基于干细胞生长因子/酪氨酸激酶受体信号通路探讨温和灸对肝郁脾虚证腹泻型肠易激综合征大鼠内脏高敏感的影响

目的:观察温和灸对肝郁脾虚证腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠干细胞生长因子(SCF)/酪氨酸激酶受体(c-kit)信号通路及内脏高敏感的影响,探讨温和灸治疗肝郁脾虚证IBS-D大鼠的可能作用机制。方法:将24只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、温和灸组,每组6只。采用冰醋酸灌肠+束缚应激方式建立肝郁脾虚证IBS-D大鼠模型。西药组予匹维溴铵灌胃(15 mg/kg),每日1次;温和灸组选取双侧“天枢”“上巨虚”“太冲”予温和灸治疗,每次20 min,每日1次。两组均连续干预14 d。干预结束后,观察各组大鼠一般情况,检测稀便率(LSR);检测引起腹部回缩反射(AWR)达3分时的最小容量阈值;旷场实验检测大鼠直立次数、修饰次数及总穿格数;HE染色法观察各组大鼠结肠组织病理形态变化;甲苯胺蓝染色法检测结肠组织中肥大细胞(MC)计数;ELISA法检测大鼠血清5-羟色胺(5-HT)和P物质(SP)含量;实时荧光定量PCR法检测结肠组织SCF、c-kit的mRNA相对表达量;Western blot法检测大鼠结肠组织SCF、c-kit的蛋白相对表达量。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量、AWR达3分时的最小容量阈值降低(P<0.05),LSR升高(P<0.01),总穿格数、直立次数、修饰次数均减少(P<0.05),结肠组织中MC数量明显增加(P<0.01),血清中5-HT、SP含量明显升高(P<0.01),结肠组织SCF、c-kit的mRNA、蛋白的表达明显升高(P<0.01)。治疗后,与模型组比较,西药组、温和灸组大鼠体质量增加(P<0.05),AWR达3分时的最小容量阈值明显增加(P<0.01),LSR降低(P<0.05),总穿格数、直立次数、修饰次数均增加(P<0.05),结肠组织中MC计数减少(P<0.05),血清中5-HT、SP含量降低(P<0.01);与模型组比较,温和灸组大鼠结肠组织SCF、c-kit的mRNA、蛋白表达降低(P<0.05)。正常组大鼠结肠组织结构完整,无糜烂及水肿;模型组大鼠结肠组织黏膜层可见少量炎性细胞浸润;西药组大鼠结肠组织可见少量淋巴细胞聚集;温和灸组大鼠结肠组织可见少量中性粒细胞聚集。结论:温和灸可降低肝郁脾虚证IBS-D模型大鼠的内脏高敏感性,改善其腹痛、腹泻及精神状态等症状,其作用机制可能与下调SCF/c-kit信号通路的表达,减少MC数量,降低5-HT、SP水平有关。

基于干细胞生长因子/酪氨酸激酶受体信号通路探讨红芪多糖治疗糖尿病胃轻瘫大鼠的作用

目的 探究红芪多糖(HPS)改善糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠胃动力的作用和可能机制。方法 将60只SPF级健康雄性Wistar大鼠随机分为空白组(常规饲养)、模型组(构建DGP模型)、对照组(DGP模型+3.5 mg·kg^(-1)枸橼酸莫沙必利溶液灌胃)、低、中、高剂量实验组(DGP模型+按50、100和200 mg·kg^(-1)给予HPS灌胃),每组10只大鼠,每日1次,连续8周。用免疫组化法测定大鼠胃窦组织中Cajal间质细胞(ICC)的含量,用实时荧光定量聚合酶链反应法检测大鼠胃窦组织中干细胞生长因子(SCF)和酪氨酸激酶受体(c-kit)mRNA的表达水平。结果 空白组、模型组、对照组和中、高剂量实验组大鼠胃窦组织中ICC含量的阳性面积分别为(2 537.00±372.89)、(254.99±139.80)、(2 270.00±132.84)、(1 339.00±218.05)和(1 530.00±242.56)μm^(2),SCF mRNA表达水平分别为1.02±0.28、0.24±0.03、3.51±0.70、2.23±0.22和3.37±0.13,c-kit mRNA表达水平分别为1.00±0.07、0.18±0.02、2.29±0.42、1.88±0.36和2.14±0.33。与模型组比较,中、高剂量实验组及对照组的上述指标差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 HPS可改善胃动力,促进胃排空,其机制可能与上调DGP大鼠胃窦组织中SCF/c-kit信号通路的表达、提高ICC的含量,从而达到对DGP的治疗效果。

