乳腺癌肿瘤干细胞标记物CD44^+ESA^+CD24^(-Λow)在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义

背景与目的:人体各种组织都存在干细胞,肿瘤组织也存在肿瘤干细胞(tumor stem cell,TSC)。乳腺癌TSC已经被分离出来,其标记物也已被确定,但肺癌的TSC仍未被分离出来。本研究旨在探讨乳腺癌肿瘤干细胞标记物(CD44+ESA+CD24-Λow)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其意义。方法:应用免疫组织化学法检测77例NSCLC组织中CD44、ESA与CD24的表达,分析其与患者吸烟、肿瘤的大小、癌的组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后的关系。结果:77例NSCLC组织中CD44、ESA与CD24的阳性率分别为63.6%、66.2%和7.8%。低分化及未分化组CD44的阳性率明显高于高分化组,高分化组ESA的阳性率明显高于中度分化组和低分化及未分化组;腺癌组ESA的阳性率明显高于鳞癌组(P<0.05)。CD44+ESA+CD24-Λow标记的阳性率为36.4%,与患者吸烟、肿瘤的大小、癌的组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后无关(P>0.05)。结论:乳腺癌肿瘤干细胞标记物(CD44+ESA+CD24-Λow)表达与NSCLC肿瘤的大小、癌的组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移和预后等临床病理学指标无关。

胃肠道干细胞标记物的筛选

目的研究几种常用干细胞标记物在人胃肠道黏膜干细胞中的表达。方法采用免疫组织化学SP法对5例正常胃黏膜、5例正常小肠黏膜及5例正常降结肠黏膜中Musashi1、端粒酶逆转录酶(TERT)、Oct4和Nestin的表达情况进行研究。结果胃黏膜中Musashi1和TERT阳性细胞主要位于腺体峡部,Oct4阳性细胞多位于腺体基底部,Nestin阳性细胞主要分布在胃黏膜间质以及腺体颈部。小肠黏膜中Musashi1和TERT阳性细胞主要在距隐窝底部4～7个细胞的位置,Oct4阳性细胞散在分布于腺体内,Nestin阳性细胞均分布在小肠黏膜间质,无腺体内着色。降结肠黏膜中Musashi1和TERT阳性细胞分别主要在距隐窝底部1～4个和1～5个细胞的位置,Oct4阳性细胞散在分布在腺体内和黏膜间质,Nestin阳性细胞分布黏膜间质内,腺体内无表达。结论Musashi1和TERT的表达与胃肠道干细胞的位置较吻合,可认为是胃肠道相对特异的干细胞标记物。而Oct4与Nestin做为胚胎干细胞和神经干细胞的标记物被广泛应用,但不能用于胃肠道干细胞的标记。

干细胞标记物ALDH_1在乳腺癌患者中的表达及意义

目的:研究乳腺癌患者干细胞标记物ALDH1与乳腺癌的相关性。方法:通过免疫组化的方法研究58例乳腺癌患者ALDH1表达与肿瘤特点的相关性。结果:乳腺癌患者31%ALDH1表达阳性,69%表达阴性;ALDH1表达与病理学分级相关;与ER、PR阴性表达相关;与其他诸如年龄、淋巴结数目、ki-67表达等无明显相关性。结论:乳腺癌干细胞标记物ALDH1在乳腺癌患者中具有高表达,与乳腺癌肿瘤细胞的一些特点具有相关性,但仍需要一些研究进一步阐明他们与乳腺癌之间的关系。

微小RNA-10b调控乳腺癌MCF-7细胞中乳腺癌干细胞标记物乙醛脱氢酶1 mRNA和蛋白的表达

背景:miR-10b能够调控乳腺癌干细胞的相关特性,乙醛脱氢酶1是最重要的乳腺癌干细胞标记物之一,二者在乳腺癌细胞中的相互作用尚需进一步研究。目的:探讨miR-10b对乳腺癌MCF-7细胞中乳腺癌干细胞标记物乙醛脱氢酶1 mRNA和蛋白表达的影响。方法:常规培养乳腺癌MCF-7细胞株,分别将miR-10b模拟物或其阴性对照转染进入乳腺癌MCF-7细胞;转染48 h,通过实时荧光定量PCR实验和Western blot实验检测乙醛脱氢酶1 mRNA和蛋白的表达。结果与结论:(1)将miR-10b模拟物转染进入MCF-7细胞之后,miR-10b在MCF-7细胞株中的表达显著高于对照组(P=0.003 47);(2)miR-10b过表达之后显著上调了MCF-7细胞株中乙醛脱氢酶1 mRNA和蛋白的表达(P=0.009 54和P=0.003 11);(3)结果表明,上调miR-10b表达能够诱导乙醛脱氢酶1阳性乳腺癌干细胞的产生,从而为miR-10b调控乳腺癌细胞侵袭、转移提供新的研究依据。

