PD1-TCF1+CD8+干细胞样记忆T细胞对肿瘤患者免疫预后及三级淋巴结构的影响

目的探讨PD1-TCF1+CD8+干细胞样记忆T细胞在肿瘤微环境中的表达及对免疫治疗预后及三级淋巴结构(TLSs)的影响。方法收集33例武汉大学人民医院接受免疫治疗的晚期胸部肿瘤患者病理组织切片,18例NSCLC及15例食管鳞癌(ESCC)。多重免疫荧光技术对PD1-TCF1+CD8+T细胞表型进行定量分析,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Pearson检验进行相关性分析。结果PD1-TCF1+CD8+T细胞的高表达与更好的无进展生存期(PFS)和免疫治疗疗效有关;在NSCLC队列中,PD1-TCF1+CD8+T细胞的高表达还与三级淋巴结构的数量(P=0.0017)及相对面积(P=0.006)显著正相关。结论在NSCLC和ESCC患者中,PD1-TCF1+CD8+干细胞样记忆T细胞的高表达可能与良好的预后及免疫治疗疗效有关,并且在NSCLC中与肿瘤微环境内TLSs的形成密切相关。

干细胞样记忆T细胞在自身免疫性疾病中的作用

干细胞样记忆T(stem cell-like memory T,T_(SCM))细胞是一种长寿的、具有持续自我更新能力及重建记忆、效应T细胞亚群的多分化潜能的记忆T细胞亚群,是记忆T细胞系统中的最小分化细胞,具有类似干细胞的生物学特征,对于维持功能性免疫至关重要。由于T_(SCM)细胞强大的免疫重建功能,它在人类的许多病理和生理过程中发挥着核心作用,在多种自身免疫性疾病的发生及发展中起重要作用。T_(SCM)细胞在自身免疫性疾病中的独特作用可能使其成为治疗多种自身免疫性疾病的潜在靶点,可在相关疾病治疗中进行有效的免疫功能重建。

记忆性干细胞样T细胞在肿瘤治疗应用中的研究进展

记忆性干细胞样T细胞(stem memory T cells,TSCM)是最近几年发现的一个细胞亚群,约占外周血中总的CD4+T细胞和CD8+T细胞的2%~4%,是记忆性T细胞的早期分化阶段,具有记忆性细胞和干细胞的特点,基因谱介于初始T细胞和中央记忆T细胞之间。记忆性干细胞样T细胞具有自我更新和长期存活能力,这些特点使它们成为肿瘤领域关注的热点。本文将简述记忆性干细胞样T细胞的一些特点,以及它们在肿瘤治疗中的应用。

干细胞样CD8^(+)T细胞在抗肿瘤免疫治疗中的地位与演进效应

以抗细胞程序性死亡-1/细胞程序性死亡-配体1(programmed cell death-1/programmed cell death-ligand 1,PD-1/PD-L1)为代表的免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)治疗显现了CD8+T细胞在治疗和可能治愈恶性肿瘤方面的潜力。但仅约20%的患者对ICIs治疗获益,因此阐明CD8+T细胞在免疫微环境中的有效抗肿瘤功能,及其分子和空间的决定因素尤为重要。具有自我更新、增殖分化和杀伤肿瘤细胞能力的干细胞样CD8^(+)T细胞亚群,在介导抗肿瘤免疫效应方面扮演极为重要的角色。本文就干细胞样CD8^(+)T细胞在抗肿瘤免疫循环中的地位与演进效应进行综述。

干细胞样记忆性T细胞的研究进展

干细胞样记忆性T细胞(stem like memory T cells,T SCM)是近年来发现的一种具有明显干细胞特性的记忆性T细胞亚群,除了具有记忆性T细胞快速高效的再次免疫应答的特点外,它还具有极强的自我更新、持续增殖分化等一系列干细胞特点。本文针对其分化、功能特点,在疾病发生发展中的作用和在制备预防性疫苗、肿瘤免疫治疗中的应用等方面进行综述,为其研究与应用提供相关的线索。

干细胞样记忆性CD8^+T细胞的生物学特性研究进展

干细胞样记忆性T细胞(TSCM)是一种新型记忆细胞亚群,TSCM具有类似干细胞样自我更新能力,能够在体内长期存活,并在抗原刺激下迅速分化为成熟的中枢记忆、效应记忆和效应T细胞。TSCM在临床患者和小鼠模型中均可检出且参与相关疾病的发生与发展。本文对CD8^+TSCM生物学特性进行总结,重点探讨CD8^+TSCM表型和转录特征、参与CD8^+TSCM分化的细胞因子和信号通路,及其在免疫相关疾病和肿瘤免疫治疗中的应用价值。

记忆性干细胞样T细胞:从哪里来?