肝细胞生长因子/酪氨酸蛋白激酶MET 信号通路与乳腺癌侵袭转移的相关性分析

目的探讨分析肝细胞生长因子(HGF)/酪氨酸蛋白激酶MET(c-met)信号通路与乳腺癌侵袭转移的相关性。方法选择2018年3月至2019年3月承德医学院附属医院临床术后经病理证实的乳腺癌标本75例、乳腺纤维腺瘤标本60例以及癌旁正常乳腺组织标本50例。采用SP免疫组化法以及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组织标本HGF、c-met、β连环素(β-catenin)蛋白表达和mRNA表达情况。结果HGF[82.67%(62/75)比48.33%(29/60)比14.00%(7/50)]、c-met[86.67%(65/75)比55.00%(33/60)比20.00%(10/50)]、β-catenin[78.67%(59/75)比41.67%(25/60)比6.00%(3/50)]在乳腺癌组织、乳腺纤维腺瘤组织以及癌旁正常乳腺组织中的表达均差异有统计学意义(P<0.05)。在乳腺癌、乳腺纤维腺瘤以及癌旁正常乳腺组织中HGF、c-met mRNA相对表达量差异有统计学意义(P<0.05),其中乳腺癌相对表达量最高、乳腺纤维腺瘤相对表达量次之;而乳腺癌、乳腺纤维腺瘤以及癌旁正常乳腺组织中β-catenin mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。HGF表达阳性率与病人TNM分期、淋巴结转移、肿瘤大小、ER表达、HER-2表达有关(P<0.05)。c-met蛋白表达阳性率与病人肿瘤TNM分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。β-catenin蛋白表达异常率与病人TNM分期、淋巴结转移、肿瘤大小密切相关(P<0.05)。结论乳腺癌组织中HGF、c-met蛋白高表达而β-catenin蛋白异常表达,且HGF/c-met信号通路及β-catenin蛋白与乳腺癌侵袭转移密切相关。

受体酪氨酸激酶样孤儿受体1与肿瘤细胞信号通路关系的研究进展

受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)属于受体酪氨酸激酶(RTKs)大家族的一种表面跨膜蛋白,在调控骨骼与神经的发育,细胞迁移与细胞极性中有重要作用。ROR1在正常组织中表达低或不表达,在肿瘤组织中高表达。研究发现ROR1能与配体螯合来调节Wnt等多种细胞信号通路,从而在多种疾病尤其是恶性肿瘤中发挥重要的作用,逐渐成为恶性肿瘤的治疗靶标。本文就ROR1在恶性肿瘤中与细胞信号通路相互作用及靶向ROR1肿瘤免疫治疗的研究进展进行综述,为肿瘤临床治疗策略的制订提供参考。

PI3K/Akt通路与表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂产生耐药性的关系研究进展

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epithelial growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)是近年来备受关注的一类肿瘤靶向治疗药物,具有很强的作用效果,能够明显提高某些癌症患者的生存质量,但最终几乎所有患者都会产生耐药性导致肿瘤进展。PI3K/Akt信号通路能够调节肿瘤细胞的增殖和存活,与肿瘤的侵袭转移行为密切相关。最近研究发现PI3K/Akt信号通路在EGFR-TKIs产生耐药性中也发挥重要作用。该文对该通路与EGFR-TKIs产生耐药性的关系的研究进展作一综述。