胚胎/多能干细胞标记物Oct3/4在乳腺浸润性小叶癌中的表达及其对分子分型的意义

目的研究干细胞标记物Oct3/4在乳腺浸润性小叶癌组织中的表达及其对分子分型的意义。方法回顾性分析67例临床病理和术后随访资料完整的乳腺癌患者,采用免疫组织化学方法检测乳腺浸润性小叶癌及正常乳腺组织中Oct3/4的表达情况,探讨Oct3/4表达与其分子分型及临床病理参数的关系。结果 Oct3/4在癌组织中的阳性率明显高于癌旁正常乳腺组织(P<0.05);Oct3/4在基底细胞样型、Luminal A型、Luminal B(HER2-)型、Luminal B(HER2+)型、HER2(+)型浸润性小叶癌阳性表达率分别为77.78%、29.63%、14.28%、20%、21.43%,差异有统计学意义(P<0.05);Oct3/4与CK5/6的表达呈正相关性(r=0.394,P<0.05);Oct3/4阳性表达与患者年龄、是否绝经、肿瘤大小、腋淋巴结转移情况、AJCC分期、患者生存状况及组织学分型均无相关性。结论干细胞标志物Oct3/4表达可能与乳腺浸润性小叶癌的发生相关,但与其进展和预后关系不明显;Oct3/4表达与浸润性小叶癌的基底细胞样型存在一定相关性;Oct3/4与CK5/6在分子机制上可能存在一定的联系。

肿瘤干细胞标记物ALDH1和Ki67在子宫内膜腺癌中的表达和意义

肿瘤干细胞（Cancer Stem Cell，CSC）为存在于肿瘤组织中的数量极少、具有无限增殖潜能，可分化为肿瘤细胞，且对肿瘤的发生、发展和转移起决定性作用的细胞。乙醛脱氢酶1（aldehyde dehygeoge-nase1，ALDH1），是在ALDH基因家族指导下合成的一类酶，主要存在于肝脏与肾脏细胞中，在体内主要发挥乙醛的代谢解毒功能，也与细胞的增殖、分化相关，可作为干细胞标志物［1］；同时也是肿瘤起始细胞（cancer-initiatingcells，CICs）的标志物之一［2］。本研究以5例子宫内膜单纯性增生病例为对照，利用免疫组织化学方法观察31例子宫内膜腺癌的ALDH1和Ki67的表达，并探讨二者表达的相关性，为以肿瘤干细胞为靶向诊断和治疗子宫内膜腺癌提供理论和实验依据。

肿瘤干细胞标记物在胶质瘤临床应用中的研究

由于患者对治疗的反应不同，且有不同预后，因此寻找胶质瘤中新的预后评估标志物是目前一研究热点。最近的研究提示肿瘤生物学抗治疗性与肿瘤干细胞（Cancer stem cells，CSCs）的存在密切相关。因此，研究与胶质瘤干细胞存在密切相关的肿瘤标记物标志物，对评估胶质瘤患者预后具有重要意义。 CSC假说提示存在一种肿瘤细胞种群，即肿瘤干细胞，其拥有独特的自我更新能力，能够使肿瘤持续生长。此外，若干研究显示， CSCs除了强大的耐药机制，还具有肿瘤发生潜能。现有研究证实了CSCs存在于包括胶质母细胞瘤在内的不同癌症类型。本文将介绍目前研究报告中公认的胶质瘤CSC 标志物及其预后价值。我们将总结每个标志物并讨论他们的预后价值。