记忆性干细胞样T细胞(stem cell-like memory T cells,T_(SCM))是近期发现的一群具有自我更新、长期生存以及分化为其他类型T细胞的多能干细胞。这些特性使其正成为细胞免疫治疗的重要武器。但是,由于正常人体内的T_(SCM)极为稀少,这成为其临床转化应用的绊脚石。近年来,越来越多的研究发现通过调控WNT、m TORC、Notch等信号通路可以促进T_(SCM)的产生。通过小分子药物调控相关信号通路可以诱导、促进多能干细胞的转化。同时,细胞因子以及APC在T_(SCM)细胞的产生上也扮演着至关重要的角色。本文主要聚焦通过小分子药物、细胞因子等调控相关信号通路获取T_(SCM)机制的研究进展。

重症肌无力患者外周血中CD4^+记忆性干细胞样T细胞水平的表达及临床意义

目的探讨重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者外周血中CD4^+记忆性干细胞样T细胞(memory stem cell-like T cell,Tscm)的表达水平及其临床意义。方法收集2016年9月—2018年12月在徐州医科大学附属医院神经内科就诊的34例MG患者及20例健康体检者(健康对照组)外周静脉血样,并根据MG患者病情程度分为眼肌型重症肌无力(ocular myasthenia gravis,OMG)组和全身型重症肌无力(generalized myasthenia gravis,GMG)组,根据定量重症肌无力(QMG)量表评分。流式细胞术检测外周血中CD4^+Tscm表达水平、CD38^+CD138^+浆细胞频率,ELISA法检测血清炎性因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-17的表达水平。分析OMG组和GMG组CD4^+Tscm的表达水平与QMG评分、CD38^+CD138^+浆细胞频率及IL-1β、IL-6、IL-17血清炎性因子的相关性。结果与健康对照组比较,OMG组和GMG组CD4^+Tscm表达水平、CD38^+CD138^+浆细胞频率及IL-1β、IL-6、IL-17血清炎性因子表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.01),且GMG组变化较OMG组变化更为显著(P<0.01)。OMG组和GMG组外周血CD4^+Tscm的表达水平与QMG评分、CD38^+CD138^+浆细胞频率及IL-1β、IL-6、IL-17血清炎性因子呈显著正相关。结论CD4^+Tscm在MG患者外周血中表达增加,与临床严重程度、浆细胞频率及血清炎性因子均呈正相关,提示CD4^+Tscm可能通过介导炎症因子的释放而参与MG的发病。

外周血干细胞样记忆性T细胞在肾癌患者中的表达水平及临床意义

目的研究肾癌患者外周血干细胞样记忆性T细胞(stem-like memory T cells,TSCM)的分布特征,探讨TSCM与临床病理特征的关系。方法选取2019年1月~2020年3月连云港第一人民医院收治的65例肾癌患者为肾癌组,同期30例健康志愿者为健康组。运用流式细胞术检测两组患者外周血中初始T细胞(naive T cells,TN)和TSCM比例,比较肾癌组与健康组的差异,分析TSCM、TN和TSCM/TN值与临床病理特征的关系。结果与健康组比较,肾癌组患者外周血TSCM比例(0.15%±0.06%vs 0.20%±0.11%,t=2.524,P<0.05)和TN比例(2.66%±1.18%vs 6.29%±1.58%,t=12.499,P<0.01)均明显降低,TSCM/TN值(6.48%±3.70%vs 3.31%±1.82%,t=5.600,P<0.01)明显升高。肾癌患者中,TSCM比例与肿瘤TNM分期(r=-0.258,P<0.05)和Fuhrman核分级(r=-0.271,P<0.05)呈负相关;TN比例与肿瘤TNM分期(r=-0.447,P<0.01)和Fuhrman核分级(r=-0.263,P<0.05)呈负相关;TSCM/TN值与肿瘤TNM分期(r=0.433,P<0.01)呈正相关。结论肾癌患者外周血TSCM、TN及TSCM/TN值与肿瘤TNM分期和Fuhrman核分级密切相关,可用于评估肿瘤发生、发展情况,TSCM在肾癌的过继性免疫治疗中具有广阔的应用前景。