受体酪氨酸激酶对子宫内膜异位症患者哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路的影响

目的探讨受体酪氨酸激酶(Axl)对子宫内膜异位症(EMS)患者哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法收集5例卵巢EMS患者的在位内膜组织和异位内膜组织,另选择5例正常内膜组织作为对照。分离培养异位子宫内膜间质细胞(HEcESCs)、在位子宫内膜间质细胞(HEuESCs)及正常子宫内膜间质细胞(HEnESCs)并进行免疫组化鉴定,分析在细胞水平靶向上游Axl、mTOR激酶调控PI3K/AKT信号通路影响人类胚胎干细胞(HESCs)凋亡的机制。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证HEcESCs、HEuESCs及HEnESCs的Axl、mTOR mRNA的表达差异;在细胞水平选择siRNA转染调控Axl靶点,雷帕霉素调控mTOR靶点,采用蛋白质印迹法、qRT-PCR检测Axl、mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)及CyclinD1表达差异。结果与HEnESCs比较,HEuESCs及HEcESCs中Axl mRNA、mTOR mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组比较,雷帕霉素处理组、Axl-siRNA处理组Axl mRNA、CyclinD1 mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.05);与雷帕霉素处理组相比,Axl-siRNA处理组中Axl mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.05);与阴性对照组比较,雷帕霉素处理组Axl mRNA、CyclinD1 mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.05);与阴性对照组比较,Axl-siRNA处理组中Axl mRNA、CyclinD1 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组比较,雷帕霉素处理组中mTOR mRNA相对表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。4组mTOR蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组比较,雷帕霉素处理组、Axl-siRNA处理组中p-mTOR、CyclinD1蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05),与阴性对照组的差异也有统计学意义(P<0.05)。结论调控Axl、mTOR可促进HEcESCs凋亡,Axl通过介导mTOR信号通路参与EMS的发生。

黄连解毒汤对脑梗死合并胃损伤大鼠干细胞因子/酪氨酸激酶受体信号通路的影响

目的:探讨黄连解毒汤对脑梗死合并胃损伤大鼠干细胞因子/酪氨酸激酶受体(SCF/C-kit)信号通路的影响。方法:将80只健康10周龄雄性Wistar大鼠随机分为模型组、黄连解毒汤组、奥美拉唑组、假手术组、正常组,以上各组再分设4 d组、7 d组,共10组。采用线栓法建立大脑中动脉梗死模型。黄连解毒汤组给予黄连解毒汤(27 mg/ml)混悬液,奥美拉唑组给予奥美拉唑(15 mg/ml)悬浊液,其余组给予1 ml 0.9%氯化钠溶液灌胃,4 d组连续灌胃4 d,7 d组连续灌胃7 d。采用HE染色法观察大鼠胃组织病理形态学变化,并进行病理损伤评分;采用实时荧光定量检测大鼠胃组织SCF、C-kit mRNA表达水平;采用Western blot检测大鼠胃组织中SCF、C-kit蛋白表达水平。结果:与正常组、假手术组比较,模型组、黄连解毒汤组、奥美拉唑组大鼠胃黏膜病理评分均明显升高(4、7 d组均P<0.01),胃组织SCF、C-kit mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);正常组、假手术组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,黄连解毒汤组、奥美拉唑组大鼠胃黏膜病理评分均显著降低(4、7 d组均P<0.01),胃组织SCF、C-kit mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。与奥美拉唑组比较,黄连解毒汤组大鼠胃黏膜病理评分均明显降低(P<0.05),胃组织SCF、C-kit mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。结论:黄连解毒汤对脑梗死合并胃损伤大鼠的胃黏膜具有一定的保护作用,其机制可能与黄连解毒汤升高大鼠胃组织SCF、C-kit mRNA及蛋白的表达水平有关。

微小RNA-338-3p调控信号转导和转录激活因子1对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂耐药肺癌细胞株PC-9/GR中程序性死亡配体1表达和细胞凋亡的影响