类肿瘤干细胞标记物及缺氧诱导因子-1α在口腔鳞癌组织中的表达及相关性研究

目的:检测类肿瘤干细胞(cancer stem-like cell,CSC)标记物(CD44、ALDH1、NANOG)及缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在口腔鳞癌组织中的表达并进行相关性分析。方法:应用免疫组化法检测40例重庆医科大学附属口腔医院颌面外科手术切除的口腔鳞癌组织、10例癌旁组织、10例淋巴结转移的淋巴结组织以及10例正常淋巴结组织中CD44、ALDH1、NANOG及HIF-1α的表达,采用Fisher确切概率法及秩和检验分析这些标记物与HIF-1α之间及其与肿瘤分化程度、分期及淋巴结转移的关系。结果:(1)CD44、NANOG、HIF-1α在口腔鳞癌组织与癌旁组织中的表达差异均存在统计学意义(P_(CD44)=0.000;P_(NANOG)=0.000;P_(HIF-1α)=0.000);(2)HIF-1α与CD44在口腔鳞癌中的表达存在相关性(r_s=0.498,P=0.027);(3)CD44、ALDH1、NANOG及HIF-1α在口腔鳞癌组织中的表达与分化程度、临床分期及淋巴结转移均无明显相关性。结论:CD44、NANOG、HIF-1α在口腔鳞癌组织中呈高表达,其中CD44与HIF-1α的表达具有相关性。联合检测CD44、NANOG、HIF-1α可能对口腔鳞癌早期诊断具有重要意义。

恶性肿瘤干细胞标记物CD34在鼻咽癌细胞系的表达

背景:在多种肿瘤中已证实CD34与肿瘤的发生、发展、复发、转移、耐药密切相关,但是CD34与鼻咽癌的关系目前还知之甚少。目的:分选鼻咽癌细胞株中CD34+与CD34-细胞的增殖和迁移能力。方法:利用流式细胞术检测CD34在鼻咽癌细胞株5-8F、6-10B、CNE1、CNE2中的表达,根据细胞表面标志物分选出CD34+与CD34-细胞,进行纯度鉴定;通过体外MTT法、平板克隆形成实验以及划痕实验分析CD34+细胞与CD34-细胞增殖和迁移能力。结果与结论:(1)4种鼻咽癌细胞株中CD34表达均恒定在0.1%-0.2%,且CD34水平与细胞的生长密度关系密切;(2)分选的CD34+细胞群中,CD34+细胞例能达到98%以上,在CD34-细胞群中未能检测到CD34+细胞;(3)CD34+细胞在第1,3,5,7天增殖速度显著高于CD34-细胞(P<0.05);(4)CD34+细胞克隆形成率显著高于CD34-细胞(P<0.05);(5)CD34+细胞向划痕区迁移的细胞明显多于CD34-细胞(P<0.05);(6)结果提示,CD34+细胞体外培养具有更高的增殖和转移能力,具有鼻咽癌肿瘤干细胞潜能。

卵巢癌干细胞标记物的研究进展

卵巢癌是致命的妇科癌症之一。虽然目前的治疗策略相对有效,但存在易复发及化疗耐药,其与卵巢癌干细胞有着密切的联系。肿瘤干细胞(CSC)是肿瘤内罕见的化疗耐药性细胞,其可以用更多分化的子细胞填充大部分肿瘤,并可能导致复发性疾病。目前,对卵巢癌干细胞的分离与鉴定已经开展了很多研究,并分析了卵巢癌干细胞特异性标记物的特性。本文旨在对卵巢癌干细胞标记物的相关研究以及其作为治疗靶点的潜力进行综述。

5-氟尿嘧啶对结肠癌干细胞标记物CD133表达的影响

目的:探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)对结肠癌干细胞标记物CD133表达的影响。方法:购买华盛顿大学干细胞中心Moon教授的实验室提供的DLD1、HCT116、Lovo、HT29、SW480、RKO 6个结肠癌细胞株,运用新型四唑氮盐方法(MTS)对细胞活性进行测定,采用BD Biosciences FACS CantoⅡ流式细胞仪对CD133+细胞比例进行检测,运用限制性稀释方法稀释细胞将克隆形成的数量计算出来,采用Qiagen试剂盒将总RNA提取出来。结果:CD133+的细胞克隆生长能力显著高于CD133-(P<0.05),对CD133+的敏感性显著低于CD133-细胞(P<0.05);处理后5-FU浓度1 mg/L、10 mg/L处理的上调结肠癌细胞DLD1、HT29中CD133mRNA均显著高于处理前(P<0.05)。结论:5-FU可上调结肠癌干细胞标记物CD133mRNA表达。