外周血干细胞样记忆性T细胞和调节性T细胞在卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义

目的探讨外周血干细胞样记忆性T细胞(Tscm)和调节性T细胞(Treg)在卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义。方法选取行腹腔镜切除根治术治疗的卵巢癌患者83例作为研究组,以60例同期体检的健康志愿者作为对照组,采集研究组术后24 h内、对照组体检当日的外周血,检测Tscm及Treg比率,分析卵巢癌患者外周血Tscm、Treg比率与临床病理特征的关系;术后随访3年,统计卵巢癌患者生存情况,并比较死亡组和生存组患者的Tscm、Treg比率;采用Cox回归分析影响卵巢癌患者预后的因素,绘制受试者工作特征曲线(ROC),以曲线下面积(AUC)评价外周血Tscm、Treg对卵巢癌患者预后的预测效能。结果研究组Tscm比率明显低于对照组、Treg比率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001);不同肿瘤大小、临床分期、分化程度、有无淋巴结转移、有无腹水卵巢癌患者外周血Tscm、Treg比率比较,差异有统计学意义(P<0.05);死亡组患者Tscm比率低于生存组、Treg比率高于生存组,差异有统计学意义(P<0.05);Cox回归分析显示临床分期、分化程度、淋巴结转移、外周血Tscm、Treg比率均为影响卵巢癌患者预后的独立影响因素(P<0.05);ROC分析显示,外周血Tscm、Treg比率单独及两者联合预测卵巢癌患者预后的灵敏度分别为82.61%、69.57%、69.57%,特异度分别为70.69%、75.86%、92.28%,AUC分别为0.756、0.743、0.892,。结论卵巢癌患者外周血Tscm比率偏低、Treg比率偏高,两者联合预测卵巢癌患者预后的效能较高。

HIV-1慢性感染者外周血中CD8^+干细胞样记忆型T细胞变化以及对疾病进展的影响

目的观察人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)慢性感染者外周血中CD8+干细胞样记忆型T细胞(CD8+stem memory T cells,CD8+TSCM)随治疗的动态变化,分析其与疾病进展的关系。方法观察25例经抗反转录病毒治疗(antiretroviral therapy,ART)的慢性HIV-1感染者(治疗方案为替诺福韦+依非韦伦+拉米夫定)以及36例健康对照者,对样本外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)分别用CD3-APCCy7、CD4-FITC、CD8-Per CPCy5、CD45RAPECy7、CCR7-APC、CD27-PE、CD95-Pacific Blue抗体和CD38-PE、HLA DR-APC抗体进行细胞表面染色并通过流式细胞仪检测CD8+TSCM细胞比例。比较HIV-1慢性感染者和健康者CD8+TSCM细胞比例的差异,并分析其与疾病进展指标(CD4+T细胞计数、HIV病毒载量以及免疫活化指标)的关系。结果 HIV-1慢性感染组的CD8+TSCM细胞比例小于健康对照组;CD8+TSCM细胞比例与CD4+T细胞计数呈正相关,与HIV-1病毒载量以及免疫活化指标CD38+HLA-DR+CD8+T细胞呈负相关;随着ART治疗,CD8+TSCM细胞比例在144周后升至健康对照水平。结论 CD8+TSCM在慢性HIV-1感染中发挥一定的保护作用,HIV-1相关特异性CD8+TSCM细胞可能是未来T细胞疫苗设计的靶点。

肿瘤中干细胞样T细胞的调控研究进展

干细胞样记忆T细胞(T_(SCM))具有自我更新能力和分化为效应细胞的多能性。肿瘤微环境中存在的TCF1+T_(SCM)细胞直接介导了PD-1免疫检查点阻断的功能性响应,并提供长久的免疫应答以增强抗肿瘤效应。T_(SCM)细胞的形成依赖于特定的免疫生态位,其中的时空调控机制仍然有待研究。本文综述了T_(SCM)细胞形成、分化和功能维持的具体调控机制及T_(SCM)细胞在肿瘤免疫治疗中的最新研究进展,为T_(SCM)在临床中的进一步转化应用提供参考。

