有一小部分具有异质性分化潜能的细胞,命名为肿瘤干细胞,这部分细胞很可能与肿瘤的发生及复发、转移密切相关。肿瘤干细胞的异质性分化能力与胚胎干细胞较为相似,而且由于到目前为止尚无公认的肿瘤干细胞的标志物,所以,往往利用胚胎干细胞的标志物来分离和鉴定肿瘤干细胞。

结直肠癌肿瘤干细胞标志物的研究进展

肿瘤干细胞与恶性肿瘤复发、耐药等生物学过程密切相关,是治疗恶性肿瘤的新靶点。寻找稳定性高、特异性强、实用性好的肿瘤干细胞标志物,清除恶性肿瘤中的肿瘤干细胞有望彻底根治恶性肿瘤。本文综述了结直肠癌中比较公认的肿瘤干细胞标志物CD44和潜在的肿瘤干细胞标志物LGR5、Bmi1、SOX2、Nanog的研究进展,为靶向治疗结直肠癌提供了参考依据。

肝癌干细胞标志物及其信号通路研究进展

肝癌是恶性程度极高、预后极差的恶性肿瘤。肝癌防治仍为我国肿瘤防控的难点。目前临床肝癌诊疗中还存在着早期诊断难、复发转移率高、治疗缺乏针对性、源头创新药物和治疗手段少等问题。因此，对肝癌分子发病机制及肝癌诊治新技术、新疗法的研究尤为重要和迫切。

干细胞标志物ALDH1与大样本乳腺癌患者的预后关系

目的研究干细胞标志物已醛脱氢酶1(ALDH1)在乳腺癌细胞中的表达及其与乳腺癌患者预后的关系。方法采用免疫组化方法检测ALDH1在595例乳腺癌组织芯片中的表达并评分,用ROC方法确定ALDH1表达最佳临界值,检测ALDH1表达情况与患者临床特征之间相关性。结果 ALDH1在乳腺癌细胞中高表达,并与Ki67、CEA和分子分型呈正相关。单因素和多因素分析均表明ALDH1可以作为乳腺癌OS、DFS独立预后因子。结论 ALDH在乳腺癌组织中高表达,且过表达ALDH1可以作为乳腺癌独立预后不良因子。

hMLH1和干细胞标志物CD44在胃癌的表达及相互间的关系

目的研究错配修复基因hMLH1和干细胞标志物CD44在胃癌的表达状况、意义及相互间的关系。方法采用免疫组化SP法检测79例胃癌组织和相对应的癌旁组织中错配修复基因hMLH1和干细胞标志物CD44的表达状况,结合临床资料分析这两个指标的表达与肿瘤病理参数间的关系,运用卡方检验分析该两个指标间的相互关系。结果79例胃癌标本中,hMLH1阳性表达的有15例,占19%,,CD44阳性表达的有53例,占67.1%,两者在癌旁正常组织表达的阳性率分别为51%和15.2%,两者差异均有统计学意义(P<0.05);胃癌组织中hMLH1的表达与CD44呈负相关(P<0.05);hMLH1阴性表达、CD44阳性表达与胃癌淋巴结转移、浸润深度、TNM分期及脉管浸润呈正相关(P<0.05)。结论 hMLH1在胃癌的形成过程中起到重要作用,它与胃癌干细胞标志物CD44之间存在拮抗关系。

肠道干细胞标志物研究进展

肠道干细胞（intestines stem cells，ISCs）是一群结构和功能未特化的原始细胞，其位于肠道隐窝，具有长期自我更新潜能和产生至少一种终末分化细胞的能力，但目前尚缺乏特异识别的组织学和免疫学标志物。通过小鼠遗传学标志谱系实验、长期保留标志等实验提供了鉴定和证实干细胞标志物的存在，如Musashi-1，BMPR1a、phospho—PTEN、DCAMKL1、Ephreceptors、integrins、Lgr5（GPR49）等，然而它们的有效性还有待证实。本文综述了最近报道的肠道干细胞标志物并且提供了鉴定和分离这些肠道干细胞的基础理论和系统模式。

前列腺癌干细胞标志物研究进展

前列腺癌是严重影响男性健康的恶性疾病,其发生、发展机理仍未完全明了。近年来前列腺癌干细胞的研究取得了多方面的进展,研究材料涉及人前列腺癌组织、前列腺癌细胞系,以及鼠前列腺癌模型。前列腺癌干细胞的研究为前列腺癌的发生和发展提出了一个全新的理念,对于前列腺癌的治疗具有积极意义。本文就近些年来在前列腺癌干细胞研究中应用于分离鉴定前列腺癌干细胞的标志物情况进行综述。