卵巢癌干细胞标记物与化疗耐药的研究进展

卵巢癌是女性生殖系统中复发率最高、预后最差的恶性肿瘤。化疗耐药性及肿瘤复发是卵巢癌患者存活率低的主要原因。尽管在卵巢癌化疗方面取得了进展,人们对其特点有了更多的认识,但化疗耐药仍然是一项巨大的临床挑战。肿瘤干细胞是具有自我更新能力和分化能力的未分化肿瘤细胞群,可以导致癌症发生、晚期转移、耐药和复发,存在于卵巢癌等数种肿瘤中。目前的研究表明在卵巢癌化疗耐药的发生过程中卵巢癌干细胞发挥至关重要的作用。因此,从卵巢癌干细胞这一新的角度研究卵巢癌的治疗方法,为提高卵巢癌的治愈率、降低复发耐药提供新思路。

结肠癌中干细胞标记物的表达情况与病理特征和预后的关系研究

目的探讨干细胞标记物富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5（Leucine-rich repeat-containing G-protein-coupled receptor 5，LGR5）也称为G蛋白偶联受体49（G-protein coupled receptor49，GPR49）蛋白在人结直肠癌组织中的表达水平及其与临床病理特征、结直肠癌演进过程的关系和意义。方法收集我院普通外科手术切除或肠镜活检的正常结肠黏膜30例、结肠腺瘤177例和结肠癌210例临床组织标本，所有病例均经病理确诊，术前未行放、化疗；标本以石蜡包埋保存。采用免疫组化血法（Immunohistochemistry，IHC）检测组织标本中CD133、LGR5的表达，并分析其与临床病理指标的关系。结果CD133在对照组结肠黏膜组织、结肠腺瘤和结肠癌中的阳性表达率分别为13.33%（4/30）、42.94%（76/177）和73.33%（154/210），在结肠癌和腺瘤中的表达均显著高于正常结肠黏膜（χ2=42.0130，χ2=9.4817，P<0.05），但在结肠癌组的表达高于腺瘤组（χ2=36.8039，P<0.05）。 Lgr5在对照组结肠组织中、结肠腺瘤组和结肠癌组的阳性表达率分别为0、23.73%（42/177）和57.14%（120/210），在结肠癌和腺瘤中的表达均显著高于正常结肠黏膜（χ2=34.2857，χ2=8.9306，P<0.05），但在结肠癌组的表达高于腺瘤组（χ2=44.0620，P<0.05），结直肠癌组织中Lgr5蛋白表达水平与患者性别、年龄、肿瘤生长部位、大体形态、组织类型无相关性（P>0.05），CD133分子的表达与患者的生存期具有相关性。结论 CD133、Lgr5在结肠癌组织中的表达均增高，说明结肠癌的形成与干细胞相关，CD133、Lgr5在肿瘤发生过程中可能起一定作用，且与肿瘤的进展相关，可以作为早期诊断的分子标记物。

在人牙髓损伤愈合阶段两种干细胞标记物α-SMA和STRO-1的免疫组化分析

以往研究采用两种标记物：α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和STRO-1，检测牙髓组织中具有问充质干细胞特性的细胞。本研究目的是研究成人正常牙髓和牙髓损伤愈合期间α—SMA和STR0—1的表达谱特征。健康牙髓通过机械暴露后，采用MTA或者氢氧化钙盖髓。

大鼠不同纯度胰岛样本中干细胞标记物CK-19的表达

我们通过实验观察不同纯度大鼠胰岛样本中干细胞标志物细胞角质蛋白（CK）-19的表达，探讨不同纯度胰岛样本中所携带的干细胞。

膀胱移行细胞癌中候选肿瘤干细胞标记物USP22mRNA水平定量分析及其与肿瘤分级的关系

目的:研究肿瘤干细胞标记物USP22 mRNA在不同级别膀胱移行细胞癌和正常膀胱黏膜中的表达差异,并探讨其与肿瘤分级,临床分期的关系。方法:分别抽提不同级别的膀胱移行细胞癌组织标本和正常膀胱黏膜组织标本的总RNA,经RT为cDNA后,采用qRT-PCR法检测USP22 mRNA的表达情况。结果:正常膀胱黏膜组织中USP22的表达明显低于膀胱肿瘤组织,几乎不表达;不同级别膀胱肿瘤组织中,低度恶性潜能的乳头状尿路上皮癌和低级尿路上皮癌中USP22的表达要明显高于其在高级尿路上皮癌中的表达;特别是Ⅲ级膀胱移行细胞癌组,USP22的表达仅略高于其在正常膀胱黏膜中的表达。结论:USP22可能是正常干细胞向肿瘤干细胞恶变的关键调节分子,可能成为一个新的诊断移行上皮癌侵袭性的有效指标。干扰其蛋白质合成将成为一个抗肿瘤生长的新靶点。