人干细胞样记忆性T细胞的免疫学特征及功能研究进展

干细胞样记忆性T细胞(stem-like memory T cell,Tscm)是新发现的一类记忆性T淋巴细胞亚群,具有自我更新和分化为中央型记忆性T细胞(Tcm)、效应型记忆性T细胞(Tem)以及效应T细胞(Teff)的多种分化潜能,是人体潜在的记忆性T细胞库。这些细胞能够特异性识别多种病毒和自身肿瘤抗原,与其他已知的记忆性细胞相比,Tscm细胞具有更高的增殖能力,能在体内长期维持,在抗原的刺激下能迅速产生大量细胞因子,更有效的调节抗肿瘤和抗感染免疫。人Tscm细胞的发现,为T细胞疫苗和T细胞免疫治疗提供了理论依据。本文就Tscm细胞的免疫学特征及功能进行综述。

艾滋病患者HIV-1抗原特异性CD8^+记忆性母细胞样T细胞的扩增

目的对艾滋病患者人类免疫缺陷病毒-1型(HIV-1)抗原特异性CD8^+记忆性母细胞样T细胞(TSCM)的扩增进行分析。方法纳入10例HIV-1感染者作为研究对象,磁珠法分离艾滋病患者CD8^+T淋巴细胞,并利用Tetramer-SL9标记T细胞表面抗原受体。利用流式细胞术检测标记有流式抗体的HIV-1抗原特异性CD8^+TSCM的分布情况,利用细胞因子探索其扩增。结果 HIV-1抗原特异性CD8^+TSCM在CD8^+T淋巴细胞中的比例,随着时间延长,可诱导出更多的TSCM细胞,但是峰值在10 d左右。结论艾滋病患者CD8^+T细胞中TSCM细胞的存在,用HIV-1抗原表位(SL9)来标记安全性高,扩增效果好,可为艾滋病的过继免疫治疗提供技术参考。

自身反应性CD8^(+)中心记忆性T细胞对实验性自身免疫性脑脊髓炎致病作用

目的探讨自身反应性CD8^(+)中心记忆性T细胞(TCM)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中的致病作用。方法用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)35-55肽段/完全弗氏佐剂(CFA)乳化液于雌性C57BL/6(B6)小鼠背部4点皮下注射,在0 h(CFA乳化液注射当时)及48 h时间点分别予以百日咳毒素(PTX)腹腔注射,建立EAE模型。于发病高峰期后处死EAE小鼠获取脾脏和淋巴结的单个核细胞(MNC),利用免疫磁珠法经阴性选择纯化CD8^(+)T细胞;进一步采用流式细胞术分选TCM(CD8^(+)CCR7^(+)CD44^(high))。将EAE鼠CD8^(+)T细胞、健康鼠CD8^(+)T细胞分别过继转移(经鼠尾静脉注射)至雌性Rag-1^(-/-)小鼠体内(2×10^(6)/只,n=6),进行Kono评分及病理学检查,以确证CD8^(+)T细胞的致病性;进一步对EAE鼠CD8^(+)T细胞不同亚群进行致病性研究,分为CD8^(+)TCM常规剂量组(5×10^(5)/只,n=6)、CD8^(+)终末效应记忆性T细胞(Ter TEM,5×10^(5)/只,n=6)组、磷酸缓冲盐溶液(PBS,n=6)组及CD8^(+)TCM高剂量组(1.5×10^(6)/只,n=3),分别将不同剂量CD8^(+)TCM、Ter TEM以及PBS相应细胞/溶液注射于Rag-1^(-/-)小鼠;予以MOG35-55/CFA和PTX诱导,进行神经功能评分;于过继转移后第40 d处死小鼠,检测其病理学改变。结果将EAE鼠CD8^(+)T细胞过继转移至Rag-1^(-/-)小鼠体内,在27 d~29 d后出现双后肢瘫痪症状,病理学显示脑/脊髓内炎性细胞浸润和脱髓鞘改变,而健康鼠CD8^(+)T细胞过继转移后小鼠无瘫痪症状,病理学检查亦未见EAE相关病理学改变。EAE鼠CD8^(+)TCM常规剂量组及高剂量组、Ter TEM组、PBS组注射后持续观察40 d则均未出现发病症状,脑/脊髓亦未见及EAE相关的病理学改变。结论EAE自身反应性CD8^(+)T细胞的过继转移可诱导Rag-1^(-/-)小鼠发病,而自身反应性CD8^(+)TCM的过继转移则未能诱导出EAE病症及其相应的病理学改变,提示CD8^(+)TCM缺乏明显的EAE致病效应。