目的 探讨微小RNA-338-3p(miR-338-3p)对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)耐药肺癌细胞株PC-9/GR中程序性死亡配体1(PD-L1)表达和细胞凋亡的影响及相关机制。方法 体外培养PC-9细胞、PC-9/GR细胞,采用0、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、8.00μmol/L吉非替尼处理确定用药浓度;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中miR-338-3p表达。将PC-9/GR细胞分为对照组、miR-338-3p NC组(转染miR-338-3p NC)、miR-338-3p组(转染miR-338-3p模拟物)和信号转导和转录激活因子1(STAT1)抑制剂组(转染miR-338-3p模拟物+100μmol/L氟达拉滨)。4组均添加1.00μmol/L吉非替尼,转染后qRT-PCR检测细胞中miR-338-3p表达;MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白印迹(WB)法STAT1、p-STAT1、PD-L1、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 当吉非替尼浓度升高至1.00μmol/L时,PC-9细胞与PC-9/GR细胞增殖率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与PC-9细胞相比,PC-9/GR细胞中miR-338-3p表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。转染后,qRT-PCR结果显示,miR-338-3p组、STAT1抑制剂组的miR-338-3p表达水平均高于miR-338-3p NC组、对照组,差异有统计学意义(P>0.05)。与miR-338-3p NC组相比,miR-338-3p组PC-9/GR细胞增殖率及细胞中PD-L1、Bcl-2蛋白表达水平降低,凋亡率及细胞中p-STAT1/STAT1、Bax蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与miR-338-3p组相比,STAT1抑制剂组PC-9/GR细胞增殖率及细胞中PD-L1、Bcl-2蛋白表达水平升高,凋亡率及细胞中p-STAT1/STAT1、Bax蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-338-3p可抑制EGFR-TKI耐药肺癌细胞株PC-9/GR细胞中PD-L1表达,并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与激活STAT1有关。

血管内皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂的研究进展

血管生成在肿瘤的生长、转移和演进中起着非常重要的作用。文中简要阐述了血管内皮生长因子受体(VEGFR)酪氨酸激酶介导的RAS/Raf/MAPK,PI3K/AKT,PLC-γ及Src信号转导途径,根据结构类型统计和介绍了已经上市或处于临床研究的VEGFR酪氨酸激酶小分子抑制剂,包括吲哚酮类、喹唑啉类、哒嗪类、吲唑类、烟碱类和吡咯并嘧啶类等典型结构,分别阐述了这几类结构中代表性化合物的临床前研究和临床研究的数据。

生长因子受体酪氨酸激酶的结构与功能

受体酪氨酸蛋白激酶是细胞信号转导进行的关键信号酶,在生长因子调控细胞生长、发育与功能的过程中起着重要的生理作用。本文主要介绍生长因子受体酪氨酸蛋白激酶的分类、结构与功能及其部分相关信号转导机制的研究进展。

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂的皮疹

靶向治疗的作用机理在于干预肿瘤演化过程中关键性的特异分子信号传导通路。经EGFR介导的细胞信号异常在肿瘤发生以及疾病的进展过程中发挥关键作用。以EGFR为靶点的药物如小分子TK抑制剂（TKIs）与单克隆抗体（mAbs）对非小细胞肺癌、胰腺癌以及结直肠癌均显示出临床疗效，并在临床上逐渐用于其他实体肿瘤。TKIs为口服给药的小分子化合物，可阻断细胞内受体中的ATP结合位点，从而阻止下游信号的传递。mAbs则通过阻断受体的细胞外部分而阻止依赖配体的活化以及下游信号的传递。目前欧盟和美国批准的EGFRIs共有3种，即厄洛替尼、西妥昔单抗以及帕尼单抗。

表皮生长因子受体(EGFR)的细胞内信号传导

表皮生长因子受体（EGFR）是一种存在于细胞表面的多功能跨膜蛋白分子,具有酪氨酸蛋白激酶活性,EGFR与配体结合后启动细胞内信号传导通路,不同的通路之间存在交叉对话（Cross-talks）共同完成细胞生理功能.对EGFR的深入研究,不仅可阐明细胞生长和发育等重要的生命过程,而且在医药和工业上也将有广泛的应用.