肺癌干细胞标志物的研究进展

目前全球范围内新发肺癌患者每年已经超过100万例[1]。在中国其死亡率也居恶性肿瘤死亡率之首。然而到目前为止,肺癌仍然无法根治。但肿瘤干细胞学说的创立与研究使肺癌的根治成为可能,现就目前肺癌干细胞标志物的研究进展作一系统性总结。

干细胞标志物CD133和Nestin在不同恶性程度胶质瘤组织中的表达及其与预后的关系

背景与目的:近来研究表明,胶质瘤中一小群表达干细胞标志的细胞是胶质瘤发生及发展的根源。本文探讨干细胞标志物CD133和Nestin在不同恶性程度人脑胶质瘤组织中的表达情况及其与预后的关系。方法:应用实时荧光定量PCR方法定量检测77例不同恶性程度胶质瘤组织中CD133和Nestin基因的表达情况,并与肿瘤的恶性程度进行相关分析;探讨肿瘤组织中上述基因的表达水平与患者预后的关系。结果:在不同恶性程度胶质瘤组织中,CD133及Nestin的表达存在显著性差异(P<0.05),CD133和Nestin的表达情况与肿瘤的恶性程度呈正性相关(P<0.05);单因素预后分析显示CD133和Nestin的表达水平与预后相关(P<0.05),CD133和Nestin基因的高表达预示一个较短的生存时间;多因素Cox比例风险回归模型分析显示,CD133是独立于病理级别及其他临床变量的预后因子。结论:检测胶质瘤组织中CD133和Nestin的表达水平有助于评价肿瘤的生物学行为和患者的预后。

肝癌干细胞标志物及细小病毒H-1非结构蛋白NS-1对肝癌干细胞生长的影响

目的:研究肝癌细胞系SMMC7721肿瘤干细胞表面标志物,探讨细小病毒H-1非结构蛋白NS-1对肝癌细胞的生长抑制作用,以及其对肝癌细胞中具有干细胞特性群体的影响。方法:用流式细胞仪将肝癌细胞按细胞表面标志CD133、CD44进行分离,分为CD133+CD44+、CD133+CD44-、CD133-CD44+、CD133-CD44-4个群体,采用脂质体法将细小病毒H-1非结构蛋白NS-1质粒转染入人肝癌细胞SMMC7721,采用G418筛选稳定转染的细胞克隆,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞NS-1基因的表达。流式细胞仪分析SMMC7721转染前后肿瘤干细胞表面标志CD133、CD90、CD44的表达和细胞生长周期,检测细胞群体的变化。以裸鼠成瘤实验和软琼脂克隆形成实验评价具肿瘤干细胞性质的肝癌细胞表面标志物以及细小病毒H-1非结构蛋白NS-1转染对肝癌细胞生长的影响。结果:肝癌SMMC7721细胞分成CD133+CD44+、CD133+CD44-、CD133-CD44+、CD133-CD44-4组亚群的细胞存在着异质性,4组亚群细胞中均有少数肿瘤干细胞样细胞能在软琼脂上形成克隆,其中CD133+CD44+、CD133+CD44-亚群克隆形成率分别为3.5%和1.8%,CD133-CD44+、CD133-CD44-亚群克隆形成率为0.7%和0.5%。转染细小病毒H-1非结构蛋白NS-1后,4组亚群细胞克隆的形成率都显著下降。裸鼠成瘤实验提示,CD133+表型的细胞成瘤能力强于CD133-表型细胞,CD133-CD44+亚群细胞成瘤能力最弱。流式细胞仪分析显示转染NS-1后,CD133+群体细胞被明显抑制,由31.9%下降至6.3%,而CD90+和CD44+的表达未出现改变;转染NS-1后细胞S期百分率明显下降。结论:肝癌细胞表型为CD133+CD44+和CD133+CD44-亚群中富含肝癌干细胞,转染细小病毒H-1非结构蛋白基因NS-1的部分亚群SMMC7721细胞生长被抑制,提示其对肝癌细胞株中具有干细胞特性的CD133+群体有一定的抑制效应。