异基因造血干细胞移植联合供者源淋巴细胞及EBV特异性杀伤T细胞治疗种痘水疱样淋巴瘤一例报告及文献复习

种痘水疱样淋巴瘤临床表现为疱疹，伴有发热、肝脾肿大、淋巴结肿大等系统症状。病理示真皮内淋巴细胞浸润，可见部分异形细胞，免疫组化示Bcl-6、Bcl-2、CD3、CD8、TIA、CD4、granzyme和EBER均阳性，而CD56、CD20均阴性。骨髓细胞TCR重排阳性。种痘水疱样淋巴瘤较罕见，临床易误诊。传统治疗效果差，异基因造血干细胞移植联合回输淋巴细胞及EBV特异性杀伤T细胞治疗种痘水疱样淋巴瘤的疗效好，可能是根治HVLL的有效手段。

记忆性T细胞和HIV疫苗

HIV疫苗被认为是预防艾滋病的最有效工具。以前研制的HIV疫苗,大多数能诱导机体产生记忆性B淋巴细胞和持久的抗体,但并不能保护机体免受HIV的感染。记忆性T细胞的研究给研究HIV疫苗提供了新思路。本文着重描述了记忆性T细胞的分群、分化、形成和维持的一般规律及其在HIV疫苗研制中的意义。

P^(38)MAPK通路在BMP9诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化中的作用

目的:研究P38丝裂原活化蛋白激酶(P38mitogen-activated protein kinases,P38MAPK)通路在骨形态发生蛋白9(Bonemorphogenetic protein 9,BMP9)诱导C3H10T1/2干细胞向心肌样细胞分化中的作用。方法:免疫印迹检测经pAdEasyBMP9诱导24 h的C3H10T1/2干细胞磷酸化P38MAPK和P38MAPK表达水平,免疫荧光定位磷酸化P38MAPK;SB203580抑制C3H10T1/2干细胞磷酸化P38MAPK活性,pAdEasyBMP9诱导21 d时免疫印迹检测心肌特异性蛋白CX43、cTnT表达,免疫荧光检测心肌特异性蛋白cTnT、α-MHC表达,RT-qPCR检测心肌特异性基因GATA4、MEF2C表达。结果:pAdEasyBMP9促进磷酸化P38MAPK表达增高,却不影响P38MAPK表达水平;磷酸化P38MAPK有表达于胞浆和胞核、仅表达于胞核的不同状态。SB203580可显著性地抑制由pAdEasyBMP9诱导的C3H10T1/2干细胞CX43、cTnT、α-MHC、GATA4、MEF2C表达。结论:pAdEasyBMP9诱导C3H10T1/2干细胞能激活P38MAPK通路,并促进其向心肌样细胞分化。

牙龈间充质干细胞来源外泌体对成骨样细胞MC3T3-E1体外增殖和成骨分化的影响

背景牙龈间充质干细胞(gingival mesenchymal stem cells,GMSCs)来源外泌体具有与GMSCs相似的生物学功能,在组织工程领域具有良好的应用前景,但目前缺乏其在骨再生中应用的研究报道。目的 探讨GMSCs来源外泌体对成骨样细胞MC3T3-E1体外增殖和成骨分化的影响。方法 体外培养GMSCs,超速离心法提取GMSCs来源外泌体。共聚焦显微镜下观察MC3T3-E1细胞对外泌体的内化摄取。CCK-8法和划痕实验分别检测不同浓度外泌体作用下MC3T3-E1细胞增殖和迁移变化情况。外泌体作用于MC3T3-E1细胞后,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测ALP活性,茜素红染色及定量实验检测钙结节形成状况;RT-qPCR法检测成骨相关基因ALP、COL1A1、RUNX2的m RNA表达水平。结果 提取的GMSCs来源外泌体呈现类圆形膜状结构,大小在100 nm左右,表达CD63和Tsg101。外泌体能被MC3T3-E1摄取。GMSCs来源外泌体能够促进MC3T3-E1细胞的增殖和迁移(P<0.05),且呈剂量依赖性;外泌体作用下,MC3T3-E1细胞ALP活性增加(P<0.05),钙结节形成增多(P<0.05),成骨相关基因ALP、COL1A1、RUNX2的mRNA表达水平明显上调(P<0.05)。结论 GMSCs来源外泌体具有增强MC3T3-E1增殖及成骨分化的作用,这为GMSCs来源外泌体应用于骨再生治疗奠定基础。