酪氨酸激酶受体ErbB2信号通路对周围神经病变及修复过程影响的研究

酪氨酸激酶受体ErbB2（V-erb-b2avianerythroblasticleukemiaviraloncogenehomolog2，ErbB2）是一种表皮生长因子受体，目前该受体蛋白主要在恶性肿瘤中研究较多，包括已经投入临床应用的赫赛汀（herceptin）、拉帕替尼（lapatinib）、吉非替尼（gefinitib）等药物，与其他化疗药物合用可以较好抑制恶性肿瘤细胞的转移。近几年研究发现该受体蛋白信号系统对周围神经的发育、维持及损伤修复也具有调控作用，参与糖尿病、神经机械性损伤等多种因素引起的周围神经病变的演变和修复过程，是周围神经疾病发病机制的研究热点。本文目的是进一步总结ErbB2信号通路在糖尿病周围神经病、神经机械性损伤及三叉神经痛中的作用机制及对病变过程的影响，希望通过进一步研究，能为治疗周围神经病提供新的治疗靶点。

小分子血管内皮细胞生长因子受体激酶抑制剂研究进展

血管内皮生长因子受体(VEGFR)属于蛋白酪氨酸激酶家族,其异常表达与肿瘤的发生、发展及预后密切相关。目前,以VEGFR为靶点的肿瘤治疗已成为抗肿瘤研究中十分活跃的领域之一。本文综述了已上市或正处于研究阶段的小分子VEGFR酪氨酸激酶抑制剂及其在肿瘤治疗中的应用。

神经胶质瘤中受体酪氨酸激酶信号传导系统及酪氨酸激酶抑制剂的研究进展

原发性的神经胶质瘤 ,特别是多形性胶质母细胞瘤 ,其生物学特征如不可控制的细胞增生 ,正常凋亡程序的关闭 ,新生血管的形成和浸润性生长 ,给治疗造成了极大的困难。目前认为一系列的基因变异是发生胶质瘤的生物学基础 ,这些变异主要发生在受体酪氨酸激酶信号传导系统。该系统可调控细胞周期 ,调节细胞生长与分化 ,促进损伤修复。最近的研究表明 ,受体酪氨酸激酶信号传导系统的异常活化与胶质瘤的发生和进展密切相关。酪氨酸激酶抑制剂可选择性抑制酪氨酸激酶的活性 ,从而阻断肿瘤细胞的信号传递 ,抑制肿瘤的生长 ,增加肿瘤对放、化疗的敏感性。对胶质瘤中受体酪氨酸激酶信号传导通路及酪氨酸激酶抑制剂的研究 ,是当今国内外生物治疗肿瘤的研究热点之一。

环境理化因素对表皮生长因子受体及其信号通路的影响

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)为典型的受体酪氨酸激酶,能够与多种配体结合,在细胞增殖、存活、黏附、分化和凋亡等生命活动中发挥重要作用。EGFR及其介导的信号通路的异常与肿瘤的发生发展密切相关。很多环境理化因素可通过影响EGFR磷酸化、或其结构功能和细胞分布、或其配体和其它相关分子表达,干预EGFR信号转导过程、影响靶基因的表达从而最终影响细胞生命活动。文中就此做一简要综述,以期更好地理解环境理化因素引起的细胞应激以及致突变致癌的表遗传分子机理。

脑源性神经营养因子及酪氨酸激酶受体B可能成为治疗膀胱肿瘤的新靶点

神经营养因子是一类对神经元的生长、发育和维持其基本功能起着重要作用的蛋白质。近来研究发现,神经营养因子在多种人体肿瘤中也有异常表达,这提示神经营养因子不仅在神经系统中发挥作用,在肿瘤中也扮演着重要角色,而其中对脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)及其受体酪氨酸激酶受体B(Tyrosine kinase receptor B,TrkB)的研究最为广泛,但BDNF/TrkB信号通路在各类肿瘤中的具体作用机制仍没有统一的认识。这篇综述主要对BDNF/TrkB在肿瘤中的不同作用并结合在膀胱肿瘤中的表达情况,推论BDNF/TrkB信号通路有可能成为治疗膀胱肿瘤的新靶点。

表皮生长因子受体对肝细胞增殖的调控作用

表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）属于受体酪氨酸激酶超家族成员，广泛表达于哺乳动物的各种组织细胞，是一多功能的膜蛋白。它能与多种配体结合而发生二聚化，从而调节细胞的生长、增殖和分化。在包括肺癌、膀胱癌和乳腺癌等多种组织中，存在EGFR信号通路的高度激活。近年来的研究表明，EGFR信号转导网络在肿瘤的发生和发展过程中发挥了重要的作用。最新的研究表明，EGFR与肝细胞的增殖密切相关。