肿瘤干细胞标志物CD44在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨和研究肿瘤干细胞标志物CD44在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组化法对40例非小细胞肺癌组织及20例正常肺组织中的CD44蛋白表达水平进行检测并分析。结果 CD44蛋白在肺癌组织中的阳性表达率为65.0%(26/40),在正常组织中的阳性表达率为20.0%(4/20),在肺癌组织中的阳性表达明显高于正常组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 CD44在非小细胞肺癌中存在异常表达,和非小细胞肺癌的发生发展存在密切相关,能够作为非小细胞肺癌临床诊断的标志物。

肿瘤干细胞标志物SOX2在甲状腺癌中的临床应用价值

甲状腺癌是起源于甲状腺滤泡上皮的一种恶性肿瘤,是头颈部最常见的恶性肿瘤之一,发病率呈逐年上升趋势[1]。最常用的治疗方法为手术切除,但有部分晚期患者容易复发,因而早期诊断具有重要的意义。目前,尚没有针对甲状腺癌诊断的特异性标志物。SOX2在肝癌、恶性黑色素瘤、乳腺癌的发生发展都有密切的关系[2~4],但在甲状腺癌中鲜有报道。本次研究旨在分析SOX2在甲状腺癌诊断治疗中的应用价值。现报道如下。

鱼卵提取物微量刺激法诱导鼠脾细胞表达干细胞标志抗原

背景:小鼠和人的体细胞能被一些特殊的因子诱导,逆转为类似胚胎细胞的状态,即诱导性多能干细胞。目的:进一步提高鱼卵提取物诱导体细胞逆向分化为多能干细胞的效率。方法:以鱼卵提取物诱导BALB/C小鼠脾细胞分化为多能干细胞,分别以普通诱导法(鱼卵提取物质量浓度分别为0,0.1,0.2,0.4,0.8,1.2g/L)与微量刺激法诱导(鱼卵提取物质量浓度分别为0,0.05,0.1,0.2,0.4g/L)。结果与结论:与普通诱导法比较,微量刺激法诱导的脾细胞表达更多的干细胞标志抗原OCT-3/4,Nanog,SSEA-1。证明微量刺激法可进一步提高体细胞逆向分化为多能干细胞的效率。

辛伐他汀抑制人乳腺癌MCF-7细胞内多能干细胞标志物Oct3/4 Nanog和Sox-2表达

目的:研究辛伐他汀(simvastatin,SIM)对人乳腺癌MCF-7细胞内多能干细胞标志物Oct3/4、Nanog和Sox-2表达的影响。方法:应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术、免疫荧光染色方法,流式细胞仪和免疫印迹(Western blot)方法检测SIM对MCF-7细胞内多能干细胞标志物表达的影响。结果:qRT-PCR结果显示,10、50和100μmol/L SIM作用于MCF-7细胞48h后,能显著抑制细胞内Oct3/4、Nanog和Sox-2基因表达,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),而SIM 1μmol/L浓度组和对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。SIM 50、100μmol/L浓度组和10μmol/L浓度组相比,抑制Oct3/4和Nanog的表达差异有统计学意义(P<0.05),而对Sox-2的表达抑制,SIM 10、50μmol/L和100μmol/L各浓度组间差异无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光染色显示经10μmol/L SIM处理48 h后MCF-7细胞核内Oct3/4、Nanog和Sox-2蛋白表达减弱,部分细胞核无表达。流式细胞检测显示MCF-7细胞经10μmol/L SIM处理48 h后,Oct3/4阳性细胞数、Nanog阳性细胞数和Sox-2阳性细胞数显著减少(P<0.05),Western blot进一步证实经10μmol/L SIM处理48 h后MCF-7细胞核内Oct3/4、Nanog和Sox-2蛋白表达显著减少(P<0.05)。结论:SIM在体外能有效地抑制人乳腺癌MCF-7细胞内多能干细胞标志物Oct3/4、Nanog和Sox-2的表达,为SIM应用于癌症治疗提供实验依据。

头颈部鳞癌干细胞标志物的研究进展

肿瘤干细胞(CSC)是一群具有自我更新能力和多向分化潜能的肿瘤细胞,虽然CSC在肿瘤细胞总数中只占很小比例,但在肿瘤的起源、发展、转移及复发等方面均有重要的作用。过去几年内研究者已经证明包括头颈部鳞癌干细胞在内的许多CSCs的存在,并分别针对头颈部肿瘤干细胞与头颈部鳞癌的关系、肿瘤干细胞的生物学特性和鉴定标志等问题展开讨论。现对CSCs及头颈部鳞癌干细胞标志物的研究进展予以综述。