乳腺癌干细胞标记物及其靶向治疗的研究进展

成熟干细胞在正常组织中的存在现已得到广泛证实。造血干细胞的开创性成果引导了利用干细胞标记物发现和揭示肿瘤机制的研究。干细胞代表了整个细胞系的一部分,具有独特的功能特征,能够自我更新并能在组织中分化成不同的细胞,可以根据其细胞表面标记物来鉴别分化层次。近年来有研究表明,有少量肿瘤细胞具备自我更新与分化成不同细胞表型的能力,这些细胞对传统治疗具有抵抗能力,它们在肿瘤的发生、发展、复发、转移方面起着重要作用。

高良姜总黄酮对宫颈癌细胞生长和肿瘤干细胞标记物表达水平的影响及意义

目的：前期研究中，我们报道高良姜根来源的总黄酮（ general flavonoids， GFs）可抑制SiHa宫颈癌细胞增殖，诱导细胞凋亡。以往研究证明肿瘤干细胞是SiHa细胞群体的重要组成部分，故本研究探讨高良姜GFs影响细胞凋亡、细胞周期相关基因及肿瘤干细胞标记物表达调控的机理，为抗肿瘤药物研发提供依据。方法以0、100和200μg／ml剂量的高良姜GFs干预SiHa宫颈癌细胞24 h，提取细胞总RNA，采用荧光定量RT-PCR方法对CDK4、 bcl-2、 ALDH1 A1、 OCT4和Twist1等5种基因表达水平进行定量分析。结果高良姜GFs干预SiHa宫颈癌细胞后， CDK4和bcl-2基因表达水平显著下降（ P＜0.05），呈剂量依赖性，说明该GFs可能调节细胞增殖和生存相关的基因表达调控，诱导细胞凋亡；随着药物剂量增加，肿瘤干细胞标记物ALDH1 A1、 OCT4和Twist1表达水平也梯度性下降，并有统计学差异（ P＜0.05）。结论本研究结果提示高良姜GFs可能抑制肿瘤干细胞基因表达水平，从而抑制细胞增殖，促进细胞凋亡，此为揭示宫颈癌发病机制及抗肿瘤新药研发提供重要依据。

人胎脑神经干细胞特征性标记物的分布

目的:探讨人胎脑神经干细胞特征性标记物的分布。方法:收集胎龄16-36周水囊引产胎儿90例,采用免疫组织化学和光镜技术对人胎脑不同部位神经干细胞的特征性标记物分布进行检测。结果:不同胎龄胎脑均存在神经干细胞,Nestin和CD34蛋白双阳性NSCs仅存在于28周胎龄组的海马及室下区、32周胎龄组的海马、室下区及纹状体和36周胎龄组的纹状体,且这类NSCs主要呈圆形和椭圆形,大小不一。Nestin和CD133蛋白双阳性NSCs在不同的胎龄组以及同一胎龄组的不同部位其表达不同,胎龄越小,Nestin和CD133蛋白双阳性NSCs越多,32周胎龄组仅在海马部位发现1个此类NSCs,36周胎龄组的任何部位均未发现此类NSCs。结论:Nestin是人胎脑神经干细胞特征性标记物,CD133和CD34是人胎脑部分神经干细胞特征性标记物。

胃癌组织中肿瘤干细胞表面标志物CD44v6、CD133与OCT3/4的表达变化及意义

目的观察胃癌组织中肿瘤干细胞表面标志物CD44v6、CD133与OCT3/4的表达变化,并探讨其意义。方法收集50例胃癌患者癌组织标本及其对应的癌旁正常组织标本,采用免疫组化法检测CD44v6、CD133与OCT3/4表达情况,并分析其与胃癌患者临床病理特征的关系。结果胃癌组织中CD44v6、CD133、OCT3/4阳性表达率高于癌旁组织,差异有统计学意义(P均<0.01)。CD44v6、CD133与OCT3/4在胃癌组织中的表达不存在相关性。CD44v6表达与胃癌细胞浸润、淋巴结转移有关;CD133表达与胃癌组织分化程度、淋巴结转移有关;OCT3/4表达与胃癌细胞浸润、淋巴结转移有关。结论 CD44v6、CD133与OCT3/4在胃癌组织中呈高表达,三者与胃癌的发生、转移及浸润等存在一定关系。